新冠核酸检测标本采集、送检、处理流程

新冠病毒核酸检测作为疫情防控的关键技术手段，其结果的准确性直接关系到疫情的精准研判与有效控制。整个流程环环相扣，任何一个环节的疏漏都可能导致结果偏差，甚至造成误诊、漏诊。本文将从标本采集、送检运输至实验室处理的全流程进行详细阐述，旨在为一线操作人员提供一套相对完整且具操作性的实践指南。一、标本采集：源头把控，规范操作是前提标本采集是核酸检测的“第一关”，其质量直接决定了后续检测的成败。规范的采集操作能够最大限度地保证所采标本中含有足够量的目标病毒核酸。（一）采集前准备与人员防护采集前，需对采集环境进行必要的清洁与消毒。采集人员必须严格按照生物安全防护要求，穿戴好个人防护用品，通常包括医用防护口罩、护目镜或面屏、防护服、一次性乳胶手套、鞋套等。每采集一人次，均需更换手套，并进行手消毒，避免交叉感染。同时，应提前准备好合格的采集管（内含病毒保存液）、一次性使用无菌采样拭子、密封袋、标签、手消毒剂等物资，并确保其在有效期内。对于受检者，应提前告知其采集流程及配合要点，如采集前半小时避免进食、饮水、吸烟、嚼口香糖等，以减少对采集过程的干扰。（二）常用标本类型与采集方法目前，新冠病毒核酸检测最常用的标本类型为鼻咽拭子和口咽拭子。1.鼻咽拭子采集：受检者头部微仰，采集人员一手轻扶其头部，另一手持带有拭子的采集管。将拭子贴鼻孔进入，沿下鼻道的底部向后缓缓深入，待拭子顶端到达鼻咽腔后壁时，轻轻旋转一周（约3-5秒），然后缓缓取出拭子，立即将拭子头浸入含保存液的采集管中，折断拭子杆，使拭子头完全浸泡在保存液内，旋紧管盖。此方法能较好地采集到鼻咽部上皮细胞，病毒载量相对较高，是目前推荐的首选采集方法。2.口咽拭子采集：受检者头部微仰，嘴张大，并发出“啊”音，充分暴露咽喉部。采集人员将拭子越过舌根，在咽腭弓两侧或扁桃体隐窝、扁桃体表面稍微用力来回擦拭至少3次，然后取出拭子，同样立即浸入含保存液的采集管中，折断拭子杆，旋紧管盖。口咽拭子采集相对简便，受检者不适感较低，但可能因采集部位不当、受检者配合度不高等因素影响标本质量。无论采用何种采集方式，均需确保拭子头部充分接触采集部位黏膜，轻柔旋转并适当停留，以保证足够的细胞量被采集。采集后，应立即在采集管上标注清楚受检者信息、采集时间、采集地点及采集人员等关键信息。（三）采集后即时处理单个标本采集管应放入密封袋内，若为混采，则需将同一批次的采集管一同放入密封袋，并确保密封完好。疑似病例或确诊患者的标本，应按照生物安全规定进行双层包装，并明确标识。二、标本送检：安全高效，无缝衔接是保障采集后的标本应尽快送至指定的核酸检测实验室进行检测。送检过程需严格遵守生物安全和冷链运输相关规定，确保标本在运输途中的安全性、完整性和稳定性。（一）标本包装与标识标本在送检前必须进行规范包装，通常采用三层包装体系。第一层为密封的采集管，第二层为防渗漏的密封袋（可放置冰排以维持低温），第三层为坚固的运输箱。运输箱外需粘贴醒目的生物危害标识、易碎标识，并注明标本类型、数量、接收单位、发送单位、发送日期、所需温度条件等信息。（二）运输条件与时限标本运输应符合《病原微生物实验室生物安全管理条例》及相关运输规范的要求。对于使用含病毒保存液的标本，通常建议在2-8℃条件下冷藏运输。运输时限应尽可能缩短，理想情况下，标本采集后应在规定时间内送达实验室。若无法及时送达，需根据保存液的特性，在合适的条件下暂存，但不宜过长，以免影响病毒核酸的稳定性。运输过程中，应避免剧烈震荡、阳光直射和极端温度。运输人员需熟悉运输路线，确保运输过程安全、高效。（三）交接与记录标本送达实验室后，送样人员与实验室接收人员需进行严格的交接核对。核对内容包括标本数量、标识信息、包装完好性、运输条件是否符合要求等。双方确认无误后，在交接记录上签字，并注明接收时间。对于不合格的标本，实验室有权拒收，并及时与送样单位沟通。三、实验室处理流程：精细操作，质量控制是核心实验室是核酸检测的核心区域，其处理流程复杂且对环境、设备、人员技能均有较高要求。实验室需严格分区，通常包括试剂准备区、标本制备区、扩增区和产物分析区（或三区合一，根据具体检测系统而定），各区独立运行，防止交叉污染。（一）标本接收与核对实验室接收标本后，首先在生物安全柜内对标本进行外部消毒。然后，由专人负责核对标本信息，包括受检者姓名、编号、采集管完整性、保存液是否渗漏、标本量是否充足等。对于信息不全、标识不清、标本管破损或渗漏的情况，应及时与相关部门沟通处理。核对无误后，对标本进行唯一编号，并录入实验室信息管理系统（LIMS）。（二）标本灭活与前处理根据实验室规定和所使用的检测试剂要求，部分标本可能需要进行灭活处理。常用的灭活方式为56℃孵育一定时间。灭活过程需在生物安全柜内进行，以确保操作人员安全。灭活后的标本，在生物安全柜内打开采集管盖，进行后续的核酸提取操作。对于冷冻保存的标本，需先在室温或规定温度下解冻，并充分混匀。（三）核酸提取核酸提取是实验室处理的关键步骤，其效率和纯度直接影响后续的扩增反应。目前实验室多采用自动化核酸提取仪配合商品化的核酸提取试剂盒进行操作。操作时，需严格按照试剂盒说明书和仪器操作规程进行，注意加样体积的准确性，避免气溶胶污染。提取过程中，应设置阴性对照（如无核酸酶水）和阳性对照（已知浓度的标准品），以监控提取过程是否受到污染以及提取效率。提取完成后的核酸产物应妥善保存，尽快进行扩增检测。（四）核酸扩增与检测核酸扩增通常采用实时荧光RT-PCR方法。在试剂准备区，按照试剂说明书配制PCR反应体系，包括酶、引物探针、缓冲液等。配制好的反应体系需在低温条件下保存，并尽快转移至标本制备区或扩增区。在指定区域内，将提取的核酸模板加入到PCR反应管中，注意避免交叉污染。加样完成后，将反应管密封，离心去除气泡，然后放入荧光定量PCR仪中。设置好仪器参数（如循环数、退火温度、荧光采集通道等），启动扩增程序。扩增过程中，仪器会实时监测荧光信号的变化。实验人员需密切关注仪器运行状态。（五）结果判读与报告扩增反应结束后，根据试剂盒说明书提供的判读标准，结合阳性对照、阴性对照、内参（如人RNaseP基因）的扩增情况，对每一份标本的结果进行判读。结果通常分为阳性、阴性和不确定（可疑）。对于不确定结果，需进行复核，必要时重新采集标本进行检测。检测结果确认后，由授权人员审核并签发报告。报告内容应包括受检者基本信息、标本类型、采集时间、检测时间、检测方法、检测结果、参考范围及必要的解释说明等。同时，检测数据应及时上传至相关信息平台，以便疫情防控部门掌握情况。结语新冠病毒核酸检测是一项系统性工程，从标本采集的规范操作，到运输环节的安全保障，再到