细胞培养基成分分析技师（中级）考试试卷及答案

细胞培养基成分分析技师（中级）考试试卷及答案一、填空题（共10题，每题1分）1.细胞培养基中必需氨基酸里，赖氨酸、______和亮氨酸被称为“支链氨基酸”。2.动物细胞培养基常用碳源除葡萄糖外，还有______（替代碳源，延长培养时间）。3.培养基中HEPES的主要作用是______。4.无血清培养基常添加______替代血清黏附因子。5.检测培养基葡萄糖含量常用______法。6.培养基中______缺乏会导致细胞停滞在G1期。7.培养基常用灭菌方法是______。8.植物细胞培养基常用激素有生长素和______。9.培养基中碳酸氢钠主要作用是______。10.检测培养基氨基酸常用______法。二、单项选择题（共10题，每题2分）1.动物细胞必需但植物可自身合成的氨基酸是：A.甘氨酸B.脯氨酸C.组氨酸D.精氨酸2.无血清培养基中不是必需添加的成分是：A.胰岛素B.转铁蛋白C.血清白蛋白D.维生素3.检测培养基谷氨酰胺含量常用：A.茚三酮比色法B.葡萄糖氧化酶法C.紫外分光光度法D.质谱法4.青霉素在培养基中的作用是：A.抑制细菌细胞壁合成B.抑制真菌C.抑制支原体D.灭活病毒5.属于合成培养基的是：A.MEMB.胎牛血清C.植物浸出液D.酵母提取物6.动物细胞培养基pH通常维持在：A.6.0-6.5B.6.8-7.4C.7.5-8.0D.5.5-6.07.检测培养基Na+、K+常用：A.原子吸收分光光度法B.电泳法C.比色法D.凝胶法8.不属于培养基基础成分的是：A.氨基酸B.维生素C.抗生素D.无机盐9.无血清培养基的主要优点不包括：A.成分明确B.减少污染C.促进细胞分化D.便于分析10.EDTA在培养基中的作用是：A.螯合金属离子B.调节渗透压C.抗氧化D.提供碳源三、多项选择题（共10题，每题2分，多选/少选/错选不得分）1.动物细胞必需维生素包括：A.维生素B12B.维生素CC.叶酸D.生物素2.检测培养基蛋白质的方法有：A.Bradford法B.BCA法C.茚三酮法D.双缩脲法3.无血清培养基常见添加物有：A.胰岛素B.转铁蛋白C.硒D.纤连蛋白4.影响培养基pH稳定的因素有：A.CO2浓度B.碳酸氢钠浓度C.细胞代谢D.温度5.植物细胞培养基常用碳源有：A.葡萄糖B.蔗糖C.麦芽糖D.淀粉6.培养基灭菌注意事项包括：A.滤膜孔径0.22μmB.灭菌后立即使用C.避免热敏成分破坏D.检测灭菌效果7.培养基成分分析质控要点包括：A.成分准确性B.无菌性C.内毒素含量D.细胞毒性8.属于半合成培养基的是：A.RPMI-1640B.DMEMC.含血清MEMD.无血清培养基9.检测培养基内毒素的方法是：A.鲎试剂法B.革兰染色法C.凝胶法D.比浊法10.培养基抗氧化剂包括：A.维生素EB.谷胱甘肽C.巯基乙醇D.碳酸氢钠四、判断题（共10题，每题2分，对打√，错打×）1.所有动物细胞都需要谷氨酰胺作为碳源。（）2.血清主要提供生长因子和黏附因子。（）3.HPLC可检测培养基中氨基酸和维生素。（）4.无血清培养基不需要添加抗生素。（）5.植物细胞培养基pH比动物细胞高。（）6.碳酸氢钠浓度越高，pH越稳定。（）7.葡萄糖氧化酶法可检测培养基葡萄糖含量。（）8.所有细胞培养基都需要无机盐。（）9.培养基灭菌后内毒素含量不会增加。（）10.无血清培养基更利于大规模细胞培养。（）五、简答题（共4题，每题5分）1.简述合成培养基与天然培养基的区别。2.无血清培养基主要添加物有哪些？各起什么作用？3.如何检测培养基中谷氨酰胺含量？4.培养基质控的主要指标有哪些？六、讨论题（共2题，每题5分）1.无血清培养基在细胞培养中的优势与局限性是什么？2.如何避免培养基成分分析中的误差？---参考答案一、填空题1.异亮氨酸2.谷氨酰胺3.维持pH稳定4.纤连蛋白（或层粘连蛋白）5.葡萄糖氧化酶（或HPLC）6.血清（或生长因子）7.过滤除菌（0.22μm滤膜）8.细胞分裂素9.调节pH（与CO2平衡）10.高效液相色谱（HPLC）二、单项选择题1-5:CCAAA6-10:BACCA三、多项选择题1.ACD2.ABD3.ABCD4.ABCD5.AB6.ACD7.ABCD8.CD9.AC10.ABC四、判断题1.×2.√3.√4.×5.×6.×7.√8.√9.×10.√五、简答题1.合成培养基：成分明确（已知化学组成），重复性好，便于分析，需加血清补充；天然培养基：含未知成分（血清、植物浸出液），重复性差，但满足细胞多元需求。合成适合成分研究，天然适合初始培养，半合成是两者结合。2.①胰岛素：促葡萄糖/氨基酸摄取；②转铁蛋白：结合铁离子，抗氧化；③硒：清除自由基；④纤连蛋白：替代黏附因子；⑤生长因子（EGF/FGF）：促增殖分化。均替代血清功能，明确成分。3.常用茚三酮比色法（谷氨酰胺与茚三酮反应呈紫色，比色定量）或HPLC（氨基酸衍生化后柱分离，紫外/荧光检测）。茚三酮法快速，HPLC准确（可同时测多种氨基酸）。4.①无菌性（细菌/真菌/支原体）；②成分含量（氨基酸/葡萄糖等）；③内毒素（鲎试剂法）；④pH（动物6.8-7.4，植物5.5-6.0）；⑤渗透压（280-320mOsm/kg）；⑥细胞毒性（L929细胞检测）；⑦生长促进性（细胞增殖速率）。六、讨论题1.优势：成分明确，减少血清污染（病毒/支原体），避免未知成分干扰，利于大规模生产。局限性：成本高，部分细胞不适应（需特定因子），增殖速率可能降低，通用性差。适合成分研究/大规模生产，特殊细胞仍需含血清培养基。2.①样品处理：避免污染，及时检测（