2026届河北省保定市曲阳县一中生物高三上期末调研试题含解析

2026届河北省保定市曲阳县一中生物高三上期末调研试题注意事项：1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。2．选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0．5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。3．请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。4．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．如图为甲、乙两种单基因遗传病的遗传家系图，甲病家族无乙病致病基因，乙病家族无甲病致病基因，其中一种遗传病为伴性遗传。人群中乙病的发病率为23/144。下列叙述正确的是（）A．甲病为伴X染色体显性遗传病，乙病为常染色体显性遗传病B．Ⅱ1与人群中正常男性婚配，没必要进行遗传咨询C．若Ⅲ1为女孩，则其患病的概率为1/3D．Ⅲ2为正常女孩的概率为11/462．下图表示某物质跨膜运输的过程，下列有关叙述错误的是A．该物质与膜上的载体蛋白结合具有专一性B．膜上载体蛋白结合该物质后其形状会发生改变C．该运输方式是细胞内最重要的吸收或排出物质的方式D．图示过程可以表示效应B细胞分泌抗体3．图示为果蝇的精原细胞中部分基因在染色体上的分布情况（只显示两对同源染色体），进行减数分裂的过程中，相关分析正确的是（）A．基因A/a与基因D/d会随同源染色体分离而进行自由组合B．如果产生ABd精子，一定是发生同源染色体间的交叉互换C．基因D/d的分开可以发生在减数第一次分裂的后期D．检测基因D/d分子结构，碱基种类和排列顺序都是不同的4．细胞自噬就是细胞组成成分降解与再利用的基本过程。下列有关细胞自噬的叙述，错误的是（）A．细胞自噬过程能为细胞提供自我更新所需的材料B．受基因控制的细胞自噬过程有利于胚胎发育C．衰老的线粒体被溶酶体分解清除不属于细胞自噬D．细胞自噬有利于消灭侵入细胞内的活菌和病毒5．下列关于胚胎发育和胚胎工程的叙述中，正确的是（）A．卵裂期细胞数量及每个细胞的遗传物质均增加B．胚胎移植一般需发育到桑椹胚或囊胚期，囊胚期开始岀现细胞分化C．囊胚期内细胞团形成原肠腔，此过程称为卵化D．利用脐带血中的造血干细胞进行自体移植时，应长期给予免疫抑制药物6．下列有关生物进化的叙述正确的是（）A．基因型为Rr的圆粒豌豆逐代自交，纯合圆粒逐渐增加，但豌豆并未发生进化B．某森林中黑色桦尺蠖与灰色桦尺蠖是自然选择作用下由一个物种进化成的两个种群C．在自然选择作用下生物间形成生殖隔离是生物进化的标志D．有害基因在自然选择的作用下基因频率会逐渐降为零7．阿托品是一种常见的麻醉药物。某实验小组将离体的神经一肌肉接头处置于生理盐水中，并滴加阿托品，用针刺神经纤维后肌肉不收缩；再滴加乙酰胆碱酯酶抑制剂后，阿托品的麻醉作用降低甚至解除(突触间隙中的乙酰胆碱酯酶能水解乙酰胆碱)。据此判断，阿托品抑制突触处的兴奋传递的机制可能是A．破坏突触后膜上的神经递质受体 B．阻止突触前膜释放神经递质C．竞争性地和乙酰胆碱的受体结合 D．阻断突触后膜上的钠离子通道8．（10分）动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中进行，CO2的作用是（）A．为细胞提供碳源 B．促进细胞贴壁生长C．维持培养液的pH稳定 D．防止细胞之间粘连二、非选择题9．（10分）果胶酶广泛用于食品工业、纺织品加工业和造纸工业等领域。请结合所学知识，同答下列问题：（1）果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括_______________（至少答出2种）等。（2）下表是筛选产果胶酶微生物时所用的一种培养基的配方：K2HPO4MgSO4NaNO3FeSO4果胶刚果红水0.1g0.5g3g0.001g2g1g加至1L①该培养基能够筛选到产果胶酶的微生物的原因是____。为了能够筛选出分解果胶的微生物菌落，该培养基还需要添加____。②该培养基中的刚果红可以与____形成红色复合物。我们可以通过菌落周围是否产生____来筛选产果胶酶的微生物。（3）某果胶酶高产菌株产生的果胶酶为分子量不同的多种酶复合物，可以采取____法将这些酶在保持活性下进行有效分离。（4）果胶酶应用于果汁生产时，主要解决的两大问题分别是：____________________。10．（14分）稻瘟病是水稻最重要的病害之一，为达到防治目的，科研人员通过转基因技术培育出了抗稻瘟病水稻品种。回答下列问题：（1）通过RT-PCR技术以抗稻瘟病基因的RNA为模板扩增出cDNA。在PCR过程中，两个引物是_____酶的结合位点；用cDNA单链与该抗性水稻植株的单链DNA进行分子杂交，可能出现游离的单链区，其原因是_____。（2）利用RT-PCR技术扩增基因时，设计两种引物的碱基序列的主要依据是_____，为了便于扩增后的X基因与质粒连接，常在两条引物上设计加入不同的限制酶酶切位点，主要目的是_____。（3）基因工程中，将重组质粒导入植物细胞采用最多的方法是_____，导入动物受精卵采用的方法是_____。（4）若要检测抗稻瘟病基因是否翻译出相应蛋白质，可采用的分子水平的检测方法是_____。11．（14分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。12．宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一，人乳头状瘤病毒（HPV）与宫颈癌的发生密切相关。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生，以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程。据图回答下列问题：（1）单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有________________________。（2）动物细胞工程技术的基础是____________。（3）灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的_______和_______能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子中心排布，细胞膜打开，细胞发生融合。（4）对于抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3~11个/mL，每孔加入细胞稀释液1．1mL，目的是____________。（5）可以利用蛋白质工程技术对抗HPV抗体进行改造以延长其体外保存的时间，蛋白质工程是指以____________的关系作为基础，通过______________，对现有的蛋白质进行改造，或制造种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、D【解析】

分析乙病：3号和4号患病生出正常的女儿和儿子，可知该病是显性遗传病，再根据父亲患病，女儿正常，则该病是常染色体显性遗传病，设用字母A、a表示；分析甲病：已知题干中另一种病为伴性遗传，再根据1号患病，2号正常，可知甲病为伴X隐性遗传病，设用字母B、b表示，据此答题。【详解】A、据分析可知，甲病为伴X隐性遗传病，乙病为常染色体显性遗传病，A错误；B、Ⅱ1患有甲病，与正常男性婚配，其后代有患病概率，因此需要进行遗传咨询，B错误；C、Ⅱ3的基因型是aaXbY，Ⅱ4的基因型是1/3AAXBXB或2/3AaXBXB，则所生后代是女儿其患病的概率是1-2/3×1/2=2/3，C错误；D、人群中乙病的发病率23/144，则正常的概率aa=121/144，a=11/12，则人群中Aa的概率为22/23，为Ⅱ6的基因型是aaXBY，其后代的女儿一定不患甲病，则只需求患乙病的概率，Ⅱ7的基因型是22/23aa，因此患病的概率是22/23×1/2=11/23，是女儿的概率再乘以1/2，因此Ⅲ2为正常女孩的概率为11/46，D正确。故选D。2、D【解析】从图示可看出离子与膜上的载体蛋白结合具有专一性，A正确；据图分析，膜上载体蛋白结合离子后其空间结构发生改变，B正确；图中的物质运输需载体协助，消耗ATP，因此判断为主动运输方式，是细胞最重要吸收物质的方式，C正确；分泌抗体属于胞吐作用，不需要载体协助，是非跨膜运输方式，D错误。【考点定位】物质跨膜运输的方式及其异同【名师点睛】自由扩散、协助扩散和主动运输的比较：3、C【解析】

据图所示：图中共有4对等位基因，其中A/a与D/d位于同源染色体上，遵循基因的分离定律，A/a与B/b分别位于两对同源染色体上，遵循基因的自由组合定律，D/d与B/b分别位于两对同源染色体上，遵循基因的自由组合定律。【详解】A、A/a与D/d位于同源染色体上，不会发生自由组合，A错误；B、如果产生ABd精子，可能是基因突变，也可能是发生同源染色体间的交叉互换，B错误；C、基因D/d位于同源染色体上，减数第一分裂后期随着同源染色体的分离而分开，若发生交叉互换，则也可以发生在减数第二次分裂的后期，C正确；D、基因D/d分子结构中碱基的种类相同，D错误。故选C。4、C【解析】

自噬是细胞中高度保守的物质降解过程，细胞内大分子物质和细胞器等经双层膜包裹运送至溶酶体,被溶酶体酶降解产生小分子物质,实现细胞内物质再循环的过程，是由自噬基因控制的。在动物、真菌和某些植物的细胞中，含有一些由单位膜包裹的小泡称为溶酶体，是高尔基体断裂后形成的，溶酶体的功能是消化细胞从外界吞入的颗粒和细胞自身产生的碎渣，细胞从外界吞入物质后，形成吞噬泡，吞噬泡与溶酶体融合，于是溶酶体中的水解酶便将吞噬泡中的物质降解。【详解】A、细胞自噬的产物有些可以被细胞重新利用，为细胞提供自我更新所需的材料，A正确；B、受基因控制的细胞自噬过程有利于胚胎发育，如有利于早期胚胎发育过程中早期心管的形成，参与调节胚胎干细胞的分化等，B正确；C、衰老的线粒体被溶酶体分解清除属于细胞自噬，C错误；D、细胞自噬有利于消灭侵入细胞内的活菌和病毒，D正确。故选C。5、B【解析】

1、卵裂期的特点是细胞进行有丝分裂，每个细胞的DNA含量不变，数量增加，胚胎总体积基本不增加，每个子细胞的体积在变小。2、囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]。3、原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。【详解】A、卵裂期细胞进行的是有丝分裂，细胞数量增加，每个细胞的遗传物质不变，A错误；B、胚胎发育过程中早期胚胎具有全能性，还没分化，囊胚期开始出现细胞分化，胚胎移植一般需发育到桑椹胚或囊胚期，B正确；C、囊胚期并没有形成原肠腔，原肠胚时期才出现原肠腔，C错误；D、利用脐带血中的造血干细胞进行自体移植时，不会发生免疫排斥反应，不需要给予免疫抑制药物，D错误。故选B。6、A【解析】

种群是生物进化的基本单位，生物进化的实质是种群基因频率的改变。突变和基因重组，自然选择及隔离是物种形成过程的三个基本环节，通过它们的综合作用，种群产生分化，最终导致新物种形成。在这个过程中，突变和基因重组产生生物进化的原材料，自然选择使种群的基因频率定向改变并决定生物进化的方向，隔离是新物种形成的必要条件。【详解】A、基因型为Rr的圆粒豌豆逐代自交的过程中，基因型频率改变了，但是基因频率不变，说明豌豆未发生进化，A正确；B、一片森林中黑色桦尺蠖与灰色桦尺蠖属于同一个物种，B错误；C、生殖隔离是新物种形成的标志，生物进化的标志是种群基因频率的改变，C错误；D、有害基因在自然选择的作用下不一定会降为零，D错误。故选A。【点睛】现代生物进化理论的主要内容是学习的重点知识。本题主要考查学生对知识的记忆和理解能力。要注意辨析，种群基因频率改变意味着生物进化了，但不一定产生新的物种。新物种的产生必须要经过生殖隔离。生殖隔离的产生不一定要经过长期的地理隔离，如多倍体的形成。7、C【解析】

正常情况下，兴奋在神经纤维上以局部电流的形式传导，而在神经元之间，即突触处，先是以电信号的形式传导神经元末梢，引起突触前膜释放神经递质到突触间隙，神经递质与突触后膜上的受体结合，引起突触后膜产生兴奋，进而在下一个神经元上继续传导。【详解】根据题意分析，某实验小组将离体的神经-肌肉接头处置于生理盐水中，并滴加阿托品，用针刺神经纤维后，肌肉收缩减弱甚至不能收缩，说明阿托品阻止了兴奋在突触处的传递；而滴加乙酰胆碱酯酶抑制剂后，乙酰胆碱不被分解，就可以和阿托品竞争受体，阿托品的麻醉作用降低甚至解除，说明阿托品没有破坏突触的结构，也没有阻止突触前膜释放神经递质或阻断突触后膜上钠离子通道，因此很可能是因为竞争性地和乙酰胆碱的受体结合，导致乙酰胆碱不能和受体结合，进而影响了兴奋在突触处的传递；故C正确，ABD错误。【点睛】分析本题关键在于熟知突触的结构组成以及兴奋在此处的传递过程，结合题意才可能推知阿托品可能的作用环节。8、C【解析】

1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

2、动物细胞培养的条件：

（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。

（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。

（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。【详解】动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH稳定，C正确，ABD错误，故选C。二、非选择题9、多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶该培养基以果胶为唯一碳源，只有能够分解利用果胶的微生物才能生长琼脂果胶透明圈凝胶色谱果肉出汁率低、耗时长；榨取的果汁浑浊、黏度高【解析】

1、果胶酶包括半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等，既能分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层使榨汁容易，又能使果胶水解为半乳糖醛酸，果汁澄清，提高质量和稳定性。2、刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。3、凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量较大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快。4、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是掩盖不同种蛋白质间的电荷差别，使蛋白质完全变性，则SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决于分子大小。【详解】（1）果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等。（2）①从所给配方，可以看出该培养基以果胶为唯一碳源，是典型的选择培养基，在该培养基中，只有能够分解利用果胶的微生物才能生长，从而起到选择的作用；筛选菌落需要用固体培养基，故培养基还需要添加琼脂。②从题中所给配方，结合所学知识:刚果红可以与多糖物质形成红色复合物；而果胶也是一种多糖，可以推知在该培养基中，刚果红可以与果胶形成红色复合物。当果胶被果胶酶分解后，刚果红—果胶复合物就无法形成，培养基中会出现以果胶分解菌为中心的透明圈，我们可以据此来筛选产果胶酶的微生物。（3）将不同蛋白质按照不同分子量进行分离，高中阶段所学的方法主要有凝胶色谱法和SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法，但后者中的SDS会使蛋白质变性，只有前者才能保持蛋白质的活性。（4）果胶酶应用于果汁生产时，要解决的两个主要问题是:一是果出汁率低、耗时长，二是榨取的果汗浑浊、黏度高。【点睛】本题以提取果胶酶为载体，主要考查果胶酶的分类、作用以及蛋白质分离的方法等主要知识点，意在强化学生对相关知识点理解与运用，属于考纲中理解和应用层次的考查。10、热稳定DNA聚合DNA分子含有内含子非编码区等序列，mRNA分子中没有相应互补的碱基序列X基因两端的部分脱氧核苷酸序列使X基因能定向插入表达载体，减少自连农杆菌转化法显微注射法抗原-抗体杂交【解析】

1、有关PCR技术的相关知识：（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。（2）原理：DNA复制。（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。（4）过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。2、基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）在PCR过程中，两个引物是热稳定DNA聚合酶的结合位点；用cDNA单链与该抗性水稻植株的单链DNA进行分子杂交，由于DNA分子含有内含子、非编码区等序列，mRNA分子中没有相应互补的碱基序列，因此逆转录形成的cDNA中缺少该序列，所以出现游离的单链区。（2）用PCR技术扩增X基因时，设计两种引物的碱基序列的主要依据是X基因两端的部分脱氧核苷酸序列，为了便于扩增后的X基因与质粒连接，常在两条引物上设计加入不同的限制酶酶切位点，主要目的是使X基因能定向插入表达载体，减少酶切产物自身环化。（3）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，农杆菌能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，将质粒上的T-DNA转移到受体细胞。将目的基因导入动物细胞常用显微注射法，这也是将目的基因导入动物细胞最有效的方法。（4）若要检测抗稻瘟病基因是否翻译出相应蛋白质，分子水平上可采用抗原-抗体杂交法进行检测。【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，识记PCR技术的原理和过程，能结合所学的知识准确答题。11、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根据实验中的对照原则，若要比较新蛋白A的表达效率是否提高，则需设置三组实验实验变量的处理分别为：仅含新蛋白质A的重组质粒，仅含蛋白A的重组质粒和空白对照（仅含空质粒，以排除空质粒可能产生的影响）。因此，将含有新蛋白A基因的重组质粒和含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）分别导入大肠杆菌，提取培养