合成生物诊断试剂研发工程师岗位招聘考试试卷及答案

合成生物诊断试剂研发工程师岗位招聘考试试卷及答案合成生物诊断试剂研发工程师岗位招聘考试试卷及答案一、填空题（共10题，每题1分）1.核酸探针中，能与靶序列互补杂交的短单链核酸称为______。2.CRISPR-Cas系统中，引导Cas酶识别靶序列的RNA称为______。3.抗原抗体反应中，常用的酶标记物包括辣根过氧化物酶（HRP）和______。4.荧光定量PCR中，非特异性结合双链DNA的荧光染料是______。5.核酸提取的常用磁珠法依赖于磁珠与核酸的______作用。6.生物素-亲和素系统中，与生物素高亲和力结合的蛋白是______。7.ELISA检测抗体常用的方法是______法。8.重组蛋白原核表达最常用的宿主是______。9.胶体金试纸条的检测膜是______（硝酸纤维素膜）。10.合成生物诊断试剂中，调控基因表达的核心元件是______。二、单项选择题（共10题，每题2分）1.常用于核酸诊断的Cas酶是？A.Cas1B.Cas9C.Cas13D.Cas142.ELISA间接法的检测对象是？A.抗原B.抗体C.半抗原D.核酸3.核酸探针特异性的关键是？A.长度B.碱基组成C.靶序列互补性D.标记物4.重组蛋白亲和层析常用的配体是？A.Ni-NTAB.琼脂糖C.纤维素D.硅胶5.胶体金试纸条检测线（T线）包被的是？A.金标抗体B.捕获抗体C.质控抗体D.抗原6.PCR退火温度一般范围是？A.55-65℃B.72℃C.94℃D.37℃7.抗原抗体结合不包括的作用力是？A.氢键B.疏水作用C.共价键D.范德华力8.合成生物诊断中用于信号放大的元件是？A.启动子B.终止子C.报告基因D.核糖体结合位点9.诊断试剂灵敏度指的是？A.检测阳性样本的能力B.检测阴性样本的能力C.特异性D.精密度10.核酸杂交最适温度比Tm值低约？A.5-10℃B.15-20℃C.25-30℃D.35-40℃三、多项选择题（共10题，每题2分，多选/少选不得分）1.合成生物诊断试剂关键技术包括？A.核酸探针设计B.CRISPR技术C.重组蛋白表达D.荧光标记2.CRISPR诊断的优势有？A.高特异性B.高灵敏度C.无需PCRD.快速检测3.ELISA常见类型包括？A.间接法B.双抗体夹心法C.竞争法D.捕获法4.核酸提取方法有？A.酚氯仿抽提法B.磁珠法C.硅胶膜法D.乙醇沉淀法5.重组蛋白表达系统包括？A.大肠杆菌B.酵母C.昆虫细胞D.哺乳动物细胞6.荧光标记物选择依据是？A.荧光强度B.激发/发射波长C.稳定性D.结合能力7.胶体金试纸条组成部分包括？A.样品垫B.结合垫C.NC膜D.吸水垫8.诊断试剂质控指标包括？A.灵敏度B.特异性C.精密度D.稳定性9.抗原抗体反应影响因素包括？A.温度B.pHC.离子强度D.反应时间10.合成生物元件类型包括？A.启动子B.终止子C.核糖体结合位点D.报告基因四、判断题（共10题，每题2分，√/×）1.CRISPR仅用于基因编辑，不能用于诊断。（）2.ELISA间接法可检测样本中的抗体。（）3.核酸探针越长，特异性越高。（）4.生物素-亲和素结合是可逆的。（）5.PCR延伸温度均为72℃。（）6.重组蛋白表达后必须复性才有活性。（）7.胶体金试纸条只能定性检测。（）8.诊断试剂特异性指检测阴性样本的能力。（）9.酚氯仿法可同时提取DNA和RNA。（）10.合成生物诊断试剂无需考虑生物安全。（）五、简答题（共4题，每题5分）1.简述核酸探针的设计原则。2.简述ELISA间接法的原理。3.简述重组蛋白在诊断试剂中的应用。4.简述合成生物诊断试剂的质量控制要点。六、讨论题（共2题，每题5分）1.结合合成生物学技术，谈谈如何提高诊断试剂的灵敏度。2.讨论合成生物诊断试剂在POCT中的应用前景及挑战。---答案部分一、填空题答案1.探针2.sgRNA（单导向RNA）3.碱性磷酸酶（AP）4.SYBRGreenI5.吸附6.链霉亲和素7.间接8.大肠杆菌（E.coli）9.NC膜10.启动子二、单项选择题答案1.C2.B3.C4.A5.B6.A7.C8.C9.A10.A三、多项选择题答案1.ABCD2.ABD3.ABCD4.ABC5.ABCD6.ABCD7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD四、判断题答案1.×2.√3.√4.×5.×6.×7.×8.×9.√10.×五、简答题答案1.核酸探针设计原则：①特异性：与靶序列高度互补，无交叉杂交；②长度适宜（15-30nt）：过短特异性差，过长杂交效率低；③GC含量（40%-60%）：避免发夹/二聚体；④标记合理：不影响杂交活性；⑤保守性：针对靶序列保守区域，提高通用性。2.ELISA间接法原理：①包被：已知抗原固定于酶标板；②孵育：待测样本中抗体与包被抗原结合；③孵育：酶标记二抗（抗待测抗体）与结合抗体结合；④显色：酶催化底物显色，吸光度与待测抗体含量正相关。3.重组蛋白的应用：①抗原：作为ELISA/试纸条包被抗原（如乙肝重组抗原）；②抗体：重组单克隆抗体（如新冠抗体），提高特异性；③标记物：重组酶（如重组HRP），稳定性优于天然酶；④对照：重组蛋白作为阳性对照，保证试剂可靠性。4.质量控制要点：①原料质控：重组蛋白/探针纯度、酶活性；②性能质控：灵敏度（最低检测限）、特异性（交叉反应）、精密度（CV≤10%）；③稳定性：加速老化试验（37℃放置），验证有效期；④生物安全：重组元件无致病性；⑤批间一致性：不同批次性能差异符合标准。六、讨论题答案1.提高灵敏度的合成生物学策略：①CRISPR信号放大：利用Cas13旁系切割活性，切割荧光淬灭探针释放信号；②重组蛋白融合：将Luciferase与抗体融合，增强信号；③基因回路级联：低浓度靶标触发级联反应，放大信号；④多标记联用：同时标记多个靶标区域，提高信号强度；⑤适配体优化：SELEX筛选高亲和力适配体，增强靶标结合。2.POCT应用