水果和蔬菜中种农药多残留测定方法

水果和蔬菜中101种农药多残留测定方法

—气相色谱-质谱法1.前言

由于色谱仪仅靠物质的保留时间进行定性分析，并不能得到分子结构的信息；当样品复杂时，许多组份之间的保留时间只差数秒，甚至重合，就很难判定目标化合物了。

即使分析者用两根色谱柱进一步确认分析对象，“其分析结果对于确认目标化合物的确认能力也是有限”。

2.

GC/MS联用技术可以在色谱峰不完全分离的情况下，用质量色谱法和选择离子检测，对其中的化合物分别定量；

GC/MS联用技术定量分析的特点是先定性，后定量，因而避免假阳性检出。目前，国际上要求检测的多种农药，其中很大部分可用气质联机检测。

3.

我中心在查阅国外大量相关文献的基础上，引进国外GC-MS农药多残留快速检测技术，根据我国国情做了相应改进，建立了一套适合我国国情的蔬菜和水果中GC-MS农药多残留快速检测技术。该技术建立了一种使用GC-MS，通过一次提取、两次进样完成蔬菜和水果中101种农药的定性和定量的快速检测方法。4.1适用范围本方法适用于常见蔬菜和水果中（苹果，西红柿，白菜，油菜，胡萝卜，卷心菜，茄子，菠菜，尖椒和韭菜）101种农药残留量的测定。

本方法的最低检出限为0.0010mg/kg-0.3488mg/kg（参见附录A）。

5.2原理试样用丙酮和二氯甲烷（4：3）的混合溶液匀浆提取，无水硫酸钠干燥后，经凝胶色谱和固相萃取柱净化，用丙酮+乙酸乙酯（1：1）洗脱农药，采用气相色谱-质谱联用仪检测。

6.3试剂与材料3.1环己烷，色谱纯；3.2丙酮；3.3二氯甲烷；3.4石油醚；3.5乙酸乙酯，色谱纯；3.6无水NaSO4：450℃烘4h；3.7NaCl：140℃烘4h；3.8内标化合物：Chrysene；3.9固相萃取柱：Enxi-Carb活性炭柱，6mL,0.5g或相当柱；3.11农药标准品共101种，纯度≥96%。

除非另有说明，在分析中仅使用确认的分析纯试剂和GB/T6682中规定的至少三级的水。

7.3.12农药标准溶液配制

单一农药标准溶液：准确称取一定量农药标准品，用溶剂(丙酮、正己烷和甲醇）稀释，逐一配制成1000mg/L或2500mg/L的单一农药标准储备液，贮存在-18℃以下冰箱中。

农药混合标准溶液：逐一吸取一定体积的单个农药储备液分别注入同一容量瓶中，用溶剂(正己烷）稀释至刻度配置成同一浓度（10mg/L)的农药混合标准储备液。使用前用溶剂(环己烷)稀释成所需浓度的标准工作液（1mg/L)。

8.4仪器4.1气相色谱—质谱联用仪：配有电子轰击源（EI）；

HP6890N/5973GC-MS，配有四极杆质量分析器和自动进样器，载气流量或压力控制，工作站及数据处理软件。4.2凝胶色谱仪：色谱柱，17×250mm；填料，SX-3，15g；流动相，环己烷/乙酸乙酯（1:1，V/V）；定量环，2mL。4.3天

平：Sartorius分析天平（精确度0.0001g）；4.3匀浆机：IKA-WERKE；4.4旋转蒸发仪。9.5试样的制备与保存

5.1试样的制备

取不少于1000g蔬菜水果样品，取可食部分，用干净纱布轻轻擦去样品表面的附着物，采用对角线分割法取对角部分，将其切碎，充分混匀后放入食品加工器粉碎，制成待测试样，密封，标明标记。5.2试样的保存

将试样冷冻保存。10.6测定步骤6.1提取6.2净化6.3浓缩6.4测定6.5平行试验6.6空白试验11.7结果计算（1）由工作站按内标法自动计算；（2）试样中被测农药残留量以质量分数ω计，数值以毫克每千克（mg/kg）表示，按以下公式计算：

V1

A

V3ω=

SV2

AS

m

S——标准溶液中农药的含量，mg/L；

A——试样中被测农药的峰面积；AS——农药标准溶液中被测农药的峰面积；V1——提取溶剂总体积；V2——吸取出用于检测的提取溶液的体积；V3——试样定容体积；m——试样的质量。

12.8精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的15%。

13.9准确度在添加浓度在0.05mg/kg-0.5mg/kg范围内，大多数化合物的平均回收率>70%，相对标准偏差<20%，完全满足多残留快速检测的要求。

14.大白菜中10种农药的添加回收率A组B组15.技术路线称样

6g氯化钠+140mL丙酮:二氯甲烷匀浆提取取70mL上清夜无水硫酸钠干燥浓缩活性炭净化GC-MS浓缩GPC净化浓缩16.谢谢！17.6.1提取称取20克试样+氯化钠6克+4：3的丙酮和二氯甲烷140毫升

匀浆提取一分钟

静置后，将上清液倾倒在装有20克无水硫酸纳的锥型瓶中，干燥30分钟（每隔5分钟摇晃一次）

准确量取提取液70ｍＬ，过装有无水硫酸钠的玻璃漏斗

用二氯甲烷淋洗无水硫酸钠近无色，合并淋洗液于圆底烧瓶

将提取液浓缩近干（水浴温度≤38℃）

18.6.2净化

由于各种蔬菜的性质不同，干扰因素有很大的差别，因此不同的蔬菜要采取不同的净化方法。（1）对于色素含量较低的蔬菜（苹果、西红柿、大白菜等），经活性炭固相萃取柱净化。（2）对于色素含量较高的蔬菜（菠菜、韭菜等），先过凝胶色谱，再用活性炭固相萃取柱净化;19.6.2.1凝胶过滤将提取液浓缩后用环己烷定容到2.0mL上样用1：1的环己烷和乙酸乙酯淋洗进样6min后开始接收流出液，20min后（接收60mL）停止接收将流出液浓缩近干，准备过活性炭小柱

流速3.0mL/min20.6.2.2固相萃取21.6.3浓缩

用旋转蒸发仪将洗脱液浓缩至〈0.5mL，添加内标（进样浓度1μg/ｍＬ）并用环己烷定容到0.5mL（在ＫＤ瓶中），混匀，用于GC-MS测定。

22.6.4测定6.4.1仪器条件6.4.2定性测定6.4.3定量测定23.6.5平行试验

除不称取试样外，均按以上步骤进行。6.6空白试验

按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。24.6.4.1仪器条件a)色谱柱:HP-5MS柱，30m×0.25mm×0.25μm；b)色谱柱温度程序:60℃（保持2min）15℃/min

150℃

6℃/min280℃（15.33min）；c)载气：氦气，纯度≥99.999%，流速为1mL/min。25.d)进样口温度：260℃；e)进样方式：不分流进样，由自动进样器进样；f)进样量：1μL；6.4.1仪器条件26.g)离子源温度:230℃；h)分析器温度:150℃；i)GC-MS接口温度:280℃；j)电子轰击源:70eV;6.4.1仪器条件27.k)扫描方式：选择离子（SIM）。

6.4.1仪器条件

每种化合物分别选择1个定量离子，2个-

3个定性离子。根据保留时间将101种农药分成两组，每组所需检测的离子按照出峰顺序，分时段分别检测。溶剂延迟5min。每组化合物的保留时间、定性离子、定量离子参见附录B；

28.6.4.2定性测定保留时间保留时间误差小于0.02min；选择特征离子所选特征离子的相对丰度变化在规定范围内；质谱定性质谱图库检索匹配应在70%以上。

29.101种标样选择离子色谱图

30.苹果中101种农药选择离子色谱图31.西红柿中101种农药选择离子色谱图32.大白菜中101种农药选择离子色谱图33.6.4.3定量测定本方法采用内标法单离子定量测定，利用选择特征离子进行定量分析；内标物为Chrysene；注：标准溶液的浓度应与待测化合物的浓度相近。基质效应强的试样，用空白基质提取液配制基质混合标准工作溶液。34.附录A101种农药中英文名称和方法检出限序号中文名称英文名称检出限/（mg/kg）1敌敌畏dichlorvos0.00462乙酰甲胺磷acephate0.02693速灭威mevinphos0.01054氧化乐果omethoate0.06615残杀威isocarb0.00826丙线磷ethoprophos0.00517二溴磷dibrom0.04818久效磷monocrotophos0.04679甲拌磷phorate0.001410氯硝胺dichloran0.011711西玛津simazin0.002812莠去津atrazine0.002513γ-6663-BHC0.005614特丁磷terbufos0.006915地虫磷fonofos0.005016二嗪磷diazinon0.013917乙拌磷disulfoton0.006918百菌清chlorthalonil0.001119抗蚜威pirimicarb0.004920除线磷diclofenthion0.040021乙烯菌核利vinclozolin0.001322甲基对硫磷methyl-parathion0.001123西维因carbaryl0.004224对氧磷paraoxon0.002225杀螟硫磷fenitrothion0.003526抑菌灵dichlofluanid0.003227艾氏剂aldrin0.002428毒死蜱chlorpyrifos0.037029三氯杀螨醇dicofol0.007130三唑酮triadimefon0.008931溴硫磷bromophos0.001132敌菌灵anilazine0.348833甲基硫环磷mephosfolan0.008334喹硫磷quinalphos0.008735乙基溴硫磷bromophos-ethyl0.001836α-硫丹Thiodan-10.008837丁草胺butachlor0.008538丙溴磷profenofos0.001439狄氏剂dieldrin0.004440b-硫丹

0.015335.附录A（续）序号

中文名称

英文名称

检出限/（mg/kg）

41PP-DDDpp'-ddd0.004742乙硫磷ethion0.002443伐灭磷famphur0.001544PP-DDTpp'-DDT0.008445亚胺硫磷phosmet0.005046苯硫磷EPN0.005247联苯菊酯Bifenthrin0.001648甲氰菊酯fenpropathrin0.015649伏杀磷phosalone0.005150乙基谷硫磷ethyl-azinphosmethyl0.023051二氯苯醚Cis-permethrin0.084752二氯苯醚trans-permethrin0.002253氟氯氰菊酯cyfluthrin-10.022254氟氯氰菊酯cyfluthrin-20.005855氟氯氰菊酯cyfluthrin-30.005756氟氯氰菊酯cyfluthrin-40.043057氰戊菊酯trans-fenvalerate0.019658氰戊菊酯cis-fenvalerate0.080259甲胺磷methamphetamine0.030460速灭磷mevinphos0.003861异丙威etrofolan0.004562仲丁威baycarb0.004063氯苯胺灵DOW-K-68820.013764百治磷dicrotophos0.013565治螟鳞sulfotep0.002466α-666a-BHC0.009267六氯苯hexachlorobenzene0.004768乐果dimethoate0.014569克百威carbofuran0.001970β-666b-BHC0.005571五氯硝基苯quintozene0.002472巴胺磷propetamphos0.012273磷胺-1phosphamidon-10.023374δ-6664-BHC0.011175敌稗propanil0.009976磷胺-2phosphamidon-20.009777甲基毒死蜱chlorpyriphos-methyl0.001736.附录A（续）序号

中文名称

英文名称

检出限/（mg/kg）

783-羟基克百威3-hydrxycabofuran0.065579七氯heptachlor0.003080皮蝇磷fenchlorophos0.003981甲基嘧啶磷pirimiphos-methyl0.048082马拉硫磷malathion0.008983倍硫磷fenthion0.001884对硫磷parathion0.001485毒壤磷trichloronate0.002686嘧啶硫磷pirimiphos0.003087硫环磷phosfolan0.005288异柳磷isophenphos0.019289杀扑磷methidathion0.009190OP-DDEop.-DDE0.011091杀虫畏tetrachlorvinphos0.001492灭菌磷plondrel0.001893PP-DDEpp'-DDE0.002694OP-DDDop'-DDD0.001095异狄氏剂endrin0.006396乙酯杀螨醇chlorobenzilate0.007397OP-DDTop'-DDT0.001198三唑磷Hostathion0.006599克瘟散ediphenphos0.0056100异菌脲iprodione0.0023101胺菊酯Tetramethrin-10.0186102胺菊酯Tetramethrin-20.0025103谷硫磷Azinphosmethyl0.0103104三氟氯氰菊酯lambda-cyhalothrin0.0114105定菌磷pyrazophos0.0105106蝇毒磷coumaphos0.0065107氯氰菊酯cypermethrin-10.0246108氯氰菊酯cypermethrin-20.0228109氯氰菊酯cypermethrin-30.0221110氯氰菊酯cypermethrin-40.0429111氟胺氰菊酯fluvalinate-10.0048112氟胺氰菊酯fluvalinate-20.0137113溴氰菊酯deltamethrin-10.0165114溴氰菊酯deltamethrin-20.018337.附录B101种农药和内标化合物的保留时间

、

定量离子

、

定性离子编号药名保留时间定量离子定性离子1定性离子2定性离子31敌敌畏8.08218510914502乙酰甲胺磷10.0641369418303速灭威10.414108797704氧化乐果12.11815611014105残杀威12.431110152006丙线磷12.7451581392002427二溴磷13.1185145109

8久效磷13.437164127192

9甲拌磷13.6142602311219710氯硝胺14.0620617612416011西玛津14.254201186173012莠去津14.408200215173013γ-66614.665183181221014特丁磷14.837231153288

15地虫磷14.922246137109

16二嗪磷15.203304179137017乙拌磷15.311274186142018百菌清15.505266268231019抗蚜威15.96316623872

20除线磷16.288279251223021乙烯菌核利16.557285212198022甲基对硫磷16.557263125109.1023西维因16.7144115116024对氧磷16.957275149247025杀螟硫磷17.385277260125026抑菌灵17.614224167226027艾氏剂17.75726329332933128毒死蜱18.031314286258029三氯杀螨醇18.065139250141

38.附录

B

（续）编号药名保留时间定量离子定性离子1定性离子2定性离子330三唑酮18.391208181293

31溴硫磷18.534331329125032敌菌灵19.008239241178

33甲基硫环磷19.225196168140034喹硫磷19.34146157298035乙基溴硫磷19.825359331303036α-硫丹20.04333934126524137丁草胺20.19117616018823738丙溴磷20.7339374297039狄氏剂20.808345263277040b-硫丹21.73233934126524141PP-DDD22.026235165237042乙硫磷22.22231153384043伐灭磷22.79218125217044PP-DDT23.123235165199045亚胺硫磷24.5281601331610

内标物24.568228

46苯硫磷24.66157169323047联苯菊酯24.774181166165048甲氰菊酯24.946181265349049伏杀磷25.688367182154050乙基谷硫磷26.711160132105051二氯苯醚27.488183163184052二氯苯醚27.706183163184053氟氯氰菊酯28.46226206199054氟氯氰菊酯28.62226206199

55氟氯氰菊酯28.746226199206056氟氯氰菊酯28.797226199206057氰戊菊酯30.443225167419058氰戊菊酯30.814225167419039.编号药名保留时间定量离子定性离子1定性离子2定性离子359甲胺磷7.86514194126060速灭磷10.048192164127061异丙威11.42512113691062仲丁威12.38121150107063氯苯胺灵12.957213171154064百治磷13.277127193237065治螟鳞13.494322294266066α-66613.734219181183067六氯苯13.94284286282068乐果14.12287125229069克百威14.323164149131070β-66614.494219217254071五氯硝基苯14.86295265237072巴胺磷14.81236194138073磷胺-115.254264127193074δ-66615.357219183181075敌稗16.254161163217076磷胺-216.334264127193077甲基毒死蜱16.5512861252880783-羟基克百威16.6137180151079七氯16.751272337237080皮蝇磷16.985285125109081甲基嘧啶磷17.465290305276082马拉硫磷17