2024-2025学年天津市部分区高二下学期期中练习生物试题（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1天津市部分区2024-2025学年高二下学期期中练习（I卷）一、选择题：每小题4分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一个最符合题意。1.传统发酵食醋具有独特的风味，这是由多种物质共同作用的结果。下列叙述不正确的是（）A.醋酸菌在氧气和糖源充足的情况下才能产生乙酸B.白醋、陈醋、米醋发酵所需菌种主要是醋酸菌C.发酵初期发酵液温度升高主要是微生物代谢活动增强所致D.发酵后期大多数微生物死亡与营养物质消耗、有机酸积累等有关【答案】A〖祥解〗发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。人们可以通过传统发酵技术或发酵工程来进行发酵生产。传统发酵以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主。发酵工程一般包括菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等环节。【详析】A、醋酸菌在氧气、糖源充足时，将糖分解成醋酸；当氧气充足、缺少糖源时，将乙醇变成乙醛，再将乙醛变为醋酸，A错误；B、传统发酵以混合菌种发酵为主，其中白醋、陈醋、米醋发酵所需的菌种主要是醋酸菌，B正确；C、发酵初期，醋酸菌等微生物代谢增强，产热增多，发酵液温度升高，C正确；D、发酵后期，营养物质基本消耗完，各种代谢产物如有机酸积累，温度升高，pH下降，渗透压升高，这些因素都不利于微生物生存，导致大量微生物死亡，D正确。故选A。2.“筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列叙述正确的是（）A.用选择培养基筛选微生物，对照组不接种微生物，实验组接种微生物B.诱导植物原生质体融合时，观察是否再生细胞壁可筛选异种融合细胞C.在试管婴儿技术中，需取滋养层细胞进行性别鉴定来筛选所需的胚胎D.制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞【答案】D〖祥解〗单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过三次筛选：①筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞②筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）③筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞。最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。【详析】A、选择培养基的作用是目的菌能够正常在其上生存，其他微生物不能正常生存，为了确定选择培养基是否具有选择作用，应设计一个在完全培养基上接种的培养皿作对照，即对照组也接种微生物，只是实验组和对照组培养基的成分不同，A错误；B、诱导植物原生质体融合时，观察是否再生细胞壁不能用于筛选异种融合细胞，因为同种融合细胞也会再生出细胞壁，B错误；C、在试管婴儿技术中，不需要进行胚胎的性别鉴定，设计试管婴儿有时需要进行性别鉴定，C错误；D、单克隆抗体制备过程中，第一次筛选要用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选要用抗体阳性检测方法从分子水平筛选出产生所需抗体的杂交瘤细胞，即从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，D正确。故选D。3.下列有关倒平板操作的叙述，错误的是（）A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B.将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上C.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰D.等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置【答案】B〖祥解〗倒平板操作的步骤：（1）将灭过菌培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；（2）右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；（3）用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；（4）等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染。【详析】A、整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵，因此灭过菌的培养皿应放在火焰旁，A正确；B、培养皿应打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不能将培养皿盖完全打开，B错误；C、打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰，防止杂菌污染，C正确；D、等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置，防止皿盖上的水珠滴入培养基造成污染，D正确。故选B。4.下表是几种限制酶的识别序列及切割位点（Y=C或T，R=A或G）。下列相关叙述正确的是（）限制酶HindIIAluIBamHISau3AI识别序列及切割位点5'-GTY↓RAC-3'5'-AG↓CT-3'5'-G↓GATCC-3'5'-↓GATC-3'A.限制酶切割一次需切断2个磷酸二酯键，增加4个游离的磷酸基团B.由上表可知一种限制酶只能识别一种核苷酸序列，并在特定位点切割C.AluI切割后的DNA片段可用E.coliDNA连接酶或T4连接酶连接D.BamHI和Sau3AI切割形成的片段进行重组后，BamHI和Sau3AI均不能识别并切割【答案】C〖祥解〗限制酶特点：识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定的位点进行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端。【详析】A、限制酶切割一次需切断2个磷酸二酯键，形成2个新的游离的磷酸基团，A错误；B、一种限制酶不一定只识别一种核苷酸序列，如HindⅡ，B错误；C、AluI切割后形成的是平末端，E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶既可以连接黏性末端，也可以连接平末端，C正确；D、BamHⅠ和Sau3AⅠ切割形成的片段进行重组后，BamHⅠ不能识别并切割重组片段，而Sau3AⅠ可识别并切割重组片段，D错误。故选C。5.无菌操作是生物实验中一项重要的基本操作。下列过程不需要严格无菌操作的是（）A.传统泡菜的制作 B.酵母菌的纯培养C.动物细胞的传代培养 D.花药离体培养【答案】A〖祥解〗在传统生物技术中，无需进行严格灭菌，根据目的菌种的代谢特征设置相应的培养条件。【详析】在传统生物技术中，如传统泡菜的制作过程，不需要严格的无菌操作，通常是根据目的菌种的代谢特征设置相应的培养条件进行的，而实验室中的一些生物工程技术，如酵母菌的纯培养、动物细胞的传代培养、花药离体培养等需要严格的无菌操作，A正确，BCD错误。故选A。6.研究人员将胰岛素B链的第28位氨基酸替换为天冬氨酸，抑制了胰岛素聚合，从而获得速效胰岛素类似物。下列叙述正确的是（）A.该产品是通过直接改造胰岛素来生产的B.改变氨基酸的种类不会影响胰岛素的空间结构C.可通过定向诱导胰岛素基因碱基增添达到改造目的D.胰岛素改造的基本思路与天然蛋白质合成过程相反【答案】D〖祥解〗蛋白质工程概念及基本原理（1）蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。（2）蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。（3）蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。（4）基本途径：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。【详析】A、蛋白质工程最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成，即改造胰岛素的过程实际是改造胰岛素基因的过程，A错误；B、氨基酸的种类及排列顺序影响蛋白质的空间结构，B错误；C、可通过定向诱导胰岛素基因碱基替换达到第28位氨基酸替换为天冬氨酸的目的，C错误；D、蛋白质工程的基本途径是预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），胰岛素改造的基本思路与天然蛋白质合成过程（基因→蛋白质合成）相反，D正确。故选D。7.科研人员通过基因编辑技术将绿色荧光蛋白（GEP）基因整合到野生型小鼠P蛋白基因的一端，如图1所示。随机挑取5个品系细胞通过PCR验证GFP的导入情况，结果如图2所示。据此推测在进行PCR扩增时，所选择的引物为（）A.F1，R1 B.F2，R1 C.F1，R2 D.F2，R2【答案】A〖祥解〗PCR技术是聚合酶链式反应的缩写，是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。【详析】结合图1和图2推测，P-GFP融合基因电泳后的DNA片段较大，未插入GFP基因则电泳后的DNA片段较小，5个品系细胞中有的只扩增出小片段或大片段，有的两种片段均有，应选择图1中的引物组合是F1、R1。故选A。8.下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“琼脂糖凝胶电泳”实验的相关说法，正确的是（）A.利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA溶于酒精B.过滤后的研磨液放置在4℃冰箱中可防止DNA被降解C.琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率越快D.提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后即可变为蓝色【答案】B〖祥解〗DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺溶液混合，并在水浴加热条件下呈现蓝色；耐高温的DNA聚合酶在延伸环节时进行子链的合成。【详析】A、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离，A错误；B、洋葱研磨液在4℃冰箱中放置几分钟，可降低DNA水解酶的活性，防止DNA降解，B正确；C、待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率，DNA分子越小，迁移的速率越快，DNA分子越大，迁移速率越慢，C错误；D、将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后，水浴加热条件下才会呈现蓝色，D错误。故选B。9.哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程，只有在促性腺激素和精子的诱导下才能完成。下图为某哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图。下列有关叙述错误的是（）A.下丘脑、垂体参与该哺乳动物次级卵母细胞的形成B.受精作用促进次级卵母细胞完成减数第二次分裂C.多数哺乳动物IV形成时，只能观察到两个极体D.精子接触透明带时，透明带会发生生理反应从而阻止多精入卵【答案】D〖祥解〗分析题图：图中细胞Ⅰ为卵原细胞，细胞Ⅱ为经过复制的初级卵母细胞，细胞Ⅲ可表示次级卵母细胞，细胞Ⅳ是经过受精作用形成的受精卵，受精卵进行的是有丝分裂。【详析】A、据图可知，减数第一次分裂完成需要促性腺激素处理，下丘脑合成的促性腺激素释放激素作用于垂体，使得垂体分泌促性腺激素，因此下丘脑、垂体参与该哺乳动物次级卵母细胞的形成，A正确；B、结合题图可知，次级卵母细胞在精子的作用下才能完成减数第二次分裂，产生成熟的卵细胞，从而形成受精卵，即受精作用促进次级卵母细胞完成减数第二次分裂，B正确；C、多数哺乳动物Ⅳ的形成只产生两个极体，在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，说明卵细胞已经完成了受精，C正确；D、在精子接触卵细胞膜时，会发生透明带反应，能防止多个精子入卵，D错误。故选D。10.我国是香蕉的主产地之一，大多数栽培香蕉是三倍体品种。传统生产采用吸芽繁殖方式，不仅周期长、产率低、果品不佳，还易积累病毒。下列措施无法达到改良目的的是（）A.通过基因工程转入外源基因提高果实品质B.用香蕉顶端分生区作为外植体获得脱毒苗C.利用单倍体育种对栽培香蕉进行品种选育D.用香蕉叶鞘进行植物组织培养以提高产率【答案】C〖祥解〗脱毒香蕉苗的获得：选取香蕉外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组织，然后通过调整植物激素比例，使其再分化形成芽和根，获得大量试管苗。【详析】A、通过基因工程转入外源基因可以改变香蕉的基因组成，从而有可能提高果实品质，达到改良香蕉的目的，可以达到改良目的，A不符合题意；B、用香蕉顶端分生区作为外植体进行植物组织培养可以获得脱毒苗。因为植物顶端分生区附近的病毒含量很低或者几乎没有病毒，通过这种方式可以减少香蕉积累的病毒，提高香蕉的品质和产量，可以达到改良目的，B不符合题意；C、大多数栽培香蕉是三倍体品种，在减数分裂过程中会出现联会紊乱，无法正常产生配子，难以进行单倍体育种，无法达到改良目的，C符合题意；D、用香蕉叶鞘进行植物组织培养可以在短时间内获得大量的香蕉植株，缩短培养周期，从而提高产率，达到改良香蕉繁殖方式的目的，可以达到改良目的，D不符合题意。故选C。11.生物技术的发展改善了人类的生活，是推动人类社会向前发展的重要科学技术。但科学是一把双刃剑，只有合理应用于生产生活才能造福全人类，下列关于生物技术的安全性及伦理问题的论述错误的是（）A.转基因生物可能通过花粉杂交影响非转基因生物B.对流感病毒基因进行改造可能会引发大规模流行性疾病C.人类基因编辑可用于编辑出完美婴儿，以实现优生优育D.“只要有证据表明产品有害，就应该禁止转基因技术的应用”不属于理性看待转基因技术【答案】C〖祥解〗（1）转基因技术给人类带来了琳琅满目的产品，也引发了社会对转基因产品安全性的关注和争论。（2）治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞、组织、器官，用它们来修复或替代受损的细胞组织和器官，从而达到治疗疾病的目的；生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体，它面临很多伦理问题。我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。【详析】A、转基因生物可通过花粉杂交影响非转基因生物，即转入的基因可能会从转基因植物的体内扩散到非转基因生物钟，A正确；B、对流感病毒基因进行改造可能会提高流感病毒的传染性和致病能力，从而引发大规模流行性疾病，B正确；C、人类基因编辑用于编辑出完美婴儿，会造成社会歧视现象的发生，C错误；D、转基因技术给人类带来许多便利，但同时也存在一些安全性问题，即既能看到转基因技术的优点，也能明白其中的不足，这属于理性看待转基因技术，“只要有证据表明产品有害，就应该禁止转基因技术的应用”不属于理性看待转基因技术，D正确。故选C。12.下图是小鼠（2N=40）孤雌单倍体胚胎干细胞系的获得过程，相关叙述错误的是（）A.过程①中精子需用获能液培养，卵母细胞应处于减数第二次分裂中期B.过程②中的早期胚胎培养应置于含95%O2和5%CO2混合气体的培养箱中C.图中“早期胚胎”是桑葚胚，细胞已经逐渐分化，出现内细胞团和滋养层D.推测孤雌单倍体胚胎干细胞只含有一个染色体组，具有增殖和分化的能力【答案】BC〖祥解〗分析图示可知：表示小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞系获得过程，精子和卵母细胞经过①受精作用形成受精卵，然后移除雄原核，经过②早期胚胎发育形成早期胚胎，最终形成孤雌单倍体胚胎干细胞。【详析】A、在受精过程中，精子需要获能才能完成受精作用，卵母细胞应处于减数第二次分裂中期，A正确；B、早期胚胎培养应置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中，而不是95\%O2，B错误；C、图中的“早期胚胎”是桑葚胚，此时细胞未分化，C错误；D、孤雌单倍体胚胎干细胞是由孤雌生殖得到的单倍体胚胎干细胞，只含有一个染色体组，具有增殖和分化的能力，D正确。故选BC。（Ⅱ卷）二、非选择题：共52分13.多年来，腐乳一直受到人们的喜爱。这是因为经过微生物（主要是毛霉）的发酵，豆腐中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸，味道鲜美，易于消化吸收。（1）毛霉等微生物能产生多种“酶类”，使豆腐质地变软，并赋予腐乳特殊的风味。此处“酶类”主要指_______（注：糖化酶能水解多糖为单糖，也能合成双糖）A.蛋白酶 B.糖化酶C.DNA聚合酶 D.限制性内切核酸酶（2）早期发酵阶段（毛霉生长阶段），豆腐可以被视为______培养基（编号选填）①固体培养基②液体培养基③选择培养基④鉴别培养基（3）为高效筛选自然界的目标菌种，可以采用如图所示的“高通量筛选”方法。图中手持的器材称为________，该器材运用在以下哪个实验中________。A．平板划线法B．稀释涂布平板法C．PCR扩增DNAD．PCR扩增产物的凝胶电泳鉴定【答案】（1）A（2）①（3）①.移液器（或移液枪）②.BCD〖祥解〗腐乳制作的实验流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制；在腐乳生产过程中，温度应控制在15～18℃，且应保持一定的湿度，以便毛霉生长。【解析】（1）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，味道鲜美，易于消化吸收，A正确，BCD错误。故选A。（2）早期发酵阶段（毛霉生长阶段），豆腐能为毛霉等微生物的生长提供一定的营养物质和支撑，豆腐可以被视为固体培养基，①正确，②③④错误。故选①。（3）图中手持的器材称为移液器（或移液枪）。ABCD、移液器主要用于准确吸取和转移一定体积的液体，在稀释涂布平板法中，需要将菌液进行一系列梯度稀释后，再用移液器吸取一定体积的稀释液涂布到平板上，从而实现高效筛选目标菌种。而平板划线法是用接种环进行操作；PCR扩增和PCR扩增产物的凝胶电泳鉴定也需要用到移液枪。所以该器材运用在BCD实验中，BCD正确，A错误。故选BCD。14.羊乳的成分更接近于人乳，可作为牛乳过敏体质者最理想的替代乳品。但研究表明山羊乳中β-乳球蛋白也是引起人体过敏反应的一种主要致敏原，为实现羊乳“人源化”改造，研究人员利用CRISPR/Cas9系统敲除了山羊乳腺细胞中致敏原β-乳球蛋白（BLG）基因，同时在相应位点导入人乳铁蛋白（hLF）基因（通常只在乳腺细胞中表达）。该研究为培育羊乳中低致敏原和富含人乳铁蛋白功能营养成分的转基因山羊新品种提供了科学依据。下图为研究人员利用该技术获得转基因山羊的操作过程。回答下列问题：（1）上述技术中的目的基因是______，可通过PCR技术快速扩增目的基因，扩增时引物的作用是________。（2）CRISPR/Cas9系统主要包含向导RNA和Cas9蛋白两个部分，利用CRISPR/Cas9系统敲除山羊乳腺细胞中致敏原β-乳球蛋白（BLG）基因时，科研人员设计了sgBLG引导序列，sgBLG能够通过______方式与山羊基因组中BLG基因的靶位点结合。（3）Cas9蛋白类似于基因工程中常用到的______酶，但Cas9蛋白特性与该酶的区别是_______。（4）检测发现过程②中，hLF基因成功插入在母羊乙成纤维细胞中的一条常染色体上。上图过程①②运用到的技术有______，过程③④⑤中，运用到的技术有______（编号选填）。①显微注射技术②动物细胞培养技术③胚胎移植技术④DNA重组技术⑤动物细胞融合技术⑥细胞核移植技术（5）筛选后得到的早期胚胎细胞中没有检测到该蛋白，能否说明目的基因没有成功导入并表达，理由是________。【答案】（1）①.人乳铁蛋白基因（HLF基因）②.使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸（2）碱基互补配对（3）①.限制性内切核酸（限制）②.Cas9蛋白没有的专一识别DNA分子特定核苷酸序列的特性（4）①.①④②.②③⑥（5）不能，人乳铁蛋白基因只能在转基因动物的乳腺细胞内表达〖祥解〗基因工程的操作步骤（1）目的基因的获取；方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞；根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【解析】（1）本研究是为了培育羊乳中低致敏原和富含人乳铁蛋白功能营养成分的转基因山羊新品种，因此目的基因是人乳铁蛋白基因（HLF基因），可通过PCR技术快速扩增目的基因，扩增时引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。（2）sgBLG通过碱基互补配对与山羊基因组中BLG基因座的第一外显子（Ex1）中的靶位点结合。（3）Cas9蛋白可切割DNA，类似于基因工程中常用到限制酶，但Cas9蛋白特性与该酶的区别是Cas9蛋白没有限制性内切核酸酶所具有的专一识别DNA分子特定核苷酸序列的特性。（4）上图过程①是基因替换，属于DNA重组技术，②是将目的基因导入受体细胞，用到显微注射技术，因此运用到的技术有①②，过程③是核移植，④是早期胚胎培养，即需要动物细胞培养技术，⑤为胚胎移植，因此运用到的技术有②③⑥。（5）人乳铁蛋白（目的）基因只能在转基因动物的乳腺细胞内表达，因此在的早期胚胎细胞中不表达，没有检测到该蛋白不能说明目的基因是否成功导入。15.植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，并且取得了显著的社会效益和经济效益。下图表示植物细胞工程的相关操作过程及应用，已知该植物为二倍体，体细胞中染色体数目为2m。回答下列问题。（1）通过植物组织培养技术进行快速繁殖植物，属于_______生殖。图中的单倍体幼苗体细胞中含有染色体数目为______，该单倍体幼苗经_______处理后可获得正常二倍体植株。（2）图中C过程的目的是_______。细胞丙和细胞丁融合前应先用________酶处理，获得原生质体。若融合仅考虑两两融合，则培养液中的融合细胞类型有_______种，获得的杂种细胞中_______（填“含有”或“不含”）同源染色体。（3）次生代谢产物______（填“是”或“不是”）其基本生命活动所必需的产物，为获得图中次生代谢产物，通常需将外植体培养至_______阶段。（4）研究人员发现脱毒苗的成苗率和脱毒率与外植体的大小有关，并利用马铃薯进行脱毒苗的培育实验，结果如下图。该图表明，马铃薯脱毒培养过程中，适宜的茎尖大小为______。【答案】（1）①.无性②.m③.秋水仙素或低温（2）①.提高乙细胞的突变频率②.纤维素酶和果胶酶③.3##三④.含有（3）①.不是②.愈伤组织（4）0.27mm〖祥解〗植物细胞工程包括植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术等，植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞（称为外植体）等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，属于无性生殖的方式，利用的原理是植物细胞具有全能性。植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术，利用的原理是植物细胞的全能性和细胞膜具有一定的流动性。【解析】（1）通过植物组织培养技术进行快速繁殖植物，属于无性生殖，已知该植物为二倍体，体细胞中染色体数目为2m，则图中的单倍体幼苗体细胞中染色体数目减半为m，单倍体幼苗可用秋水仙素或低温处理，通过抑制纺锤体的形成，使染色体数目加倍，从而获得正常二倍体植株。（2）C过程用紫外线照射处理，可以提高乙细胞的突变频率。植物细胞融合之前要先使用纤维素酶和果胶酶处理，去除细胞壁，获得原生质体，若融合仅考虑两两融合，则培养液中的融合细胞类型有3种类型，即两个丙细胞融合、两个丁细胞融合、丙和丁细胞融合，获得的杂种细胞含有两个亲本中所有染色体，故细胞中含有同源染色体。（3）次生代谢产物不是其基本生命活动所必需的产物，为获得图中次生代谢产物，需将外植体培养至愈伤组织阶段，因为愈伤组织细胞分裂快，代谢旺盛，可产生所需的产物。（4）实验结果说明，茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低，因此马铃薯脱毒培养过程中，适宜的茎尖大小为0.27mm左右，既保证成苗率相对较高，也保证了脱毒苗的脱毒率较高。16.埃博拉病毒（EBOV）是一种能导致人类出血热的致死性病毒，对公共卫生具有较严重的危害。EBOV的NP蛋白在病毒复制中具有重要作用，也是检测EBOV的重要靶蛋白。实验人员用NP蛋白免疫小鼠来制备抗EBOV单克隆抗体，过程如下图所示。回答下列问题：（1）制备抗EBOV单克隆抗体过程中，用NP蛋白多次免疫小鼠的目的是________。（2）选择骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合，原因是骨髓瘤细胞具有_____的特征。从细胞来源的角度分析，与其他瘤细胞相比，选择骨髓瘤细胞进行融合的优点为________。（3）②过程中通常采用的诱导融合的方法有_______（写出一种即可），细胞融合的原理是________。（4）抗EBOV单克隆抗体可用于检测血浆中EBOV的含量，检测原理如下图所示。①检测前，先将抗EBOV单克隆抗体固定在支持物上，然后向检测体系中加入一定量含有EBOV的血浆（其NP蛋白称为待测抗原）和等量酶标记的NP蛋白（酶标记抗原），目的是让待测抗原、酶标记抗原与抗EBOV单克隆抗体_______结合。②保温一段时间后洗涤，再向检测体系中加入一定量的白色底物，若检测体系蓝色越浅，则说明血浆中NP蛋白（EBOV）含量_______。【答案】（1）刺激小鼠产生更多能分泌抗NP抗体的B淋巴细胞（2）①.能无限增殖②.骨髓瘤细胞和B淋巴细胞均来自骨髓中的造血干细胞，有利于细胞的融合（3）①.灭活病毒诱导②.细胞膜的流动性（4）①.竞争性②.越高〖祥解〗单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【解析】（1）制备抗EBOV单克隆抗体过程中，需要用免疫过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，因此，用NP蛋白多次免疫小鼠的目的是刺激小鼠产生更多能分泌抗NP抗体的B淋巴细胞。（2）适宜条件下，骨髓瘤细胞具有能无限增殖的特点，因此选择免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合进而获得杂交瘤细胞，此时的杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖；从细胞来源的角度分析，与其他瘤细胞相比，选择骨髓瘤细胞进行融合的优点为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞均来自骨髓中的造血干细胞，有利于细胞的融合。（3）②过程动物细胞融合与植物细胞融合相比（有物理方法、化学方法等），诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法，细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性。（4）①根据图示反应原理，检测前，先将抗EBOV单克隆抗体固定在支持物上，然后向检测体系中加入一定量含有EBOV的血浆（其NP蛋白称为待测抗原）和等量酶标记的NP蛋白（酶标记抗原），待测抗原中的目标抗原和酶标记抗原竞争结合固相抗体，即待测抗原、酶标记抗原与抗EBOV单克隆抗体发生竞争性结合。②标记抗原的酶可催化白色底物变为蓝色产物，所以如果待测抗原中目标抗原越多，则酶标记抗原和抗体结合得越少，催化生成的蓝色产物就越少，检测体系蓝色就越浅。即检测体系蓝色越浅，则说明血浆中NP蛋白（EBOV）含量越高。17.北方白犀牛曾经广泛分布于非洲，但由于猖獗的盗猎和自然栖息地的丧失，它们的个体数量不断减少。2018年3月，世界上最后一头雄性北方白犀牛去世，该物种仅剩下两头雌性。然而在此之前，研究人员已设法保存了北方白犀牛的精子。回答下列问题：（1）若通过胚胎工程对北方白犀牛进行繁殖，则操作步骤应为：对仅存的两头雌性个体注射_________进行超数排卵处理→体外受精→早期胚胎培养→_______+是否妊娠检查→产生白犀牛后代。（2）为了提高胚胎利用率，可以对早期胚胎进行胚胎分割，对囊胚期的胚胎进行分割时，要特别注意________，以免影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。（3）保护白色犀牛的最根本措施是借助生态工程使白犀牛被破坏的生态环境得到收复，生态工程遵循的基本原理包括_______（答出2点即可）。除了上述建立精子库外，保护生物多样性的措施还有__________。（答出1点即可）。【答案】（1）①.促性腺激素②.胚胎移植（2）内细胞团均等分割（3）①.整体、协调、循环、自生②.建立自然保护〖祥解〗胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后，用分割针或分割刀进行分割。对于不同发育阶段的胚胎，分割的具体操作不完全相同。【解析】（1）若通过胚胎工程对北方白犀牛进行繁殖，则操作步骤应为：对仅存的两头雌性个体注射促性腺激素，使其超数排卵，体外受精→早期胚胎培养→胚胎移植+是否妊娠检查→产生白犀牛后代。（2）胚胎分割时应选择发育良好的、形态正常的桑葚胚或囊胚，并注意将囊胚的内细胞团均等分割，以免影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。（3）保护白色犀牛的最根本措施是借助生态工程使白犀牛被破坏的生态环境得到恢复，生态工程遵循的基本原理整体、协调、循环、自生等。除了上述建立精子库外，保护生物多样性的措施还有建立自然保护区以及风景名胜区。天津市部分区2024-2025学年高二下学期期中练习（I卷）一、选择题：每小题4分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一个最符合题意。1.传统发酵食醋具有独特的风味，这是由多种物质共同作用的结果。下列叙述不正确的是（）A.醋酸菌在氧气和糖源充足的情况下才能产生乙酸B.白醋、陈醋、米醋发酵所需菌种主要是醋酸菌C.发酵初期发酵液温度升高主要是微生物代谢活动增强所致D.发酵后期大多数微生物死亡与营养物质消耗、有机酸积累等有关【答案】A〖祥解〗发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。人们可以通过传统发酵技术或发酵工程来进行发酵生产。传统发酵以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主。发酵工程一般包括菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等环节。【详析】A、醋酸菌在氧气、糖源充足时，将糖分解成醋酸；当氧气充足、缺少糖源时，将乙醇变成乙醛，再将乙醛变为醋酸，A错误；B、传统发酵以混合菌种发酵为主，其中白醋、陈醋、米醋发酵所需的菌种主要是醋酸菌，B正确；C、发酵初期，醋酸菌等微生物代谢增强，产热增多，发酵液温度升高，C正确；D、发酵后期，营养物质基本消耗完，各种代谢产物如有机酸积累，温度升高，pH下降，渗透压升高，这些因素都不利于微生物生存，导致大量微生物死亡，D正确。故选A。2.“筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列叙述正确的是（）A.用选择培养基筛选微生物，对照组不接种微生物，实验组接种微生物B.诱导植物原生质体融合时，观察是否再生细胞壁可筛选异种融合细胞C.在试管婴儿技术中，需取滋养层细胞进行性别鉴定来筛选所需的胚胎D.制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞【答案】D〖祥解〗单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过三次筛选：①筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞②筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）③筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞。最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。【详析】A、选择培养基的作用是目的菌能够正常在其上生存，其他微生物不能正常生存，为了确定选择培养基是否具有选择作用，应设计一个在完全培养基上接种的培养皿作对照，即对照组也接种微生物，只是实验组和对照组培养基的成分不同，A错误；B、诱导植物原生质体融合时，观察是否再生细胞壁不能用于筛选异种融合细胞，因为同种融合细胞也会再生出细胞壁，B错误；C、在试管婴儿技术中，不需要进行胚胎的性别鉴定，设计试管婴儿有时需要进行性别鉴定，C错误；D、单克隆抗体制备过程中，第一次筛选要用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选要用抗体阳性检测方法从分子水平筛选出产生所需抗体的杂交瘤细胞，即从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，D正确。故选D。3.下列有关倒平板操作的叙述，错误的是（）A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B.将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上C.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰D.等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置【答案】B〖祥解〗倒平板操作的步骤：（1）将灭过菌培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；（2）右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；（3）用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；（4）等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染。【详析】A、整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵，因此灭过菌的培养皿应放在火焰旁，A正确；B、培养皿应打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不能将培养皿盖完全打开，B错误；C、打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰，防止杂菌污染，C正确；D、等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置，防止皿盖上的水珠滴入培养基造成污染，D正确。故选B。4.下表是几种限制酶的识别序列及切割位点（Y=C或T，R=A或G）。下列相关叙述正确的是（）限制酶HindIIAluIBamHISau3AI识别序列及切割位点5'-GTY↓RAC-3'5'-AG↓CT-3'5'-G↓GATCC-3'5'-↓GATC-3'A.限制酶切割一次需切断2个磷酸二酯键，增加4个游离的磷酸基团B.由上表可知一种限制酶只能识别一种核苷酸序列，并在特定位点切割C.AluI切割后的DNA片段可用E.coliDNA连接酶或T4连接酶连接D.BamHI和Sau3AI切割形成的片段进行重组后，BamHI和Sau3AI均不能识别并切割【答案】C〖祥解〗限制酶特点：识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定的位点进行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端。【详析】A、限制酶切割一次需切断2个磷酸二酯键，形成2个新的游离的磷酸基团，A错误；B、一种限制酶不一定只识别一种核苷酸序列，如HindⅡ，B错误；C、AluI切割后形成的是平末端，E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶既可以连接黏性末端，也可以连接平末端，C正确；D、BamHⅠ和Sau3AⅠ切割形成的片段进行重组后，BamHⅠ不能识别并切割重组片段，而Sau3AⅠ可识别并切割重组片段，D错误。故选C。5.无菌操作是生物实验中一项重要的基本操作。下列过程不需要严格无菌操作的是（）A.传统泡菜的制作 B.酵母菌的纯培养C.动物细胞的传代培养 D.花药离体培养【答案】A〖祥解〗在传统生物技术中，无需进行严格灭菌，根据目的菌种的代谢特征设置相应的培养条件。【详析】在传统生物技术中，如传统泡菜的制作过程，不需要严格的无菌操作，通常是根据目的菌种的代谢特征设置相应的培养条件进行的，而实验室中的一些生物工程技术，如酵母菌的纯培养、动物细胞的传代培养、花药离体培养等需要严格的无菌操作，A正确，BCD错误。故选A。6.研究人员将胰岛素B链的第28位氨基酸替换为天冬氨酸，抑制了胰岛素聚合，从而获得速效胰岛素类似物。下列叙述正确的是（）A.该产品是通过直接改造胰岛素来生产的B.改变氨基酸的种类不会影响胰岛素的空间结构C.可通过定向诱导胰岛素基因碱基增添达到改造目的D.胰岛素改造的基本思路与天然蛋白质合成过程相反【答案】D〖祥解〗蛋白质工程概念及基本原理（1）蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。（2）蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。（3）蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。（4）基本途径：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。【详析】A、蛋白质工程最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成，即改造胰岛素的过程实际是改造胰岛素基因的过程，A错误；B、氨基酸的种类及排列顺序影响蛋白质的空间结构，B错误；C、可通过定向诱导胰岛素基因碱基替换达到第28位氨基酸替换为天冬氨酸的目的，C错误；D、蛋白质工程的基本途径是预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），胰岛素改造的基本思路与天然蛋白质合成过程（基因→蛋白质合成）相反，D正确。故选D。7.科研人员通过基因编辑技术将绿色荧光蛋白（GEP）基因整合到野生型小鼠P蛋白基因的一端，如图1所示。随机挑取5个品系细胞通过PCR验证GFP的导入情况，结果如图2所示。据此推测在进行PCR扩增时，所选择的引物为（）A.F1，R1 B.F2，R1 C.F1，R2 D.F2，R2【答案】A〖祥解〗PCR技术是聚合酶链式反应的缩写，是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。【详析】结合图1和图2推测，P-GFP融合基因电泳后的DNA片段较大，未插入GFP基因则电泳后的DNA片段较小，5个品系细胞中有的只扩增出小片段或大片段，有的两种片段均有，应选择图1中的引物组合是F1、R1。故选A。8.下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“琼脂糖凝胶电泳”实验的相关说法，正确的是（）A.利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA溶于酒精B.过滤后的研磨液放置在4℃冰箱中可防止DNA被降解C.琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率越快D.提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后即可变为蓝色【答案】B〖祥解〗DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺溶液混合，并在水浴加热条件下呈现蓝色；耐高温的DNA聚合酶在延伸环节时进行子链的合成。【详析】A、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离，A错误；B、洋葱研磨液在4℃冰箱中放置几分钟，可降低DNA水解酶的活性，防止DNA降解，B正确；C、待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率，DNA分子越小，迁移的速率越快，DNA分子越大，迁移速率越慢，C错误；D、将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后，水浴加热条件下才会呈现蓝色，D错误。故选B。9.哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程，只有在促性腺激素和精子的诱导下才能完成。下图为某哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图。下列有关叙述错误的是（）A.下丘脑、垂体参与该哺乳动物次级卵母细胞的形成B.受精作用促进次级卵母细胞完成减数第二次分裂C.多数哺乳动物IV形成时，只能观察到两个极体D.精子接触透明带时，透明带会发生生理反应从而阻止多精入卵【答案】D〖祥解〗分析题图：图中细胞Ⅰ为卵原细胞，细胞Ⅱ为经过复制的初级卵母细胞，细胞Ⅲ可表示次级卵母细胞，细胞Ⅳ是经过受精作用形成的受精卵，受精卵进行的是有丝分裂。【详析】A、据图可知，减数第一次分裂完成需要促性腺激素处理，下丘脑合成的促性腺激素释放激素作用于垂体，使得垂体分泌促性腺激素，因此下丘脑、垂体参与该哺乳动物次级卵母细胞的形成，A正确；B、结合题图可知，次级卵母细胞在精子的作用下才能完成减数第二次分裂，产生成熟的卵细胞，从而形成受精卵，即受精作用促进次级卵母细胞完成减数第二次分裂，B正确；C、多数哺乳动物Ⅳ的形成只产生两个极体，在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，说明卵细胞已经完成了受精，C正确；D、在精子接触卵细胞膜时，会发生透明带反应，能防止多个精子入卵，D错误。故选D。10.我国是香蕉的主产地之一，大多数栽培香蕉是三倍体品种。传统生产采用吸芽繁殖方式，不仅周期长、产率低、果品不佳，还易积累病毒。下列措施无法达到改良目的的是（）A.通过基因工程转入外源基因提高果实品质B.用香蕉顶端分生区作为外植体获得脱毒苗C.利用单倍体育种对栽培香蕉进行品种选育D.用香蕉叶鞘进行植物组织培养以提高产率【答案】C〖祥解〗脱毒香蕉苗的获得：选取香蕉外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组织，然后通过调整植物激素比例，使其再分化形成芽和根，获得大量试管苗。【详析】A、通过基因工程转入外源基因可以改变香蕉的基因组成，从而有可能提高果实品质，达到改良香蕉的目的，可以达到改良目的，A不符合题意；B、用香蕉顶端分生区作为外植体进行植物组织培养可以获得脱毒苗。因为植物顶端分生区附近的病毒含量很低或者几乎没有病毒，通过这种方式可以减少香蕉积累的病毒，提高香蕉的品质和产量，可以达到改良目的，B不符合题意；C、大多数栽培香蕉是三倍体品种，在减数分裂过程中会出现联会紊乱，无法正常产生配子，难以进行单倍体育种，无法达到改良目的，C符合题意；D、用香蕉叶鞘进行植物组织培养可以在短时间内获得大量的香蕉植株，缩短培养周期，从而提高产率，达到改良香蕉繁殖方式的目的，可以达到改良目的，D不符合题意。故选C。11.生物技术的发展改善了人类的生活，是推动人类社会向前发展的重要科学技术。但科学是一把双刃剑，只有合理应用于生产生活才能造福全人类，下列关于生物技术的安全性及伦理问题的论述错误的是（）A.转基因生物可能通过花粉杂交影响非转基因生物B.对流感病毒基因进行改造可能会引发大规模流行性疾病C.人类基因编辑可用于编辑出完美婴儿，以实现优生优育D.“只要有证据表明产品有害，就应该禁止转基因技术的应用”不属于理性看待转基因技术【答案】C〖祥解〗（1）转基因技术给人类带来了琳琅满目的产品，也引发了社会对转基因产品安全性的关注和争论。（2）治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞、组织、器官，用它们来修复或替代受损的细胞组织和器官，从而达到治疗疾病的目的；生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体，它面临很多伦理问题。我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。【详析】A、转基因生物可通过花粉杂交影响非转基因生物，即转入的基因可能会从转基因植物的体内扩散到非转基因生物钟，A正确；B、对流感病毒基因进行改造可能会提高流感病毒的传染性和致病能力，从而引发大规模流行性疾病，B正确；C、人类基因编辑用于编辑出完美婴儿，会造成社会歧视现象的发生，C错误；D、转基因技术给人类带来许多便利，但同时也存在一些安全性问题，即既能看到转基因技术的优点，也能明白其中的不足，这属于理性看待转基因技术，“只要有证据表明产品有害，就应该禁止转基因技术的应用”不属于理性看待转基因技术，D正确。故选C。12.下图是小鼠（2N=40）孤雌单倍体胚胎干细胞系的获得过程，相关叙述错误的是（）A.过程①中精子需用获能液培养，卵母细胞应处于减数第二次分裂中期B.过程②中的早期胚胎培养应置于含95%O2和5%CO2混合气体的培养箱中C.图中“早期胚胎”是桑葚胚，细胞已经逐渐分化，出现内细胞团和滋养层D.推测孤雌单倍体胚胎干细胞只含有一个染色体组，具有增殖和分化的能力【答案】BC〖祥解〗分析图示可知：表示小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞系获得过程，精子和卵母细胞经过①受精作用形成受精卵，然后移除雄原核，经过②早期胚胎发育形成早期胚胎，最终形成孤雌单倍体胚胎干细胞。【详析】A、在受精过程中，精子需要获能才能完成受精作用，卵母细胞应处于减数第二次分裂中期，A正确；B、早期胚胎培养应置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中，而不是95\%O2，B错误；C、图中的“早期胚胎”是桑葚胚，此时细胞未分化，C错误；D、孤雌单倍体胚胎干细胞是由孤雌生殖得到的单倍体胚胎干细胞，只含有一个染色体组，具有增殖和分化的能力，D正确。故选BC。（Ⅱ卷）二、非选择题：共52分13.多年来，腐乳一直受到人们的喜爱。这是因为经过微生物（主要是毛霉）的发酵，豆腐中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸，味道鲜美，易于消化吸收。（1）毛霉等微生物能产生多种“酶类”，使豆腐质地变软，并赋予腐乳特殊的风味。此处“酶类”主要指_______（注：糖化酶能水解多糖为单糖，也能合成双糖）A.蛋白酶 B.糖化酶C.DNA聚合酶 D.限制性内切核酸酶（2）早期发酵阶段（毛霉生长阶段），豆腐可以被视为______培养基（编号选填）①固体培养基②液体培养基③选择培养基④鉴别培养基（3）为高效筛选自然界的目标菌种，可以采用如图所示的“高通量筛选”方法。图中手持的器材称为________，该器材运用在以下哪个实验中________。A．平板划线法B．稀释涂布平板法C．PCR扩增DNAD．PCR扩增产物的凝胶电泳鉴定【答案】（1）A（2）①（3）①.移液器（或移液枪）②.BCD〖祥解〗腐乳制作的实验流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制；在腐乳生产过程中，温度应控制在15～18℃，且应保持一定的湿度，以便毛霉生长。【解析】（1）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，味道鲜美，易于消化吸收，A正确，BCD错误。故选A。（2）早期发酵阶段（毛霉生长阶段），豆腐能为毛霉等微生物的生长提供一定的营养物质和支撑，豆腐可以被视为固体培养基，①正确，②③④错误。故选①。（3）图中手持的器材称为移液器（或移液枪）。ABCD、移液器主要用于准确吸取和转移一定体积的液体，在稀释涂布平板法中，需要将菌液进行一系列梯度稀释后，再用移液器吸取一定体积的稀释液涂布到平板上，从而实现高效筛选目标菌种。而平板划线法是用接种环进行操作；PCR扩增和PCR扩增产物的凝胶电泳鉴定也需要用到移液枪。所以该器材运用在BCD实验中，BCD正确，A错误。故选BCD。14.羊乳的成分更接近于人乳，可作为牛乳过敏体质者最理想的替代乳品。但研究表明山羊乳中β-乳球蛋白也是引起人体过敏反应的一种主要致敏原，为实现羊乳“人源化”改造，研究人员利用CRISPR/Cas9系统敲除了山羊乳腺细胞中致敏原β-乳球蛋白（BLG）基因，同时在相应位点导入人乳铁蛋白（hLF）基因（通常只在乳腺细胞中表达）。该研究为培育羊乳中低致敏原和富含人乳铁蛋白功能营养成分的转基因山羊新品种提供了科学依据。下图为研究人员利用该技术获得转基因山羊的操作过程。回答下列问题：（1）上述技术中的目的基因是______，可通过PCR技术快速扩增目的基因，扩增时引物的作用是________。（2）CRISPR/Cas9系统主要包含向导RNA和Cas9蛋白两个部分，利用CRISPR/Cas9系统敲除山羊乳腺细胞中致敏原β-乳球蛋白（BLG）基因时，科研人员设计了sgBLG引导序列，sgBLG能够通过______方式与山羊基因组中BLG基因的靶位点结合。（3）Cas9蛋白类似于基因工程中常用到的______酶，但Cas9蛋白特性与该酶的区别是_______。（4）检测发现过程②中，hLF基因成功插入在母羊乙成纤维细胞中的一条常染色体上。上图过程①②运用到的技术有______，过程③④⑤中，运用到的技术有______（编号选填）。①显微注射技术②动物细胞培养技术③胚胎移植技术④DNA重组技术⑤动物细胞融合技术⑥细胞核移植技术（5）筛选后得到的早期胚胎细胞中没有检测到该蛋白，能否说明目的基因没有成功导入并表达，理由是________。【答案】（1）①.人乳铁蛋白基因（HLF基因）②.使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸（2）碱基互补配对（3）①.限制性内切核酸（限制）②.Cas9蛋白没有的专一识别DNA分子特定核苷酸序列的特性（4）①.①④②.②③⑥（5）不能，人乳铁蛋白基因只能在转基因动物的乳腺细胞内表达〖祥解〗基因工程的操作步骤（1）目的基因的获取；方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞；根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【解析】（1）本研究是为了培育羊乳中低致敏原和富含人乳铁蛋白功能营养成分的转基因山羊新品种，因此目的基因是人乳铁蛋白基因（HLF基因），可通过PCR技术快速扩增目的基因，扩增时引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。（2）sgBLG通过碱基互补配对与山羊基因组中BLG基因座的第一外显子（Ex1）中的靶位点结合。（3）Cas9蛋白可切割DNA，类似于基因工程中常用到限制酶，但Cas9蛋白特性与该酶的区别是Cas9蛋白没有限制性内切核酸酶所具有的专一识别DNA分子特定核苷酸序列的特性。（4）上图过程①是基因替换，属于DNA重组技术，②是将目的基因导入受体细胞，用到显微注射技术，因此运用到的技术有①②，过程③是核移植，④是早期胚胎培养，即需要动物细胞培养技术，⑤为胚胎移植，因此运用到的技术有②③⑥。（5）人乳铁蛋白（目的）基因只能在转基因动物的乳腺细胞内表达，因此在的早期胚胎细胞中不表达，没有检测到该蛋白不能说明目的基因是否成功导入。15.植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，并且取得了显著的社会效益和经济效益。下图表示植物细胞工程的相关操作过程及应用，已知该植物为二倍体，体细胞中染色体数目为2m。回答下列问题。（1）通过植物组织培养技术进行快速繁殖植物，属于_______生殖。图中的单倍体幼苗体细胞中含有染色体数目为______，该单倍体幼苗经_______处理后可获得正常二倍体植株。（2）图中C过程的目的是_______。细胞丙和细胞丁融合前应先用________酶处理，获得原生质体。若融合仅考虑两两融合，则培养液中的融合细胞类型有_______种，获得的杂种细胞中_______（填“含有”或“不含”）同源染色体。（3）次生代谢产物______（填“是”或“不是”）其基本生命活动所必需的产物，为获得图中次生代谢产物，通常需将外植体培养至_______阶段。（4）研究人员发现脱毒苗的成苗率和脱毒率与外植体的大小有关，并利用马铃薯进行脱毒苗的培育实验，结果如下图。该图表明，马铃薯脱毒培养过程中，适宜的茎尖大小为______。【答案】（1）①.无性②.m③.秋水仙素或低温（2）①.提高乙细胞的突变频率②.纤维素酶和果胶酶③.3##三④.含有（3）①.不是②.愈伤组织（4）0.27mm〖祥解〗植物细胞工程包括植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术等，植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞（称为外植体）等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，属于无性生殖的方式，利用的原理是植物细胞具有全能性。植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术，利用的原理是植物细胞的全能性和细胞膜具有一定的流动性。【解析】（1）通过植物组织培养技术进行快速繁殖植物，属于无性生殖，已知该植物为二倍体，体细胞中染色体数目为2m，则图中的单倍体幼苗体细胞中染色体数目减半为m，单倍体幼苗可用秋水仙素或低温处理，通过抑制纺锤体的形成，使染色体数目加倍，从而获得正常二倍体植株。（2）C过程用紫外线照射处理，可以提高乙细胞的突变频率。植物细胞融合之前要先使用纤维素酶和果胶酶处理，去除细胞壁，获得原生质体，若融合仅考虑两两融合，则培养液中的融合细胞类型有3种类型，即两个丙细胞融合、两个丁细胞融合、丙和丁细胞融合，获得的杂种细胞含有两个亲本中所有染色体，故细胞中含有同源染色体。（3）次生代谢产物不是其