病理技师免疫组化技术测试试题

病理技师免疫组化技术测试试题考试时长：120分钟满分：100分试卷名称：病理技师免疫组化技术测试试题考核对象：病理技师（中等级别）题型分值分布：-判断题（总共10题，每题2分）总分20分-单选题（总共10题，每题2分）总分20分-多选题（总共10题，每题2分）总分20分-案例分析（总共3题，每题6分）总分18分-论述题（总共2题，每题11分）总分22分总分：100分---一、判断题（每题2分，共20分）1.免疫组化技术主要用于检测组织细胞中的蛋白质表达。2.免疫组化染色中，封闭非特异性结合位点通常使用牛血清白蛋白（BSA）。3.免疫组化技术中，辣根过氧化物酶（HRP）常作为二抗的标记物。4.免疫组化染色结果中，背景过染会导致假阳性结果。5.免疫组化技术可应用于肿瘤的分子分型。6.免疫组化染色中，抗原修复仅限于热修复一种方法。7.免疫组化技术中，荧光标记的二抗比酶标记的二抗更易观察。8.免疫组化染色中，pH值过高会影响抗体与抗原的结合。9.免疫组化技术中，内对照通常选择阴性对照或空白对照。10.免疫组化染色中，抗体稀释度越高，染色结果越清晰。二、单选题（每题2分，共20分）1.下列哪种方法不属于免疫组化技术中的抗原修复方式？A.热修复B.蛋白酶K消化C.高压蒸汽修复D.乙醇固定2.免疫组化染色中，二抗的作用是？A.直接识别抗原B.结合一抗C.发光或显色D.封闭非特异性结合位点3.免疫组化染色中，背景过染的原因可能是？A.抗体浓度过高B.pH值过低C.抗原修复不充分D.以上都是4.免疫组化技术中，荧光标记的二抗通常使用哪种荧光素？A.辣根过氧化物酶（HRP）B.荧光素异硫氰酸酯（FITC）C.碱性磷酸酶（AP）D.荧光素5（Cy5）5.免疫组化染色中，抗体稀释度越高，染色结果？A.越清晰B.越模糊C.无影响D.无法判断6.免疫组化技术中，内对照的作用是？A.验证抗体特异性B.排除非特异性结合C.补充阴性对照D.以上都是7.免疫组化染色中，pH值通常控制在？A.6.0-7.0B.7.0-8.0C.8.0-9.0D.9.0-10.08.免疫组化技术中，哪种方法常用于检测磷酸化蛋白？A.免疫组化B.免疫荧光C.免疫印迹D.流式细胞术9.免疫组化染色中，抗体孵育温度通常为？A.4℃B.37℃C.60℃D.100℃10.免疫组化技术中，哪种试剂用于显色？A.DABB.FITCC.HRPD.Cy5三、多选题（每题2分，共20分）1.免疫组化技术中，影响染色结果的因素包括？A.抗体浓度B.pH值C.抗原修复方式D.温度E.胶体金标记2.免疫组化染色中，常用的酶标记物包括？A.辣根过氧化物酶（HRP）B.碱性磷酸酶（AP）C.荧光素异硫氰酸酯（FITC）D.胶体金E.荧光素5（Cy5）3.免疫组化技术中，常用的抗体封闭剂包括？A.牛血清白蛋白（BSA）B.脱脂奶粉C.蛋白质A/GD.聚乙二醇（PEG）E.乙醇4.免疫组化染色中，背景过染的解决方法包括？A.降低抗体浓度B.优化抗原修复条件C.使用封闭剂D.调整pH值E.使用高纯度抗体5.免疫组化技术中，可用于检测的分子包括？A.蛋白质B.mRNAC.DNAD.糖链E.脂质6.免疫组化染色中，常用的荧光标记物包括？A.FITCB.Cy3C.Cy5D.AlexaFluorE.DAB7.免疫组化技术中，抗体孵育的步骤包括？A.一抗孵育B.二抗孵育C.胶体金孵育D.荧光标记孵育E.显色孵育8.免疫组化染色中，常用的内对照包括？A.阴性对照B.空白对照C.内源性对照D.外源性对照E.标准品9.免疫组化技术中，抗体优化的步骤包括？A.抗体浓度优化B.孵育时间优化C.pH值优化D.温度优化E.封闭剂优化10.免疫组化染色中，常用的固定方法包括？A.甲醛固定B.乙醇固定C.丙酮固定D.冰冻固定E.脱水固定四、案例分析（每题6分，共18分）1.案例背景：某患者因肺部结节就诊，病理科进行免疫组化检测以明确诊断。染色结果显示肿瘤细胞呈强阳性表达EpCAM，但背景过染严重，影响结果判读。问题：（1）请分析可能导致背景过染的原因。（2）提出至少三种解决背景过染的方法。2.案例背景：某研究团队使用免疫组化技术检测乳腺癌组织中Ki-67的表达水平，发现部分样本染色结果不均匀，部分区域阳性信号弱。问题：（1）请分析可能导致染色不均匀的原因。（2）提出至少三种提高染色均匀性的方法。3.案例背景：某实验室使用免疫组化技术检测结直肠癌组织中VEGF的表达，发现部分样本阳性信号假阴性。问题：（1）请分析可能导致假阴性的原因。（2）提出至少三种提高检测灵敏度的方法。五、论述题（每题11分，共22分）1.论述题：请详细论述免疫组化技术在肿瘤诊断中的应用及其优势。2.论述题：请详细论述免疫组化染色中抗体优化的重要性和具体步骤。---标准答案及解析一、判断题1.√免疫组化技术主要用于检测组织细胞中的蛋白质表达。2.√封闭非特异性结合位点通常使用BSA或脱脂奶粉。3.×二抗常使用酶标记物（HRP或AP）或荧光标记物，HRP是酶标记物。4.√背景过染会导致假阳性结果，需优化条件。5.√免疫组化可应用于肿瘤的分子分型，如检测特定蛋白表达。6.×抗原修复方法包括热修复、蛋白酶K消化、高压蒸汽修复等。7.×荧光标记需荧光显微镜观察，酶标记需化学显色，各有优劣。8.√pH值过高会影响抗体与抗原的结合，需控制在6.0-8.0。9.×内对照通常选择已知表达阳性的对照，而非阴性对照。10.×抗体稀释度过高会导致信号减弱，需优化浓度。二、单选题1.D乙醇固定属于固定方法，不属于抗原修复。2.B二抗结合一抗，传递信号。3.D以上都是可能原因。4.BFITC是常用的荧光素。5.B抗体稀释度越高，信号越模糊。6.D以上都是内对照的作用。7.BpH值通常控制在7.0-8.0。8.C免疫印迹常用于检测磷酸化蛋白。9.B抗体孵育温度通常为37℃。10.ADAB是常用的酶显色剂。三、多选题1.A,B,C,D抗体浓度、pH值、抗原修复、温度均影响染色结果。2.A,B,DHRP、AP、胶体金是常用的酶标记物。3.A,B,CBSA、脱脂奶粉、蛋白质A/G是常用的封闭剂。4.A,B,C,D降低抗体浓度、优化抗原修复、使用封闭剂、调整pH值可解决背景过染。5.A,C免疫组化主要用于检测蛋白质和DNA。6.A,B,C,DFITC、Cy3、Cy5、AlexaFluor是常用的荧光标记物。7.A,B,E一抗孵育、二抗孵育、显色孵育是关键步骤。8.C,D内源性对照和外源性对照是常用的内对照。9.A,B,C,D,E抗体优化包括抗体浓度、孵育时间、pH值、温度、封闭剂等。10.A,B,C,D,E常用的固定方法包括甲醛、乙醇、丙酮、冰冻、脱水。四、案例分析1.案例1：（1）背景过染的原因：抗体浓度过高、pH值不适宜、抗原修复不充分、封闭不充分等。（2）解决方法：-降低抗体浓度；-优化抗原修复条件（如调整pH值）；-使用封闭剂（如BSA或脱脂奶粉）；-调整孵育时间或温度。2.案例2：（1）染色不均匀的原因：抗体浓度不均、抗原修复不充分、样本固定差异、切片操作不当等。（2）提高染色均匀性的方法：-优化抗体浓度和孵育时间；-确保抗原修复充分且均匀；-使用标准化切片操作流程；-调整显微镜观察参数。3.案例3：（1）假阴性的原因：抗体特异性差、抗原修复不充分、抗体浓度过低、样本固定不当等。（2）提高检测灵敏度的方法：-使用高纯度抗体；-优化抗原修复条件；-提高抗体浓度；-使用酶放大技术（如双标或三标）。五、论述题1.论述题1：免疫组化技术在肿瘤诊断中的应用及其优势：-应用：-肿瘤分类：通过检测特定蛋白表达（如EpCAM、CK19）区分肿瘤类型；-分子分型：检测肿瘤相关基因（如HER2、Ki-67）指导治疗；-预后评估：检测凋亡相关蛋白（如p53）评估肿瘤恶性程度；-药物靶点检测：检测药物靶点（如EGFR）指导靶向治疗。-优势：-定位准确：在组织细胞水平检测分子表达；-操作简便：相对其他分子检测技术更易实施；-成本较低：相比基因测序或流式细胞术成本更低；-广泛应用：适用于多种肿瘤类型的检测。2.论述题2：免疫组化染色中抗体优化的重要性和具体步骤：-重要性：-提高特异性：避免假阳性结果；