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文档简介
生物学生物研究员实习报告一、摘要
2023年6月5日至8月23日,我在一家生物技术公司担任生物研究员实习生,负责基因编辑实验和数据分析。核心工作成果包括完成10组CRISPR-Cas9基因敲除实验,成功构建并验证3个重组质粒,并通过qPCR技术检测到目标基因敲除效率达85%以上。期间应用了分子克隆、酶切鉴定、测序分析等专业技能,熟练使用ABI3730XL测序仪和NanoDrop进行核酸定量。提炼出标准化的基因编辑实验流程,包括引物设计优化、转染效率提升等可复用方法论,为后续实验效率提升提供数据支撑。
二、实习内容及过程
2023年6月5日到8月23日,我在一家生物技术公司实习,岗位是生物研究员。公司主要做基因功能研究和药物开发,有分子生物学和细胞生物学实验室,设备挺全乎,有ABI3730XL测序仪、流式细胞仪这些。实习目的主要是把学校学的知识用到实际实验上,熟悉生物制药行业的相关工作流程。
6月初,跟着导师做了CRISPR-Cas9基因编辑实验,目标是敲除某个基因。我负责设计引物,用NEBuilder™Kit做基因合成,然后转染到HEK293T细胞里。6月15号左右,挑克隆,做PCR验证,用了1%琼脂糖凝胶电泳看结果。有3个克隆条带对,测序后确认是对的,敲除效率大概85%,比预想的略低。导师教我用qPCR定量,我跑了10个样本,发现用TaqMan探针法能更准地算出敲除比例,这个数据后来写进报告里了。
7月,参与了一个细胞毒实验,用CCK-8法检测药物对肿瘤细胞的影响。我负责准备6个浓度梯度,每个梯度设3个复孔,7月20号测OD值,结果用GraphPadPrism生成剂量反应曲线。有个挑战是培养基有点浑,影响读数,导师让我试试用0.22μm滤膜过滤,确实清晰多了。最后数据显示,某化合物在10μM浓度下IC50值是1.2μM,比文献值低一点,可能跟细胞系状态有关。
实习期间还学了质粒提取和酶切鉴定,用了Qiagen的QiagenPlasmidMaxiKit,纯化的质粒A260/A280比值在1.8-1.9之间,符合要求。跑酶切的时候,酶量加少了,条带很淡,导师教我看说明书,调整酶浓度和反应时间,后面实验都顺利了。
公司的培训机制其实一般,很多实验细节都是靠自己摸索,或者看师兄师姐的旧记录。我觉得岗位匹配度还可以,但要是能有更系统的培训手册就好了。比如基因编辑那部分,如果一开始有标准操作流程(SOP)讲义,我可能不会花那么多时间在细节上。
这次实习最大的收获是学会了看文献找优化点,以前只懂怎么做实验,现在知道怎么troubleshoot。比如细胞毒实验那事儿,让我明白实验条件控制多重要。职业规划上,我更想往精准医疗方向发展了,希望以后能参与基因治疗的研发。虽然实习单位有些地方做得不够好,但对我个人成长挺有用的。
三、总结与体会
8周实习像座桥,把书上学到的分子生物学知识跟真实验联系起来。6月5日刚进公司时,连离心管都放不太顺,现在能独立设计CRISPR实验方案了。期间做的10组基因敲除,敲除效率最高达到85%,这个数据不是随便写的,是跑qPCR验证了10个样本才定下来的。用CCK-8法测细胞毒时,6个浓度梯度、3个复孔,每个都做到位,最后算出IC50=1.2μM,这个数字背后是严谨的操作和数据处理。实习让我明白,生物研究不是玩票,每一步都需要责任心,比如跑凝胶时电压稍微不对,结果可能就废了。这种责任感是学校里培养不出来的。
这次经历也让我看清了职业方向。之前对药物研发挺模糊,现在知道基因编辑领域特别需要既懂技术又懂应用的复合型人才。导师常说“文献看多了,实验思路就来了”,我现在就天天啃细胞治疗相关的论文,还计划明年考个PMP证书,想学点项目管理知识。实习单位虽然培训有点乱,但逼着自己主动学东西了。比如他们用的一些数据分析软件,我在学校没用过,现在天天琢磨,感觉技能树又长了不少枝桠。
行业趋势挺明显的,基因编辑从研究走向临床越来越快,CRISPR技术现在跟两年前比成熟多了。我在公司接触到的项目里,就有好几个是针对遗传病的基因疗法。这让我觉得,现在学的每一个实验技巧,未来都可能用上。比如那个用TaqMan探针法提高敲除效率的小改进,现在想想特别有意义。以后要是继续做这个方向,我肯定要把分子克隆、测序分析这些技能练得更扎实,争取能上手更复杂的实验,比如碱基编辑或者基因治疗载体构建。从学生到“准职场人”的心态转变挺大的,抗压能力肉眼可见地提升了。实习教会我的不仅是技术,更是怎么在压力下把事做好。这些经验,不管是继续深造还是直接工作,都是宝贵的财富。
四、致谢
感谢实习单位提供平台,让我有机会把书本知识用在实际实验里。特别感谢我的导师,实习期间遇到问题,他总能耐心
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