高三一轮复习生物：动物细胞工程课件

动物细胞工程生物

大一轮复习第52课时动物细胞培养<考点一>动物细胞培养

1掌握：1.概念2.原理3.条件动物组织分散成单个细胞培养细胞增殖（有丝分裂）①营养②无菌、无毒的环境③适宜的温度、pH和渗透压④适宜的气体环境合成培养基+血清等天然成分

培养基类型：液体培养基（培养液）①对培养液和培养用具进行灭菌处理

+无菌操作②定期更换培养液

清除代谢物，防止代谢物积累对细胞自身造成危害。渗透压——维持细胞正常的形态和功能95%空气和5%CO2的混合气体培养皿或松盖培养瓶+CO2培养箱培养4.过程取动物组织用机械法用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理分散成单个细胞解决悬浮生长贴壁生长(大多数）细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等接触抑制传代培养细胞悬液原代培养分瓶培养①细胞贴壁：某些细胞需要贴附于某些基质表

面才能增殖，这类细胞往往贴附

在培养瓶的瓶壁上②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接

触时，细胞停止分裂增殖的现象。③原代培养：分瓶前的细胞培养，指动物组织

经处理后的初次培养④传代培养：分瓶后的细胞培养。加培养液放入培养皿或培养瓶内悬浮培养的细胞:直接用离心法收集贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集细胞分裂受阻②制成细胞悬液，分瓶培养①收集细胞1.选材？为什么？2.培养前为什么分散成单个细胞？可用什么方法？

3.体外培养动物细胞有哪些类型？4.区分原代培养和传代培养？5.用胃蛋白酶将动物组织分散成单个细胞可以吗？为什么？

思考:①成块组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长与增殖；P44

②利于与培养液充分接触，保证O2与营养供应和代谢物及时排出。因为细胞分化程度低，分裂能力强，容易培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官①悬浮生长细胞

②贴壁生长细胞

①分瓶前，即动物组织经处理后的初次培养是原代培养。②分瓶后的细胞培养为传代培养。

不可以；多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，而胃蛋白酶的适宜pH约为2，在此环境中会失活。植物组织培养和动物细胞培养的比较

比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基培养基特有成分过程结果相同点固体培养基葡萄糖、动物血清液体培养基细胞增殖植物细胞的全能性获得细胞或细胞产物蔗糖、植物激素①都进行有丝分裂，不涉及减数分裂；②均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件完整植株外植体↓脱分化愈伤组织

↓再分化芽、根或胚状体↓生长发育植物体动物的组织

↓机械法或胰蛋白酶、

↓胶原蛋白酶处理细胞悬液↓原代培养↓细胞悬液↓传代培养1.干细胞的概念：动物和人体内仍保留的少数具有

能力的细胞。（必1P121）2.干细胞的分布：干细胞存在于_________、_____和_______等多种组织和器官中；早期胚胎骨髓脐带血3.干细胞的分类：包括

和

等。干细胞培养及其应用胚胎干细胞成体干细胞在一定条件下，干细胞可以分化成其他类型的细胞。12分裂和分化具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能一般认为，成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力移植取成纤维细胞等iPS细胞转入相关因子细胞发生转化分化病人胰岛细胞神经元血细胞肠上皮细胞心肌细胞肝细胞iPS细胞用于治疗人类疾病示意图体外诱导定向诱导分化诱导多能干细胞（iPS细胞）①诱导过程无须破坏胚胎；②理论上可以避免免疫排斥反应。(1)营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制(2023·海南，7A)(

)×判断正误(2)进行动物细胞培养时，血清应经过高温处理后加入培养基(2022·湖北，6C)(

)×(3)培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳(2022·江苏，14B)(

)√考向一动物细胞培养1.(2024·黑吉辽，14)从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是A.传代培养时，培养皿需密封防止污染B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理C.直接用离心法收集细胞进行传代培养D.细胞增长进入平台期可能与细胞密度过

大有关√迁移应用评价动物细胞融合技术与单克隆抗体<考点二

>动物细胞融合技术

2植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志主要用途意义遗传信息细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞物理法：电融合法、离心法；化学法：聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法PEG融合法、电融合法、▲灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合获得完整的杂种植株获得杂交细胞，主要用于制造单克隆抗体打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能具有原来两个或多个细胞的遗传信息13灭活：指用物理或化学手段使病毒失去感染能力（不感染细胞），但是并不破坏病毒的抗原结构（诱导细胞融合）。

病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。【拓展】灭活病毒诱导细胞融合的原理单克隆抗体的制备

31.抗体的本质是什么？如何产生的？浆细胞抗体(蛋白质）抗原B细胞激活增殖、分化1）每个B淋巴细胞只分泌一种特异性的抗体2）体内产生的特异性抗体种类多达百万种以上2.怎样才能获得大量的单一抗体呢？单克隆抗体克隆

单个B淋巴细胞

细胞群抗体动物细胞融合杂交瘤细胞动物细胞培养单克隆抗体骨髓瘤细胞

（能无限增殖）一种B淋巴细胞（只分泌一种特异性抗体）既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体2.怎样才能获得大量的单一抗体呢？要实现这一方案，需要解决哪些困难？细胞融合、筛选、大规模培养单克隆抗体的制备过程单克隆抗体筛选二多种杂交细胞多种杂交瘤细胞体外或体内培养筛选一骨髓瘤细胞

诱导融合足够数量且分泌所需抗体的杂交瘤细胞杂交瘤细胞群提取已免疫的多种B淋巴细胞动物细胞融合技术动物细胞培养技术既能大量增殖又能产生抗体注射特定抗原既能大量增殖又能产生特定抗体选择培养基克隆化培养，抗体检测，多次筛选“第一次筛选”原理17培养基中添加氨基蝶呤补充资料

请根据上述资料，提出筛选出杂交瘤细胞的方法？已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基碟呤阻断。①人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不能分裂增殖。②鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。克隆化培养、抗体检测？多孔细胞培养板96孔板每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞①将杂交瘤细胞进行有限稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。②然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。③阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单个细胞增殖而来。（单克隆细胞）该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养（将单个细胞分裂增殖获得细胞团的培养过程）检测方法？抗原—抗体杂交技术补充了解——克隆化培养和抗体检测★有限稀释法每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞侧面模拟图克隆化培养一段时间取上清液进行抗体检测【两次筛选的比较】项目第一次筛选第二次筛选（需要多次筛选）筛选原因筛选方法筛选结果诱导融合后得到多种杂交细胞，还有未融合的细胞等。因为小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞用特定的选择培养基筛选：只有融合的杂交瘤细胞才能生长。克隆化培养和抗体检测，经多次筛选

得到杂交瘤细胞（多种）得到足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞单克隆抗体的应用

利用同位素或荧光标记的单克隆抗体在特定组织中成像的技术，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。1.单克隆抗体的优点：2.单克隆抗体的应用①广泛用作诊断试剂实例：②运载药物：抗体-药物偶联物ADC（抗体-接头-药物）③用于治疗疾病。在多种疾病的诊断和病原体的鉴定中发挥重要作用。抗体：靶向运输药物药物：发挥治疗效应，如杀伤靶细胞准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，可大量制备。(1)有的病毒经灭活处理后，可用于细胞工程中介导动物细胞的融合(2020·浙江6月选考，15A)(

)(2)将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞(2021·江苏，11D)(

)√判断正误×(3)甲状旁腺激素(PTH)水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，判断有关制备过程的叙述是否正确：①利用抗原－抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞(2023·北京，12C)(

)②筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞(2023·北京，12D)(

)√×(4)我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测(

)×理解单克隆抗体的制备过程及应用长春新碱(VCR)能够干扰肿瘤细胞的有丝分裂，也会影响正常细胞的增殖和分裂，导致药物副作用的发生。H18杂交瘤细胞产生的抗人肝癌单克隆抗体HAb18对于人体肝癌的诊断和靶向治疗具有重要的意义。回答下列问题：(1)抗人肝癌单克隆抗体HAb18的制备过程中，需要向小鼠体内注射肝癌细胞悬液，其目的是

。(2)单克隆抗体被广泛用作诊断试剂的原因是___________________________________________________________________________________。关键能力提升刺激机体发生免疫应答，从而得到能产生特定抗体的B淋巴细胞

单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备(3)资料：①细胞合成DNA包括D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。②免疫的B淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但它不能分裂增殖，其本身也不能在体外长期存活。③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但它能不断分裂增殖。如果它的D途径被阻断的话，它会因不能合成DNA而死亡。根据上述资料，利用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞的具体方法是在培养基中加入

进行培养，一段时间后收集存活细胞。原理是

可以阻断DNA的D合成途径，所以未融合的骨髓瘤细胞及融合的骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞不能在该培养基生长，而未融合的B淋巴细胞及融合的B淋巴细胞和B淋巴细胞不能长期存活，只有

的细胞才可以在培养基中长期存活与繁殖。氨基蝶呤氨基蝶呤B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合(4)将VCR与抗人肝癌单克隆抗体HAb18通过接头连接形成抗体—药物偶联物(ADC)，可实现对肝癌细胞的特异性杀伤，ADC的作用机制如图。据图分析，ADC的抗体可以_______________________________________

；药物VCR通过

从而

，阻断肝癌细胞分裂，诱导肝癌细胞凋亡。发挥靶向运输作用，携带VCR与肝癌细胞特异性结合抑制微管蛋白聚合抑制纺锤体的形成考向二动物细胞融合技术与单克隆抗体3.(2021·山东，15)一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是A.注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大B.单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合C.利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗D.p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况√迁移应用评价4.(2023·湖北，22节选)某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。回答下列问题：(1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞(含浆细胞)______(填“需要”或“不需要”)通过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞膜的作用是____________________________________________________________。不需要分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合使细胞接触处的磷脂(2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基(如HAT培养基)，该培养基对___________________和_______________________生长具有抑制作用。未融合的亲本细胞融合的具有同种核的细胞(3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是_________________________________________________。通过抗体检测呈阳性来获得分泌所需抗体的杂交瘤细胞动物体细胞核移植技术和克隆动物<考点三

>动物细胞核移植技术与克隆动物4掌握：1.概念：2.原理：3.生殖方式：4.种类：将动物的一个细胞的细胞核，移入

中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成的

技术。去核的卵母细胞动物个体用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。供体细胞：受体细胞：提供细胞核的细胞MⅡ期的卵母细胞动物细胞核的全能性无性生殖胚胎细胞核移植：体细胞核移植：胚胎细胞分化程度低，表现全能性容易体细胞分化程度高，表现全能性十分困难3131采集卵母细胞，在体外培养到MⅡ期从供体高产奶牛身上取体细胞显微操作去核对体细胞进行培养去核的卵母细胞供体细胞电融合法将供体细胞注入去核的卵母细胞重构胚

激活早期胚胎物理/化学（以体细胞克隆牛为例）(1)该过程用到哪些技术手段？动物细胞培养动物细胞融合早期胚胎培养胚胎移植动物细胞核移植技术代孕母牛克隆牛（与供体奶牛遗传物质基本相同）动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎移植（2）选择MⅡ期卵母细胞作为核移植受体细胞的原因？①卵母细胞体积大，易操作②含有促使细胞核表达全能性的物质③卵黄多，营养丰富（3）将供体细胞整个注入去核卵母细胞中的原因？对卵母细胞损伤较小；保证供体细胞的细胞核不被破坏；操作方便；5.过程：1.在将体细胞的核移植到卵母细胞之前，为什么必须先对卵母细胞进行去核操作？保证核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自供体细胞。2.你认为用上述体细胞核移植技术培育的克隆动物，是对核供体动物进行了100%的复制吗？为什么？有关体细胞核移植的问题P54克隆动物遗传物质细胞核的DNA供体细胞的细胞核细胞质的DNA供体细胞+受体卵母细胞生活环境性状可能发生基因突变、染色体变异等可遗传变异病人取核去核卵母细胞重构胚胎各种细胞组织或器官诱导取出体细胞核移植移植成纤维细胞取出转入相关因子iPS细胞各种细胞组织或器官胚胎干细胞取出诱导移植治疗性克隆iPS细胞治疗细胞发生转化3.体细胞核移植技术与诱导iPS细胞相比，有什么相似或不同之处？请你预测它们应用前景的差异。

目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是

，也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性。相关信息P54显微操作去核法显微操作去核法纺锤体-染色体复合物去核”去的是什么？P52透明带显微操作法克隆是指由一个共同的祖先，通过无性繁殖产生一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。拓展：克隆1.定义：2.三个层次：DNA（分子）、细胞、个体思考：下列克隆分别用什么技术：

动物细胞克隆——

动物克隆——

植物克隆——DNA克隆——动物细胞培养核移植植物组织培养PCR技术应用前景畜牧生产生物多样性保护医药卫生治疗人类疾病科研存在的问题加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。保护濒危物种，增加其数量转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产珍贵的医用蛋白。①转基因克隆动物的细胞、组织或器官可以作为异种移植的供体；②以患者作为供体培育的核移植胚胎干细胞，经过诱导分化能形成相应的细胞、组织或器官，将它们移植给患者时可以避免免疫排斥反应。①研究克隆动物可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程②克隆一批遗传背景相同的动物，可以通过它们之间的对比来分析致病基因③克隆特定疾病模型的动物，还能为研究该疾病机制和开发相应的药物提供帮助。①成功率非常低②各个技术环节有待进一步改进③绝大多数克隆动物存在健康问题，表现出遗传和生理缺陷。理解动物体细胞核移植的过程及应用培育克隆猴的流程如图所示。请结合图示回答问题：(1)在将体细胞的核移植到卵母细胞之前，必须先对卵母细胞进行去核操作的原因是什么？关键能力提升提示

为了使核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自体细胞供体动物。(2)上述体细胞核移植技术培育的克隆猴没有实现对体细胞供体动物进行100%的复制，其原因是克隆动物绝大部分DNA来自体细胞供体(核供体)动物的细胞核，但其线粒体中的DNA同时来自核供体细胞和___________

。所以，克隆猴不是对核供体动物进行完全相同的复制。此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的发育及一些行为、习性的形成与

也有很大关系。(3)在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用是

。受体卵母细胞所处环境诱导细胞融合(4)为了调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，Kdm4d的mRNA翻译的组蛋白去甲基化酶能

；同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理了它，TSA可以抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，从而

。降低组蛋白的甲基化水平提高组蛋白的乙酰化水平考向三动物体细胞核移植技术和克隆动物5.(2021·辽宁，13)如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是A.后代丁的遗传性状由甲和

丙的遗传物质共同决定B.过程①需要提供95%空气

和5%CO2的混合气体C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植√迁移应用评价6.(2024·临沂期中)如图为体细胞克隆猴“中中”和“华华”的培育流程，为建立动物模型、研究疾病机理带来光明前景。下列叙述错误的是A.过程①将成纤维细胞

注射到去核的卵母细

胞中，说明细胞膜的

控制作用是相对的B.卵子细胞质中含有促使成纤维细胞核全能性表达的物质C.中中、华华的性别由成纤维细胞的遗传物质决定D.“去核”去除的是纺锤体—染色体复合物√A.应使用加入血清等一些天然成分的液体培养基来培养皮肤细胞B.培养液需要定期更换，以便提供营养和清除代谢废物C.应在95%的O2和5%的CO2培养箱中培养，培养液中的CO2用于维持pH一、过教材1.实验小鼠皮肤成纤维细胞培养的基本过程如图所示。科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得一种类似胚胎干细胞的细胞，称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)。下列叙述正确的是√√D.图中丙和丁分别表示的是原代培养和传代培养，其培养原理不同E.体外培养的细胞既能贴壁生长又能悬浮生长，都会发生接触抑制现象F.传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，不需要再用酶处理G.iPS细胞是只能由成纤维细胞诱导形成的类似胚胎干细胞的一种细胞H.利用iPS细胞分化形成的器官进行自体移植后将引发机体产生细胞免疫I.iPS细胞较传统胚胎干细胞，具有细胞来源广泛、较少涉及伦理道德问

题等优点√√2.下列关于动物细胞融合、单克隆抗体的制备及应用的叙述中，不正确的是A.动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核膜的融合B.用灭活的病毒诱导融合利用了细胞膜的流动性C.单克隆抗体可对目的基因是否成功表达进行检测与鉴定D.单抗制备时至少需要2次筛选，第2次筛选常用选择培养基进行E.杂交瘤细胞在培养过程中有接触抑制现象，需要用胰蛋白酶处理F.可以从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体G.单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，产量高H.抗体—药物偶联物可定向清除肿瘤细胞，发挥杀伤作用的主要是单克隆抗体√√√3.下列关于动物细胞核移植技术的叙述，正确的是A.哺乳动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植B.卵母细胞需要培养至MⅡ期再去核C.卵母细胞去核的实质是去除细胞中的纺锤体—染色体复合物D.梯度离心是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核的E.用物理或化学方法激活重构胚，使其完成分裂和发育进程F.克隆动物的遗传物质全部来自供体的体细胞核G.用体细胞核移植技术克隆出大熊猫，体现了动物细胞核具有全能性H.核移植技术培育动物可在保持优良性状的同时提高遗传的多样性√√√√√√二、过高考(2020·全国Ⅰ，38节选)为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。回答下列问题：(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是_____________

。诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞(2)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于

，使用该培养基进行细胞培养的结果是

。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是

。选择培养基只有杂交瘤细胞能够生存抗原与抗体的反应具有特异性返回课时精练对一对123456789101112131415答案题号12345678答案ABBDABDD题号91011121314答案BCBBDBCABD(1)一种抗原中包含多种抗原决定簇(2)既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体PEG(或聚乙二醇)相同特定的选择培养基克隆化培养纯度高、特异性强、灵敏度高(3)选用腺瘤细胞、鳞状细胞瘤细胞分别与B淋巴细胞融合后选择能产生单一抗体的杂交瘤细胞，取等量的杂交瘤细胞在体外培养相同的时间，检测抗体的数量15.23456789101112131415答案1一、选择题：每小题给出的四个选项中只有一个符合题目要求。1.体外培养动物细胞时常需要提供一个类似该细胞在生物体内的环境条件，培养方式可分为悬浮培养和贴壁培养。下列叙述正确的是A.悬浮培养一般使用液体培养基B.贴壁培养一般使用固体培养基C.悬浮培养会发生接触抑制现象D.血液中淋巴细胞适合贴壁培养123456789101112131415答案√2.(2024·泰安期中)科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)，iPS细胞增殖分化后可形成多种组织细胞，用于多种疾病的治疗。如图为该技术的实验示意图，下列有关说法错误的是A.体外培养小鼠成纤维细胞和iPS细

胞时，定期更换培养液可以清除

细胞的代谢物B.选取的小鼠成纤维组织需经胃蛋白酶或胶原蛋白酶处理成单个细胞后制成细胞

悬液C.iPS细胞用于疾病治疗时存在分化为肿瘤细胞的风险D.若iPS细胞取自病人，经诱导并移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应√123456789101112131415答案3.(2024·德州月考)研究人员诱导肺上皮干细胞增殖分化可生成不同肺类器官。肺类器官可自组装或与成熟体细胞组装成肺类装配体，过程如图所示。下列叙述正确的是A.为提供无菌的环境，培养肺类装配体

时应对细胞进行灭菌处理B.在培养肺上皮干细胞和体细胞时，培

养液中通常需要加入血清C.培养肺类装配体时，需提供含95%O2

和5%CO2的气体环境D.在组装肺类装配体的培养过程中，运用了动物细胞融合技术√123456789101112131415答案4.(2024·北京昌平一模)据报道，我国科研人员在太空中进行细胞电融合实验，获得烟草黄花品种叶肉细胞与烟草革新一号叶肉细胞的杂交细胞，又成功完成小鼠淋巴细胞和人骨髓瘤细胞杂交实验。下列相关叙述不正确的是A.两个电融合实验中，融合前都需用一定浓度的特定酶预处理实验材料B.细胞经电融合处理后，需进一步筛选，以淘汰未融合细胞和多核细胞C.电融合处理后的烟草细胞经组织培养，可获得具双亲优良性状的植株D.经电融合获得的人、鼠杂交瘤细胞，培养过程中体现了细胞的全能性123456789101112131415√答案5.(2024·张家界月考)如图所示，核苷酸合成有两条途径，物质A可以阻断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入了H、A、T三种物质的HAT培养基来筛选杂交瘤细胞。下列相关说法错误的是A.已免疫的B淋巴细胞在HAT

培养基中可大量增殖B.用该培养基筛选出的能产

抗体的杂交瘤细胞有多种C.HAT培养基是选择培养基，可以满足部分细胞的生存D.杂交瘤细胞中，“核苷酸→DNA”主要发生于分裂间期√123456789101112131415答案6.(2025·株洲月考)在某药物研发过程中，需制备抗细胞膜蛋白N的抗体，流程如图所示。下列叙述错误的是A.取脾组织之前应用蛋白N对健康小鼠进行免疫B.将培养B淋巴细胞的培养瓶置于培养箱并通入无菌氧气C.将杂交瘤细胞转入96孔板

时，每个孔中尽量只接种

一个细胞D.将药物与抗蛋白N的单克

隆抗体结合，可实现特异

性治疗√123456789101112131415答案7.(2022·山东，15)如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是A.双抗可同时与2种抗原结合B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞√123456789101112131415答案8.(2024·海南，7)海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是A.利用的原理均是细胞的全能性B.使用的培养基均需添加葡萄糖和血清C.培养时的温度和pH均相同D.产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力123456789101112131415答案√9.治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义，流程如图。下列相关叙述错误的是A.核移植前需将卵母细胞培养

到MⅡ期B.上述过程体现出动物细胞具

有全能性C.获得的组织器官移植给个体B一般不发生免疫排斥反应D.胚胎干细胞需经过基因的选择性表达才能产生出所需的组织器官123456789101112131415√答案10.如图为培育体细胞克隆猴的流程。据图分析，下列叙述错误的是A.将成纤维细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是利

于细胞融合B.图中克隆猴的细胞质基因来自猴A和

猴

BC.组蛋白的甲基化和乙酰化不利于重构

胚完成细胞分裂和发育过程D.体细胞克隆猴的成功便于建立某些疾

病模型和药物筛选123456789101112131415答案√11.(2024·衡阳三模)体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生、拯救濒危动物等方面有着广泛的应用前景。下列关于动物细胞核移植技术应用的叙述，错误的是A.哺乳动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的B.克隆动物与供核动物的遗传性状完全相同，原因是遗传物质主要分布

在细胞核中C.利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物，可作为生物反应器生

产医用蛋白D.以患者作为供体培育的人核移植胚胎干细胞，经过诱导分化能形成相

应的细胞、组织或器官，将它们移植给患者时可避免发生免疫排斥反应123456789101112131415答案√二、选择题：每小题给出的四个选项中有一个或多个符合题目要求。12.(2024·湘潭一模)细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。某研究小组以小鼠甲为实验材料设计实验，研制抗病毒A的单克隆抗体。下列叙述错误的是A.实验前必须给小鼠甲注射病毒A

是为了得到能产生特定抗体的B

淋巴细胞B.将小鼠体内取出的脾脏用剪刀剪碎后加入胃蛋白酶处理，使其分散成单个细胞C.筛选1需用特定的选择培养基进行筛选才能获得融合的杂交瘤细胞D.筛选2利用96孔板经1次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞123456789101112131415答案√√13.(2024·怀化二模)科研人员成功培育了能分泌含卵泡刺激素(FSH)乳汁的转基因山羊，其基本流程为：含FSH基因表达载体→导入山羊成纤维细胞→核移植→重构胚→检测并获得转基因山羊。下列说法错误的是A.需将转基因成纤维