浙江省91高中联盟2026届高三下学期3月摸底生物试题含解析

浙江省91高中联盟2026届高三下学期3月摸底生物试题注意事项：1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。2．选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0．5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。3．请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。4．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下图是细胞膜的亚显微结构模式图，①~③表示构成细胞膜的结构，下列叙述错误的是（）A．组成结构③的物质中含有甘油基团B．结构②不可能起着生物催化剂的作用C．结构③也具有选择透性D．在效应细胞毒性T细胞中，结构①可能会识别抗原-MHC复合体2．下列关于下丘脑与垂体的叙述，正确的是A．垂体可通过神经细胞支配其他内分泌腺B．垂体分泌的激素通过管道运输到体液中C．甲状腺激素能作用于下丘脑但不能作用于垂体D．神经系统和内分泌系统的功能可通过下丘脑相联系3．下列关于人类遗传病的叙述，正确的是（）A．遗传病患者都携带致病基因，且性状与性别相关联时一定是伴性遗传B．X连锁隐性遗传病的特点是致病基因的频率男性明显高于女性C．基因突变引起的遗传病一定不能利用光学显微镜进行检测D．遗传病是指生殖细胞或受精卵里的遗传物质发生改变而引发的疾病4．某实验小组探究一定浓度的萘乙酸（NAA）溶液和细胞分裂素（KT）溶液对棉花主根长度及侧根数的影响，所得结果如图所示。下列相关叙述或推理合理的是（）A．由甲组数据可知，没有激素的调节棉花根也能生长B．乙组与甲组和丙组可分别构成对照实验和对比实验C．NAA和KT对棉花主根的顶端优势的作用有协同作用D．若去除丁组棉花的主根，则棉花的侧根数不受影响5．下列有关实验或研究的叙述，不正确的是（）A．生物组织中脂肪的检测和观察过程中，可以不需要制备临时装片B．低温诱导植物染色体数目的变化实验中，固定细胞形态后用体积分数为95%酒精冲洗2次C．在探究培养液中酵母菌种群的数量变化实验中，应设置空白对照排除无关变量的干扰D．探究土壤微生物的分解作用实验中，不做处理保持自然状态的土壤为对照组，60℃恒温箱灭菌1h的土壤为实验组6．CCR5是HIV入侵人体T细胞的主要辅助受体之一。有科学家为了使婴儿一出生就具有抵抗艾滋病的能力，通过基因编辑破坏了受精卵中的CCR5基因，该做法引起了民众普遍的担忧。下列各项不属于担忧依据的是（）A．CCR5基因可能还参与了其他生理过程的调控B．基因编辑技术有可能因编辑对象错误（脱靶）造成不可预知的后果C．被编辑个体受其他疾病感染的风险可能会提高D．该技术虽然符合人类伦理道德，但可能存在潜在的安全风险二、综合题：本大题共4小题7．（9分）生物体内不同的信息分子必须与相应的受体（化学本质多为糖蛋白）特异性结合才能发挥作用。下列图示中，图甲所示为人体“重症肌无力”成因：由于机体能产生一种与乙酰胆碱受体特异性结合的抗体，但该抗体不能发挥乙酰胆碱的作用；图乙所示为“Graves氏病”成因：由于机体能产生一种针对促甲状腺激素受体的抗体，该种抗体能发挥与促甲状腺激素相同的生理作用，但甲状腺激素不会影响该种抗体的分泌。请分析回答下列问题：（1）正常人体内，兴奋到达神经一肌肉突触时，储存在__________中的乙酰胆碱就被释放到突触间隙中，与受体结合后使突触后膜兴奋，肌肉收缩。（2）重症肌无力患者的乙酰胆碱受体与抗体结合后，导致__________和__________，使乙酰胆碱受体数量和功能部分丧失，表现为重症肌无力。（3）根据乙图分析：与正常人相比，Graves氏病患者Y激素的分泌量__________，X激素的分泌量__________。由此判断，Graves氏病患者的体温往往比正常人__________，但该病患者自身的产热量__________（填“大于”或“等于”或“小于”）散热量。（4）在“重症肌无力”与“Graves氏病”患者体内，促甲状腺激素受体和乙酰胆碱受体属于________，因而会引起特异性免疫反应。（5）由上述分析可知，人体的内环境稳态的调节方式有__________。8．（10分）海藻糖是由两个葡萄糖（G）结合而成的非还原性二糖，其结构稳定、耐高温，能帮助酵母菌克服极端环境。在无压力状态下，葡萄糖的代谢产物G6P和UDPG可抑制海藻糖合成酶基因（TPS复合体）的表达，胞内海藻糖水解酶（Nthl）水解已经存在的海藻糖，分解膜外海藻糖的水解酶（Ath1）处于小液泡中（如图所示）。在有压力状态下，TPS复合体微话，Nth1失活，转运蛋白（Agt1）将细胞内海藻糖运至膜外，结合在磷脂上形成隔离保护，酵母菌进入休眠状态以度过恶劣的环境。回答下列相关问题：无压力状态下酵母海藻糖代谢图（1）与大肠杆菌细胞相比，酵母菌细胞最主要的结构特征是________________。在无压力状态下下，细胞内海藻糖含量低的原因有_____________________________________________。（2）在有压力状态下，TPS复合体激活，胞内产生大量海藻糖，此时磨碎酵母菌制成溶液，加入斐林试剂，在水浴加热条件下，_________________（填“出现”或“不出现”）砖红色沉淀，原因是______________________________。（3）发面时所用的干酵母因海藻糖的保护而表现为代谢_______________，对其活化的过程中，酵母菌内的变化有_______________、_______________，由于海藻糖被分解为葡萄糖，葡萄糖的代谢产物G6P和UDPG抑制TPS复合体基因的活性，在这种调节机制下，酵母菌迅速活化，从而适应环境。9．（10分）研究小组探究不同浓度的IAA、乙烯利及二者的混合溶液对大豆下胚轴不定根形成的影响，结果如下。组别A组B组C组A0A1A2A3B0B1B2B3C0C1C2C3IAA010501000105010001050100乙烯利00001010101050505050不定根平均数量（条）12213228101928357161936请回答：（1）对大豆的下胚轴进行激素处理时常用浸泡法，这种处理方法对激素浓度和处理时间的要求是____________。（2）A组实验中IAA对大豆下胚轴生根的作用____________（表现/未表现）出两重性，判断的理由是__________。（3）本实验表明不同浓度的IAA和乙烯利混合溶液共同作用时乙烯对植物不定根形成过程中有促进和抑制两种相反的调控作用。①支持乙烯对不定根形成有抑制作用的证据是___________；②支持乙烯对不定根形成有促进作用的证据是_____________。（4）进一步研究发现生长素能调控不定根发育的相关基因的表达，说明激素在植物体内起作用的方式是_______________________。10．（10分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。11．（15分）下图是研究人员为净化水质在湖边建立的人工湿地，回答下列问题。（1）某人将未经检疫的外来鱼类和水草大量引进该湖泊生态系统后，导致生物多样性下降。从种间关系的角度分析，引起这种不良后果的原因是本地原有物种和外来物种之间可能存在着_____________、_____________、_____________的关系。一般来说，生态系统的物种组成越丰富，营养结构越复杂，抵抗力稳定性就越_____________。为了提高生态系统的稳定性，对于利用强度大的生态系统应_____________，以保证生态系统内部结构和功能的协调。（2）该人工湿地呈现斑块状镶嵌，体现了群落的_____________结构。（3）如图对湖水的净化过程体现了人类的活动能够使群落的演替按照_____________进行。（4）人工湿地能进化水质，调节气候，这体现了生物多样性的_____________价值，但要控制污染湖水的流入量，原因是__________________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

据图分析，图示为细胞膜的亚显微结构模式图，其中结构①表示糖蛋白，位于细胞膜的外侧；结构②表示蛋白质，其种类和数量与细胞膜功能的复杂程度有关；结构③表示磷脂双分子层，是细胞膜的基本骨架。【详解】A、结构③是磷脂双分子层，由两层磷脂分子组成，而磷脂分子含有甘油基团，A正确；B、结构②是膜蛋白，可能是酶，因此可能起着生物催化剂的作用，B错误；C、结构③是磷脂双分子层，也具有选择透性，C正确；D、在效应细胞毒性T细胞中，结构①糖蛋白可能会识别抗原-MHC复合体，D正确。故选B。解答本题的关键是掌握细胞膜的结构与功能，准确识别图中各个数字代表的结构的名称，回忆各个结构的功能，明确细胞膜上蛋白质的种类和数量越多，细胞膜的功能越复杂。2、D【解析】

下丘脑的部分细胞称为神经分泌细胞，既能传导神经冲动，又有分泌激素的功能。下丘脑在机体稳态中有感受、传导、分泌、调节四个方面的主要作用。下丘脑分泌多种促激素释放激素作用于垂体，通过垂体调控其他内分泌腺的活动。【详解】垂体通过释放促激素调节其他内分泌腺，A选项错误；内分泌腺没有导管，是通过胞吐的方式将激素分泌到体液中，B选项错误；甲状腺激素的对全身几乎所有细胞起作用，甲状腺激素能作用于下丘脑也能作用于垂体，C选项错误；下丘脑的部分细胞既能传导神经冲动，又有分泌激素的功能，故神经系统和内分泌系统的功能可通过下丘脑相联系，D选项正确。3、D【解析】

由于生殖细胞或受精卵里的遗传物质发生了改变，从而使发育成的个体患疾病，这类疾病都称为遗传性疾病，简称遗传病。根据目前人们对遗传物质的认识，可以将遗传病分为单基因遗传病，多基因遗传病和染色体病三类。单基因遗传病是由染色体上单个基因的异常所引起的疾病，多基因遗传病是指涉及许多个基因和许多环境因素的疾病，染色体异常遗传病是指由于染色体的数目形态或结构异常引起的疾病。【详解】A、染色体异常遗传病患者由于染色体异常而患病，不携带致病基因，性状与性别相关联时不一定是伴性遗传，如秃顶（从性遗传），对于杂合子（Bb），是男性表现为秃顶，女性正常，B、b基因位于常染色体上，造成这种差异的原因是由于两性体内性激素的不同，A错误；B、X连锁隐性遗传病的特点是人群中男性患者远远多于女性患者，致病基因的频率男性与女性相等，B错误；C、基因突变引起的遗传病如镰刀型贫血症，可以利用光学显微镜观察红细胞的形态，正常人的红细胞呈圆盘形，贫血症患者的红细胞呈镰刀型，C错误；D、遗传病是指生殖细胞或受精卵里的遗传物质发生改变而引发的疾病，D正确。故选D。4、B【解析】

分析柱形图：该实验的自变量是施加试剂的种类，因变量是主根长度和侧根数，甲乙组对比来看，NAA能抑制主根生长，甲丙组对比来看，KT能促进主根生长；乙、丁组对比可知，一定浓度的KT对NAA促进侧根生长的效应具有增强作用。【详解】A、棉花根内有内源激素，另外没有空白对照组的原始数据，所以不能得出没有激素的调节棉花根也能生长的结论，A错误；B、甲组是对照组，乙组和丙组是实验组，因此乙组与甲组和丙组可分别枃成对照实验和对比实验，B正确；C、NAA能一定程度地抑制根的顶端优势，而KT能促进根的顶端优势，C错误；D、若去除丁组棉花的主根，则棉花主根的顶端优势会解除，因此侧根数可能会更多，D错误。故选B。5、C【解析】

抽样检测法的操作：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入。多余培养液用滤纸吸去。稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。【详解】A、生物组织中脂肪的检测和观察过程中，可以不需要制备临时装片，而直接制成组织样液来进行观察，A正确；B、低温诱导植物染色体数目的变化实验中，固定细胞形态后用体积分数为95%酒精冲洗2次，洗去卡诺氏固定液，防止对后续实验步骤的干扰，B正确；C、在探究培养液中酵母菌种群的数量变化实验中，不需要设置空白对照，C错误；D、探究土壤微生物的分解作用实验中，自变量是土壤微生物的有无，通常自然状态下的实验为对照实验，据此可知不做处理保持自然状态的土壤为对照组，60℃恒温箱灭菌1h的土壤为实验组，D正确。故选C。6、D【解析】

HIV通过识别靶细胞表面的受体进入靶细胞，故可以通过敲除CCR5避免HIV入侵。【详解】A、CCR5基因可能还参与了其他生理过程的调控，敲除CCR5基因后其他生理过程会受到影响，A错误；B、基因编辑技术有可能因编辑对象错误（脱靶）造成不可预知的后果，故会引发民众的担忧，B错误；C、被编辑个体受其他疾病感染的风险可能会提高，会引发民众的担忧，C错误；D、该技术不符合人类伦理道德，D正确。故选D。二、综合题：本大题共4小题7、突触小泡乙酰胆碱受体被胞吞并分解未胞吞的受体无法与乙酰胆碱结合减少增加高等于抗原神经调节、体液调节、免疫调节【解析】

要维持内环境的稳定，动物体就必须能及时感知内环境的变化，并及时做出反应加以调整，这些活动都依靠神经系统、内分泌系统和免疫系统的活动来完成。神经系统的基本形式是反射，反射的结构基础是反射弧。体液调节又称为内分泌调节，是内分泌系统分泌激素，通过体液的传送而发挥调节作用的一种调节方式。免疫是指身体对抗病原体引起的疾病的能力。免疫系统由免疫器官、免疫细胞以及免疫活性物质组成。【详解】（1）神经递质只存在于突触小体的突触小泡内，所以兴奋在神经元之间（即在突触处）的传递是单向的，只能是由突触前膜→突触间隙→突触后膜。（2）图乙显示，重症肌无力的原因是乙酰胆碱受体与抗体结合后，导致乙酰胆碱受体被胞吞并分解和未胞吞的受体无法与乙酰胆碱结合，使乙酰胆碱受体数量和功能部分丧失。（3）X激素是甲状腺激素，Y激素是促甲状腺激素。“Graves氏病”由于机体能产生一种针对促甲状腺激素受体的抗体，该种抗体能发挥与促甲状腺激素相同的生理作用，使X激素分泌量增加，但X激素的分泌量过量后，会抑制下丘脑和垂体分泌相应的激素，即Y激素分泌量较少。甲状腺激素可促进代谢活动，提高体温，由此判断，Graves氏病患者的体温往往比正常人高。人是恒温动物，在神经系统和内分泌系统等的共同调节下，人体的产热和散热过程保持动态平衡，即产热量等于散热量。（4）抗体与抗原发生特异性结合，发生特异性免疫反应，促甲状腺激素受体和乙酰胆碱受体属于抗原。（5）图乙显示，神经-肌肉突触是属于神经调节，图乙中X、Y激素属于激素调节。乙酰胆碱受体与抗体结合和促甲状腺激素受体的抗体与促甲状腺激素受体的结合属于免疫调节，故人体的内环境稳态的调节方式有神经调节、体液调节、免疫调节。本题考查神经调节、体液调节、免疫调节的相关知识，重点考查学生对图形信息的识别及处理分析的能力。8、具有成形的细胞核（具有核膜包被的细胞核）海藻糖合成酶基因的表达受抑制，海藻糖的合成受影响；Nthl水解胞内已存在的海藻糖出现酵母菌细胞内除了含有海藻糖，还有葡萄糖等还原糖缓慢Nthl活化分解胞内海藻糖Athl转运到膜外分解膜外海藻糖【解析】

题干信息“无压力状态下，葡萄糖的代谢产物G6P和UDPG可抑制海藻糖合成酶基因（TPS复合体）的表达，胞内海藻糖水解酶（Nthl）水解已经存在的海藻糖，分解膜外海藻糖的水解酶（Ath1）处于小液泡中（如图所示）。在有压力状态下，TPS复合体微话，Nth1失活，转运蛋白（Agt1）将细胞内海藻糖运至膜外，结合在磷脂上形成隔离保护，酵母菌进入休眠状态以度过恶劣的环境”进行解答。【详解】（1）大肠杆菌是原核生物，酵母菌细胞是真核细胞，二者主要的区别是酵母菌细胞具有成形的细胞核（具有核膜包被的细胞核）；根据题干信息“在无压力状态下，葡萄糖的代谢产物G6P和UDPG可抑制海藻糖合成酶基因（TPS复合体）的表达，胞内海藻糖水解酶（Nthl）水解已经存在时海藻糖”，所以细胞内海藻糖含量低的原因有海藻糖合成酶基因的表达受抑制，海藻糖的合成受影响；Nthl水解胞内已存在的海藻糖。（2）在有压力的条件下，胞内产生大量海藻糖，同时在细胞内还存在葡萄糖等还原糖，所以加入斐林试剂，在水浴加热条件下，会出现砖红色沉淀。（3）干酵母因海藻糖的保护而表现为代谢缓慢，在其活化过程中，实质是没有压力的条件下，Nthl活化分解胞内海藻糖，Athl转运到膜外分解膜外海藻糖，酵母菌迅速活化，从而适应环境。本题重点是抓住题干信息，分析出在有压力和无压力的情况下酵母菌的代谢活动。9、配制较低浓度的激素溶液，处理时间需几小时至一天未表现A1、A2、A3组的不定根均数量大于A0组，说明实验组的IAA对大豆下胚轴的生根都有促进作用，没有体现抑制作用B1、C1组的不定根平均数量小于A1组（或：B2、C2组的不定根平均数量小于A2组或：当IAA浓度为10或50时，随着乙烯利浓度的增加，不定根平均数量减少）B3、C3组的不定根平均数量大于A3组（或：当IAA浓度为100时，随着乙烯利浓度的增加，不定根平均数增加）为信息分子，调节植物的生长发育（或：给细胞传达一种调节代谢的信息）【解析】

激素调节与植物生命活动的关系：激素调节在植物的生长发育和对环境的适应过程中发挥着重要作用，但是，激素调节只是植物生命活动调节的一部分。植物的生长发育过程，在根本上是基因组在一定时间和空间上程序性表达的结果。光照、温度等环境因子的变化，会引起植物体内产生包括植物激素合成在内的多种变化，进而对基因组的表达进行调节。【详解】（1）用激素处理大豆下胚轴可以用沾蘸法或浸泡法，前者通常使用高浓度的激素处理很短的时间，如3~5s；后者需要的激素浓度低，通常是处理几小时至一天，本实验中用浸泡法处理，具体做法是配制较低浓度的激素溶液，对大豆的下胚轴处理几小时至一天。（2）A组实验中A1、A2、A3组的不定根数量均大于A0组，说明实验组的IAA对大豆下胚轴的生根都有促进作用，没有体现抑制作用，故此可知实验中IAA对大豆下胚轴生根的作用未表现出两重性。（3）①实验中B1、C1组的不定根平均数量小于A1组（或：B2、C2组的不定根平均数量小于A2组或：当IAA浓度为10或50时，随着乙烯利浓度的增加，不定根平均数量减少），由此实验结果可得出乙烯对不定根形成有抑制作用的结论；②根据实验结果中B3、C3组的不定根半均数量大于A3组，可以得出乙烯对不定根形成有促进作用的的结论。（4）进一步研究发现生长素能调控不定根发育的相关基因的表达，据此可知激素作为信息分子，传递了一种调节植物的生长发育的信息。运用单一变量原则对题目中的实验结果进行合理的分析、比较是正确解题的关键！10、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××