病理技师三基模拟题与答案

病理技师三基模拟题与答案一、单项选择题（每题2分，共30分）1.关于组织固定的叙述，错误的是A.固定液需为组织体积的5-10倍B.4%中性多聚甲醛适用于电镜标本固定C.冰冻切片标本可直接固定于95%乙醇D.胃黏膜标本应先展平再固定答案：B解析：4%中性多聚甲醛是光镜常用固定液，电镜标本需用2.5%戊二醛等电镜专用固定液。2.HE染色中，盐酸酒精分化的主要目的是A.增强细胞核着色B.去除胞质多余染料C.使细胞核与胞质对比度清晰D.防止切片脱片答案：C解析：苏木素染色后，细胞核和部分胞质均被染色，盐酸酒精分化可溶去胞质中多余苏木素，保留细胞核内结合牢固的染料，使核质对比清晰。3.免疫组化染色中，内源性生物素干扰最常见于A.肝脏、肾脏组织B.乳腺、甲状腺组织C.皮肤、软骨组织D.神经、肌肉组织答案：A解析：肝脏（肝细胞）、肾脏（肾小管上皮）含丰富内源性生物素，使用链霉亲和素-生物素系统时易出现非特异性着色。4.冰冻切片制作时，组织表面出现冰晶的主要原因是A.组织未及时取材B.冷冻温度过低（<-30℃）C.组织含水量过高D.冷冻速度过慢答案：D解析：冰晶形成与冷冻速度负相关，快速冷冻（如异戊烷预冷至-150℃）可减少冰晶，常规冷冻台（-20~-25℃）若组织未贴紧冷冻面导致降温慢，易形成冰晶。5.病理标本接收时，发现“送检标本为‘右乳肿块’，但申请单标注为‘左乳’”，正确处理流程是A.联系临床医生确认后接收B.直接按申请单信息登记C.拒绝接收并退回D.自行修正申请单信息答案：A解析：标本与申请单信息不符时，需第一时间联系送检医生核实，确认无误后标注修正并双方签字，不可擅自修改或拒收。6.石蜡切片厚度控制在3-5μm的主要原因是A.减少抗原丢失B.避免切片断裂C.保证显微镜观察时细胞结构重叠少D.降低染色时间答案：C解析：过厚切片（>6μm）会导致细胞重叠，影响形态学观察；过薄（<2μm）易断裂且抗原保存差，3-5μm为最佳观察厚度。7.关于组织脱水的叙述，错误的是A.脱水剂浓度应梯度递增（70%→85%→95%→无水乙醇）B.脂肪组织需延长脱水时间C.胃镜小标本脱水时间可缩短至2-3小时D.脱水不彻底会导致透明时组织发白答案：B解析：脂肪组织含脂类多，乙醇穿透性差，需缩短脱水时间（避免过度收缩），或改用正丁醇等脂溶性脱水剂。8.瑞氏染色适用于A.骨髓涂片B.肾穿刺组织C.肝脏活检D.乳腺细针穿刺答案：A解析：瑞氏染色主要用于血液、骨髓等细胞悬液标本，通过酸性伊红和碱性亚甲蓝染色，显示血细胞形态。9.免疫组化结果判读时，“阳性细胞呈胞膜线性着色”提示A.细胞增殖标记（如Ki-67）B.膜抗原（如CD20）C.核抗原（如P53）D.胞质抗原（如CK）答案：B解析：CD20、HER2等膜表面抗原阳性表现为细胞膜线性或环状着色；核抗原为核内颗粒状，胞质抗原为胞质弥漫或颗粒状。10.关于组织包埋的注意事项，错误的是A.胃黏膜标本应垂直包埋（黏膜面向上）B.骨组织需脱钙后再包埋C.淋巴结应沿长轴平行包埋D.较大组织需分开包埋以保证切片完整性答案：A解析：胃黏膜、肠黏膜等表面结构标本应水平包埋（黏膜面与包埋盒底面平行），确保切片能显示黏膜全层结构；垂直包埋会导致黏膜层被切断。11.原位杂交（ISH）检测HPV时，常用的探针类型是A.双链DNA探针B.单链RNA探针C.寡核苷酸探针D.蛋白质探针答案：C解析：HPV检测多使用针对E6/E7基因的寡核苷酸探针，特异性高且穿透力强，适合石蜡切片检测。12.切片机刀片角度调整不当会导致A.切片褶皱B.切片出现平行刀痕C.切片厚度不均D.切片脱片答案：B解析：刀片角度过大（>5°）或过小会导致刀刃与组织接触不均匀，产生平行于切片方向的细刀痕；切片褶皱多因展片水温过高或组织过软。13.关于病理档案保存的要求，正确的是A.切片保存15年，蜡块保存30年B.切片和蜡块均永久保存C.电子病理资料保存10年D.外检申请单保存5年答案：B解析：根据《病理科建设与管理指南》，病理切片、蜡块、申请单等原始资料需永久保存；电子资料保存时间不低于30年。14.荧光原位杂交（FISH）实验中，杂交后洗涤的主要目的是A.去除未结合的探针B.增强荧光信号C.固定杂交复合物D.防止背景着色答案：A解析：洗涤步骤通过不同浓度SSC缓冲液洗脱未与靶序列结合的探针，减少非特异性信号，提高信噪比。15.关于组织透明的叙述，正确的是A.透明剂需与脱水剂（乙醇）互溶B.二甲苯透明时间越长越彻底C.脂肪组织可用氯仿代替二甲苯D.透明不充分会导致包埋时石蜡无法渗透答案：A解析：透明剂（如二甲苯）需与乙醇互溶，才能置换组织内的乙醇，为石蜡渗透做准备；透明过度会导致组织变脆，脂肪组织因脂溶性高，二甲苯透明时间应缩短。二、多项选择题（每题3分，共15分，少选得1分，错选不得分）1.影响组织固定效果的因素包括A.固定液类型B.组织体积（厚度）C.固定时间D.组织取材后至固定的时间间隔答案：ABCD解析：固定液渗透压、pH、穿透速度（如甲醛穿透速度约1mm/h），组织厚度（>5mm需切开），固定时间（一般6-24小时），以及取材后延迟固定（导致自溶）均影响固定效果。2.免疫组化质量控制应包括A.阳性对照（已知阳性组织）B.阴性对照（省略一抗）C.空白对照（不加任何抗体）D.内对照（组织内自身阳性细胞）答案：ABD解析：空白对照（不加一抗和二抗）无实际意义，常规质控包括阳性对照（验证试剂有效性）、阴性对照（排除非特异性结合）、内对照（如淋巴结内CD20阳性B细胞）。3.冰冻切片常见问题及处理方法正确的是A.切片破碎——降低冷冻温度B.切片皱缩——提高展片水温（45-50℃）C.冰晶过多——缩短组织冷冻前暴露时间D.组织发脆——减少冷冻时间（或提高冷冻温度至-18℃）答案：CD解析：切片破碎多因组织过硬（冷冻过度），应提高冷冻温度（-18~-22℃）；切片皱缩因展片水温过低（<35℃），需调至38-42℃；冰晶过多因冷冻速度慢，应确保组织紧贴冷冻面快速降温；组织发脆因冷冻时间过长，需减少冷冻时间或降低冷冻强度。4.关于HE染色流程，正确的步骤是A.脱蜡：二甲苯Ⅰ（5min）→二甲苯Ⅱ（5min）B.复水：无水乙醇→95%乙醇→85%乙醇→70%乙醇（各2min）C.苏木素染色（5-10min）→自来水冲洗→盐酸酒精分化（数秒）→返蓝（温水或稀氨水）D.伊红染色（30s-2min）→梯度乙醇脱水→二甲苯透明→封片答案：ACD解析：复水应从高浓度到低浓度，即无水乙醇→95%乙醇→85%乙醇→70%乙醇（各1-2min），但实际操作中常简化为无水乙醇Ⅰ→无水乙醇Ⅱ→95%乙醇→85%乙醇→70%乙醇，避免直接从二甲苯到低浓度乙醇导致组织肿胀。5.病理技术室生物安全防护措施包括A.甲醛操作在通风橱内进行B.处理新鲜标本戴手套、护目镜C.废弃切片放入感染性废物袋D.高压蒸汽灭菌处理废弃蜡块答案：ABC解析：蜡块主要成分为石蜡，无生物活性，废弃蜡块可按一般固废处理；感染性废物（如未固定标本、血液污染的切片）需高压灭菌或化学消毒后处理。三、判断题（每题1分，共10分）1.胃黏膜活检标本应先放入10%中性福尔马林固定，再用滤纸展平防止卷曲。（×）解析：应先将黏膜面平铺于滤纸上，再放入固定液，避免固定后卷曲无法展平。2.免疫组化中，热修复（高压热修复）比酶消化更适用于大多数抗原的修复。（√）解析：热修复（EDTA或柠檬酸缓冲液）通过高温破坏蛋白交联，适用于90%以上抗原；酶消化（胰酶、蛋白酶K）主要用于被过度固定的抗原（如某些病毒抗原）。3.冰冻切片染色后，可用中性树胶封片。（×）解析：冰冻切片因未脱蜡，需用甘油明胶或水溶性封片剂，中性树胶（二甲苯溶剂）会溶解冰冻切片中的水分，导致细胞变形。4.组织脱水时，无水乙醇可重复使用至浑浊后更换。（×）解析：无水乙醇吸水后浓度降低，需定期检测（如用酒精计），低于99%时应更换，否则影响脱水效果。5.电子显微镜标本固定需在取材后30分钟内完成，组织块大小不超过1mm³。（√）解析：电镜标本对固定及时性要求高（避免超微结构破坏），组织块过大会导致固定液无法穿透中心区域。6.瑞氏染色时，染液与缓冲液比例为1:1，混合后覆盖涂片10-15min。（×）解析：瑞氏染色需先滴染液覆盖涂片1-2min（固定细胞），再滴等量缓冲液混合，染色5-8min，避免长时间染色导致背景过深。7.切片脱片的常见原因包括组织固定不足、载玻片防脱片处理不佳、烤片温度过高。（√）解析：固定不足导致组织与玻片结合力差；防脱片处理（如APES、多聚赖氨酸）失效；烤片温度过高（>70℃）导致组织收缩脱离玻片。8.骨组织脱钙完全的标志是用针刺骨组织无阻力。（√）解析：脱钙程度检测可通过针刺法（完全脱钙时易刺入）或X线法（无钙盐密度影）。9.免疫组化结果中，“阳性细胞数<1%”可报告为阴性。（√）解析：多数抗体判读标准中，阳性细胞数<1%视为阴性，需结合阳性对照判断是否为真阴性。10.病理技术记录应包括取材时间、固定液种类、脱水包埋参数、染色编号等，保存时间不少于30年。（√）解析：技术记录作为质量控制的关键环节，需长期保存以追溯问题。四、简答题（每题8分，共40分）1.简述石蜡切片制作的主要流程及各步骤关键注意事项。答案：主要流程：取材→固定→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→展片→烤片→染色→封片。关键注意事项：（1）取材：大小2×1.5×0.3cm，避免挤压；（2）固定：10%中性福尔马林（pH7.2-7.4），体积为组织5-10倍，时间6-24小时；（3）脱水：梯度乙醇（70%→85%→95%→无水乙醇Ⅰ→无水乙醇Ⅱ），每级30-60min（小标本缩短）；（4）透明：二甲苯Ⅰ（15-20min）→二甲苯Ⅱ（10-15min），避免过度透明（组织变脆）；（5）浸蜡：60℃石蜡（熔点56-58℃），2-3级（每级30-60min），确保石蜡渗透；（6）包埋：组织方向正确（如黏膜面平行包埋盒底），蜡温适宜（避免烫伤组织）；（7）切片：厚度3-5μm，刀片角度3-5°，避免刀痕；（8）展片：水温38-42℃，避免褶皱；（9）烤片：60℃烤片30-60min（或45℃过夜），确保贴附牢固。2.列举5种免疫组化非特异性染色的原因及解决方法。答案：（1）内源性过氧化物酶：常见于血细胞、肝脏等，解决方法：3%H₂O₂孵育10min阻断；（2）内源性生物素：肝、肾组织，解决方法：使用生物素阻断试剂盒（avidin-biotin封闭）；（3）抗体浓度过高：背景弥漫着色，解决方法：优化抗体稀释度（通过预实验确定）；（4）血清封闭不充分：非特异性蛋白结合，解决方法：增加正常血清（与二抗同源）封闭时间（20-30min）；（5）孵育时间过长：室温孵育超过1小时，解决方法：4℃冰箱孵育过夜（16-18小时），减少非特异性结合；（6）洗涤不彻底：缓冲液残留抗体，解决方法：PBS洗涤3次（每次5min），振荡洗涤。3.试述冰冻切片的质量要求及常见问题的原因分析。答案：质量要求：切片完整无破碎，厚度4-6μm，细胞结构清晰无冰晶，染色对比鲜明。常见问题及原因：（1）切片破碎：①组织过硬（冷冻过度，温度<-25℃）；②组织含纤维成分多（如乳腺纤维腺瘤）；③刀片钝或角度过大；（2）冰晶形成：①冷冻速度慢（组织未紧贴冷冻台）；②组织含水量高（如脑、卵巢囊肿壁）；③冷冻温度波动（冷冻台制冷不稳定）；（3）切片皱缩：①展片水温过低（<35℃）；②组织过软（如脂肪组织）；③切片机推进速度过快；（4）染色模糊：①固定不充分（丙酮固定时间<10min）；②染色时间不足（如HE染色苏木素<3min）；③分化过度（盐酸酒精作用时间过长）；（5）组织发脆：①冷冻时间过长（>5min）；②组织含钙化灶（未脱钙直接冷冻）；③冷冻温度过低（<-30℃）。4.简述病理技术质量控制的主要内容。答案：（1）标本接收：核对信息（姓名、标本类型、数量），记录送检时间，拒收不合格标本（如无标识、自溶严重）；（2）取材制片：规范取材大小、固定液选择，定期校准切片机厚度（误差<0.5μm），监控脱水机温度（乙醇槽45℃，石蜡槽60℃）；（3）染色质量：每日运行HE染色质控片（标准组织如扁桃体），记录染色评分（核蓝、质红、对比清晰）；免疫组化每批检测带阳性/阴性对照，结果判读符合判读标准（如HER20-3+）；（4）仪器设备：切片机每月维护（刀片更换记录），脱水机每季度校准温度/时间，烤片机温度误差≤2℃，冰箱温度监控（4℃±2℃，-20℃±5℃）；（5）人员培训：定期考核切片厚度控制、染色操作、设备使用，新员工需通过技能认证（如切片合格率>95%）；（6）记录追溯：保存技术记录（取材时间、固定液批号、染色编号、仪器参数），电子