2026年免疫学实验操作测验试题

2026年免疫学实验操作测验试题考试时长：120分钟满分：100分一、单选题（总共10题，每题2分，总分20分）1.在进行ELISA实验时，以下哪种方法常用于检测抗体与抗原的结合？A.直接法B.间接法C.双抗体夹心法D.均可（A、B、C均正确）2.免疫荧光技术中，荧光素标记的抗体通常用于检测什么？A.细胞表面抗原B.细胞内抗原C.蛋白质表达水平D.DNA序列3.在流式细胞术实验中，以下哪种荧光染料常用于标记活细胞？A.PI（碘化丙啶）B.FITC（异硫氰酸荧光素）C.PE（藻红蛋白）D.APC（藻红蛋白偶联物）4.免疫印迹（WesternBlot）实验中，以下哪个步骤是关键？A.蛋白质电泳B.转膜C.抗体孵育D.均是（A、B、C均为关键步骤）5.以下哪种方法常用于检测细胞因子？A.ELISAB.PCRC.流式细胞术D.免疫组化6.在细胞培养过程中，以下哪种试剂常用于维持细胞活性？A.FBS（胎牛血清）B.PBS（磷酸盐缓冲液）C.DMEM（杜氏改良Eagle培养基）D.HEPES（羟乙基哌嗪乙磺酸）7.免疫磁珠分选技术中，以下哪种材料常用于捕获目标细胞？A.抗体磁珠B.细胞磁珠C.DNA磁珠D.磁珠载体8.在ELISA实验中，以下哪种方法常用于增强信号检测？A.HRP（辣根过氧化物酶）标记B.AP（碱性磷酸酶）标记C.生物素-亲和素系统D.均可（A、B、C均正确）9.免疫沉淀（Co-IP）实验中，以下哪个步骤是关键？A.抗体孵育B.蛋白质纯化C.SDS电泳D.均是（A、B、C均为关键步骤）10.在流式细胞术实验中，以下哪种参数常用于评估细胞活力？A.FSC（前向散射）B.SSC（侧向散射）C.PI（碘化丙啶）染料D.CD45（白细胞标志物）二、填空题（总共10题，每题2分，总分20分）1.ELISA实验中，______法常用于检测抗原。2.免疫荧光技术中，______染料常用于标记细胞核。3.流式细胞术实验中，______染料常用于评估细胞凋亡。4.WesternBlot实验中，______膜常用于固定蛋白质。5.细胞因子检测中，______方法常用于定量分析。6.免疫磁珠分选技术中，______材料常用于捕获目标细胞。7.ELISA实验中，______酶常用于信号放大。8.免疫沉淀实验中，______蛋白常用于连接目标蛋白。9.免疫组化实验中，______染料常用于观察组织切片。10.流式细胞术实验中，______参数常用于评估细胞大小。三、判断题（总共10题，每题2分，总分20分）1.ELISA实验中，直接法和间接法均可用于检测抗体。（正确）2.免疫荧光技术中，荧光素标记的抗体只能检测细胞表面抗原。（错误）3.流式细胞术实验中，PI染料只能用于检测活细胞。（错误）4.WesternBlot实验中，PVDF膜比NC膜更常用。（正确）5.细胞因子检测中，ELISA方法只能用于定性分析。（错误）6.免疫磁珠分选技术中，抗体磁珠只能用于捕获B细胞。（错误）7.ELISA实验中，HRP酶比AP酶更灵敏。（正确）8.免疫沉淀实验中，IgG蛋白常用于连接目标蛋白。（正确）9.免疫组化实验中，苏木精染料常用于观察细胞质。（错误）10.流式细胞术实验中，FSC参数只能用于评估细胞颗粒度。（错误）四、简答题（总共3题，每题4分，总分12分）1.简述ELISA实验的基本原理及其主要步骤。2.比较流式细胞术和免疫荧光技术的优缺点。3.解释免疫磁珠分选技术的原理及其应用场景。五、应用题（总共2题，每题9分，总分18分）1.某实验室需检测细胞培养上清中的IL-6水平，请设计一个ELISA实验方案，包括主要试剂、步骤及结果判读。2.某研究者需分离纯化特定蛋白，请设计一个免疫沉淀实验方案，包括主要试剂、步骤及结果验证方法。【标准答案及解析】一、单选题1.D（直接法、间接法、双抗体夹心法均正确）2.A（荧光素标记抗体主要用于检测细胞表面抗原）3.C（PE常用于标记活细胞）4.D（蛋白质电泳、转膜、抗体孵育均为关键步骤）5.A（ELISA常用于检测细胞因子）6.A（FBS常用于维持细胞活性）7.A（抗体磁珠常用于捕获目标细胞）8.D（HRP、AP、生物素-亲和素系统均可增强信号）9.D（抗体孵育、蛋白质纯化、SDS电泳均为关键步骤）10.C（PI染料常用于评估细胞活力）二、填空题1.双抗体夹心2.DAPI3.AnnexinV-FITC4.PVDF5.ELISA6.抗体磁珠7.HRP8.IgG9.免疫荧光10.FSC三、判断题1.正确2.错误（荧光素标记抗体可检测细胞表面和细胞内抗原）3.错误（PI染料可检测死细胞和活细胞）4.正确5.错误（ELISA方法可定量分析）6.错误（抗体磁珠可捕获多种细胞类型）7.正确8.正确9.错误（苏木精染料常用于观察细胞核）10.错误（FSC参数可评估细胞大小和颗粒度）四、简答题1.ELISA实验的基本原理：ELISA（酶联免疫吸附测定）利用抗原抗体反应，通过酶标记的抗体或抗原与底物反应产生显色信号，从而检测样品中目标物质的水平。主要步骤：-包被：将抗原或抗体包被在微孔板上，4℃过夜。-封闭：用封闭液封闭未结合位点，防止非特异性结合。-孵育：加入待测样品，孵育检测目标物质。-结合：加入酶标记的抗体或抗原，孵育结合。-显色：加入底物，酶催化底物产生显色信号。-读板：用酶标仪检测吸光度值，计算结果。2.流式细胞术与免疫荧光技术的比较：-流式细胞术：可同时检测多种参数（如细胞大小、颗粒度、多种荧光标记物），高通量，定量分析，但设备昂贵，操作复杂。-免疫荧光技术：主要用于观察细胞形态和定位，操作简单，但只能检测一种或少数几种荧光标记物，定量分析能力有限。3.免疫磁珠分选技术的原理及应用：-原理：利用抗体标记的磁珠与目标细胞表面的特异性抗原结合，通过磁力分离目标细胞。-应用：分离纯化特定细胞（如CD4+T细胞），用于研究细胞功能或治疗。五、应用题1.ELISA实验方案：-主要试剂：ELISA试剂盒（IL-6抗体）、HRP标记的二抗、TMB底物、终止液。-步骤：1.包被：将IL-6抗体包被微孔板，4℃过夜。2.封闭：用5%BSA封闭1小时。3.孵育：加入细胞上清，孵育1小时。4.结合：加入HRP标记的二抗，孵育1小时。5.显色：加入TMB底物，孵育30分钟。6.终止：加入终止液，终止反应。7.读板：用酶标仪检测450nm吸光度值。-结果判读：吸光度值越高，IL-6水平越高。2.免疫沉淀实验方案：-主要试剂：抗体（如抗-Flag）、蛋白A/G磁珠、SDS试剂、BCA蛋白定量试剂盒。-步骤：1.蛋白提取：提取细胞裂解液，BCA定量蛋白浓度。