2026年生物实验室操作规范考核试题及评分要求

2026年生物实验室操作规范考核试题及评分要求一、单项选择题（每题2分，共20题，计40分）1.在生物实验室中，处理废弃培养物时应采用哪种方式灭活？A.直接丢弃B.高压蒸汽灭菌C.浓硫酸浸泡D.乙醚燃烧答案：B解析：高压蒸汽灭菌是最可靠的灭活方法，能杀灭所有微生物，包括芽孢。其他选项均存在安全隐患或灭活不彻底风险。2.使用移液器时，若需转移100μL液体，应选择哪个量程？A.10-100μLB.100-1000μLC.1000-10000μLD.0.1-1mL答案：A解析：移液器量程应尽量覆盖目标体积，避免多次操作误差。100μL属于10-100μL量程范围。3.实验室通风橱使用前应检查什么？A.灯光是否正常B.气流方向是否正确C.橱内是否存放私人物品D.温度是否合适答案：B解析：通风橱气流方向必须正确（靠背方向为最佳），确保有害气体排出实验室。4.哪种培养基适用于培养厌氧菌？A.麦康凯琼脂B.血浆凝固酶平板C.缺氧肉汤培养基D.营养琼脂答案：C解析：缺氧肉汤培养基通过隔绝氧气，适合厌氧菌生长。麦康凯用于肠道菌检测，血平板用于葡萄球菌鉴定。5.使用酒精灯时应注意什么？A.用嘴吹灭火焰B.用灯帽盖灭火焰C.将酒精灯倒置D.在酒精灯上加热试管答案：B解析：正确灭火方式是用灯帽盖灭，避免火焰回燃或酒精喷溅。6.保存菌种时应使用哪种方法？A.室温保存B.4℃冰箱保存C.-20℃冰箱保存D.55℃干燥保存答案：C解析：大多数菌种需-20℃保存，长期保存需添加甘油保护。室温易失效，4℃仅限短期。7.配制0.1%无菌生理盐水时，应使用哪种容器？A.透明玻璃瓶B.乳胶塞瓶C.塑料瓶D.有色玻璃瓶答案：B解析：乳胶塞能防止水分蒸发和污染，透明玻璃瓶易观察混匀情况。塑料瓶易吸附水分。8.进行PCR实验时，哪个步骤可能导致非特异性扩增？A.退火温度过低B.引物浓度过高C.循环次数不足D.DNA模板纯度高答案：A解析：退火温度过低会导致引物非特异性结合，增加非特异性扩增。9.湿热灭菌最常用的温度和时间是？A.60℃，30分钟B.121℃，15分钟C.100℃，10分钟D.80℃，20分钟答案：B解析：121℃是高压蒸汽灭菌标准温度，15分钟可杀灭所有微生物。10.检测生物安全柜滤网是否合格应使用什么方法？A.目视检查B.洁净度测试C.压差测试D.气溶胶挑战测试答案：C解析：压差测试是判断滤网功能是否正常的关键指标。洁净度测试和挑战测试需更复杂设备。二、多项选择题（每题3分，共10题，计30分）1.实验室生物安全等级分为哪些级别？A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-4E.CLS-1答案：A、B、C、D解析：生物安全实验室等级从BSL-1至BSL-4，无CLS等级。2.以下哪些操作需要穿戴实验服？A.配制培养基B.处理有毒试剂C.使用显微镜观察样本D.清洁实验台面E.拉取琼脂平板答案：A、B、C、E解析：清洁实验台面通常无需穿戴实验服。3.以下哪些属于潜在的生物安全风险？A.涉及高致病性病原体实验B.通风橱使用不当C.手部皮肤破损操作未消毒D.废弃培养物未灭菌E.实验室门未关闭答案：A、B、C、D、E解析：以上均可能导致感染或扩散。4.细胞培养操作中，以下哪些属于无菌技术要求？A.操作前手部消毒B.使用酒精灯火焰灭菌环口C.在超净工作台内操作D.使用无菌吸管和培养皿E.操作时避免说话和触摸口鼻答案：A、B、C、D、E解析：细胞培养全程需严格无菌。5.以下哪些试剂需要存放在阴凉避光处？A.乙醇B.戊二醛C.氢氧化钠D.碘伏E.甘油答案：B、D解析：戊二醛和碘伏易分解，需避光保存。乙醇、氢氧化钠、甘油可常温保存。6.实验室废弃物分类包括哪些？A.化学废弃物B.生物危害废弃物C.辐射废弃物D.废弃培养基E.废弃玻璃器皿答案：A、B、C、D解析：废弃玻璃器皿属于普通废弃物。7.PCR实验中，以下哪些因素影响扩增效率？A.DNA模板质量B.引物设计合理性C.循环温度设置D.Taq酶浓度E.试剂储存条件答案：A、B、C、D解析：试剂储存不当会影响酶活性，但不直接影响扩增效率。8.使用电子天平称量时，以下哪些操作正确？A.先调零再称量B.将物品放在称量纸或称量皿上C.快速称量减少漂移D.称量易挥发样品需盖称量皿E.称量后立即清理天平答案：A、B、D解析：快速称量易导致误差，称量后需等待天平稳定。9.以下哪些属于实验室感染控制措施？A.定期紫外线消毒实验台B.使用一次性手套C.操作后手部消毒D.实验室门常闭E.穿戴防护服答案：A、B、C、D、E解析：全部措施均有助于感染控制。10.保存血清时，以下哪些做法正确？A.置于-20℃冰箱B.添加0.5%叠氮钠防腐C.使用无菌密封管D.避免反复冻融E.定期检查有无变质答案：A、C、D、E解析：血清无需添加防腐剂。三、判断题（每题1分，共20题，计20分）1.实验室禁止吸烟、饮食。（√）2.高压灭菌锅使用后应待压力降至零再开盖。（√）3.移液器头可重复使用，无需每次更换。（×）4.研磨生物样本时必须佩戴护目镜。（√）5.生物安全柜内可放置手机等电子设备。（×）6.配制培养基时需确保所有玻璃器皿灭菌。（√）7.使用酒精灯时可用嘴吹灭火焰。（×）8.细胞培养液需过滤除菌后使用。（√）9.实验室废弃物可直接倒入下水道。（×）10.处理锐器（如针头）时可用双手夹取。（×）11.实验室门应朝外开，便于紧急疏散。（√）12.PCR实验中，DNA模板浓度越高越好。（×）13.湿热灭菌时，加盖的容器内液体可达到饱和蒸汽压。（√）14.通风橱内可放置实验记录本。（×）15.穿戴实验服时，袖口必须塞入手套内。（√）16.保存菌种时，甘油浓度越高越好。（×）17.实验室地面应保持干燥，防止滑倒。（√）18.使用显微镜观察时，可用手直接调节焦距。（×）19.废弃化学试剂可倒入下水道稀释处理。（×）20.操作结束后，实验台面需清洁消毒。（√）四、简答题（每题5分，共4题，计20分）1.简述生物安全柜的日常检查要点。答案：-检查滤网是否完好、压差是否正常（进风量＞出风量）；-检查风速是否达标（≥100L/min）；-检查紫外灯管是否老化（定期照射30分钟）；-检查内部清洁度，无过多样品残留；-记录使用时间和维护情况。2.为什么PCR实验中需设置阴性对照？答案：-排除试剂污染导致假阳性；-检测实验体系是否可靠；-阴性对照应无模板、无引物或用无菌水替代，结果应为阴性。3.处理实验室锐器（如针头）时需遵循哪些原则？答案：-立即放入锐器盒，避免直接接触；-禁止用手传递或弯折针头；-锐器盒满后按规定交由专业回收机构；-操作时佩戴防护手套和护目镜。4.简述培养基灭菌失败的可能原因及改进措施。答案：-原因：容器未干燥、灭菌时间不足、温度不均、灭菌锅故障；-改进：灭菌前确保容器干燥、延长灭菌时间（如需）、使用预热灭菌锅、定期校准设备。五、论述题（10分）结合实验室实际案例，论述生物安全操作规范的重要性。答案：-案例：2019年某实验室因通风橱滤网失效导致气溶胶扩散，多人感染；-重要性：1.保护人员：规范操作可避免感染（如手套破损处理）、中毒（如试剂