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文档简介

生物工程生物科技公司实习报告一、摘要2023年7月1日至2023年8月31日,我在一家生物工程生物科技公司担任分子生物学助理实习生。在为期8周的实习中,我参与了重组蛋白表达系统的优化工作,通过改造质粒骨架和筛选高表达菌株,将目标蛋白的产量从2.5mg/L提升至8.3mg/L,效率提升3.3倍。运用分子克隆、酶切电泳和WesternBlot等技术,成功构建了包含6个标签的融合蛋白表达载体,并验证了其在原核体系中的表达活性。通过分析发酵数据,优化了培养基配方,使发酵周期缩短了12小时。实习期间,我掌握了基于序列比对和生物信息学工具的基因设计方法,以及利用统计学分析实验误差的策略,这些方法论可直接应用于后续的科研项目中。二、实习内容及过程1.实习目的希望通过实践了解重组蛋白在大肠杆菌中的表达全流程,掌握分子生物学基本操作,并熟悉生物工程公司的日常运作模式。2.实习单位简介我实习的公司主要做重组蛋白药物的开发,实验室有蛋白表达、纯化、表征等板块,技术路线比较成熟,设备也比较新。3.实习内容与过程我跟着一位师兄做一个小项目,优化一个干扰素的E.coli表达体系。刚开始是画质粒图,用引物设计软件PrimerPremier设计了几对针对原核表达载体的引物,然后自己合成。7月10号左右拿到质粒后,开始做酶切验证,用了EcoRI和XhoI,结果胶电泳发现外源基因片段有点偏小,怀疑是酶切不完全,后来增加了一次酶切反应时间才对上。接着把正确的质粒送入感受态细胞转化,挑单克隆送测序确认,花了3天时间。7月20号左右开始做诱导表达实验,第一次用IPTG诱导,蛋白表达量很低,WesternBlot看不出来,师兄说可能是温度没调对,后来把诱导温度从37℃降到30℃,表达量明显提升,但仍有部分包涵体。于是调整了IPTG浓度和诱导时间,最后把产量从2.5mg/L提到8.3mg/L,效率差不多翻了三倍。期间还参与了发酵实验,学习怎么调培养基成分,比如把酵母提取物从5g/L加到8g/L,甘油从10g/L减到5g/L,结果发酵OD600值从0.6升到1.2用了更短时间。4.实习成果与收获成果就是那个干扰素表达量提升了,数据有记录。收获是学会了好几种实验技巧,比如怎么根据测序结果设计引物,怎么判断质粒好坏,还有发酵参数对表达的影响。最大的体会是实验有时候挺磨人的,得细心,而且生物信息学工具用得多了效率确实高。5.遇到的问题及应对遇到的一个问题是刚开始做质粒构建时,连接效率很低,用了好几种方法都不行。后来师兄教我用热激法替代冰浴法,温度调到42℃,效果明显好很多。学到了热激法对某些连接反应确实有影响。另一个是WesternBlot膜背景总有点高,试了好几种封闭液都不行,最后发现是洗涤次数太频繁,改回原来的洗涤条件就好了。6.对职业规划的启发这次实习让我更清楚自己到底喜欢什么,感觉做蛋白表达挺有意思的,但纯化分析又有点累。以后想往表达和发酵方向发展,但得先补补工程菌改造这块知识。7.现存问题公司的培训机制有点弱,新来的实习生基本靠师兄带,没有成体系的培训材料,有时候会搞混一些实验细节。8.改进建议建议可以搞个新员工手册,把常用实验的SOP写清楚,特别是那些容易出错的地方,比如酶切反应条件、转化效率计算等,都能省不少事儿。三、总结与体会1.实习价值闭环这8周过得飞快,感觉像坐了个旋转木马。从7月1号第一次走进实验室,手忙脚乱地配培养基,到8月31号离开时能独立跑个简单的表达流程,真的挺有成就感的。当初去的时候就是想看看理论怎么用,现在看来,那些DNA条带、蛋白条带真的把书本上的东西具象化了。比如提升干扰素表达量那次,把产量从2.5mg/L干到8.3mg/L,虽然只是个实验数据,但每次看到结果都觉得自己挺厉害的,这种价值感是以前做实验报告写论文时完全体会不到的。2.职业规划联结这次经历让我更清楚自己想干嘛。之前对分子生物学、发酵工程都挺感兴趣,现在看来,我好像更偏向于表达和发酵这块,毕竟调体系、看发酵曲线这种实时变化的东西挺有意思的。所以接下来打算多看看相关方向的文献,如果可能的话,明年试试考个PMP或者类似的项目管理证书,感觉以后做技术管理可能更适合我。3.行业趋势展望在公司待着,能感觉到生物制药行业特别强调效率和质量,像我的那个小项目,师兄就反复强调优化成本和成功率。而且现在AI在生物领域用得越来越多了,我顺手学了个软件能自动设计引物,效率确实高。感觉以后做研发,不跟上信息化、智能化节奏可能就落后了,这也是我接下来要补课的方向。4.心态转变以前做实验总想一帆风顺,现在明白这事儿本来就不是的。比如有次做质粒构建失败,试了三次都不行,当时真的有点崩溃,但师兄说“没事,重做,看是哪步出问题”,最后发现是模板量太少了。这种经历反而让我踏实了,知道实验没那么多“奇迹”,得一步一个脚印。现在感觉抗压能力确实强了点,对“失败是成功之母”有了真切的体会。5.未来行动实习最后师兄还给了我一些未发表的数据让我回去看看,感觉挺受宠若惊的。现在回来后打算把那些数据整理一下,试着用机器学习的方法分析一下表达条件跟产量之间的关系,虽然可能很初级,但至少是个尝试。另外,那个干扰素表达体系我打算再优化一下,看看能不能提到10mg/L,也算是对自己有个交代。致谢1.感谢实习单位感谢公司提供了这次实习机会,让我接触到了真实的生物工程研发环境。

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