内蒙古呼伦贝尔市莫力达瓦旗尼尔基一中2026年高三第二学期生物试题模拟考试卷（一）含解析

内蒙古呼伦贝尔市莫力达瓦旗尼尔基一中2026年高三第二学期生物试题模拟考试卷（一）注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型（B）填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。2．作答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。4．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．下列以新鲜洋葱为实验材料的生物学实验中，叙述正确的是（）A．以鳞片叶内表皮为材料，盐酸处理后经健那绿染色可观察DNA的分布B．以鳞片叶为材料，捣烂取其汁液加入斐林试剂经水浴加热可检测蔗糖的存在C．以鳞片叶外表皮为材料，用1．3g/ml蔗糖溶液处理可观察细胞的质壁分离和复原D．以根尖为材料，经低温等处理显微镜下观察到分生区少数细胞染色体数目加倍2．如图表示升高大气CO2浓度和干旱胁迫对大豆开花期净光合速率[CO2（µmo1/·s）]的影响，下列相关分析错误的是（）A．湿润状态下，限制净光合速率的主要因素是CO2浓度B．干旱状态下，大豆叶片上的气孔并没有全部关闭C．大气CO2浓度没有达到开花期大豆的CO2饱和点D．两种环境下，CO2浓度升高后叶绿体内膜上[H]、ATP含量均下降3．2019年初，中科院生物化学与细胞生物学研究所陈剑锋研究组的最新研究成果对发烧在机体清除病原体感染中的主要作用及其机制做出了全新阐述。研究发现当机体温度达到高热（1.5℃）及以上水平时，热刺激会促使免疫细胞中的热休克蛋白90表达并转移到细胞膜上，该蛋白质与alpha4整合素结合后会加速免疫细胞“运动”到感染部位发挥作用。该发现让人们对发热的作用及退热药的使用有了新的认识。下列说法错误的是A．热休克蛋白90与alpha4整合素结合并使免疫细胞做出应答，体现了细胞膜的信息交流功能B．退热药可能是作用于下丘脑体温调节中枢，从而发挥作用C．该研究提示我们，在病人身体条件许可的情况下，可以让病人体温维持在1．5℃以上一段时间，然后再吃退烧药D．机体清除外来病原体体现了免疫系统的监控和清除功能4．新型冠状肺炎病毒(COVID-19)是单链RNA病毒，主要侵染人体肺泡细胞，下面叙述正确的是（）A．COVID-19侵染过程与肺炎双球菌侵染小鼠肺泡过程相似B．COVID-19和R型肺炎双球菌侵染人体肺泡都导致人患肺炎C．COVID-19疫苗难研发是因为其结构内单链RNA易发生变异D．COVID-19和与疯牛病病毒组成成分相似5．研究表明渐冻症是因为突变基因使神经元合成了毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动；将诱导多功能干细胞（iPS细胞）移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。下列相关叙述错误的是（）A．可通过DNA分子杂交技术对渐冻症进行诊断B．可通过替换控制合成毒蛋白基因来进行基因治疗C．iPS细胞分化过程涉及到有关基因的选择性表达D．iPS细胞与胚胎干细胞全能性高，都属于多能干细胞6．物质甲能阻断神经细胞膜上的Na+通道和影响某些神经递质的释放，过量误食会导致心率减慢，注射适量肾上腺素可使心率恢复正常。下列相关叙述错误的是（）A．正常情况下，机体能通过调节维持心脏活动的稳态B．物质甲阻断神经细胞膜上的Na+通道后，Na+内流受阻C．物质甲能影响某些神经递质的释放，从而影响神经元之间的兴奋传递D．肾上腺素为心肌细胞提供能量，使心率加快7．多酶片是一种促消化的药品，主要成分是胰蛋白酶、胃蛋白酶。多酶片还具有分解脂质的功效，加速胆固醇的酯化从而降低血液中的胆固醇含量。下列说法合理的是（）A．多酶片应整颗服用，防止唾液淀粉酶对多酶片水解B．胃蛋白酶在肠道中把蛋白质水解成多肽C．胆固醇是动物细胞膜的重要成分之一D．人体小肠黏膜可通过主动运输的方式吸收胰蛋白酶8．（10分）下列有关人类遗传病及其预防的叙述，错误的是（）A．人类遗传病是指由于遗传物质发生改变而引起的人类疾病B．多基因遗传病在群体中的发病率较高C．镰刀型细胞贫血症可利用显微镜进行检测D．含有致病基因的个体一定患病二、非选择题9．（10分）有资料表明胃癌细胞中有胃泌素相关基因的表达，而且外源性胃泌素对胃癌细胞有明显促进生长的作用。某科研人员为验证外源性胃泌素的上述作用，以及进一步研究丙谷胺对其作用的影响，进行了以下实验研究。请完善实验思路，并根据实验结果进行分析。（要求与说明：用细胞流式测定仪测定细胞周期分布；实验结果测定的具体操作不作要求；培养过程中培养液变化忽略不计；实验条件适宜）（1）完善实验思路：①将X型胃癌细胞培养3天后制备细胞悬液备用。用细胞培养液配制适宜浓度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。②取适量等量细胞悬液加入4组培养瓶中待继续培养，每组若干，各组处理如下。甲组：_______；乙组：51μL丙谷胺溶液+51uL细胞培养液；丙组：_______；丁组：111µL细胞培养液。③将上述样品在适宜条件下进行培养。48h后取部分样品测定________，并记录。④_______，并记录。⑤对实验数据进行统计分析，结果如下。表：胃泌素和丙谷胺对X型胃癌细胞增殖及细胞周期的影响组别72h，571nm48h，各时期细胞百分比（%）OD值G1SG2+M甲1．767±1．132．613．94．9乙1．27±1．1971．119．157．85丙1．585±1．1228．619．1111．31丁1．561±1．12671．119．1111．11（注：OD值大小可体现细胞增殖情况；丁组细胞的细胞周期T=9h。）（2）实验分析与讨论：①用OD值作为检测细胞增殖指标的依据是_______。甲组与丁组数据比较，说明甲组的处理最可能是促进了S期细胞的________，从而促进肿瘤细胞增殖。乙、丁组数据几乎没有差异，但甲、丙组数据差异明显，可见丙谷胺具有________作用。②据表中数据，在答题卷相应坐标系中画出丁组细胞中核DNA含量的周期性变化曲线，并将坐标系补充完整________________。10．（14分）下图为红绿色盲、抗维生素D佝偻病的遗传家系图（不考虑基因突变与四分体中非姐妹染色单体间的交叉互换）。已知红绿色盲是伴X染色体隐性遗传病（设基因为A、a），抗维生素D佝偻病是伴X染色体显性遗传病（设基因为B、b），请据图回答下列问题：（1）Ⅰ-1与Ⅰ-4的基因型分别为______________________________。（2）Ⅲ-2与一个只患红绿色盲男性婚配，则他们生一两病都不患的孩子的概率为___，他们所生的男孩中，患抗维生素D佝偻病的概率为_____。（3）经检查发现，Ⅲ-1不携带任何致病基因，但却患有遗传病，请简要说明两种可能原因：_______________、__________________。（4）计算人群中的红绿色盲的发病率时，所调查的群体应_______，以保证实验数据和结论的准确性。11．（14分）突尼斯软籽石榴是一种热门水果，深受大家喜爱，但其抗寒能力差，这成为限制该种石榴栽培的重要因素。科学家们利用基因工程对其进行定向改造，以得到抗寒性强的优良品种。下图表示构建基因表达载体的方法，图中标注的是限制酶的酶切位点，请回答下列问题：（1）在切割目的基因时选择的两种限制酶最好为____________________，选择两种限制酶的优势是可避免________________。（2）可通过________技术对获得的抗寒基因进行体外扩增，该过程使DNA解旋的方法与细胞内复制时的差异是________________，体外扩增时使用的酶具有的显著特点是__________________。（3）将重组质粒导入经________（过程）培养成的软籽石榴的愈伤组织中常用________法。12．为研究西瓜果肉颜色的遗传规律，研究人员以白瓤西瓜自交系为母本(P1)、红瓤西瓜自交系为父本(P2)开展如下杂交实验。自交系是由某个优良亲本连续自交多代，经过选择而产生的纯合后代群体。西瓜的花为单性花，雌雄同株。请回答：（1）与豌豆杂交实验相比，西瓜杂交实验不需要进行的操作是_____。（2）这对性状不可能只受一对等位基因控制，依据是___。（3）若西瓜果肉颜色受两对等位基因A、a和B、b控制，则：①P1的基因型为___。基因A(a)与B(b)位于___，且两对等位基因对果肉颜色的影响可能表现为下列中的_____效应。②回交二后代与回交一后代相同的基因型是__，该基因型个体在回交二后代的白瓤瓜中占____。③为验证第①题的假设，研究人员选择亲本杂交的F1个体之间随机传粉，若后代表现型及比例为_____，则支持假设。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、D【解析】

1、紫色洋葱的叶片分两种，一种是管状叶，绿色，这种叶片可用于提取和分离叶绿体中的色素。紫色洋葱的另一种叶片是鳞片叶，其内外表皮都由一层细胞构成，适于显微镜观察。其中外表皮为紫色，适于观察质壁分离复原；洋葱鳞片叶的内表皮色浅，适于观察DNA、RNA在细胞中的分布状况。观察有丝分裂的最佳材料是根尖，一是色浅，无其他色素干扰；二是此处细胞处于分裂周期中，能找到进行分裂的细胞。2、观察DNA和RNA在细胞中的分布实验的原理是甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，其中甲基绿能将DNA染成绿色，吡罗红能将RNA染成红色。利用甲基绿和吡罗红混合染色剂对细胞进行染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。【详解】A、甲基绿能将DNA染成绿色，吡罗红能将RNA染成红色，以鳞片叶内表皮为材料，盐酸处理后经甲基绿和吡罗红混合染色剂染色，可观察DNA和RNA的分布，而健那绿的作用是将活细胞内的线粒体染成蓝绿色，A错误；B、斐林试剂是检测还原性糖的试剂，而蔗糖是非还原性糖，B错误；C、鳞片叶外表皮为紫色，含有大液泡，故可作为质壁分离的实验材料，用1.3

g/mL蔗糖溶液处理可观察细胞的质壁分离，但是要观察其质壁分离复原，需要滴加清水，C错误；D、低温诱导只能作用于有丝分裂前期的细胞，抑制细胞中的纺锤体的形成，低温处理时，分生区少数细胞处于有丝分裂前期，因此显微镜下可观察到分生区只有少数细胞染色体数目加倍，D正确。故选D。本题考查观察DNA和RNA在细胞中的分布实验、低温诱导染色体数目加倍、观察细胞有丝分裂、观察质壁分离及复原，，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的材料是否合适、实验采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。2、D【解析】

影响植物光合作用的环境因素主要有光照强度、温度和二氧化碳浓度等。据图分析：总体湿润环境中的净光合作速率大于干旱环境中的净光合作速率。【详解】A、湿润状态下，增加CO2浓度大豆净光合速率增大，说明CO2浓度为主要限制因子，A正确；B、干旱状态下，净光合速率有一定值，说明有光合产物的积累，气孔并没有全部关闭，B正确；C、无论在干旱还是湿润条件下，增加CO2浓度，净光合速率都增大，说明大气中的CO2浓度没有达到开花期大豆的CO2饱和点，C正确；D、CO2浓度升高后一段时间内，消耗的[H]、ATP增多，剩余量下降，类囊体薄膜上的[H]、ATP含量下降，D错误。故选D。3、D【解析】

细胞间信息交流方式一般分为三种：细胞间直接接触（如精卵结合）、化学物质的传递（如激素的调节）和高等植物细胞的胞间连丝。人体中枢神经系统各部分的作用：①大脑皮层：调节机体活动的最高级中枢；②小脑：维持身体平衡的中枢；③下丘脑：调节体温、水分和血糖平衡等；④脑干：维持呼吸等；⑤脊髓：调节躯体运动的低级中枢。人体的免疫系统的功能主要有防卫、监控和清除等。防卫是指机体抵抗病原微生物感染的能力。监控和清除是指机体清除体内衰老、死亡或损伤的自身癌变细胞的能力。【详解】A、热刺激会促使免疫细胞中的热休克蛋白90表达并转移到细胞膜上，该蛋白质与alpha4整合素结合后会加速免疫细胞“运动”到感染部位发挥作用。热休克蛋白90与alpha4整合素结合并使免疫细胞做出应答，体现了细胞膜的信息交流功能，A正确。B、下丘脑调节体温、水分和血糖平衡等，因此退热药可能是作用于下丘脑体温调节中枢，从而发挥作用，B正确。C、由题干信息可知，在病人身体条件许可的情况下，可以让病人体温维持在1.5℃以上一段时间，然后再吃退烧，C正确。D、免疫系统的监控和清除是指机体清除体内衰老、死亡或损伤的自身癌变细胞的能力，D错误。本题考查免疫系统功能的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，分析题干提炼有效信息是解题关键。4、C【解析】

肺炎双球菌有光滑型（S型）和粗糙型（R型）两种类型。其中S型细菌外面有由多糖类的荚膜，有致病性，其菌落是光滑的；R型细菌外面没有荚膜，无致病性，其菌落是粗糙的。在众多的肺炎双球菌菌株中，光滑型菌株（S型菌）是唯一能够引起小鼠患败血症且能引起人类患肺炎的类型。当细菌进入人或动物体后，由于自身免疫的存在，都会被吞噬细胞吞噬消化、消灭。但是由于S型细菌有荚膜，当被吞噬细胞吞噬后，因为有荚膜的保护，就能抵抗吞噬细胞的吞噬和消化，迅速增殖、扩散，引起机体发生疾病。COVID-19是病毒，要依赖于宿主细胞才能存活，将遗传物质注入宿主细胞后，在宿主细胞内大量增殖，最后将宿主细胞裂解死亡，寻找新的寄主。【详解】A、COVID-19是病毒，要依赖于宿主细胞才能存活，肺炎双球菌是细菌，能独立存活，且其荚膜能抵抗吞噬细胞的吞噬作用，使其在人体内大量繁殖，因此它们的侵染过程不同，A错误；B、R型肺炎双球菌无致病力，不会使人患肺炎，B错误；C、单链RNA不稳定，易发生变异，C正确；D、COVID-19的成分是RNA和蛋白质，疯牛病病毒的成分为蛋白质，D错误。故选C。5、D【解析】

DNA分子杂交的基础是，具有互补碱基序列的DNA分子，可以通过碱基对之间形成氢键等，形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前，先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来，再通过加热或提高pH的方法，将双链DNA分子分离成为单链，这个过程称为变性。然后，将两种生物的DNA单链放在一起杂交，其中一种生物的DNA单链事先用同位素进行标记。如果两种生物DNA分子之间存在互补的部分，就能形成双链区。由于同位素被检出的灵敏度高，即使两种生物DNA分子之间形成百万分之一的双链区，也能够被检出。【详解】A、根据碱基互补配对原则，可通过DNA分子杂交技术对渐冻症进行诊断，A正确；B、基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病，以达到治疗目的，可通过替换控制合成毒蛋白基因来进行基因治疗，B正确；C、细胞分化的实质是基因的选择性表达，C正确；D、动物体细胞没有全能性，或者说由于目前的技术限制，全能性很难体现，D错误。故选D。6、D【解析】

两个神经元之间或神经元和肌肉细胞之间形成的结构，我们称为突触。突触由突触前膜，突触间隙和突触后膜形成。兴奋在神经元上以电信号的形式传导，在突触间转化为化学信号。突触前膜释放神经递质，与其对应的突触后膜上的特异性受体结合，使得下一个神经元兴奋或抑制。突触后膜上的“受体”与相应神经递质结合，引起下一个细胞产生兴奋或抑制，使突触后膜的电位发生变化，兴奋后突触后膜由外正内负变为外负内正，抑制后突触后膜仍旧为外负内正，但电位差可能进一步加大。【详解】A、正常情况下，机体能通过调节维持心脏活动的稳态，A正确；B、物质甲阻断神经细胞膜上的Na+通道后，Na+内流受阻，B正确；C、物质甲能影响某些神经递质（兴奋性神经递质）的释放，从而影响神经元之间的兴奋传递，过量误食会导致心率减慢，C正确；D、肾上腺素不能为心肌细胞提供能量，D错误。故选D。7、C【解析】

“多酶片”的双层结构应是依据“药物先进入胃，然后才进入小肠”来设计的，外层含有胃蛋白酶，内层含有胰蛋白酶、胰淀粉酶等，使其中各种酶能缓慢地释放出来发挥作用。据此分析解答。【详解】A.多酶片应整颗服用，防止胃酸对多酶片的破坏，A错误；B.胃蛋白酶在胃中把蛋白质水解成多肽，B错误；C.胆固醇是动物细胞膜的重要成分之一，C正确；D.胰蛋白酶属于大分子物质，不可通过主动运输的方式吸收，D错误。故选C。8、D【解析】

1.人类遗传病分为单基因遗传病、多基因遗传病和染色体异常遗传病：（1）单基因遗传病包括常染色体显性遗传病（如并指）、常染色体隐性遗传病（如白化病）、伴X染色体隐性遗传病（如血友病、色盲）、伴X染色体显性遗传病（如抗维生素D佝偻病）；（2）多基因遗传病是由多对等位基因异常引起的，如青少年型糖尿病；（3）染色体异常遗传病包括染色体结构异常遗传病（如猫叫综合征）和染色体数目异常遗传病（如21三体综合征）。2.多基因遗传病：（1）概念：由两对以上等位基因控制的人类疾病。（2）特点：①易受环境因素的影响；②在群体中发率较高；③常表现为家族聚集。（3）实例：腭裂、无脑儿、青少年型糖尿病、原发性高血压等。【详解】A、人类遗传病是指由于遗传物质发生改变而引起的人类疾病，A正确；B、多基因遗传病易受环境因素的影响，在群体中的发病率较高，B正确；C、镰刀型细胞贫血症是基因突变引起的红细胞形态发生变化的疾病，基因突变虽然显微镜下不能观察，但是显微镜可以观察红细胞的形态，因此镰刀型细胞贫血症可以用显微镜进行检测，C正确；D、含有致病基因的小孩也可能是表现正常的携带者，即含有致病基因的个体不一定患病，D错误。故选D。二、非选择题9、51uL置泌素+51uL细胞培养液51uL胃泌素+51uL丙谷胺溶液细胞周期分布/各时期细胞百分比72h后取剩余样品（在571nm波长）测定OD值细胞密度与（细胞悬液的）OD值呈正比/线性关系/OD值越大细胞数越多DNA复制对抗/抑制外源性胃泌素【解析】

题意分析，外源性胃泌素对胃癌细胞有明显促进生长的作用。本实验的目的是验证外源性胃泌素的上述作用，并且还要进一步研究丙谷胺对胃泌素促进生长作用的的影响，根据实验目的并结合题目中的信息可知实验中的自变量为胃泌素、丙谷胺以及胃泌素和丙谷胺三种不同因素的处理，因变量为OD值以及细胞周期中各期的变化，实验过程中无关变量要求相同且适宜。【详解】（1）根据分析可知，补充实验如下：①实验试剂的准备：将X型胃癌细胞培养3天后制备细胞悬液备用。用细胞培养液配制适宜浓度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。②取适量等量细胞悬液加入4组培养瓶中待继续培养，每组若干，分组、编号，然后给与不同处理如下：甲组中加入51uL胃泌素溶液+51uL细胞培养液；乙组中加入51μL丙谷胺溶液+51uL细胞培养液；丙组中加入51uL胃泌素溶液+51uL丙谷胺溶液；丁组中加入111µL细胞培养液。③为保证无关变量的一致性，需要将上述样品在适宜条件下进行培养。根据题目中的实验结果可知，48h后取部分样品测定细胞周期分布/各时期细胞百分比，并记录。④结合实验表格可知，72h后取剩余样品（在571nm波长）测定OD值，并记录。（2）实验分析如下①由于细胞密度与（细胞悬液的）OD值呈正比，故可用OD值的大小表示细胞数目的多少。甲组与丁组数据比较，处于S期的细胞的占比高于丁组，说明甲组胃泌素的处理最可能是促进了S期细胞的DNA复制，进而加快了后续的分裂过程，从而促进肿瘤细胞增殖。比较发现乙、丁组数据几乎没有差异，但甲、丙组数据差异明显，由此可推测丙谷胺具有对抗/抑制外源性胃泌素作用，从而对抗了胃泌素促进癌细胞生长的作用。②绘图过程中需要根据表中的数据来绘制，故需要计算出细胞周期中各时期的长短，题意显示丁组细胞细胞进行有丝分裂，细胞周期为9小时，则G1经历时间为9×71%=14小时，此期进行DNA复制前的准备阶段，进行有关RNA和蛋白质合成；S期经历时间为9×9%=4小时，此期进行DNA分子的复制，故此期后DNA数目加倍；G2+M经历时间为9×11%=2小时，此期后形成新的子细胞，其中的DNA数目与原来亲代细胞的DNA数目相同，据此绘图如下：熟知有丝分裂过程中染色体行为变化以及相关的物质变化是解答本题的关键！实验设计能力是本题考查的重要能力，对实验设计的基本原则以及设计的基本思路的掌握是学生的必备能力。10、XAbY、XAbXaB1/21/2Ⅲ-1的染色体数目异常，如21三体综合征Ⅲ-1的染色体结构异常，如猫叫综合征（其它合理答案也可）足够大【解析】

伴性遗传指位于性染色体上的基因所控制的性状表现出与性别相联系的遗传方式。自然界中由性染色体决定生物性别的类型，主要有XY型和ZW型，XY型在雌性的体细胞内，有两个同型的性染色体，在雄性的体细胞内，有两个异型的性染色体。受精作用的实质是雌雄配子的结合，因此可以用配子法来解答相应的问题。【详解】（1）由于Ⅰ-1的表现型正常，故其基因型为XAbY。再根据Ⅰ-4与Ⅱ-4、Ⅱ-5的表现型，可分析出Ⅰ-4的基因型为XAbXaB（答XABXab不给分）。（2）Ⅰ-4的基因型为XAbXaB，根据Ⅱ-3与Ⅱ-4及Ⅲ-2的表现型可推知Ⅲ-2的基因型为XABXAb，她与一个只患红绿色盲男性（XabY）婚配，他们的后代的基因型及比例为：1XABXab、1XAbXab、1XABY、1XAbY。因此，他们生一两病都不患的孩子的概率为1/2，他们所生的男孩中，患抗维生素D佝偻病的概率为1/2。（3）Ⅲ-1不携带任何致病基因，但却患有遗传病，此问题可从染色体异常角度去分析。（4）计算人群中的红绿色盲的发病率时，所调查的群体应足够大，以保证实验数据和结论的准确性。本题考查的是两对基因在X染色体上的连锁遗传，难度较大，在计算时应注意基因在染色体上的位置及标注，运用孟德尔的分离定律解答该类问题。11、SmaI和PstI质粒自身成环和质粒与目的基因的反向连接PCR体外扩增目的基因利用加热至90~95℃的高温使DNA解旋，细胞内复制目的基因使用解旋酶使DNA解旋耐高温（或具有热稳定性）脱分化农杆菌转化【解析】

分析题图可知：HindIII的切割位点会破坏质粒的标记基因，AluI会破坏目的基因，故不能用上述两种酶切割。【详解】（1）根据图中各种限制酶的切割位点，既可以获得目的基因又不能破坏质粒上的标记基因，故选用SmaI和PstI；选择两种酶的优势是可避免含有目的基因的外源DNA自身环化