上海师范大学附属外国语中学2026年高三第二学期期末四校联考生物试题含解析

上海师范大学附属外国语中学2026年高三第二学期期末四校联考生物试题考生须知：1．全卷分选择题和非选择题两部分，全部在答题纸上作答。选择题必须用2B铅笔填涂；非选择题的答案必须用黑色字迹的钢笔或答字笔写在“答题纸”相应位置上。2．请用黑色字迹的钢笔或答字笔在“答题纸”上先填写姓名和准考证号。3．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，在草稿纸、试题卷上答题无效。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列关于人体细胞生命历程的叙述，错误的是（）A．细胞凋亡有利于生物个体的生长发育B．衰老细胞的体积增大，色素积累C．细胞癌变通常是致癌因子作用下发生基因突变导致的D．细胞分化导致人体不同细胞中蛋白质种类不完全相同2．表是对人类某种单基因遗传病的调查结果，相关分析错误的是（）类型第一类第二类第三类父亲正常正常患病母亲患病正常正常儿子全患病正常50人，患病3人正常38人患病8人女儿全正常正常49人正常29人患病6人A．该调查对家庭采取随机抽样B．根据第一类家庭调查结果可推测该病是伴X染色体隐性遗传病C．第二类家庭中出现3名患儿最可能的原因是减数分裂时发生了基因突变D．第三类家庭中部分母亲为纯合子3．哺乳动物胰岛B细胞的代谢活动十分旺盛，下列细胞结构与对应功能表述有误的是（）A．细胞核：中心法则中各环节发生的场所B．溶酶体：水解衰老细胞器和细胞碎片C．高尔基体：对胰岛素前体进行加工修饰D．线粒体：丙酮酸彻底氧化分解合成ATP4．下列说法不正确的是（）A．DNA与RNA都能携带遗传信息B．控制细胞器进行物质合成、能量转换等的指令，主要是通过核孔从细胞核到达细胞质的C．生物膜是对生物体内所有膜结构的统称D．生物膜上的蛋白质具有催化、物质运输、信息交流等功能5．宁夏回族自治区银川市掌政镇黄河旅游度假村为打造黄河流域第一村，将其景观空间格局以成片的农田为基底,以村落、池塘等为斑块,以道路、林带、河流等为廊道，建造桑基鱼塘，市民对其交口称赞：将度假村打造成了全国美丽乡村的样板。下列相关叙述错误的是（）A．农田群落物种高度相近，且组成比较简单，因此不具有群落的水平结构B．人类活动会使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向进行C．实施美丽乡村项目能实现能量的多级利用,提高能量的利用率D．乡村绿地能调节当地气候、保持水土，这体现了生物多样性的间接价值6．结核分枝杆菌俗称结核杆菌，属胞内寄生菌，是引起结核病的病原菌，下列有关结核杆菌所引起的免疫调节的说法中不正确的是（）A．结核杆菌能够引发机体产生体液免疫和细胞免疫B．T细胞可增殖分化形成效应T细胞直接清除结核杆菌C．吞噬细胞可对结核杆菌的抗原进行非特异性识别和处理D．过量使用免疫抑制剂会使结核病的发病率出现上升趋势二、综合题：本大题共4小题7．（9分）回答下列（一）、（二）小题。（一）回答下列有关发酵食品生产工艺的问题：（1）豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。影响豆豉风味的主要因素，除了菌种类型、发酵温度、pH、氧气等环境因素，还有________（答2个因素）。（2）目前的豆豉发酵基本是一次性的，每次都经过“培养基灭菌→___→发酵→提取”，周而复始。能否________发酵、生产、提取是今后的发展方向。（3）根据所学知识判断，下面哪种微生物更适合用豆芽汁培养基培养_________A醋杆菌B酵母菌C乳酸菌D农杆菌（4）在果醋发酵工艺中，用谷壳糠等将醋杆菌固定化，装在发酵瓶，下端直角玻璃管中塞____________用以过滤空气；物料瓶内装___________________，铝箔封口。发酵过程若流速过快，则可能导致____________，为保障品质，需对发酵瓶流出液________________。（二）为开发利用沿海滩涂盐碱地，我国科学家应用基因工程培育出了耐盐碱水稻新品系，大大提高了水稻等农作物的种植面积，增加了粮食产量。据此请回答下列问题：（1）欲将耐盐碱基因和Ti质粒进行重组形成重组质粒需要的工具酶有限制性核酸内切酶和____________，限制酶一般需要________种，这样设计的目的是____________。（2）将重组Ti质粒构建完成后导入农杆菌，经筛选后，对含目的基因的农杆菌进行大量繁殖，其目的是____________。（3）取田间水稻的幼胚经消毒后接种到____________（固体、半固体、液体）培养基上诱导产生愈伤组织，利用含重组质粒的农杆菌侵染愈伤组织后，将其接种到MS生根培养基上，在该培养基中细胞分裂素具有解除高浓度生长素____________的作用。（4）经组培获得水稻试管苗后，提取其叶片组织中的DNA，采用PCR技术扩增目的基因，目的是为了____________。要检测到转基因水稻中目的基因的表达产物，一般采用的方法是_________。8．（10分）为增加油葵种子中的含油量，科学家尝试将花生中的酶A基因导入油葵细胞，获得转基因油葵新品种。（1）为获取目的基因，可从花生细胞中提取_________，经逆转录形成cDNA。以此cDNA为模板通过PCR技术扩增目的基因。（2）构建重组DNA分子（如图所示）最好选用_________限制酶，目的是可避免_________。（3）普通大肠杆菌细胞中没有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，将构建的重组DNA分子导入农杆菌中,将获得的农杆菌接种在含_________的固体平板上培养得到含重组质粒的单菌落，再利用培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液。（4）剪取油葵的叶片放入浸染液中一段时间后，经过筛选获得转基因油菜细胞。最后经过__________________培育成转基因油葵植株。此种技术的原理是_________。（5）研究发现，如果将该酶A的20位和24位氨基酸变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。通过蛋白质工程对酶A进行改造，所需步骤有_________。a．蛋白质的结构设计b．蛋白质的结构和功能分析c．蛋白质结构的定向改造d．酶A基因的定向改造e．将改造后的酶A基因导入受体细胞f．将定向改造的酶A导入受体细胞（6）经过种植转基因油葵发现，虽然转基因油葵种子中含油量上升，但是抗灰霉菌的能力丢失，其原因是_________。9．（10分）“海水稻”是耐盐碱水稻，能通过细胞代谢在根部产生一种调节渗透压的代谢产物，此代谢产物在叶肉细胞和茎部却很难找到。自然状态下，“海水稻”单株生长，自花受粉。抗病、易感病以及茎的高矮是两对独立遗传的性状。抗病和易感病由基因G和g控制，抗病为显性；茎的高矮由两对独立遗传的基因（D、d、E、e）控制，同时含有基因D和E表现为矮茎，只含有基因D或E表现为中茎，其他表现为高茎。现有亲本为易感病矮茎和抗病高茎的纯合子，欲培育纯合的抗病矮茎“海水稻”品种。（1）“海水稻”产生调节渗透压的代谢产物在茎部和叶肉细胞中很难找到，而存在于根部细胞中的根本原因是__________________________________。（2）某“海水稻”品种M是用野生海水稻与栽培稻杂交后，经多年耐盐碱选育获得，其耐盐碱能力远强于野生海水稻，且产量高，则获得品种M的育种原理有_____________。（3）若只考虑茎的高矮这一相对性状，两亲本杂交所得的F1在自然状态下繁殖，理论上F2的表现型及比例为_________________________________。（4）若利用题干两亲本，通过单倍体育种，理论上获得纯合的抗病矮茎“海水稻”品种的概率是___________，试简述该育种过程___________________。10．（10分）科研人员利用基因编辑技术删除小鼠母本基因组的相关印记区域，培育出了由母本单倍体干细胞融合发育而来的孤雌生殖小鼠，为探索生殖奥秘作出了贡献。过程见下图：（1）上图孤雌小鼠的获得，用到动物细胞培养_________、_________、_________胚胎移植等生物技。（2）孤雌小鼠培育过程中需要用基因编辑技术删除母本基因组的相关印记区域。为了检测删除是否成功，在分子水平需要应用______________________________技术进行检测。（3）常用的基因编辑系统是crispr-cas9，其过程为：先让一段RNA与特征DNA序列结合，由此引导Cas9酶对特征DNA序列切割。因为“一段RNA”能与特征DNA序列_________，才能特异性结合。Cas9酶作用于特征DNA序列的____________________（填DNA分子的相关结构）。（4）上图中的“卵母细胞”应处于________________（时期）。应用卵母细胞培育孤雌小鼠容易成功，其原因是_______________________。并且由上述卵母细胞发育而来的胚胎能在代孕母鼠体内存活的原因是____________。11．（15分）科学家研发出抗HPV的单克隆抗体可高效准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。回答下列问题：（l）单克隆抗体具有的主要优点是______。单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有______（答出两点）。（2）将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合时，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外（只考虑两两融合），可能还有______，出现多种类型细胞的原因是______，诱导动物细胞融合时，常用的诱导因素有______（答出三点）等。（3）据报道，科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因（prG），该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。请据此设计两种制备单克隆抗体的新思路：①______；②______。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态结构和生理功能上发生稳定性的差异的过程称为细胞分化。【详解】A、细胞凋亡是基因编程性死亡，有利于生物个体的生长发育，A正确；B、衰老细胞的体积减小，色素积累，B错误；C、细胞癌变是致癌因子作用下引起原癌基因和抑癌基因突变导致，C正确；D、细胞分化的实质是基因的选择性表达，故人体不同细胞中蛋白质种类不完全相同，D正确。故选B。细胞分化的过程中，不同细胞中的遗传物质不变，蛋白质种类会发生改变。2、C【解析】

调查人类遗传病时，最好选取群体中发病率相对较高的单基因遗传病，如色盲、白化病等；若调查的是遗传病的发病率，则应在群体中抽样调查，选取的样本要足够的多，且要随机取样；若调查的是遗传病的遗传方式，则应以患者家庭为单位进行调查，然后画出系谱图，再判断遗传方式。【详解】A、为保证实验结果的准确性，调查应对家庭采取随机抽样，A正确；B、第一类家庭调查结果为父亲正常，母亲患病，子代表现为儿子全患病，女儿全正常，表现为交叉遗传的特点，可推测该病是伴X染色体隐性遗传病，B正确；C、第二类家庭中出现3名患儿均为男性，与性别相关联，故最可能的原因是该病为伴X隐形遗传病，父亲为XBY，母亲为基因型多数为XBXB，有部分母亲为携带者XBXb，C错误；D、第三类家庭中父亲患病，母亲正常，子代中男女均有患者，若为显性遗传病，则子代正常与患病比例应接近1:1，不符合题意；该病可能为常染色体隐形遗传病，父亲为aa，母亲为AA、Aa；也可能为伴X隐性遗传病，父亲为XaY，母亲为XAXA、XAXa，即有部分母亲为纯合子，D正确。故选C。遗传方式判定顺序：先确定是否为伴Y遗传（是否患者全为男性）→确定是否为母系遗传（是否为母系遗传）→确定是显、隐性→确定是常染色体遗传还是伴X遗传。3、A【解析】

1、动物细胞中，高尔基体对来自内质网的蛋白质进行加工、分类和包装，发送蛋白质；植物细胞中高尔基体与细胞壁的合成有关。

2、溶酶体内含有多种水解酶；膜上有许多糖，防止本身的膜被水解，能分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并杀死侵入细胞的病毒或病菌。

3、细胞核是遗传信息库，是细胞代谢和遗传的控制中心。【详解】A、哺乳动物胰岛B细胞高度分化，细胞核不能进行DNA的复制、翻译，只能进行DNA的转录，A错误；B、溶酶体中含有多种水解酶，能水解衰老细胞器和细胞碎片，B正确；C、高尔基体可对胰岛素前体进行加工修饰，使其成为成熟的蛋白质，C正确；D、葡萄糖在细胞质基质中分解为丙酮酸，丙酮酸进入线粒体彻底氧化分解，释放能量并合成ATP，D正确。故选A。4、C【解析】

细胞是生物体代谢和遗传的基本单位，生物膜相互转化的基础是膜的组成和结构的相似性都由蛋白质和脂质构成，依据膜的流动性，生物膜之间相互转化；核孔实现核质之间频繁的物质交换和信息交流。【详解】A、所有细胞生物和DNA病毒都以DNA作为遗传物质，携带遗传信息；而RNA病毒则以RNA作为遗传物质，携带遗传信息，A正确；B、核孔实现了核质之间频繁的物质交换和信息交流，控制细胞器进行物质合成、能量转换等的指令主要靠mRNA来实现，mRNA是通过核孔从细胞核到达细胞质的，B正确；C、生物膜并不是对生物体内所有膜结构的总称，而是对细胞膜、核膜和细胞器膜的统称，如皮肤黏膜，是生物体内的膜，但不是生物膜，C错误；D、一些蛋白质有催化作用，如绝大多数的酶，一些蛋白质有运输作用，如载体蛋白，还有一些蛋白质有信息交流的功能，如糖蛋白，这些蛋白质可以位于生物膜上，D正确。故选C。5、A【解析】

1、群落的空间结构：（1）垂直结构：植物群落的垂直结构表现垂直方向上的分层性，其中植物的垂直结构决定了动物的垂直分层。（2）水平结构：水平方向上由于光照强度地形明暗湿度等因素的影响，不同地段上分布着不同的生物种群。2、生物多样性的价值：①直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等使用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的。②间接价值：对生态系统起重要调节作用的价值(生态功能)。③潜在价值：目前人类不清楚的价值。【详解】A、农田群落也具有群落的水平结构，A错误；B、人类活动会使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向进行，B正确；C、实施美丽乡村项目能实现能量的多级利用，提高能量的利用率，C正确；D、调节气候、保持水土，属于生物多样性的间接价值，D正确。故选A。6、B【解析】

对于胞内寄生生物，体液免疫先起作用，阻止寄生生物的传播感染，当寄生生物进入细胞后，细胞免疫将抗原释放，再由体液免疫最后清除。【详解】A、结核杆菌属于胞内寄生菌，在侵染的过程中首先通过体液免疫阻止其扩散，当进入细胞内时，会引起T细胞的增殖分化，从而引发细胞免疫，A正确；B、效应T细胞的作用是和靶细胞结合，导致靶细胞裂解死亡，效应T细胞不能直接清除病原体，B错误；C、吞噬细胞能对病原体进行非特异性识别，并处理和暴露抗原，将信息呈递给T细胞，C正确；D、使用免疫抑制剂会导致机体的免疫功能降低，使结核病的发病率上升，D正确。故选B。本题考查疫苗、特异性免疫的相关知识，有一定的综合性，意在考查学生识记和理解能力，在此基础上可将注射抗原和注射疫苗相互进行比较，注射抗体，抗体可以直接清除病毒，发挥作用快，可起到治疗的作用，一般使用于紧急治疗，此法缺点是抗体存活时间比较短，没有长期预防的作用。二、综合题：本大题共4小题7、大豆品种（原料）、发酵时间接种连续地B脱脂棉球酒水混合物发酵不充分定期检测/监控（答到一个词给分）DNA连接酶2防止质粒和目的基因自身环化以及定向连接获取大量重组质粒（让目的基因扩增或克隆目的基因）半固体抑制根生长检测目的基因是否成功导入抗原-抗体反应【解析】

1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。3、基因工程的操作步骤：一是获取目的基因；二是构建基因表达载体（核心）；三是将目的基因导入受体细胞（导入植物细胞一般有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管道法等）；四是检测和鉴定目的基因（一是检测目的基因是否导入成功，二是检测目的基因是否成功表达，三是检测目的基因控制的性状是否在能在植株上表现出来）。【详解】（一）（1）影响豆豉风味的因素很多，包括菌种类型、发酵温度、pH、氧气等环境因素还有发酵的大豆品种原料和发酵时间。（2）发酵过程利用了微生物的代谢，因此培养过程要经过“培养基灭菌→接种→发酵→提取”。这种发酵技术基本上是一次性的，因此如何连续性低发酵、生产、提取是今后的发展方向。（3）豆芽汁培养基适合培养真菌，选项中只有酵母菌属于真菌，故选B。（4）醋酸菌是好氧细菌，下端直角玻璃管中塞脱脂棉球用以过滤空气。物料瓶内装酒水混合物，铝箔封口。发酵过程若流速过快，则可能导致发酵不充分，为保障品质，需对发酵瓶流出液进行定期检测。（二）（1）重组质粒构建过程中，用的工具酶包括限制性核酸内切酶和DNA连接酶，其中限制性核酸内切酶一般用两种，这样防止目的基因和质粒发生自身环化以及定向连接。（2）为了获取大量重组质粒，可对含目的基因的农杆菌进行大量繁殖。（3）愈伤组织的培养采用的是半固体培养基。生长素具有两重性，低浓度促进生长，高浓度抑制生长，在MS生根培养基上，细胞分裂素具有解除高浓度生长素抑制生根的作用。（4）提取叶片组织的DNA，采用PCR技术扩增目的基因，鉴定目的基因是否成功导入。对于检测转基因水稻中目的基因是否表达，可采用抗原-抗体杂交方法。本题考查视频发酵和基因工程的相关知识，要求考生识记相关发酵技术的原理、方法和流程，基因工程的原理及意义，掌握基因工程采用的工具及具体操作步骤，能结合所学的知识准确分析各题。8、mRNABamHⅠ和PstⅠ质粒自身的黏性末端连接或目的基因与质粒反向连接氨苄青霉素植物组织培养技术植物细胞的全能性b、a、d、e抗灰霉菌基因没有表达（或丢失等）【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）逆转录过程需要从供体细胞内提取出的mRNA为模板，以脱氧核苷酸为原料合成cDNA。（2）构建重组DNA分子时选用的限制酶要不破坏目的基因，所以不能用EcoRI，同时尽量防止质粒自身的黏性末端连接或目的基因与质粒反向连接，所以最好选用两种限制酶，即BamHⅠ和PstⅠ。（3）根据限制酶的切割位点，由于使用BamHⅠ和PstⅠ会破坏抗四环素标记基因，但抗氨苄青霉素的标记基因是完整的所以只能用含氨苄青霉素的培养基筛选含重组质粒的单菌落。（4）得到转基因细胞后，要培养转基因植株，需要用植物的组织培养技术才能实现，其依据的原理是植物细胞的全能性。（5）蛋白质工程的步骤是：蛋白质的结构和功能分析→蛋白质的结构设计→酶A基因的定向改造→将改造后的酶A基因导入受体细胞→获得所需蛋白质。（6）转基因油葵种子中含油量上升，但抗灰霉菌的能力丢失，原因可能是抗灰霉菌基因未表达或丢失。本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合图中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查。9、基因选择性表达基因重组、基因突变高茎：中茎：矮茎=1∶6∶91/8利用亲本杂交获得F1，种植F1，提取F1的花粉，进行花药离体培养（组织培养），获得幼苗后，用秋水仙素处理幼苗，逐一分开移栽到易感病环境，表现抗病且植株为矮茎的就是所需品种【解析】

由题可知，亲本易感病矮茎基因型为ggDDEE，抗病高茎基因型为GGddee。培育纯合的抗病矮茎的方法有：杂交育种、诱变育种和单倍体育种。【详解】（1）细胞分化是细胞在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程，其实质是基因的选择表达，因此“海水稻”产生调节渗透压的代谢产物在茎部和叶肉细胞中很难找到的根本原因是基因选择性表达。（2）杂交育种的原理是通过基因重组把两个或多个优良基因集合在一起。“经多年耐盐碱选育获得，其耐盐碱能力远强于野生海水稻，且产量高”说明进行了诱变育种，其原理是基因突变。因此获得品种M的育种原理有基因重组和基因突变。（3）若只考虑茎的高矮这一相对性状，两亲本杂交所得的F1基因型为DdEe，F1在自然状态下繁殖即自交，理论上F2的表现型及比例为矮茎（D_E_）∶中茎（3D_ee+3ddE_）∶高茎（ddee）=9∶6∶1。（4）要得到纯合的抗病矮茎基因型为GGDDEE，通过单倍体育种，亲本易感病矮茎基因型为ggDDEE，抗病高茎基因型为GGddee，F1为GgDdEe可产生8种比例相等的花粉，所以理论上获得纯合的抗病矮茎“海水稻”品种的概率是1/8。单倍体育种过程：利用亲本杂交获得F1，种植F1，提取F1的花粉，进行花药离体培养（组织培养），获得幼苗后，用秋水仙素处理幼苗，逐一分开移栽到易感病环境，表现抗病且植株为矮茎的就是所需品种。答题关键在于理解基因自由组合定律、常规育种方法及原理，把握知识点间的内在联系。10、基因工程动物细胞核移植早期胚胎培养DNA分子杂交技术碱基互补配对磷酸二酯键MⅡ中期（减数第二次分裂中期）卵母细胞体积大，易操作；含促使细胞核表达全能性的物质；卵母细胞所含营养物质丰富代孕母鼠子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应【解析】

1、孤雌生殖也称单性生殖，即卵不经过受精也能发育成正常的新个体的生殖方式。2、胚胎移植的生理学基础：（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）哺乳动物早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是出于游离状态，为胚胎的收集提供了可能；（3）受体子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能；（4）移植入受体的胚胎能与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但移入受体的供体胚胎的遗传特性不会受到影响。【详解】（1）识图分析可知，整个过程中用基因编辑技术删除相关的基因印迹区域，该过程中使用的Cas9酶类似于限制酶的作用，因此属于基因工程的操作，经编辑后的细胞用动物细胞培养成多个细胞或组织，利用核移植技术使卵母细胞与新核融合，体外培养胚胎至桑椹胚或囊胚后移植胚胎进入代孕母鼠体内。（2）验证基因是否删除成功，需要利用DNA分子杂交技术进行检测。（3）让一段RNA与目标特征DNA序列的碱基互补配对后两者才能结合。Cas9酶与DNA的基因靶点结合时发生了构象变化，酶功能区对靶标DNA的反向链进行定位切割DNA分子的磷酸二酯键，删除基因。（4）传统的细胞核移植技术中，受体卵母细胞处于减数第二次分裂中期。因