2026年医学实验室技术生物样本处理实操考试题

2026年医学实验室技术生物样本处理实操考试题一、选择题（每题2分，共20题）1.在处理血液样本时，以下哪种抗凝剂最适用于全血细胞计数（CBC）分析？A.枸橼酸钠B.乙二胺四乙酸（EDTA）C.草酸钾D.氯化锂2.离心血液样本时，正确的离心速度和时间为多少，以分离血浆和血细胞？A.3000rpm，5分钟B.1500rpm，10分钟C.5000rpm，3分钟D.8000rpm，2分钟3.以下哪种方法最适合保存RNA样本，以避免降解？A.保存于-20°C，加入RNA酶抑制剂B.保存于4°C，立即进行提取C.保存于-80°C，不添加任何试剂D.保存于室温，定期检测完整性4.在处理尿液样本时，为什么要进行离心？A.去除细胞碎片B.沉淀结晶C.分离尿沉渣D.以上都是5.DNA样本提取前，常用的预处理步骤是什么？A.高温变性B.蛋白酶K消化C.氯仿萃取D.乙醇沉淀6.以下哪种试剂用于固定组织样本中的蛋白质，以便进行免疫组化（IHC）检测？A.甲醇B.甲醛C.乙醇D.酚7.在处理细胞培养样本时，培养基的pH值应维持在多少？A.6.5-7.0B.7.0-7.5C.5.5-6.0D.8.0-8.58.以下哪种方法可用于检测样本中的微生物污染？A.镜检B.培养皿接种C.PCR检测D.以上都是9.在处理脑脊液（CSF）样本时，应避免哪种操作，以防止细胞破裂？A.快速离心B.轻柔混匀C.高温保存D.立即检测10.以下哪种方法可用于提高蛋白质样本的溶解度？A.加热B.加入尿素C.低温保存D.消化酶处理二、判断题（每题1分，共10题）1.血清和血浆是同义词，可以互换使用。（×）2.乙醇可用于固定组织样本，以备后续染色。（√）3.RNA样本应避免反复冻融，以防止降解。（√）4.尿液样本离心后，上清液可用于生化分析。（√）5.DNA提取前，样本必须进行充分的匀浆。（√）6.细胞培养样本的pH值偏离正常范围会导致细胞死亡。（√）7.微生物污染可通过肉眼观察直接判断。（×）8.脑脊液样本应立即进行细胞计数，以避免细胞破裂。（×）9.蛋白质样本加入尿素可以提高其溶解度。（√）10.高速离心可用于分离血浆和血细胞。（√）三、简答题（每题5分，共6题）1.简述血液样本处理的一般步骤，包括抗凝、离心和保存。2.解释RNA样本为何需要快速提取，并说明防止降解的方法。3.描述尿液样本离心后的操作步骤，以及各步骤的目的。4.列举三种常用的DNA样本保存方法，并说明原因。5.说明细胞培养样本pH值的重要性，并列举两种调节pH值的方法。6.解释微生物污染对生物样本分析的干扰，并提出预防措施。四、操作题（每题10分，共4题）1.全血细胞计数（CBC）样本处理：请详细描述从样本采集到上机检测的全过程，包括抗凝剂选择、离心步骤和保存条件。2.RNA样本提取：假设需从血液样本中提取RNA，请说明提取前后的关键操作步骤，以及如何确保RNA完整性。3.组织样本固定：描述从新鲜组织样本到固定液保存的步骤，并说明不同固定液（如10%甲醛）的适用场景。4.细胞培养样本检测：假设需检测细胞培养样本的细胞活力，请说明样本处理、试剂添加和结果判定的步骤。答案与解析一、选择题1.B（EDTA是CBC分析常用抗凝剂，可螯合钙离子，防止凝血。）2.A（3000rpm，5分钟可有效分离血浆和血细胞。）3.C（-80°C可最大限度抑制RNA酶活性，避免降解。）4.D（离心可去除细胞碎片、沉淀结晶，并分离尿沉渣。）5.B（蛋白酶K消化可降解蛋白质，提高DNA纯度。）6.B（甲醛用于组织固定，使蛋白质交联，便于后续染色。）7.B（细胞培养最适pH为7.0-7.5，过高或过低会影响代谢。）8.D（镜检、培养和PCR均可检测微生物污染。）9.C（高温会破坏CSF成分，轻柔操作可避免细胞破裂。）10.B（尿素可破坏蛋白质结构，提高溶解度。）二、判断题1.×（血清去除了凝血因子，而血浆含有。）2.√（乙醇可固定组织，但染色效果不如甲醛。）3.√（反复冻融会释放RNA酶，加速降解。）4.√（上清液可用于生化指标检测，如肌酐、尿素。）5.√（匀浆可提高DNA提取效率。）6.√（pH偏离会影响酶活性和细胞功能。）7.×（需培养或染色才能确认污染。）8.×（应冷藏保存，避免细胞破裂。）9.√（尿素可破坏氢键，提高溶解度。）10.√（高速离心可快速分离血浆和血细胞。）三、简答题1.血液样本处理步骤：-采集后立即加入抗凝剂（如EDTA）。-3000rpm离心5分钟，分离血浆和血细胞。-血浆可保存于-20°C，血细胞需立即处理或冻存。2.RNA样本提取要点：-RNA易被降解，需快速提取（如RNeasy试剂盒）。-预处理：加入RNA酶抑制剂，避免反复冻融。3.尿液样本离心操作：-3000rpm离心5分钟，分离尿沉渣和上清液。-上清液用于生化检测，沉渣用于细胞计数或染色。4.DNA样本保存方法：--20°C（短期保存）。--80°C（长期保存，避免降解）。-加入TE缓冲液（含Tris和EDTA，稳定DNA）。5.细胞培养pH值重要性：-影响酶活性和代谢，偏离范围会导致细胞凋亡。-调节方法：使用酸碱缓冲液（如Hepes），或调整培养基。6.微生物污染预防：-污染会干扰实验结果（如假阳性）。-预防措施：无菌操作、高压灭菌、定期检测。四、操作题1.CBC样本处理：-采集全血→加入EDTA抗凝剂→混匀→3000rpm离心5分钟。-分离血浆和血细胞，血浆-20°C保存，血细胞立即上机检测。2.RNA提取：-血液→裂解（如TRIzol法）→去除蛋白质（氯仿萃取）→RNA沉淀（乙醇洗涤）→溶解于TE缓冲液。-关键：快速操作，全程避光，加入RNA酶抑制剂。3.组织固定：-新鲜组织→流水冲洗→10%甲醛浸泡（24小时以上）→脱水（梯度乙醇）