T-FPSHS 005-2024 血叶兰种苗繁育技术规程

T/FPSHS005-2024血叶兰种苗繁育技术规程TechniqueRegulationsforSeedlingPropagationofLudisiadiscolor(Ker-Gawl.)A.Rich.2024-02-05发布2024-02-06实施福建省园艺学会发布本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由福建省热带作物科学研究所提出，由福建省园艺学会归口。本文件起草单位：福建省热带作物科学研究所。本文件主要起草人：郑涛、蔡坤秀、林秀香、张天翔、杨俊杰、吴英详、黄成能、陈振东。2本文件规定了血叶兰（Ludisiadiscolor(Ker-Gawl.)A.Rich.）种苗繁育的相关技术，包括相关术语与定义、组培快繁技术、培养基配方等方面的主要技术指标和要求内容。本文件适用于血叶兰种苗繁育。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用用于本文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1血叶兰（L.discolor（Ker-Gawl.）A.Rich.）指兰科（Orchidaceae）血叶兰属（Ludisia）血叶兰（L.discolor（Ker-Gawl.）A.Rich.别名公3.2培养基（Medium）培养基是植物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及生长素和水等。3.3外植体（Explants）植物组织培养中作为离体培养材料的器官、组织或细胞。在继代培养时，将培养的组织切段移入新的培养基时，这种切段也称外植体。3.4污染（Contamination）培养基或培养材料生长有真菌或细菌等微生物的现象。3.5光照培养（Lightculture）有光照的培养。3.6暗培养（Darkculture）全天无光照的培养。指在组织培养过程中，最初建立的外植体无菌培养阶段。即无菌接种完成后，送入培养室的外植体在适宜的光、温、气等条件下被诱导成无菌短枝(或称茎梢)、不定芽(丛生芽)、胚状体或原球茎等中间繁殖体的过程。3.8增殖培养（Proliferationculture）离体芽苗、愈伤组织或悬浮培养细胞不断倍增的培养过程。3.9生根培养（Rootingculture）诱导无根离体芽苗产生根的培养过程。3.10组培苗（Tissuecultureseedling）通过植物组织培养产生的离体小植株。3.11炼苗（Acclimatization）将组培苗连培养容器一起移至室外近自然环境中培养，提高植株的木质化程度，增强植株对自然光照和温差变化适应能力的过程。3.12移栽（Transplant）将组培苗种植到苗圃，并使植株逐渐适应自然条件的过程。3.13基质（Substrate）组培苗种植中用来固定植株及贮存植物所需水分和养分的材料。4繁殖材料来源选择生长健壮、无病虫害的健康植株作为外植体。血叶兰种子直播发芽率极低、种子繁殖难度大，组培快繁技术是目前最有效的血叶兰繁育技5.1外植体的采集、消毒与接种5.1.1外植体的采集地上茎段在自然环境下连续3个以上的晴天午后进行采集，大棚种植需停止浇水3d以上的晴天上午十一点后进行采集，当天采集当天消毒接种。需长途运输时应使用保湿材料包扎，放入保温容器内加冰袋降温保鲜处理，或使用车载冰箱储藏保鲜。5.1.2外植体的处理4外植体用洗洁剂（如洗衣粉等）洗净，流水冲洗干净。在超净工作台上，将外植体切成5cm左右带芽茎段，先用75%乙醇消毒30s，再用0.1%HgCl2（加3～5滴0.08%～0.12%的吐温-80）消毒液浸泡8min～10min（期间轻轻震摇），用无菌水清洗3遍～5遍，备用。5.1.3外植体的接种将消毒后的外植体切割为带1个顶芽或腋芽的茎段，切割好后平放在附录A所示诱导培养基上。外植体接种后暗培养7d～10d再转入光培养。培养温度20℃~25℃。5.2增殖培养初代诱导培养基上培养45d～60d后，转接至附录A所示增殖培养基上进行增殖培养。5.3生根培养增殖培养基上培养105d～120d，芽苗高度达到4cm～5cm时，转接至附录A生根培养基上进行生根培养。培养60d～75d后进行炼苗。5.4一步成苗培养初代诱导培养基上培养45d～60d后，转接至附录A所示一步成苗培养基上培养，培养105d~135d后进行炼苗。5.5培养条件培养室温度20℃~25℃,光照强度1500lx～2000lx，光照时间8h/d～10h/d。5.6炼苗组培苗培养至苗高7cm～10cm、叶数2片～3片、根数3条～5条即可进行移栽前炼苗。放置于配有遮荫网的大棚内炼苗，应避免阳光直射，炼苗环境温度15℃~28℃,高温不超过35℃。炼5.7洗苗及包装运输用清水将瓶苗根部的培养基洗净，置于泡沫箱中，胶带密封好后放至阴凉处，避免暴晒。运输时间不超过3d，环境温度控制在10℃~28℃,运输途中严禁倒置翻转。到目的地后尽快种植。种植时间2d以上，应将植株全部直立，放置与阴凉处，每日喷雾补水。5血叶兰组培快繁培养基配方药品类别药品名称诱导培养基)增殖培养基)生根培养基)一步成苗培养基大量元素CaCl2ꞏ2H2O440440220NH4NO3412KNO3950475MgSO4ꞏ7H2O370370KH2PO4微量元素MnSO4ꞏ4H2O22.322.322.322.3ZnSO4ꞏ7H2OH3BO3Na2MoO4ꞏ2H2O0.250.250.250.250.0250.0250.0250.025CoCl2ꞏ6H2O0.0250.0250.0250.025KI0.830.830.830.83铁盐Na2-EDTA37.337.337.337.3FeSO4ꞏ7H2O27.827.827.827.8有机物甘氨酸2221盐酸硫胺素VB10.10.10.10.05盐酸吡哆辛VB60.50.50.50