2026年大二分子生物学实验操作测验试卷及答案

2026年大二分子生物学实验操作测验试卷及答案考试时长：120分钟满分：100分班级：__________姓名：__________学号：__________得分：__________一、单选题（总共10题，每题2分，总分20分）1.在分子生物学实验中，用于分离核酸的凝胶类型主要是（）A.聚丙烯酰胺凝胶B.硫酸纤维素凝胶C.琼脂糖凝胶D.尼龙膜凝胶2.PCR反应体系中，引物退火温度通常取决于（）A.引物长度B.引物GC含量C.DNA模板浓度D.以上都是3.限制性内切酶识别的序列通常是（）A.随机序列B.重复序列C.回文序列D.变性序列4.在蛋白质电泳中，SDS主要用于（）A.分离核酸片段B.分离蛋白质分子C.测序DNA序列D.基因克隆5.基因芯片技术主要用于（）A.DNA序列测定B.蛋白质表达分析C.基因表达谱分析D.限制性酶切图谱构建6.在分子克隆中，连接酶的作用是（）A.合成DNA链B.切割DNA链C.连接DNA片段D.修饰DNA序列7.细胞培养中，用于维持细胞贴壁生长的涂层是（）A.硅胶B.丝裂霉素CC.透明质酸D.胰蛋白酶8.流式细胞术主要用于（）A.DNA定量B.蛋白质定量C.细胞周期分析D.基因突变检测9.在基因编辑中，CRISPR-Cas9系统的主要作用是（）A.扩增DNA片段B.切割DNA特定位点C.合成RNA链D.修复DNA损伤10.用于检测核酸杂交的探针通常是（）A.多肽链B.RNA分子C.DNA分子D.蛋白质分子二、填空题（总共10题，每题2分，总分20分）1.PCR反应的三个主要步骤是______、______和______。2.限制性内切酶的识别位点通常是______序列。3.SDS中，SDS的作用是______。4.基因芯片技术的基本原理是______。5.蛋白质电泳中，常用的缓冲液是______。6.细胞培养中，常用的培养基是______。7.流式细胞术的英文缩写是______。8.CRISPR-Cas9系统中，Cas9蛋白的作用是______。9.DNA测序中，Sanger法的基本原理是______。10.用于固定核酸的膜是______。三、判断题（总共10题，每题2分，总分20分）1.PCR反应需要RNA聚合酶。（×）2.琼脂糖凝胶适用于分离大片段DNA。（√）3.限制性内切酶的识别位点具有对称性。（√）4.SDS中，蛋白质分子按分子量大小分离。（√）5.基因芯片技术可以检测单一基因的表达。（√）6.连接酶在分子克隆中是必需的。（√）7.细胞培养中，胰蛋白酶用于消化细胞。（√）8.流式细胞术可以分析细胞表面标记。（√）9.CRISPR-Cas9系统可以用于基因敲除。（√）10.DNA探针通常是单链核酸分子。（√）四、简答题（总共3题，每题4分，总分12分）1.简述PCR反应的基本原理及其应用。2.解释什么是限制性内切酶及其在分子克隆中的作用。3.描述SDS的原理及其在蛋白质研究中的应用。五、应用题（总共2题，每题9分，总分18分）1.某实验需要从细菌中提取质粒DNA，请简述提取步骤并说明每一步的原理。2.设计一个简单的实验方案，用于检测某基因在肿瘤细胞中的表达水平。【标准答案及解析】一、单选题1.C（琼脂糖凝胶常用于核酸分离）2.D（引物退火温度受长度、GC含量和模板浓度影响）3.C（限制性内切酶识别回文序列）4.B（SDS用于蛋白质分离）5.C（基因芯片技术用于基因表达谱分析）6.C（连接酶用于连接DNA片段）7.C（透明质酸用于维持细胞贴壁）8.C（流式细胞术用于细胞周期分析）9.B（CRISPR-Cas9系统用于切割DNA特定位点）10.C（DNA探针用于检测核酸杂交）二、填空题1.退火、延伸、变性2.回文3.使蛋白质变性并带负电荷4.探针与目标核酸杂交5.Tris-甘氨酸缓冲液6.RPMI-1640或DMEM7.FlowCytometry8.切割DNA特定位点9.化学终止法10.尼龙膜三、判断题1.×（PCR需要DNA聚合酶）2.√（琼脂糖凝胶适用于大片段DNA分离）3.√（限制性内切酶识别对称序列）4.√（SDS按分子量分离蛋白质）5.√（基因芯片可检测单一基因表达）6.√（连接酶是分子克隆必需工具）7.√（胰蛋白酶用于消化细胞）8.√（流式细胞术可分析细胞表面标记）9.√（CRISPR-Cas9可用于基因敲除）10.√（DNA探针通常是单链核酸）四、简答题1.PCR反应的基本原理是通过DNA聚合酶在引物作用下合成DNA链，其应用包括基因扩增、测序、诊断等。2.限制性内切酶是识别并切割DNA特定序列的酶，在分子克隆中用于产生粘性末端或平末端，便于DNA片段连接。3.SDS通过SDS使蛋白质变性并带负电荷，在电场中按分子量大小分离，广泛应用于蛋白质纯化和鉴定。五、应用题1.提取质粒DNA步骤：-涂片培养细菌，裂解细胞（如使用碱裂解法）；-蛋白酶K处理去除蛋白质；-萃取质粒DNA（如使用氯仿-异戊醇抽提）；-乙醇沉淀纯化DNA。原理：碱裂解法通过NaOH使细胞膜通透，蛋白质变性，质粒DNA释放；蛋白酶K降解蛋白质；氯仿-异戊醇去除脂质和蛋白质。2.检测肿瘤细胞基因表达方案：-提取肿瘤细胞RNA，反转录为cDNA；-设计特异性引物进行qPCR检测；-使用基因芯片或RT-PCR验证表达水平；-结果分析比较肿瘤细胞与正常细胞的基因表达差异