病理质控试题及答案2026年必考版

病理质控试题及答案2026年必考版1.单项选择题（每题1分，共30分）1.1下列哪项不是HE切片出现“灰蓝色雾状背景”的最常见原因A.苏木素氧化过度B.分化不足C.返蓝液pH＜7.0D.切片封片前脱水不足答案：C解析：返蓝液pH＜7.0会导致核染色偏红，而非雾状背景；雾状背景多因分化不足或脱水不足造成苏木素-伊红胶状沉淀。1.2免疫组化ER染色中，出现“脂肪组织强阳性而癌巢阴性”最可能的质控失误是A.一抗种属交叉B.内源性生物素封闭遗漏C.抗原修复液pH6.0D.切片烘烤温度90℃4h答案：B解析：脂肪组织富含内源性生物素，若未用游离生物素封闭，将出现非特异染色。1.3计算切片合格率时，公式为合格率若总切片200张，其中5张因刀痕报废，3张因折叠报废，合格180张，则合格率为A.91.8%B.92.9%C.90.0%D.94.5%答案：B解析：分母=200−5−3=192，180/192×100%=92.9%。1.4冰冻切片脂肪染色用OilRedO，最佳复染是A.苏木素B.甲基绿C.核固红D.伊红答案：B解析：甲基绿与脂滴对比度好，且不易溶解脂滴。1.5下列关于组织固定渗透速率公式v描述正确的是A.固定液浓度ΔC越大，v越小B.组织厚度d越大，v越大C.温度升高η降低，v增大D.k为组织密度答案：C解析：η为固定液黏度，温度升高黏度下降，渗透速率v增大。1.6质控图中心线CL=5.2%，上控制限UCL=7.8%，下控制限LCL=2.6%，连续7点落在中心线同一侧，首先应A.重新校准仪器B.更换试剂批号C.排查系统误差D.增加质控频次答案：C解析：7点规则提示系统漂移，需排查系统误差。1.7特殊染色PAS中，若切片出现“基底膜不着色而红细胞强阳性”，最可能遗漏步骤A.高碘酸氧化B.亚硫酸氢钠冲洗C.Schiff试剂避光D.淀粉酶消化答案：A解析：红细胞含大量糖原，若高碘酸氧化不足，基底膜糖蛋白无法生成醛基，导致阴性。1.8电子显微镜组织块染色用醋酸铀，其安全库存量计算公式安全库存若日消耗D=5ml，采购提前期L=7d，服务水平95%对应Z=1.65，提前期需求标准差σ_L=3ml，则安全库存为A.35mlB.40mlC.44mlD.50ml答案：C解析：5×7+1.65×3=35+4.95≈44ml。1.9免疫组化阳性对照选择原则，下列错误的是A.与待测组织固定方式一致B.每批实验均设阳性对照C.可用高表达细胞系制作D.阳性对照可不含内源性靶抗原答案：D解析：阳性对照必须含靶抗原，否则失去对照意义。1.10切片封片后出现“牛顿环”，最先考虑A.盖玻片厚度不均B.中性树胶过稀C.封片时压片力度过大D.脱水不彻底答案：A解析：牛顿环由光程差产生，盖玻片厚度不均或气泡导致。1.11组织处理机质控，乙醇浓度每日检测，允许偏差为A.±1%B.±2%C.±3%D.±5%答案：B解析：乙醇浓度偏差＞2%将显著影响脱水效果。1.12计算染色批次间CV值，公式CV若5批ER阳性百分比均值μ=78%，标准差σ=2.1%，则CV为A.1.8%B.2.7%C.3.4%D.4.1%答案：B解析：2.1/78×100%=2.7%。1.13下列哪项不属于室内质控图Westgard多规则A.1-2sB.1-3sC.2-2sD.4-1s答案：A解析：1-2s为警告规则，不单独判失控。1.14石蜡切片出现“纵裂”最常见于A.刀口缺损B.蜡块温度过低C.刀角过大D.组织固定不足答案：B解析：蜡块温度低导致脆性增加，出现纵裂。1.15免疫组化DAB显色后，切片呈“整体棕褐色”，最可能A.一抗浓度过高B.显色时间过短C.过氧化氢封闭遗漏D.苏木素复染过度答案：C解析：内源性过氧化物酶未封闭，导致组织内源性催化DAB。1.16组织切片厚度标准差要求A.≤1µmB.≤2µmC.≤3µmD.≤5µm答案：B解析：常规厚度4–5µm，标准差≤2µm可保证染色均一。1.17特殊染色Masson三色中，若胶原纤维呈红色，最可能A.磷钼酸分化过度B.酸性品红失效C.丽春红S浓度低D.苯胺蓝未避光保存答案：A解析：磷钼酸分化过度将胶原纤维颜色洗脱，后续苯胺蓝无法着色。1.18质控记录保存年限至少A.2年B.3年C.5年D.10年答案：C解析：ISO15189要求5年。1.19切片烘烤最佳温度-时间组合为A.60℃30minB.60℃60minC.70℃30minD.70℃60min答案：B解析：60℃60min可充分融蜡并减少抗原损失。1.20免疫荧光封片剂含DAPI，其最佳储存条件A.4℃避光B.−20℃避光C.室温避光D.−80℃避光答案：B解析：−20℃避光可减缓DAPI淬灭。1.21组织处理质控，二甲苯透明度检测常用A.折光仪B.比重计C.浊度计D.电导仪答案：A解析：折光仪可快速测二甲苯纯度。1.22切片刀移动速度公式v若切片厚度d=4µm，每转时间t=0.02s，则速度为A.0.2mm/sB.0.4mm/sC.0.8mm/sD.1.0mm/s答案：A解析：4µm/0.02s=200µm/s=0.2mm/s。1.23免疫组化二抗室温孵育时间一般A.15minB.30minC.60minD.120min答案：B解析：30min可平衡特异性与背景。1.24石蜡熔点选择依据A.组织大小B.环境温度C.切片机型号D.固定液种类答案：B解析：环境温度高需用高熔点石蜡防止软化。1.25组织切片出现“颤痕”首先调整A.刀角B.切片速度C.蜡块温度D.防卷板位置答案：B解析：速度过快导致刀架振动。1.26免疫组化高压修复最常用缓冲液A.Tris-EDTApH9.0B.CitratepH6.0C.PBSpH7.4D.BoratepH8.0答案：B解析：CitratepH6.0对多数抗原表位恢复效果好。1.27切片封片后气泡呈“星芒状”，最可能A.树胶含水分B.盖玻片倾斜放下C.切片未干D.中性树胶过期答案：B解析：倾斜放下易卷入空气形成星芒状气泡。1.28组织固定液中性缓冲甲醛浓度A.2%B.4%C.10%D.20%答案：C解析：10%中性缓冲甲醛为常规浓度。1.29免疫组化阴性对照常用A.PBS代替一抗B.同型IgGC.省略二抗D.省略显色答案：B解析：同型IgG可排除Fc段非特异结合。1.30切片刀角度常规设置A.5°B.10°C.15°D.25°答案：C解析：15°兼顾锋利与耐用。2.多项选择题（每题2分，共20分）2.1导致HE切片核染色过深的原因包括A.苏木素时间过长B.分化不足C.返蓝液pH偏低D.伊红浓度过高E.切片过厚答案：ABE解析：返蓝液pH偏低导致核偏红；伊红浓度影响胞质而非核。2.2免疫组化背景染色过重，可采取A.增加一抗稀释比B.延长封闭时间C.降低显色温度D.提高切片厚度E.使用Fab段二抗答案：ABE解析：提高厚度增加背景；降低显色温度不显著改善背景。2.3组织脱水透明不足，切片会出现A.云雾状B.裂片C.刀痕D.摊片难展E.染色不均答案：ADE解析：裂片与刀口相关；刀痕与刀口或蜡块温度相关。2.4关于质控品选择，正确的是A.高、中、低表达均含B.可溯源至参考物质C.每批实验只需一个浓度D.与患者组织同处理E.可长期−80℃保存答案：ABDE解析：每批需多浓度监测漂移。2.5电子显微镜组织块染色后，出现“铅染色沉淀”原因A.醋酸铅与CO₂反应B.染色后未充分水洗C.切片温度过高D.醋酸铀浓度过高E.避光不足答案：AB解析：铅与空气中CO₂生成碳酸铅沉淀；水洗不足残留铅。2.6切片封片后树胶溢出，可采取A.减少树胶量B.降低盖玻片速度C.使用小一号盖玻片D.封片前烘干切片E.降低树胶黏度答案：ADE解析：盖玻片速度不影响溢出量；小一号盖玻片易留气泡。2.7组织处理机质控每日记录包括A.乙醇浓度B.二甲苯折光率C.石蜡熔点D.温度曲线E.试剂更换日期答案：ABDE解析：石蜡熔点为试剂固有属性，不需每日测。2.8免疫荧光淬灭因素A.激发光强度过高B.封片剂含抗淬灭剂不足C.切片过厚D.DAPI浓度过高E.湿度大答案：ABE解析：切片过厚影响信号强度而非淬灭；DAPI为核染与荧光淬灭无关。2.9切片刀出现“缺口”检查方法A.显微镜观察刀口B.用尼龙棒轻刮C.切片连续性测试D.刀口反射光检查E.用指甲轻触答案：ACD解析：尼龙棒与指甲会损伤刀口。2.10关于室内质控失控处理，正确的是A.立即报告主管B.继续签发报告C.排查试剂批号D.重新校准仪器E.填写失控记录答案：ACDE解析：失控时禁止签发报告。3.判断题（每题1分，共10分）3.1免疫组化一抗4℃孵育过夜可降低背景。答案：√解析：低温减缓非特异结合。3.2石蜡切片厚度越薄，抗原修复时间越长。答案：×解析：薄切片表位易暴露，时间可缩短。3.3组织固定时间越长，抗原修复难度越低。答案：×解析：过度固定交联增加，修复难度增大。3.4中性树胶封片后可在60℃烘箱加速干燥。答案：√解析：高温加速溶剂挥发。3.5免疫荧光二抗可反复冻融5次不影响效价。答案：×解析：反复冻融导致抗体聚合效价下降。3.6组织处理乙醇浓度梯度差越大，脱水越快越好。答案：×解析：梯度差过大导致组织收缩剧烈。3.7切片刀角度越小，切片越薄。答案：×解析：角度过小刀口易崩缺，厚度由进刀量决定。3.8质控图出现10点连续上升，应立即更换试剂。答案：√解析：10点趋势为系统漂移，需更换试剂。3.9免疫组化显色后可用PBS终止反应。答案：√解析：PBS稀释H₂O₂可终止显色。3.10组织切片烘烤温度越高，抗原保存越好。答案：×解析：高温导致抗原表位破坏。4.填空题（每空1分，共20分）4.1组织固定液中性缓冲甲醛的pH为________。答案：7.2–7.44.2免疫组化高压修复温度通常为________℃，时间________min。答案：120，2.54.3石蜡切片常规厚度为________µm，允许偏差±________µm。答案：4–5，14.4组织处理乙醇梯度常用________%、________%、________%、100%。答案：70，80，954.5免疫荧光DAPI激发波长________nm，发射波长________nm。答案：358，4614.6质控图Westgard1-3s规则指单次结果超出________s限。答案：34.7切片刀移动速度单位常用________。答案：mm/s4.8组织透明二甲苯折光率约为________。答案：1.4954.9免疫组化DAB显色液配制后需在________min内使用。答案：304.10组织处理机石蜡浸蜡温度应高于石蜡熔点________℃。答案：2–45.简答题（每题5分，共30分）5.1简述HE切片出现“灰蓝色雾状背景”的排查流程。答案：1.检查分化时间，延长至镜下见核清晰红染；2.检查返蓝液pH，调至7.2–7.4；3.检查伊红染液是否沉淀，过滤或更换；4.检查脱水乙醇是否含水，更新至100%；5.检查封片前切片是否经二甲苯透明，避免水残留；6.检查苏木素是否氧化过度，过滤或更换；7.记录并绘制质控图，持续监测。5.2写出免疫组化阳性对照设置原则。答案：1.对照组织需经相同固定、脱水、包埋流程；2.含高、中、低表达区域，可评估灵敏度；3.每批实验均设，位置与待测组织同片；4.可溯源至参考细胞系或权威组织；5.记录批号、有效期、染色强度，存档5年；6.出现失控立即停用并更换。5.3说明组织处理乙醇浓度监测的两种方法及优缺点。答案：1.比重计法：快速、成本低，但受温度影响大，需校正；2.折光仪法：精度高、样品少，需定期用标准液校准，设备成本高。5.4描述电子显微镜组织块铀铅双重染色后，出现“铅沉淀”的补救措施。答案：1.用0.1MNaOH滴于切片表面10s，立即双蒸水冲洗；2.若沉淀仍存，用1%冰醋酸轻洗5s，再水洗；3.重复染色前，将铅染液离心3000rpm5min，避免CO₂污染；4.染色柜内置NaOH颗粒吸附CO₂；5.染色后尽快观察，减少暴露时间。5.5计算：某实验室每月切片6000张，失控率目标≤1%，若连续3月失控分别为68、52、71张，是否达标？提出改进措施。答案：失控率分别为1.13%、0.87%、1.18%，平均1.06%，未达标。措施：1.引入Westgard多规则，提前预警；2.每月召开质控会，分析失控原因；3.更换稳定性更高试剂；4.增加每日高、低值质控品；5.对技术员重新培训标准化操作。5.6简述免疫荧光淬灭防护的三项关键技术。答案：1.使用含对苯二胺或PVA的防淬灭封片剂，减少自由基；2.激发光强度调至最小可用，缩短曝光时间，使用高灵敏CCD；3.储存于−20℃避光，避免反复温度变化，扫描后24h内观察完毕。6.案例分析题（每题10分，共20分）6.1病例：乳腺浸润性癌ER免疫组化，实验室连续5批出现“脂肪组织强阳性、癌巢阴性”，内对照正常。问题：1.分析可能原因；2.提出验证实验；3.给出纠正措施。答案：1.原因：内源性生物素封闭遗漏，脂肪组织富含线粒体生物素化蛋白；二抗含生物素系统；试剂批号突变。2.验证：A.用同批试剂对脂肪组织单独封闭生物素后重复；B.换用聚合物法二抗排除生物素系统；C.用已知ER阳性脂肪组织验证封闭效果。3.纠正：立即停用该批试剂；重新配制10%蛋清封闭液，室温20min；更换聚合物法检测系统；更新SOP，增加脂肪组织封闭专项检查表；记录并提交失控报告。6.2病例：肾穿刺电镜标本，连续3例出现“基底膜电子密度不均、铅颗粒沉淀”，影响诊断。问题：1.列出质控盲点；2.给出改进方案；3.说明如何监测效果。答案：1.盲点：铅染液未过滤、染色柜CO₂浓度高、切片清洗不足、环境温湿度未记录。2.改进：A.铅染液使用前0.22µm过滤；B.染色柜内置NaOH颗粒，每周更换；C.增加双蒸水冲洗次数至5次×1min；D.每日记录温湿度，控制在22±2℃、湿度＜50%；E.设立每日质控切片，含已知基底膜清晰标本。3.监测：统计连续4周沉淀率，目标＜5%；每月拍照存档，用ImageJ定量灰度值CV＜8%；若连续两周达标，视为改进有效，否则再评估。7.计算与论述题（