2025年生物化学实验技巧与结果分析指南

南方田科士考

生物化学试验汇报

姓名：

学号：

专业年级：级临床医学（妇幼保健）

组别：第四试验室

生物化学与分子生物学试验教学中心

试验室规则

1.试验前应认真预习试脸指导，明确试脸目的和规定，写出预试验汇报。

2.进入试验室必须穿白大衣。严格遵守试脸课纪律，不得无端迟到或早退。

不得高声说话。严禁拿试验器具开玩笑。试验室内严禁吸烟、用餐。

3.严格按操作规程进行试验。试验过程中自己不能处理或决定的问题，切

勿盲目处理，应及时请教指导老师。

4.严格按操作规程使用仪器，凡不熟悉操作措施的仪器不得随意动用，对

宝贵的精密仪器必须先熟知使用措施，才能开始使用；仪器发生故障，应立即关

闭电源并汇报老师，不得私自拆修。

5.取用试剂时必须“随开随盖”，“盖随瓶走”，即用毕立即盖好放回原处，

切忌“张冠李戴"，防止污染。

6.爱惜公物，节省水、电、试剂，遵守损坏仪器汇报、登记、赔偿制度。

7.注意水、电、试剂的使用安全。使用易燃易爆物品时应远离火源。用试

管加热时，管口不准对人。严防强酸强碱及有毒物质吸入口内或溅到他人身上。

任何时候不得将强酸、强碱、高温、有毒物质抛洒在试脸台上。

8.废纸及其他固体废物严禁倒入水槽，应倒到垃圾桶内。废弃液体如为强

酸强碱，必须事先用水稀释，方可倒入水槽内，并放水冲走。

9.以实事求是的科学态度如实记录试验成果，仔细分析，做出客观结论。

试脸失败，须认真查找原因，而不能任意涂改试验成果。试验完毕，认真书写试

验汇报，准时上交。

1().试验完毕，个人应将试剂、仪器器材摆放整洁，用过的玻璃器皿应刷洗

洁净归置好，方可离开试脸室。值日生则要认真负责整个试脸室的清洁和整顿，

保持试脸整洁卫生。离开试脸室前检查电源、水源和门窗6勺安全等，并严格执行

值日生登记制度。

二、试验汇报的基本规定

试验汇报通过度析总结试脸的成果和问题，加深对有关理论和技术的理解与

掌握，提高分析、综合、概括问题的能力，同步也是学习撰写研究论文的过程。

1.试脸汇报应当在专用的生化试验汇报本上、按上述格式规定书写。

2.试验汇报的前三部分①试验原理、②试验材料(包括试验样品、重要试

剂、重要仪器与器材)、③试验环节(包括试验流程与操作环节)规定在试脸课

前预习后撰写，作为试验预习汇报的内容。预习时也要考虑并设计好对应试脸记

录的表格。

3.每项内容的基本规定

(1)试验原理：埼要扼要地写出试验的原理，波及化学反应时用化学反应

方程式表达。

(2)试脸材料：应包括多种来源的生物样品及试剂和重要仪器。阐明化学

试剂时要防止使用未被普遍接受的商品名和俗名。试剂要标清所用的浓度。

(3)试验环节：描述要简洁，不能照抄试验讲义，可以采用工艺流程图的

方式或自行设计的表格来表达，但对试脸条件和操作的关键环节应写清晰，以便

他人反复。

(4)试验记录：包括重要试脸条件、试验中观测到的现象及试验中的原必

数据。

(5)成果(定量试验包括计算)：应把所得的试验成果(如观测现象)和数

据进行整顿、归纳、分析、对比，尽量用图表的形式概括试验的成果，如试脸组

与对照组试脸成果的比较表等(有时对试脸成果还可附以必要的阐明)。

(6)讨论：不应是试脸成果的重述，而是以成果为基础的逻辑推论。如对

定性试脸，在分析试脸成果6勺基础上应有中肯的结论。还可以包括有关试验措施、

操作技术和有关试验的某些问题，对试验异常成果的分析和评论，对于试脸设计

的认识、体会和提议，对试验课的改善意见等。

(7)结论：一般试脸要有结论，结论要简朴扼要，阐明本次试验所获得的

成果。

三、试验汇报的评分原则（百分制）

1.试验预习汇报内容（30分）

学生进入试脸室前应预习试脸，并书写预习汇报。试验预习汇报应包括如下三部分：①试脸

原理（10分）：规定以自己的语言归纳要点；②试脸材料（5分）：包括样品、试剂及仪器。只列出

重要仪器、试剂（常规材料不列）；③试验措施（15分）：包括流程或路线、操作环节，要以流程图、

表格式给出要点，简要扼要。根据各部分内容与否完整、清•晰、简要等，分如下三个等级洽分。

优秀合格不合格

30-252478分17~0分

优秀：项目完整，能反应试脸者的加工、整顿、提炼。

合格：较完整，有一定整顿，但不够精炼。

不合格：不完整、块项，大段文字，完全照抄教材，记流水账。

试脸预习汇报不合格者，不容许进行试有。该试脸应重新预约，待试监室安排时间后方可进行

试验。

2.试验记录内容（20分）

试验记录是试验教学、科学研究的重要环节之一，必须培养严谨的科学作风。

试验记录的重要内容包括如下三方面：①重要试验条件（如材料的来源、质量；试剂的规格、

用量、浓度：试验时间、操作要点中的技巧、失误筝，以便总结试舱时进行查对和作为查找成败原

因的参照根据）；②试验中观测到的现象（如加入试剂后溶液颜色的变化）；③原始试脸数据：设计

试脸数据表格（注意三线表格式），精确记录试验中测得的原始数据。记录测量值时，要根据仪器的

精确度精确记录有效数字（如吸光值为0.050,不应写成0.05）,注意有效数字的位数。

试验记录应在试验过程中书写；应当用钢笔或者圆珠笔记录，不能用铅笔。记录不可擦抹和涂

改，写错时可以精确划去重记。记录数据时请教师审核并签名。

试验记录分如下三个等级给分。

优秀合格不合格

20~1716~13分12~0分

优秀：如实详细地记录了试脸条件、试脸中观测到的现象、成果及试验中的原始数据（如三次

测定的吸光度值）等；试脸记录取钢笔,或者圆珠笔,记录，没有抹擦和涂改迹象。书写精确，表格规

范（三线表）。有教师的签字审核。

合格：记录了重要试验条件，但不详细、凌乱；试脸中观测到的现象不细致；原始数据无涂改

迹象，但不规范。有教师的签字审核。

不合格：记录不完整，有遗漏；原始数据有抹擦和涂改迹象、捏造数据（以。分计）；图、表格

形式错误：用铅笔,记录原始数据：无教师的签字审核。

若记录的成果有怀疑、遗漏、丢失，必须重做试验，培养严谨的科学作风。

3.成果与讨论（45分）

（1）数据处理（5分）

对试验中所测得的一系列数值.要选择合适的处理措施进行整顿和分析。数据处理时,要根据

计算公式对的书写中间计算过程或推导过程及成果，得出最终试验成果。要注意有效数字的位数、

单位（国际单位制）。通过记录处理的数据要以X±SD表达。可提成如下三个等级给分。

优秀合格不合格

5分4分3~0分

优秀：处理措施合理，中间过程清晰，数据格式单位规范。

合格：处理措施较合理，有中间计算过程；数据格式单位较规范。

不合格：处理措施不妥：无中间过程；有效数字的位数、单位不规范。

（2）成果（20分）

试脸成果部分应把所观测到的现象和处理的最终数据进行归纳、分析、比对，以列表法或作图

法来表达。同步对成果还可附以必要的阐明。

要注意图表的规范：表格要有编号、标题；表格中数据要有单位（一般列在每一列顶端的第一

行或每一行左端的第一列）。图也要有编号、标题，标注在图的下方；直角坐标图的纵轴和横轴要标

出方向、名称、单位和长度单位：电泳图谱和层析图谱等要标明正、负极方向及分离出的区带、色

带或色斑的组分或成分。电泳成果还要标识泳道，并在图题下给出泳道的注释：要标出分子量原则

的各条带的大小。并且注意需要结合图表对成果进行较详细的解释阐明。

可提成如下三个等级给分。

优秀合格不合格

20-1716~13分12〜。分

优秀：试验成果有归纳、解释阐明，成果精确，格式规范。

合格：堆砌试脸现象、数据，解释阐明少。

不合格：最终试脸成果错误且无解释阐明，图表、数字不规范。

（3）讨论（20分）

讨论应围绕试脸成果进行，不是试脸成果的重述，而是以试脸成果为基础的逻辑推论，基本内

容包括：①用已经有的专业知识理论对试验成果进行讨论，从理论上对试脸成果的多种资料、数据、

现象等进行综合分析、解释，阐明试脸成果，重点论述试验中出现的一般规律与特殊性规律之间的

关系；②试脸成果提醒了哪些新问题，指出成果与结论的理论意义及其大小；③对实践的指导与应

用价值；④试脸中碰到的问题、差错和教训，与预想不一致的原因，有何待处理的措施，提出在此

后的试验中需要注意和改善的地方；⑤试脸目的与否到达。

同步能结合查阅的其他文献等资料进行讨论，有独到的见解。在试脸成果和理论分析的基础上,

通过推理，归纳规律得出结论。结论要严谨、精炼，体现要精确，与试验目的呼应。也分三个等级

给分。

优秀合格不合格

20-1716-13分12~0分

优秀：分析试脸成果的问题与经脸：分析试脸设计的优劣：能提出试脸技术、措施的改善意见:

能结合自己查阅的其他资料来讨论，有自己独到的见解；有结论。

合格：仅针对试脸成果进行讨论，有一定自己的见解。

不合格：将讨论写成注意事项分析或回答思索题等，与试睑成果无关。

4.格式与版面（5分）

按照试脸汇报的书写格式、版面与否整洁、工整，分三个等级给分。

优秀合格不合格

5分4分3~。分

优秀：试验汇报字体工整，版面整洁。

合格：试验汇报字体较工整，版面较整洁。

不合格：试脸汇报字体潦草，版面凌乱。

5.加分（5~10分）:

以全英文书写试脸汇报视状况加5~10分。

IntroductiontoBiochemistryExperiment

Biochemistryexperimentisaprcclinicalcurriculumofomni-spccialticsinbiomedicineand

anexperimentalcurriculumforgoingwithbiochemistryteaching.Ilstaskistohelpsludents

tounderstandandmasterthebasictechnicalprinciplesandmethodsinbiochemistry,to

possesstheabilitiesofanalyzingproblemsandworkingoutsolutionsindependently.By

learningthiscuniculum,thestudentsshouldunderstandthebasicexperimentalprinciplesof

spectrophotometry,chromatography,electrophoresisandcentrifuge,etal.,masterthebasic

technicalskillscommonlyusedwiththeseprinciplesandpossesstheabilitiestoapplythe

skillssystematicallyandtooptimizetheexperimentconditions.Thegoalofbiochemistry

experimentistomakethestudentsstrengthentheirgraspofthebiochemistrytheoriesandto

integratewhattheyhavelearnedwithscientificresearchandclinicalapplication.

Thereare9experimentsthatrepresentmostimportantareasofbiochemistryincluding

characterizationofproteinsandnucleicacidbyelectrophoresisandspectroscopicor

chromatographicanalysis.Theseexperimentsareessentialforatypicalone-semestercourse

andaretoberevisedandupdatedwhennecessary.Newexperimentswillbeaddedtothis

listinthefuturetocovermoretopicsofbiochemistryandtoreflectthemanyadvancesin

biochemistry.

BiochemistryLaboratoryRules

1.Pre-LaboratoryPreparation

AllstudentsmustprepareBEFOREARRIVINGINTHELABORATORY.The

experimentsaredesignedsothattheycanbecarriedout-withproperadvanceplanning-

withinthefour-hourlaboratoryperiods.Itisexpectedthatstudentsshouldhavea

fundamentalunderstandingofthetheoryandpracticespertainingtotheexperimentbefore

enteringthelaboratorytoconducttheseexperiments.

Biochemicalexperimentsoftenemploytoxicchemicals.Forthehealthandsafetyof

allstudents,theexperimentalprotocolsmustbestudiedandtheday'sactivitiesshouldbe

plannedinadvance.Ifitbecomesobviousthatastudentisill-prepared,heorshewill

notbepermittedlocontinuetheexperiment.

2.SafetyPrecautionsintheBiochemistryLaboratory

AllINJURIES,nomatterhowminor,shouldbereportedtotheinstructor

IMMEDIATELY.Ifyouhaveanyquestionsregardingthesafehandlingofany

biochemical,consultyourinstructor.

3.Strictlyfollowtheexperimentalprocedures.

Turntoinstructorsimmediatelyfbrhelponcethelaboratoryinstrumentsdon'twork.

DON'Ttrytofixthebreakdownbyyourself.Propercompensationfbrlossbecauseof

yourownfaultwillbedemanded.

4.DisposalofSolutions

Inmostcasesthesolutionsusedduringthelaboratorycanbedisposedofasdirectedby

laboratorypersonnelattheendoftheperiod.Anyvolatileorganicsolventsshouldbe

placedinthehoodasdirected.Laboratorypersonnelwillthendisposeofthesesolvents.

5.Solidtrashesincludingwastepapersareprohibitedtodiscardintothesink.

6.Alltheglasswareshouldbecleanedimmediatelyafteruse.Andailthereagentboules

andinstrumentsshouldbeplacedneatlyafteruse.

7.AnexpeiimentreportshouldbesubmittedtotheProfessorand/orTAsintime.

laboratoryReport

1.Althoughstudentswillworkinpairsforallexperiments,eachstudentmustturninan

individuallaboratoryreport,writtenbyhimselforherself.Thesereportsshouldbe

clearlywritteninink,typed,orprintedandbeclearandlegible.Ifmistakesaremade,

neatlycrossthemoutandenterthecorrectionsnearby.Reportsshouldbewritteninthe

thirdperson(c.g.,donotuse"I"or"we").STAPLEaTitlePagetothetopofthereport

andSTAPLEtheaccompanyinggraphs,tables,andlaboratorynotebooksheetstothe

back.Ifthereportisnotclearlypresented,theinstructormayreturnthereport

withoutgradingit.

2.Eachlaboratoryreportshouldconsistof:

a.TitlePage

Atitlepageforeachexperimentisrequiredandshouldstatethetitleofthe

experiment,thenameofthestudent,thedatesofthelaboratoryperiodscovered,the

namesofthelaboratorypartners,andthedatethatthelaboratoryreportisdue.

b.Objectives

Statementofthepointoftheexperiment-innomorethantwosentences.

c.Procedures

DONOTrecapitulatethelaboratoryprotocol.WriteinyouOWNwords.Aclear

flowchartoftheproceduresisrecommended.

d.Results

Thissectionshouldsummarizeyourobservationspresentedintheformofgraphs,

calculations,tables,etc.

e.Discussion

Evaluateyourdata.Explainwhatyouobservedandalsowhyyouthinkthedata

wereasobserved.Donotrestateprocedures!Listpossiblesitesoferror.

Wheneverpossibledemonstrateyourunderstandingofthetheorybehindthe

experiment.Supportyourresults(e.g.:“UsingthelinearportionoftheAbsorbance

vs.Concentrationgraphtocalculatetheslope,itwasdeterminedthat...")(Limitedto

onlyonepageperexperimentforexperimentsI-6andfourpagesforexperiment

7-9).

3.Ifanylaboratoryreportisnotcompletedandturnedinbytheendofthequarter,thestudent

maybereceiveanIncompleteforthecourseatthediscretionoftheinstructors;

altemativelya“zero"fbrthemissinglaboratoryreportwillberecordedandthefinalgrade

determinedaccordingly.

试验名称

(Titleof

Experimetn)血清Alb、Y-G测定

试验日期试验地点

第四试验室

(Dateof-12-09

（babNo.）

Experiment)

合作者沈倩文吴莉杨柳指导老师冯春琼

(Partner)(Instructor)

总分教师签名幌意*批改日期

买侬（）

(TotalScore)(Signature)Date0

【试脸汇报第一部分（预习汇报内容）：①试脸原理、②试脸材料（包括试验样品、重

要试剂、重要仪器与器材）、③试脸环节（包括试脸流程、操作环节和注意事项）；评分

（满分30分）：XX\

一、试验原理

不一样蛋白质的分子量、溶解度及在一定条件下的带电的状况均有所不一样。运用蛋白

质的这一特性，可以分离纯化多种蛋白质。

L盐析法。由于血清中多种蛋白质分子的颗粒大小、所带电荷的多少和亲水程度不一样,

故盐析所需的盐浓度也不一样样。因此调整盐的浓度可使不一样的蛋白质沉淀从而到达

分离的目的。如：血清清蛋白不溶于饱和硫酸钺溶液，而球蛋白不溶于半饱和硫酸镂溶

液，从而将清、球蛋白分离开。

2.脱盐。用盐析法分离而得到的蛋白质中具有大量的中性盐，会阻碍蛋白质的深入纯化。

本试验中我们采用葡聚糖凝胶（G-25）层析法。重要运用的是蛋白质与无机盐类之间的

分子量的差异。当溶液通过凝胶柱时，溶液中分子直径大的蛋白质不能进入凝胶颗粒的

网孔从而首先被洗脱出来；而无机盐分子直径小，能进入凝胶颗粒网孔中被阻滞而后洗

脱出来。

3.纯化（离子互换层析）离子互换层析是指流动相中的离子和固定相上的离子进行可逆

的互换，运用化合物的电荷性质及电荷量不一样进行分离。本试验采用的DEAE（二乙基

氨基乙基）纤维素是一种阴离子互换剂。溶液中带负电荷的离子可与其进行互换结合，

带正电的离子则不能，从而到达分离纯化的目的。

4..蛋白性质鉴定（沉淀法）。本试验采用的是磺基水杨酸检测蛋白质。由于蛋白质为两

性物质，在酸性环境中带正电荷，而磺基水杨酸根带负电，恰好与蛋白质结合沉淀，显

小液体中有蛋白存在O

5.纯度鉴定（电泳）。本试验采用的是醋酸纤维素薄膜电泳。血浆中多种蛋白质的等电

点不一样，一般都低于PH7.4。它们在pH8.6的缓冲液中均解离带负电荷，在电场中向

正极移动。由于血浆中多种蛋白质分子大小、形状及所带的电荷量不一样，因而在醋酸

纤维素薄膜上电泳的速度也不一样。因此可以将它们分离为清蛋白（Albumin）,al-球

蛋白、Q2-球蛋白、8-球蛋白、丫-球蛋白5条区带。

二、试验材料

1.样品。健康人血清

2.试剂。0.3mol/LpH6.5醋酸钱（NH,AC）缓冲液、0.06mol/LpH6.5NH4AC缓冲液、

0.02mol/LpH6.5NH"C缓冲液、1.5mol/LNaCl-0.3mol/LNH&AC溶液、饱和硫酸镂溶

液、l%BaC12溶液、20%磺基水杨酸

3.仪器及器材

电泳仪、电泳槽、离心机、微量加样枪、离心管、托盘天平、载玻片、盖玻片、醋酸纤

维素薄膜、滤纸、试管、点样板、滴管

三、试验环节

1.流程：粗提一脱盐—纯化-＞鉴定

2.操作环节

（1）取0.8ml血清于试管中，边摇边缓慢滴加饱和硫酸镀溶液0.8ml,混匀室温放置

lOmin,4000r/min离心lOmin

（2）取沉淀（含球蛋白）加0.6ml蒸储水溶解，过葡聚糖凝胶G-25层析柱。

（3）用1ml0.02mol/LNH4AC缓冲液清洗层析柱内壁,继续用0.02mol/LpH6.5NH4AC

缓冲液（2ml）洗脱，流出液量约2ml

（4）磺基水杨酸检测与否有蛋白质被洗脱，当有沉淀且后一滴洗脱液产生的沉淀明显

多于前一滴时，搜集具有较纯净球蛋白的峰液12d.

（5）此时磺基水杨酸和BaC12检测也许同步阳性，继续用0.02mol/LNH4AC缓冲液洗

涤约2mLBaC12检测S042-阴性,用2~3ml0.02mol/LNH4AC缓冲液再生平衡

（6）上清液（含清蛋白、少许a球蛋白和B球蛋白）约0.8ml,加入到环节（5）再生

的葡聚凝胶层析柱中，反复环节（3）-（5）

（7）除盐后搜集的球蛋白，过DEAE-纤维素层析柱。

（8）用1ml0.02mol/LN114AC缓冲液清洗层析柱内壁,继续用0.02mol/Lpl16.5NII4AC

缓冲液（3ml）洗脱，流出液量约2nli时，用磺基水杨酸检测与否有蛋白质生成

（9）当点滴板上有沉淀生成时，搜集具有球蛋白的洗脱液每管10d,持续搜集3管

（10）DEAE-纤维素柱不用再生，可直接用于纯化清蛋白

（11）除盐后搜集的清蛋白过DEAE-纤维素层析柱,用1ml0.06moi/LNH4AC缓冲液清

洗层析柱内壁,用约5mL0.06moi/LNH4AC缓冲液流洗,除去a球蛋白和B球蛋白

（12）用磺基水杨酸检测蛋白质呈阴性时，用0.3mol/LNH4AC缓冲液（约3ml）洗脱，流

出液量约2.5ml

（13）磺基水杨酸检测蛋白质呈阳性时，搜集具有清蛋白的洗脱液每管10d,持续搜集

2管

(14)DEAE-纤维素柱先用6ml1.5mol/LNaCl-0.3mol/LNH4AC溶液流洗,再用10ml

0.02mol/LN114AC缓冲液流洗再生