河南省遂平中学2026届高三下学期第二次周考生物试题含解析

河南省遂平中学2026届高三下学期第二次周考生物试题注意事项:1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在条形码区域内。2．答题时请按要求用笔。3．请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试卷上答题无效。4．作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。5．保持卡面清洁，不要折暴、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下图所示DNA分子片段中一条链含15N，另一条链含14N。下列有关说法错误的是（）A．DNA连接酶和DNA聚合酶都催化形成①处的化学键B．解旋酶作用于③处，而②是胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸C．若该DNA分子中一条链上G+C=56%，则无法确定整个DNA分子中T的含量D．把此DNA放在含15N的培养液中复制两代，子代中含15N的DNA占100%2．一对夫妇有遗传性神经性耳聋家族史（常染色体单基因遗传病），且根据家族遗传系谱推知该夫妇理论上生育后代的表现型及比例为正常：正常（携带者）：患者=1：2：1，下列有关叙述正确的是（）A．该遗传病性状中，正常对患者为不完全显性B．这对夫妻中，妻子为携带者的概率为2/3C．精卵细胞可随机结合表明该病符合自由组合定律D．该夫妻育有两个孩子，为一儿一女且表现型正常的概率为9/323．下图为北美某湿地草原泽鵟种群数量与田鼠种群数量随时间变化的曲线图，图中阴影部分表示DDT(一种农药)处理时间。下列相关说法错误的是（）A．两种生物的种间关系可能是捕食关系B．两种生物的种间关系不可能是互利共生关系C．1964年到1969年间田鼠的出生率始终大于死亡率D．DDT的喷洒对草原泽鵟种群数量变化的影响大于对田鼠的影响4．人棘状毛囊角质化是一种伴X染色体显性遗传病，下列相关叙述错误的是（）A．女性患者的致病基因可以传递给儿子或女儿B．男性患者的致病基因可以传递给儿子或女儿C．女性患者与正常男性结婚可能生出正常女儿D．正常男性和正常女性结婚一般不会生出患病孩子5．研究人员用图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶切割位点），将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述不正确的是A．构建重组质粒的过程应选用BclⅠ和HindⅢ两种限制酶B．使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组C．能在添加四环素的培养基上生存一定是含有重组质粒的大肠杆菌D．利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙6．下列有关基因和染色体的叙述，正确的是（）A．豌豆雌蕊、雄蕊的形成由性染色体上基因决定B．萨顿运用假说一演绎法确定了果蝇的白眼基因位于染色体上C．正常情况下，女性红绿色肓携带者的初级卵母细胞中含有2个致病基因D．有丝分裂间期，染色体复制，基因不复制二、综合题：本大题共4小题7．（9分）尿生成量与机体水盐平衡有关，抗利尿激素（ADH）是调节机体水盐平衡的重要激素。回答以下有关问题。（1）抗利尿激素在___________（器官）合成，能引起抗利尿激素分泌量增加的有效刺激是____________。（2）有研究表明，适量的乙醇会抑制ADH的分泌，某实验小组以雌性家兔为实验对象对该研究结果进行验证，实验步骤如下：①将健康的生理状态相同的雌性家兔均分为A、B两组。②A组注射适量的乙醇溶液，B组注射______________。③一段时间后测定A、B两组雌性家兔的________________。预测实验结果为_______________。（3）实验小组刺激雌性家兔的迷走神经，发现雌性家兔的尿量明显增加，说明参与尿量调节的信息分子除了抗利尿激素外还有__________________，机体调节尿量的方式是_________________。8．（10分）野生生菜通常为绿色，遭遇低温或干旱等逆境时合成花青素，使叶片变为红色。花青素能够通过光衰减保护光合色素，还具有抗氧化作用。人工栽培的生菜品种中，在各种环境下均为绿色。科研人员对其机理进行了研究。（1）用野生型深红生菜与绿色生菜杂交，F1自交，F2中有7/16的个体始终为绿色，9/16的个体为红色。①本实验中决定花青素有无的基因位于___________对同源染色体上。②本实验获得的F2中杂合绿色个体自交，后代未发生性状分离，其原因是：_________________。（2）F2自交，每株的所有种子单独种植在一起可得到一个株系。所有株系中，株系内性状分离比为3:1的占___________________（比例），把这样的株系保留，命名为1号、2号__________。（3）取1号株系中绿色与深红色个体进行DNA比对，发现二者5号染色体上某基因存在明显差异，如下图所示。据图解释：1号株系中绿色个体的r1基因编码的r1蛋白丧失功能的原因___________________。（4）进一步研究发现，与生菜叶色有关的R1和R2基因编码的蛋白质相互结合成为复合体后，促进花青素合成酶基因转录，使生菜叶片呈现深红色。在以上保留的生菜所有株系中都有一些红色生菜叶色较浅，研究人员从中找到了基因R3，发现R3基因编码的蛋白质也能与R1蛋白质结合。据此研究人员做出假设：R3蛋白与R2蛋白同时结合R1蛋白上的不同位点，且R1R2R3复合物不能促进花青素合成酶基因转录。为检验假设，研究人员利用基因工程技术向浅红色植株中转入某一基因使其过表达，实验结果如下。受体植株转入的基因转基因植株叶色浅红色植株（R1R1R2R2R3R3）R1深红色浅红色植株（R1R1R2R2R3R3）R2深红色实验结果是否支持上述假设，如果支持请说明理由，如果不支持请提出新的假设______________________________。9．（10分）回答下列（一）、（二）小题：（一）开发山楂果醋恰好让山楂中的有机酸丰富了果醋的酸味，同时也弥补生食山楂酸味大的缺陷，具体酿制山楂果醋分为以下三个阶段，请将具体过程补充完整。（1）制备山楂果原汁：选成熟的山楂果，在清水冲洗山楂果_______（填“之前”或“之后”）去梗。将山楂果切片并去籽，再添加_______，酶解适宜时间后压榨取果汁。（2）乙醇发酵：由于山楂果原汁_______，故发酵液中添加适量蔗糖，以获得酒精含量较高的果酒。果汁中加入活化的________后，在适宜环境下发酵一段时间，当发酵液中停止_______，发酵完毕待过滤，或发酵至_______，上清液即为果酒，用虹吸法取出。（3）醋酸发酵：将醋化醋杆菌进行扩大培养后，经检查菌体生长正常并无杂菌污染后接种于山楂酒-水中进行发酵，整个发酵过程需要通入_______。在发酵后期加入1．3~1．4%的食盐，其目的是调味和_______，以防止果醋被发酵分解。（二）下图为转基因抗虫烟草的培育流程，①②③④表示过程，其中②表示利用农杆菌转入受体细胞。回答下列相关问题：（1）在①过程构建重组质粒时，若用同一种限制性核酸内切酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA片段，使两者形成粘性末端用于拼接，这种方法的明显缺点是目的基因和质粒________（答出2点即可）。另外，影响拼接效率的主要因素，除以上缺点和盐离子浓度、渗透压、温度等环境因素外，还有_______（答出2点即可）。（2）在②过程中，将图示重组Ti质粒导入农杆菌时可用______处理农杆菌，以提高转化效率。操作之后，需要特定的培养基对农杆菌进行筛选，其原因是_______，最终筛选到的对象在相应选择培养基上的存活情况是________。（3）在③过程常通过调节_______的适当配比，从愈伤组织诱导出芽和根的_____，并由此再生出新植株。获得转基因烟草后，再通过[④]_______过程实现多个世代组织培养。10．（10分）基因打靶技术是建立在基因同源重组技术以及胚胎干细胞技术的基础上而发展起来的一种分子生物学技术。请结合图示回答下列有关问题：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表达可以使无毒的丙氧鸟苷代谢为毒性物质，导致细胞死亡。（1）将目的基因和与细胞内靶基因同源的DNA片段都重组到__________上，构建打靶载体（基因表达载体）。（2）打靶载体测序验证正确后，利用__________酶，将之线性化，以提高重组率。通过__________技术将打靶载体导入胚胎干细胞，这样打靶载体和与细胞内靶基因同源的区段就有机会发生同源重组。（3）为了筛选发生同源重组的细胞，可在培养液中加入__________。最后还需要通过__________技术鉴定同源重组的细胞（去除靶基因），将这样的细胞通过动物细胞培养后，获得大量打靶成功的细胞。其中，暂时不用的细胞进行__________保存。（4）将打靶成功的细胞注射入小鼠囊胚，移植到同种、__________的母鼠体内，一段时间后对受体母鼠进行妊娠检查，确保其生下嵌合体小鼠。这种嵌合体小鼠长大后，体内同时存在被“修饰”过的基因和未被“修饰”的基因。如果某些小鼠的__________（填“体细胞”或“生殖细胞”）恰巧被“修饰”过了，则它们的杂交后代中，就可能出现基因完全被“修饰”过的小鼠。11．（15分）人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值，只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。（1）为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____________合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。（2）启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是_____________（填写字母，单选）。A．人血细胞启动子B．水稻胚乳细胞启动子C．大肠杆菌启动子D．农杆菌启动子（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是____________。（4）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才有活性。与途径Ⅱ相比，选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是____________________________________。（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与_________________的生物学功能一致。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【解析】

分析题图：图示表示DNA分子片段，部位①为磷酸二酯键，是限制酶、DNA聚合酶和DNA连接酶的作用部位；②处是碱基对；部位③为氢键，是解旋酶的作用部位。【详解】A、DNA连接酶和DNA聚合酶作用于①磷酸二酯键，A正确；B、题图为双链DNA分子，而解旋酶作用于③氢键，②是构成DNA的基本单位，是胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸，B正确；C、若该DNA分子中一条链上G+C=56%，依据碱基互补配对原则，另一条链上G+C=56%，整个DNA分子中G+C=56%，A+T=44%，A=T，则T占22%，C错误；D、把此DNA放在含15N的培养液中复制两代得到4个DNA分子，根据DNA的半保留复制特点，其中有一个DNA分子的一条链含有14N，另一条链含有15N，其他3个DNA分子只含15N，因此子代DNA分子均含15N，D正确。故选C。2、D【解析】

据家族遗传系谱推知该夫妇理论上生育后代的表现型及比例为正常：正常（携带者）：患者=1：2：1，可设该遗传病由A、a一对等位基因控制，据此分析作答。【详解】AB、由于该夫妇所生后代表现型及比例为正常：正常（携带者）：患者=1：2：1，则该夫妻基因型均为Aa，子代AA：Aa：aa=1:2:1，因携带者表现正常，故正常对患者为完全显性，该夫妇为携带者的概率为1，A、B错误；C、基因的自由组合发生在减数分裂过程中，不同于精卵细胞间的随机结合，C错误；D、该夫妻生育一个正常子代的概率为3/4，育有一儿一女的该女为1/2×1/2×2=1/2；育有一儿一女且表现型正常的概率为3/4×3/4×1/2=9/32，D正确。故选D。解答此题D选项时需注意一儿一女可能有两种情况，故为1/2×1/2×2。3、C【解析】

图呈现“先增加者先减少”的不同步性变化，属于捕食关系。【详解】A、由分析可知，两种生物的种间关系可能属于捕食关系，A正确；B、互利共生关系的两种生物同时增加，同时减少，呈现出“同生共死”的同步性变化，图中曲线变化不同步，不可能是互利共生关系，B正确；C、1964年到1966年间，田鼠种群数量增长，出生率大于死亡率；但1966年到1969年间，田鼠种群数量大量下降，出生率小于死亡率，C错误；D、由图可知，DDT的喷洒后，草原泽鵟种群数量骤降，且难以恢复，DDT的喷洒对草原泽鵟种群数量变化的影响大于对田鼠的影响，D正确。故选C。答题关键在于识别种间关系曲线图和数据分析，明确捕食关系曲线图呈现“先增加者先减少，后增加者后减少”的不同步性变化，互利共生关系曲线呈现“同生共死”的同步性变化。4、B【解析】

1、棘状毛囊角质化是由位于X染色体上的显性致病基因决定的一种遗传病，其特点：（1）世代相传；（2）男患者少于女患者；（3）男患者的母亲和女儿都患病，女性正常个体的父亲和儿子都正常。2、假设棘状毛囊角质化的致病基因是D，则基因型和性状的关系：

XDXD

XDXd

XdXd

XDY

XdY

女性患者

女性患者

女性正常

男性患者

男性正常【详解】A、儿子和女儿的X染色体都可来自母亲，因此女性患者的致病基因可以传递给儿子或女儿，A正确；B、男性患者的致病基因只传递给女儿，B错误；C、女性患者（若为XDXd）与正常男性（XdY）结婚后可以生出XdXd正常的女儿，C正确；D、正常男性（XdY）和正常女性（XdXd）结婚，后代一般不会生出患病的孩子，D正确。故选B。5、C【解析】

基因工程技术的基本步骤：1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】A、选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ可能使质粒中的两种标记基因都破坏，因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割，A正确；B、使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组，B正确；C、能在添加四环素的培养基上生存的也可能是没有重组目的基因的大肠杆菌，C错误；D、PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链，故所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙，D正确。故选C。6、C【解析】

1、红绿色盲遗传的特点（伴X隐性遗传）：（1）交叉遗传（色盲基因是由男性通过他的女儿传给他的外孙的）；（2）母患子必病，女患父必患；（3）色盲患者中男性多于女性。2、萨顿运用类比推理的方法提出基因在染色体的假说，摩尔根运用假说演绎法证明基因在染色体上。【详解】A、豌豆的花为两性花，其细胞中不含性染色体，A错误；B、摩尔根果蝇杂交实验，运用假说一演绎法确定了基因在染色体上，B错误；C、正常情况下，女性红绿色盲携带者经过减数第一次分裂前的间期的复制，其一个初级卵母细胞中含2个致病基因的致病基因母亲，C正确；D、有丝分裂间期，染色体和DNA复制，DNA加倍，染色体没有加倍，D错误。故选C。二、综合题：本大题共4小题7、下丘脑细胞外液渗透压升高等量的生理盐水尿量A组尿量比B组多神经递质神经--体液调节【解析】

水盐平衡的调节。1．体内水少或吃的食物过咸时→细胞外液渗透压升高→下丘脑感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素多→肾小管、集合管重吸收增加→尿量减少，同时大脑皮层产生渴觉（饮水）；2．体内水多→细胞外液渗透压降低→下丘脑感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素少→肾小管、集合管重吸收减少→尿量增加。【详解】（1）抗利尿激素是下丘脑神经分泌细胞合成的，通过垂体释放的激素，能促进肾小管、集合管对水分的重吸收，从而使细胞外液渗透压下降，显然细胞外液渗透压升高能引起抗利尿激素分泌量增加。（2）实验目的是验证适量的乙醇会抑制ADH的分泌，据此可知实验中的自变量是有、无乙醇刺激，因变量是抗利尿激素的分泌量的变化，也可检测抗利尿激素的作用效果，即尿量变化，据此实验步骤为：①分组编号：将健康的生理状态相同的雌性家兔均分为A、B两组。②给与不同处理：A组（实验组）注射适量的乙醇溶液，B组（对照组）注射等量的生理盐水。③一段时间后测定A、B两组雌性家兔的尿量变化。由于使用乙醇后，抑制了抗利尿激素分泌，则A组家兔体内抗利尿激素减少，导致尿量增多，故实验结果为A组家兔尿量对多于B组，则能得出适量的乙醇会抑制ADH的分泌的结论。（3）实验小组刺激雌性家兔的迷走神经，发现雌性家兔的尿量明显增加，说明参与尿量调节为神经调节--体液调节，其中涉及的信息分子除了抗利尿激素外还有神经递质，即机体调节尿量的方式是神经--体液调节。熟知水盐平衡调节的过程是解答本题的关键！掌握抗利尿激素的合成、释放部位以及作用效果是解答本题的另一关键！8、2红色出现需要含有2种显性基因；而绿色杂合子只含有1种显性基因，其自交后不可能出现含2种显性基因的个体1/4r1基因中间碱基对缺失（5个），导致其指导合成的蛋白质空间结构发生改变不支持。新假设：R3蛋白与R2蛋白竞争R1蛋白上的相同结合位点，但R1R3复合物不能促进花青素合成酶基因转录。【解析】

F2代9∶7的性状分离比符合9∶3∶3∶1的变式，是判断该对性状是由两对独立遗传的等位基因控制的依据。若用A/a以及B/b来表示，则F1的基因型为AaBb，F2的基因型和比例为AABB∶AaBB∶AABb∶AaBb∶AAbb∶Aabb∶aaBB∶aaBb∶aabb=1∶2∶2∶4∶1∶2∶1∶2∶1。【详解】（1）①F2中红色个体与绿色个体比例为9∶7，符合9∶3∶3∶1的变式，说明决定花青素有无的基因位于2对同源染色体上。②由①可知，决定该性状的基因位于两对同源染色体上，若用A/a以及B/b来表示，红色个体基因型为A_B_，绿色个体基因型包括A_bb、aaB_和aabb，绿色杂合子包括Aabb、aaBb，自交后代最多只有一种显性基因，而红色出现需要含有2种显性基因，因此其自交后代全为绿色。（2）自交后代分离比为3∶1，说明有一对基因属于杂合子，同时红色出现需要含有2种显性基因，而绿色杂合子只含有1种显性基因，因此符合情况的基因型包括AaBB、AABb，这两种基因型在F2中占2/16+2/16=1/4。（3）由图可知，与R1相比，r1缺失了5个碱基对，由于碱基对缺失，导致其指导合成的蛋白质空间结构发生了改变。（4）根据实验结果可知，向浅红色植株R1R1R2R2R3R3中转入基因R1或R2，均可使转基因植株叶色变为深红色，若R3蛋白与R2蛋白同时结合在R1蛋白上的不同位点，且R1R2R3复合物不能促进花青素合成酶基因转录，则两种转基因植株都应为浅红色，所以实验结果不支持上述假说。R1R2复合物可促进花青素合成酶基因转录，推测R3蛋白与R2蛋白结合在R1蛋白的同一位点，转入基因R1或R2，均会使R1R2复合物含量增加，使转基因植物叶色变为深红色，但R1R3复合物不能促进花青素合成酶基因转录。即新假设为：R3蛋白与R2蛋白竞争R1蛋白上的相同结合位点，但R1R3复合物不能促进花青素合成酶基因转录。本题考查自由组合定律的应用和基因控制性状的机理，考查考生对所学知识的分析和应用能力，尤其第（4）问具有一定的难度，要求考生能根据实验现象做出合理的推理。9、之后果胶酶（和果胶甲酯酶）含糖量较低干酵母（悬液）出现气泡酵母下沉无菌空气/氧气抑制杂菌反向拼接/倒接、（自身）环化且的基因的浓度、质粒的浓度、反应时间氯化钙CaCl2不是所有的农杆菌都接纳了重组质粒在含四环素培养基上存活，在含青霉素培养基上死亡营养物质和生长调节剂/植物激素项端分生组织继代培养【解析】

1.酿酒和制醋是最古老的生物技术。与酒和醋的生产有关的微生物分别是酵母菌和醋杆菌，它们各有不同的菌种。菌种的不同，所产生的酒和醋的风味也不同。本实验的内容是制作果酒和果醋，所用的原料是葡萄或其他果汁。葡萄酒是酵母利用葡萄糖进行酒精发酵(乙醇发酵)的产物。酵母菌只有在无氧条件下才能进行酒精发酵，即将葡萄糖氧化成乙醇，而且当培养液中乙醇的浓度超过16%时，酵母菌就会死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反应式如下。醋杆菌在有氧条件下才能将乙醇氧化为醋酸，醋杆菌所产生的醋酸可使培养液中醋酸的含量高达13%。2.基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．【详解】（一）（1）制备山楂果原汁通常选成熟的山楂果，为了避免杂菌污染，通常在用清水冲洗山楂果之后去梗。将山楂果切片并去籽，为了提高出汁率和澄清度，通常需要添加果胶酶（和果胶甲酯酶）处理，酶解适宜时间后压榨取果汁。（2）乙醇发酵时通常需要在发酵液中添加适量蔗糖，以弥补山楂果原汁含糖量较低的不足，同时也是为了满足酵母菌发酵需要的底物量，从而获得酒精含量较高的果酒。然后在果汁中加入活化的干酵母（悬液）后，置于适宜环境下进行发酵，由于酵母菌无氧呼吸的产物是酒精和二氧化碳，所以在发酵过程中会有气泡产生，当发酵液中不再出现气泡时，意味着发酵完成，然后过滤获得果酒；也可发酵至酵母下沉后，用虹吸法取出上清液即为果酒。（3）醋酸发酵中，由于醋化醋杆菌在有氧气的条件下将酒精变为为乙醛，进而变为乙醇，所以整个发酵过程需要通入无菌空气/氧气。在发酵后期加入1．3~1．4%的食盐，食盐起到了调味和抑制杂菌的作用，进而防止果醋被其他微生物发酵分解。（二）（1）①为构建基因表达载体的过程，若用同一种限制性核酸内切酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA片段，则两者会出现相同的粘性末端从而使得拼接变得容易，但这种方法存在明显的缺点是在拼接时会出现反向拼接/倒接、（自身）环化等情况。影响拼接效率的因素主要有盐离子浓度、渗透压、温度等环境因素，除此外，还有且的基因的浓度、质粒的浓度和反应时间也会影响拼接的效率。（2）②过程为将目的基因导入受体细胞的过程，将图示重组Ti质粒导入农杆菌时，为了提高导入的成功率，可用氯化钙CaCl2处理农杆菌，以提高转化效率。因为导入的成功率较低，也就是说，并不是所有的农杆菌都接纳了重组质粒，可能有的导入的是普通质粒，或者没有导入成功，所以需要在特定的培养基对农杆菌进行筛选，由于图中重组质粒上含有标记基因四环素抗性基因，而抗青霉素的基因被破坏，为了筛选出成功导入重组质粒的农杆菌，需要将待筛选的农杆菌分别接种在含有四环素的培养基和含青霉素的培养基上进行筛选，最终筛选到成功导入重组质粒的农杆菌在相应选择培养基上的存活情况是在含四环素培养基上存活，在含青霉素培养基上死亡。（3）③过程为再分化成植株的过程，该过程中需要通过调节营养物质和生长调节剂/植物激素的适当配比，从而实现由愈伤组织诱导出芽和根的项端分生组织的目的，并由此再生出新植株。获得转基因烟草后，再通过[④]继代培养过程实现多个世代组织培养，从而实现了转基因烟草的扩大培养。熟知果酒、果醋的制作原理以及基因工程的基本原理和操作要点是解答本题的关键，辨图分析能力是本题考查的主要能力。10、载体（或质粒）限制显微注射新霉素和丙氧鸟苷DNA分子杂交液氮（或冷冻）生理状态相同（或经同期发情处理）生殖细胞【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）分析题图可知，将目的基因和与细胞内靶基因同源的DNA片段都重组到载体（或质粒）上，构建打靶载