食用菌菌包接种环境无菌检测技师（初级）考试试卷及答案

食用菌菌包接种环境无菌检测技师（初级）考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.食用菌无菌检测常用的培养基是______培养基。2.高压蒸汽灭菌的常用温度是______℃（压力0.1MPa）。3.接种环境空气无菌检测常用______法。4.接种工具需用______灼烧灭菌。5.无菌室常用消毒剂举1种：______。6.培养基灭菌后需冷却至______℃左右倒平板。7.沉降菌检测时培养皿暴露时间通常为______分钟。8.菌包主要原料需含______和碳源。9.接种后菌包需置于______环境培养。10.无菌检测阳性对照用______菌液接种。答案：1.PDA2.1213.沉降菌4.酒精灯5.75%酒精6.507.108.氮源9.恒温避光10.已知污染（如大肠杆菌）二、单项选择题（每题2分，共20分）1.下列属于接种环境无菌检测指标的是（）A.沉降菌数B.菌包含水率C.培养基pHD.培养温度2.高压蒸汽灭菌有效时间一般为（）A.10minB.20-30minC.60minD.90min3.无菌室紫外线照射消毒时间是（）A.10minB.20minC.30-60minD.90min4.灼烧后的接种工具需冷却至（）A.不烫手B.室温C.50℃D.100℃5.适合食用菌无菌检测的培养基是（）A.LBB.PDAC.麦康凯D.血平板6.沉降菌培养温度通常为（）A.37℃B.25-28℃C.4℃D.50℃7.接种前无菌室需提前多久开紫外线？（）A.10minB.30minC.60minD.2h8.空白对照的作用是（）A.排除培养基污染B.检测阳性菌生长C.测环境温度D.测菌包质量9.不属于无菌操作的是（）A.洗手消毒B.培养基灭菌C.工具灼烧D.手触菌包10.接种环境最佳湿度是（）A.30-40%B.50-60%C.70-80%D.90%以上答案：1.A2.B3.C4.A5.B6.B7.B8.A9.D10.B三、多项选择题（每题2分，共20分）1.无菌检测常用方法包括（）A.沉降菌法B.空气采样器法C.菌包重量法D.表面涂抹法2.无菌检测合格标准涉及（）A.沉降菌≤5cfu/皿B.表面菌落≤1cfu/cm²C.无杂菌D.菌包无异味3.无菌室消毒方法有（）A.紫外线照射B.高温烘烤C.化学熏蒸D.消毒剂擦拭4.培养基制备步骤包括（）A.称量B.溶解C.灭菌D.倒平板5.无菌操作要点有（）A.接种室密闭B.工具无菌C.多人操作D.速度快6.无菌检测需记录（）A.检测日期B.温湿度C.菌落数D.菌包产量7.属于杂菌的是（）A.青霉B.香菇C.木霉D.曲霉8.接种前准备工作包括（）A.菌包灭菌B.工具准备C.菌包晾晒D.培养基制备9.沉降菌检测注意事项（）A.培养皿灭菌B.避免人员走动C.记录暴露时间D.立即高温处理10.无菌检测目的（）A.确保环境无菌B.预防杂菌C.保证产量D.提高质量答案：1.ABD2.ABC3.ACD4.ABCD5.ABD6.ABC7.ACD8.ABD9.ABC10.ABCD四、判断题（每题2分，共20分）1.无菌室可用自来水直接擦拭（×）2.培养基灭菌后立即倒平板（×）3.沉降菌培养皿放接种关键位置（√）4.灼烧工具可直接接触菌包（×）5.紫外线消毒后需通风30min再进入（√）6.无菌检测只需测空气不用测表面（×）7.PDA适合大多数食用菌生长（√）8.接种时人员可随意交谈（×）9.空白对照有菌落说明培养基污染（√）10.环境温度越高无菌效果越好（×）答案：1.×2.×3.√4.×5.√6.×7.√8.×9.√10.×五、简答题（每题5分，共20分）1.简述沉降菌检测操作步骤。答案：①准备灭菌PDA培养皿（9cm）；②无菌室消毒通风后，将培养皿放接种台、空气流动处；③开盖暴露10min后盖好，标记日期/位置；④25-28℃培养3-5天；⑤计数菌落，计算平均沉降菌数。操作时避免人员走动、说话。2.培养基制备注意事项？答案：①称量准确（马铃薯、葡萄糖等）；②马铃薯煮沸过滤取汁，琼脂完全融化；③调pH至5.5-6.5；④121℃灭菌20-30min；⑤冷却至50℃倒平板；⑥超净台内操作，防止污染；⑦标记培养基信息。3.接种环境无菌检测合格标准？答案：①沉降菌：接种台≤5cfu/皿，一般区域≤10cfu/皿；②表面菌落：台面/工具≤1cfu/cm²；③空白对照无杂菌；④阳性对照有菌落生长。4.无菌室日常维护要点？答案：①每日紫外线30-60min，每周熏蒸1次；②75%酒精擦拭台面/墙壁；③人员换衣、洗手消毒；④每周检测沉降菌/表面菌落；⑤维护紫外线灯、超净台；⑥记录消毒/检测情况。六、讨论题（每题5分，共10分）1.接种环境杂菌污染常见原因及预防？答案：常见原因：①消毒不彻底（紫外线老化、熏蒸不足）；②工具灭菌不充分；③人员操作不当（未消毒、交谈）；④培养基/菌包灭菌不够；⑤空气带入杂菌。预防：①紫外线每1000h更换，消毒后通风；②工具灼烧至红热冷却用；③人员换衣消毒、戴口罩；④培养基121℃30min灭菌；⑤安装空气过滤器。2.如何判断无菌检测结果有效？不合格怎么办？答案：有效性判断：①空白