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文档简介
2025年合成生物学(合成生物材料与应用)试卷及答案一、单项选择题(共15题,每题2分,共30分)1.以下哪种微生物是合成生物材料领域最常用的异源宿主菌株?A.酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)B.枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)C.大肠杆菌(Escherichiacoli)D.谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)2.生物3D打印技术中,用于构建合成生物材料支架的“生物墨水”核心成分通常是?A.金属纳米颗粒B.重组蛋白或多糖水凝胶C.聚乳酸(PLA)塑料颗粒D.陶瓷粉末3.以下哪种合成生物材料的构建不依赖基因编辑技术?A.重组蜘蛛丝蛋白纤维B.微生物合成的聚羟基脂肪酸酯(PHA)C.酶催化合成的壳聚糖衍生物D.工程酵母生产的胶原蛋白4.合成生物材料设计中,“模块化设计”的核心目的是?A.降低材料生产成本B.实现功能单元的可替换与组合C.提高材料的机械强度D.缩短研发周期5.无细胞合成系统在合成生物材料中的主要优势是?A.无需维持细胞活性,反应条件灵活B.可直接利用复杂代谢网络C.产物分泌效率更高D.适合长期连续生产6.以下哪种材料属于“智能响应型合成生物材料”?A.大肠杆菌合成的聚3羟基丁酸酯(PHB)B.温度敏感型重组弹性蛋白水凝胶C.工程蓝细菌生产的纤维素D.酵母表达的人源化胶原蛋白7.合成生物材料的“生物相容性”主要指?A.材料在自然环境中的降解速率B.材料与生物体组织、细胞的相互适应能力C.材料对微生物的抑制效果D.材料与其他人工材料的结合强度8.构建微生物合成平台时,“代谢途径正交化”的主要策略是?A.敲除宿主原有代谢路径B.引入异源酶并优化其与宿主的兼容性C.提高宿主的生长速率D.增加目标产物的分泌效率9.以下哪种技术可用于定量分析合成生物材料的力学性能?A.扫描电子显微镜(SEM)B.动态力学分析(DMA)C.荧光定量PCR(qPCR)D.高效液相色谱(HPLC)10.合成生物材料规模化生产中,“碳源利用效率”的关键影响因素是?A.发酵罐的搅拌速度B.目标产物的分子量C.代谢路径的热力学效率D.宿主菌株的抗生素抗性11.以下哪种蛋白质是合成生物材料中常用的“自组装模块”?A.血红蛋白B.丝心蛋白(Fibroin)C.免疫球蛋白D.肌动蛋白12.用于骨组织工程的合成生物材料需具备的关键特性不包括?A.与骨基质的矿化相容性B.可控的降解速率C.高导电性D.适宜的孔隙率13.合成生物材料“功能验证”的核心步骤是?A.基因测序确认构建成功B.体外细胞实验与体内动物实验C.发酵条件优化D.材料成分的质谱分析14.以下哪种方法可用于提高微生物合成PHA的分子量?A.缩短发酵时间B.增加碳源中脂肪酸的比例C.敲除PHA解聚酶基因D.降低发酵温度15.合成生物材料在包装领域的应用优势不包括?A.可完全生物降解B.原料来源可再生(如葡萄糖)C.生产成本显著低于石油基塑料D.可通过基因编辑赋予抗菌功能二、多项选择题(共5题,每题3分,共15分,错选、漏选均不得分)1.合成生物材料的设计原则包括?A.功能导向性(TargetedFunctionality)B.模块化(Modularity)C.可预测性(Predictability)D.生物安全性(Biosafety)2.以下哪些技术可用于表征合成生物材料的微观结构?A.X射线衍射(XRD)B.原子力显微镜(AFM)C.核磁共振(NMR)D.流式细胞术(FCM)3.微生物合成多糖类生物材料(如透明质酸)的关键调控节点包括?A.前体物质(如UDP葡萄糖)的供应B.糖基转移酶的表达水平C.宿主的渗透压耐受能力D.产物的分泌效率4.合成生物材料在医疗领域的应用案例包括?A.工程细菌生产的可降解手术缝合线B.重组胶原蛋白填充剂用于皮肤修复C.微生物合成的抗菌肽涂层医疗器械D.酵母表达的病毒样颗粒(VLPs)疫苗载体5.制约合成生物材料大规模产业化的主要瓶颈有?A.目标产物的分离纯化成本高B.宿主菌株的遗传稳定性不足C.发酵过程的工艺放大难度大D.公众对基因编辑生物的接受度低三、填空题(共10空,每空2分,共20分)1.合成生物材料的核心构建策略包括异源合成、元件优化和__________。2.CRISPRCas9系统在合成生物材料构建中的主要作用是__________。3.聚羟基脂肪酸酯(PHA)的重复单元结构为__________(用化学结构式或名称表示)。4.蛋白质基生物材料的自组装驱动力主要包括氢键、疏水相互作用和__________。5.生物3D打印中,“交联”步骤的目的是__________。6.无细胞合成系统中,能量供应通常通过添加__________(如ATP或磷酸烯醇式丙酮酸)实现。7.合成生物材料的“降解可控性”可通过调控材料的__________(如结晶度、分子量)或引入敏感型结构(如二硫键)实现。8.工程菌株代谢路径优化的常用方法包括酶活性调节、代谢流重定向和__________。9.评价合成生物材料“环境友好性”的关键指标是__________(如降解产物的毒性、碳足迹)。10.蜘蛛丝蛋白的高强度特性主要源于其分子中__________(如β折叠片层)的有序排列。四、简答题(共4题,第12题每题8分,第34题每题9分,共34分)1.(封闭型)简述基因回路(GeneticCircuit)在合成生物材料功能调控中的应用原理。2.(封闭型)比较微生物发酵法与无细胞合成法生产合成生物材料的优缺点(需各列出3点)。3.(开放型)分析合成生物材料在替代传统石油基塑料时面临的技术挑战(至少5点)。4.(开放型)以“可降解血管支架”为例,说明合成生物材料的设计需考虑哪些关键性能指标(至少6点)。五、应用题(共2题,第1题12分,第2题19分,共31分)1.(计算类)某工程菌株利用葡萄糖(C₆H₁₂O₆)为碳源合成聚乳酸(PLA,(C₃H₄O₂)ₙ),其代谢路径为:葡萄糖→2丙酮酸→2乳酸→PLA(假设乳酸聚合无碳损失)。(1)计算每摩尔葡萄糖理论上可合成的PLA质量(PLA的摩尔质量为72ng/mol,n为聚合度);(2)若实际发酵中葡萄糖到乳酸的转化率为85%,乳酸到PLA的聚合效率为90%,计算1吨葡萄糖的实际PLA产量(保留2位小数)。2.(综合分析类)某团队计划开发一种基于工程大肠杆菌的合成生物材料,目标是替代传统聚氨酯用于环保型鞋底生产。需完成以下任务:(1)设计该材料的核心功能模块(需包含生物组分与功能描述);(2)提出3种提高大肠杆菌合成目标材料产量的代谢工程策略;(3)列出该材料需验证的关键性能指标(至少5项);(4)分析规模化生产时可能遇到的工艺挑战(至少3项)。答案及解析一、单项选择题1.C(大肠杆菌是最常用的异源宿主,遗传背景清晰,操作简便)2.B(生物墨水需支持细胞存活或生物大分子功能,通常为重组蛋白或多糖水凝胶)3.C(酶催化合成无需修改宿主基因,其他选项均涉及基因编辑)4.B(模块化设计便于功能单元的替换与组合,是合成生物学的核心原则)5.A(无细胞系统无需维持细胞活性,反应条件更灵活)6.B(温度敏感型材料可响应环境变化,属于智能材料)7.B(生物相容性指材料与生物体的相互适应能力)8.B(代谢途径正交化通过引入异源酶并优化其与宿主的兼容性实现)9.B(动态力学分析(DMA)用于定量材料的力学性能)10.C(代谢路径的热力学效率直接影响碳源利用效率)11.B(丝心蛋白是典型的自组装模块,可形成有序纤维)12.C(骨组织工程材料无需高导电性)13.B(功能验证需通过细胞和动物实验确认实际效果)14.C(敲除PHA解聚酶可减少降解,提高分子量)15.C(当前合成生物材料成本通常高于石油基塑料)二、多项选择题1.ABCD(均为合成生物材料的核心设计原则)2.ABC(流式细胞术用于细胞分析,不用于材料微观结构表征)3.ABCD(前体供应、酶活性、渗透压耐受、分泌效率均影响多糖合成)4.ABCD(均为医疗领域的实际应用案例)5.ABCD(均为产业化的主要瓶颈)三、填空题1.底盘细胞改造(或“宿主优化”)2.精确编辑宿主基因组(或“基因敲除/插入”)3.R3羟基脂肪酸(或结构式:CH₃CH(OH)CH₂CO)4.范德华力(或“离子键”)5.固定材料结构,提高机械强度6.高能磷酸化合物7.化学组成(或“分子结构”)8.辅因子平衡(或“代谢节点调控”)9.生物降解率(或“生命周期评估”)10.二级结构(或“β折叠结构”)四、简答题1.基因回路通过将调控元件(如启动子、转录因子)与目标基因连接,构建可响应环境信号(如温度、小分子)的遗传调控网络。例如,设计一个温度敏感型回路:当温度升高时,转录因子激活,启动目标材料合成基因的表达;温度降低时,回路关闭,停止合成。通过这种方式,可实现材料合成的时空可控性,或根据需求调节材料的组成与性能(如分子量、交联度)。2.微生物发酵法优点:①利用完整代谢网络,可合成复杂分子;②可通过发酵工艺优化提高产量;③适合长期连续生产。缺点:①需维持细胞活性,反应条件受限;②副产物多,纯化难度大;③基因稳定性可能影响批次一致性。无细胞合成法优点:①无需维持细胞活性,反应条件灵活(如高温、添加有毒底物);②无副产物干扰,产物纯度高;③反应体系简单,易于调控。缺点:①依赖外源添加辅酶(如ATP),成本高;②缺乏代谢网络支持,仅能合成简单分子;③无法实现长期连续生产(酶易失活)。3.技术挑战包括:①材料性能不足(如机械强度、耐水性低于传统塑料);②生产成本高(发酵、纯化工艺复杂);③规模化放大困难(小试到中试的工艺参数难以匹配);④降解可控性差(环境中降解速率不可预测);⑤原料利用效率低(碳源到目标产物的转化率不足);⑥功能修饰难度大(如抗菌、着色等附加功能需额外工艺)。4.可降解血管支架的关键性能指标:①机械强度(需支撑血管,避免塌陷);②降解速率(需与血管再生速率匹配,通常612个月完全降解);③生物相容性(无免疫排斥,不引发血栓);④表面亲水性(促进内皮细胞黏附与生长);⑤孔隙率(适宜孔隙结构利于营养物质交换);⑥抗钙化能力(避免支架表面钙盐沉积);⑦载药功能(可负载抗增殖药物,预防再狭窄)。五、应用题1.(1)葡萄糖(C₆H₁₂O₆)→2丙酮酸(C₃H₄O₃)→2乳酸(C₃H₆O₃)→PLA((C₃H₄O₂)ₙ)。每摩尔葡萄糖生成2摩尔乳酸,乳酸脱水聚合为PLA时,每分子乳酸脱去1分子水(H₂O),即乳酸(C₃H₆O₃)→PLA单元(C₃H₄O₂)+H₂O。因此,2摩尔乳酸可生成2摩尔PLA单元(n=2时,PLA摩尔质量为72×2=144g/mol)。葡萄糖摩尔质量为180g/mol,2摩尔PLA单元质量为2×72=144g(n=1时,PLA单元摩尔质量为72g/mol)。因此,每摩尔葡萄糖理论可合成144gPLA(n=2时),或简化为每摩尔葡萄糖生成2×(72n)/n=144gPLA(与n无关)。(2)1吨葡萄糖=1,000,000g,物质的量=1,000,000/180≈5555.56mol。理论乳酸产量=5555.56×2×85%=9444.45mol。实际PLA产量=9444.45×90%×72g(PLA单元摩尔质量72g/mol)=9444.45×0.9×72≈612,000g=612.00kg。2.(1)核心功能模块设计:弹性模块:表达重组弹性蛋白(如人源弹性蛋白重复序列),赋予材料高弹性;强度模块:表达蜘蛛丝蛋白(如MaSp1)的β折叠结构域,提高拉伸强度;交联模块:表达酪氨酸酶,催化酪氨酸残基形成二硫键或多巴键,增强材料交联度;疏水模块:表达脂肪酸修饰酶(如脂酰转移酶),在蛋白表面连接短链脂肪酸,提高耐水性。(2)代谢工程策略:①过
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