2025年微生物检验期末考试题及答案

2025年微生物检验期末考试题及答案一、单项选择题（每题1分，共30分。每题只有一个最佳答案，请将正确选项字母填入括号内）1.某腹泻患儿粪便标本直接涂片革兰染色镜检，见大量革兰阴性、弯曲呈海鸥状杆菌，最可能的病原是（）A.霍乱弧菌 B.空肠弯曲菌 C.大肠埃希菌 D.沙门菌答案：B2.关于艰难梭菌毒素检测，下列哪项叙述正确（）A.细胞毒性试验需用Vero细胞 B.谷氨酸脱氢酶（GDH）阳性即可确诊感染C.毒素A/BEIA检测灵敏度100% D.核酸扩增试验可直接区分产毒株与非产毒株答案：D3.血培养报阳时间（TTP）与下列哪项因素关系最小（）A.采血量 B.菌株种类 C.患者是否已接受有效抗菌治疗 D.培养瓶颜色答案：D4.在麦康凯平板上形成无色透明小菌落、氧化酶阳性、触酶阳性、42℃生长、不发酵蔗糖的革兰阴性杆菌，最可能是（）A.铜绿假单胞菌 B.鲍曼不动杆菌 C.嗜麦芽窄食单胞菌 D.脑膜炎败血伊丽莎白菌答案：C5.下列哪种方法可快速区分MRSA与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）（）A.头孢西丁纸片扩散法 B.苯唑西林MIC测定 C.mecA基因PCR D.以上均可答案：D6.关于布鲁菌实验室诊断，错误的是（）A.血培养需延长孵育至21天 B.布鲁菌血清学试管凝集试验（SAT）≥1:160支持诊断C.革兰染色可见细胞内革兰阴性小杆菌 D.可常规使用BSL2操作答案：D7.痰标本定量培养判定肺炎致病菌的阈值是（）A.≥10³CFU/mL B.≥10⁴CFU/mL C.≥10⁵CFU/mL D.≥10⁶CFU/mL答案：C8.下列哪项不是真菌G试验假阳性原因（）A.静脉输注白蛋白 B.纱布棉塞污染 C.新生儿溶血标本 D.革兰阳性菌败血症答案：D9.关于结核分枝杆菌rpoB基因突变，正确的是（）A.507bp核心区81bp区域最常见 B.导致高水平耐异烟肼 C.与耐乙胺丁醇相关 D.可用线性探针杂交法检测答案：D10.用于监测高压蒸汽灭菌效果的生物指示剂是（）A.枯草芽孢杆菌5230 B.嗜热脂肪地芽孢杆菌 C.短小芽孢杆菌 D.炭疽芽孢杆菌答案：B11.某尿路感染患者中段尿培养检出大肠埃希菌，ESBL确证试验阳性，下列哪项药敏结果最可能为“耐药”（）A.头孢曲松 B.哌拉西林/他唑巴坦 C.亚胺培南 D.阿米卡星答案：A12.关于诺如病毒检测，最佳标本采集时间是（）A.发病≥7天 B.发病48h内 C.潜伏期 D.恢复期答案：B13.在BCYE平板上生长并形成灰白黏附菌落，紫外光下可见蓝白色荧光，最可能是（）A.嗜肺军团菌 B.流感嗜血杆菌 C.百日咳鲍特菌 D.莫拉菌答案：A14.下列哪项不是厌氧菌耐氧试验常用方法（）A.疱肉培养基法 B.溴甲酚绿纸片法 C.甲硝唑（5μg）纸片法 D.80μg/片庆大霉素纸片法答案：B15.关于MALDITOFMS鉴定丝状真菌，错误的是（）A.需使用甲酸乙腈提取法 B.可鉴定至种水平 C.数据库需含曲霉属谱图 D.不能用于接合菌门答案：D16.某患者角膜刮片10%KOH湿片见宽大无隔菌丝，呈90°分枝，最可能是（）A.曲霉 B.镰刀菌 C.毛霉 D.赛多孢菌答案：C17.关于幽门螺杆菌表型耐药检测，正确的是（）A.Etest需微需氧孵育3天 B.纸片扩散法可常规用于克拉霉素C.琼脂稀释法金标准 D.可直接用粪便标本答案：C18.下列哪项不是细菌产碳青霉烯酶表型确证试验（）A.CarbaNP B.mCIM C.EDTA协同试验 D.头孢西丁三维试验答案：D19.关于B族链球菌（GBS）产前筛查，正确的是（）A.35–37周取阴道口拭子即可 B.选择性肉汤增菌用LIM或ToddHewittC.直接接种血平板敏感性>90% D.核酸扩增试验不能替代培养答案：B20.某患者持续中性粒细胞缺乏伴发热，血培养2天报阳，革兰阳性小杆菌，触酶阳性，在血平板上形成细小α溶血，CAMP试验阳性，最可能是（）A.单核细胞增生李斯特菌 B.无乳链球菌 C.红斑丹毒丝菌 D.棒状杆菌答案：A21.关于鹦鹉热衣原体实验室诊断，错误的是（）A.细胞培养需用BGMK细胞 B.血清微量免疫荧光（MIF）是金标准C.呼吸道标本可测16SrRNA基因 D.尿抗原检测灵敏度高答案：D22.下列哪项不是真菌药敏试验CLSIM38A2适用菌种（）A.曲霉属 B.镰刀菌属 C.念珠菌属 D.毛霉属答案：D23.关于万古霉素耐药肠球菌（VRE），正确的是（）A.vanA型对替考拉宁敏感 B.vanB型可诱导表达 C.vanC型常见于屎肠球菌 D.表型筛查可用脑心浸液琼脂含6μg/mL万古霉素答案：D24.某患者脑脊液墨汁负染色见宽厚荚膜酵母样细胞，最可能是（）A.白色念珠菌 B.新生隐球菌 C.格特隐球菌 D.热带念珠菌答案：B25.关于HPV分型检测，下列哪项技术可同时提供18种高危型别信息（）A.杂交捕获2代 B.实时荧光PCR C.反向线性探针杂交 D.环介导等温扩增答案：C26.某腹泻患者粪便悬滴法见穿梭样运动活泼的革兰阴性弧菌，制动试验阳性，最可能是（）A.O1群霍乱弧菌 B.O139群霍乱弧菌 C.副溶血弧菌 D.气单胞菌答案：A27.关于产气荚膜梭菌α毒素，正确的是（）A.为卵磷脂酶 B.可被诺维氏梭菌抗毒素中和 C.致红血球溶解即Nagler阳性 D.以上均正确答案：D28.下列哪项不是病毒细胞培养常用观察指标（）A.细胞病变效应（CPE） B.红细胞吸附 C.空斑形成 D.菌落大小答案：D29.关于SARSCoV2变异株检测，错误的是（）A.全基因组测序是金标准 B.靶向S基因dropoutPCR可初筛OmicronC.荧光PCR熔解曲线可区分Delta D.抗原检测可替代测序答案：D30.某移植患者BALF培养长出革兰阴性球杆菌，氧化酶弱阳性，麦康凯不生长，需X+V因子，最可能是（）A.流感嗜血杆菌 B.副流感嗜血杆菌 C.杜克雷嗜血杆菌 D.埃及嗜血杆菌答案：A二、配伍选择题（每题1分，共10分。每组试题共用五个备选答案，每题一个最佳答案，备选答案可重复选用）A.头孢他啶阿维巴坦 B.替加环素 C.多黏菌素B D.磷霉素 E.美罗培南法硼巴坦31.对KPC型碳青霉烯酶活性最佳的抑制剂组合是（）答案：E32.常用于XDRAB感染，剂量需按理想体重调整且需监测肾功能的药物是（）答案：C33.对NDM1金属酶仍保持活性的药物是（）答案：B34.口服用于轻症ESBLE尿路感染的药物是（）答案：D35.对OXA48型碳青霉烯酶活性最佳的抑制剂组合是（）答案：AA.疱肉培养基 B.卡那霉素万古霉素溶血琼脂 C.苯乙醇血琼脂 D.布鲁菌血琼脂 E.硫乙醇酸盐肉汤36.用于分离厌氧革兰阴性杆菌的选择培养基是（）答案：B37.用于观察黑色分泌物中“硫磺颗粒”放线菌的培养基是（）答案：A38.用于分离诺卡菌属需添加抗生素的培养基是（）答案：D39.用于厌氧菌增菌的非选择性液体培养基是（）答案：E40.可抑制大部分兼性厌氧菌、保持厌氧菌活性的培养基是（）答案：C三、填空题（每空1分，共20分）41.结核分枝杆菌GeneXpertMTB/RIF检测靶基因为________，同时可检测________耐药。答案：rpoB，利福平42.真菌1,3βD葡聚糖检测正常参考值＜________pg/mL，连续________次阳性可临床诊断侵袭性真菌感染。答案：80，243.细菌产超广谱β内酰胺酶（ESBL）确证试验中，头孢他啶/克拉维辛抑菌圈直径比单药≥________mm判为阳性。答案：544.根据CLSIM100，万古霉素对金黄色葡萄球菌MIC≥________μg/mL即判定为耐药。答案：1645.诺如病毒基因组为单股正链________，其________蛋白是主要衣壳蛋白。答案：RNA，VP146.高压蒸汽灭菌132℃预真空程序下，生物指示剂嗜热脂肪地芽孢杆菌孢子灭活时间≤________分钟。答案：447.鹦鹉热衣原体细胞培养需离心吸附________g×1h，培养温度________℃。答案：900，3548.产气荚膜梭菌在牛奶培养基中汹涌发酵现象由________毒素引起，该毒素为________酶。答案：α，卵磷脂49.真菌药敏试验中，曲霉属孵育温度________℃，时间________小时。答案：35，48–7250.病毒空斑试验常用染色剂为________，空斑形成单位英文缩写为________。答案：中性红，PFU四、名词解释（每题3分，共15分）51.碳青霉烯酶答案：指能水解碳青霉烯类抗生素的β内酰胺酶，按Ambler分类包括A类（KPC、GES）、B类金属酶（NDM、IMP、VIM）及D类（OXA48like），导致肠杆菌目及铜绿假单胞菌等对碳青霉烯耐药，需用CarbaNP、mCIM等表型或分子方法确证。52.生物指示剂答案：将已知数量高耐受性微生物（如嗜热脂肪地芽孢杆菌孢子）置于特定载体，经灭菌程序后培养，以灭菌后无生长视为灭菌合格，是验证高压蒸汽、环氧乙烷等灭菌过程的金标准。53.前噬菌体答案：温和噬菌体基因组整合至宿主菌染色体中的状态，可随宿主复制而垂直传递，在诱导因素（紫外线、丝裂霉素C）作用下进入裂解周期，产生子代噬菌体并导致宿主裂解，与细菌毒力基因（如白喉毒素基因）水平转移相关。54.侵袭性真菌病答案：真菌突破皮肤黏膜屏障进入无菌组织或血流，引起深部感染，常发生于免疫抑制宿主，诊断需结合宿主因素、临床特征、微生物学及组织病理（组织内真菌侵袭证据），如侵袭性曲霉病、隐球菌病等。55.卫星现象答案：流感嗜血杆菌在血平板上靠近金黄色葡萄球菌划线处菌落增大，因葡萄球菌合成V因子（NAD）扩散，供流感嗜血杆菌生长，用于鉴定需X、V因子的嗜血杆菌属。五、简答题（每题5分，共25分）56.简述血培养报阳后一级处理流程。答案：①立即涂片革兰染色，显微镜下观察形态、排列、染色性；②根据染色结果发出一级口头报告，指导临床初始用药；③同时转种血琼脂、巧克力琼脂、麦康凯琼脂，置CO₂及厌氧环境；④如有细菌生长迹象，做快速药敏（如头孢西丁、苯唑西林、万古霉素梯度扩散）；⑤若疑酵母菌，做快速念珠菌显色或MALDITOF；⑥记录报阳时间、瓶数、染色结果并通知临床。57.列举并解释三种ESBL表型确证试验原理。答案：①双纸片协同试验：头孢他啶与头孢他啶/克拉维辛纸片间距20mm，若复合纸片抑菌圈直径≥5mm大于单药，提示克拉维辛抑制ESBL；②EtestESBL条：含头孢他啶梯度与头孢他啶/克拉维辛梯度，MIC比值≥8判阳性；③自动化系统：Vitek2ASTN334卡含头孢他啶±克拉维辛，软件算法判定MIC降低≥3倍稀释度为ESBL阳性。58.简述艰难梭菌感染实验室诊断三步策略。答案：①筛查试验：谷氨酸脱氢酶（GDH）EIA，阴性可排除；②毒素确证：细胞毒性试验或毒素A/BEIA，阳性即诊断；③discrepant结果：GDH阳性而毒素阴性时，用核酸扩增（tcdB或tcdC缺失）确证产毒株，避免过度诊断。59.说明真菌G试验与GM试验区别及临床意义。答案：G试验检测1,3βD葡聚糖，存在于念珠菌、曲霉、肺孢子菌等细胞壁，可提示侵袭性真菌感染，但接合菌、隐球菌阴性；GM试验检测曲霉半乳甘露聚糖，主要用于血液系统恶性肿瘤患者侵袭性曲霉病早期筛查，血清≥0.5或BALF≥1.0为阳性，可受哌拉西林/他唑巴坦、肠内营养假阳性影响。60.概述COVID19合并毛霉病实验室快速识别要点。答案：①鼻咽拭子或鼻窦坏死组织KOH湿片见宽大无隔菌丝，90°分枝；②组织病理HE染色见血管侵袭性坏死，GMS染色更清晰；③MALDITOF或mNGS快速鉴定至属；④立即通知临床，因需高剂量两性霉素B及外科清创，延误死亡率极高。六、案例分析题（每题10分，共30分）61.患者男，68岁，糖尿病足溃疡，分泌物恶臭。培养48h后血平板出现双溶血环、革兰阳性粗大杆菌、卵磷脂酶阳性、Nagler试验阳性。（1）最可能病原？（2分）（2）写出两项确证试验。（4分）（3）首选抗菌药物及剂量？（2分）（4）如何报告实验室安全等级？（2分）答案：（1）产气荚膜梭菌；（2）反向CAMP试验阳性、lecithinase抑制试验（抗毒素中和）；（3）青霉素G4MUq6hIV或哌拉西林/他唑巴坦4.5gq6h；（4）本菌为Class2，可在BSL2操作，但产大量毒素，建议生物安全柜内处理，废弃物高压灭菌。62.新生儿，出生48h，发热、呼吸急促，血培养报阳，涂片革兰阳性小杆菌，触酶阳性，CAMP试验阳性，胆汁七叶苷阳性，马尿酸水解阳性。（1）鉴定结果？（2分）（2）写出两种快速分子鉴定靶基因。（2分）（3）该菌对氨苄西林MIC≥32μg/mL，可能耐药机制？（3分）（4）临床如何调整经验用药？（3分）答案：（1）单核细胞增生李斯特菌；（2）hly、prfA；（3）与青霉素结合蛋白PBP3突变及β内酰胺酶无关，主要为PBP亲和力降低；（4）停用头孢类，改用高剂量氨苄西林+庆大霉素或复方磺胺甲噁唑，疗程14–21天。63.女，45岁，急性白血病化疗后粒缺发热，胸部CT示右肺上叶晕轮征。BALF培养2天，沙氏琼脂35℃长出白色绒毛样菌落，正面雪白，背面亮黄，乳酸酚棉蓝镜检见45°分枝分隔菌丝，顶端球形顶囊，上半覆放射状小梗。（1）病原体？（2分）（2）写出两项药敏必测药物。（2分）（3）若MIC：伏立康唑0.25μg/mL、两性霉素B2μg/mL、卡泊芬净8μg/mL，如何解读？（3分）（4）实验室如何发出分级报告？（3分）答案：（1）烟曲霉复合群；（2）伏立康唑、两性霉素B；（3）伏立康唑敏感，两性霉素B中介，卡泊芬净耐药，提示首选伏立康唑；（4）一级口头报告“曲霉属生长”；二级报告“烟曲霉复合群，伏立康唑敏感”；三级报告完整MIC及临床建议。七、论述题（每题15分，共30分）64.结合最新CLSIM100与EUCAST2024文件，论述碳青霉烯耐药革兰阴性菌（CRE/CRAB/CRPA）实验室检测策略、结果解释及临床沟通要点，要求涵盖表型、基因型、报告格式、感染控制提示，字数≥600字。答案：碳青霉烯耐药肠杆菌目（CRE）定义依据CLSI为对厄他培南或美罗培南或亚胺培南MIC≥2μg/mL，或产碳青霉烯酶；EUCAST则采用MIC断点≥8μg/mL。实验室应建立分级检测：①筛查：对所有血培养分离株、ICU患者株用厄他培南纸片（10μg）或自动化MIC，若抑菌圈≤21mm或MIC≥0.25μg/mL（厄他培南）进入确证；②表型确证：CarbaNP试验检测A、B、D类酶，B类金属酶用EDTA协同试验，mCIM用于肠杆菌；③基因型：采用多重实时PCR（XpertCarbaR、FilmArrayPneumoniaplus）检测bla_KPC、bla_NDM、bla_IMP、bla_VIM、bla_OXA48like，30min出结果；④测序：对阳性株进行全基因组测序，确认突变位点及ST型，用于院感溯源。结果解释：报告需注明“产碳青霉烯酶”，并列出酶型，因不同酶对应药物选择差异大——KPC、OXA48对头孢他啶阿维巴坦敏感；NDM对氨曲南阿维巴坦、头孢地尔敏感；金属酶对阿维巴坦无效。报告格式：一级口头“CRE，产KPC”；二级书面“肺炎克雷伯菌，产KPC2，对头孢他啶阿维巴坦敏感，对美罗培南耐药”；三级附注释“建议联合替加环素或多黏菌素，咨询感染科”。临床沟通：立即电话通知ICU、感控科，启动接触隔离，记录菌株ST11，提示高爆发风险；建议床旁隔离、专用听诊器、终末消毒用次氯酸1000ppm；同时提醒碳青霉烯酶基因可通过IncFII质粒水平转移，需筛查同病房患者直肠拭子。对CRAB（鲍曼不动杆菌）采用OXA23/24PCR+CLSI断点≥8μg/mL，报告“耐碳青霉烯类，仅对替加环素、舒巴坦敏感”，提示舒巴坦剂量增至9g/d。对CRPA（铜绿假单胞菌）强调金属酶VIM、IMP，报告“对美罗培南法硼巴坦敏感”，但需警惕耐药进化。实验室每季度向抗菌药物管理小组提交CRE菌株分布图，协助制定院感SOP，实现“同菌同策”闭环管理。65.试从检验前、中、后三个阶段，系统分析临床微生物标本质量影响因素，并提出基于ISO15189与WHO2023指南的改进方案，要求结合实例、数据、流程图描述，字数≥600字。答案：检验前阶段占错误总量62%（WHO2023）。影响因素：①采集时机：抗菌药物使用后血培养阳性率下降40%，需建立“用药前2小时内采集”提醒；②采集量：成人每瓶8–10mL，<5mL阳性率降50%，采