肝细胞程序性细胞死亡在肝纤维化中的作用

肝细胞程序性细胞死亡在肝纤维化中的作用【摘要】肝纤维化是慢性肝病发生和发展的关键环节，抑制肝纤维化对慢性肝病的防治具有重要意义。随着对肝细胞研究的深入，研究者发现不同的诱因刺激肝细胞，会使肝细胞通过不同的分子机制，发生相应的程序性细胞死亡（包括细胞凋亡、坏死性凋亡、焦亡、泛凋亡、铁死亡、铜死亡和自噬），进而对肝纤维化造成促进或抑制的作用。通过调控肝细胞程序性细胞死亡，可缓解或加剧纤维化进展。现阐述不同肝细胞程序性细胞死亡在肝纤维化中的作用、诱发肝细胞程序性细胞死亡的相关机制，以及通过干预肝细胞程序性细胞死亡以调控肝纤维化的相关措施，以期为防治肝纤维化提供新的理论依据。【关键词】肝细胞；肝星状细胞；肝纤维化；程序性细胞死亡肝细胞、肝巨噬细胞、肝窦内皮细胞和肝星状细胞（hepaticstellatecell，HSC）是肝纤维发生机制中的4种核心细胞，它们组成了肝纤维化过程中各个环节的关键枢纽，联合管理纤维化机制［1］。程序性细胞死亡（programmedcelldeath，PCD）是维持机体内在平衡的重要机制，在机体的组织细胞内广泛存在，目前发现的PCD形式包括细胞凋亡、坏死性凋亡、焦亡、泛凋亡、铁死亡、铜死亡和自噬。肝纤维化的发病过程中涉及多种细胞的PCD、同种细胞的不同PCD以及不同PCD之间的串扰，它们对纤维化进展发挥着双向作用：消除促纤维化细胞，如活化HSC和M1型巨噬细胞的PCD，能减缓肝纤维化进展；损伤维持肝脏正常生理功能的基础细胞如肝细胞、肝窦内皮细胞和M2型巨噬细胞的PCD，则会加剧肝纤维化的发生和发展［2］。肝细胞是肝损伤后发生PCD的主体细胞和肝纤维化的始动因素，它的PCD形式往往决定后续的肝纤维化发生和发展机制。研究结果显示，肝细胞PCD由基因调节，会对肝纤维化造成双重影响，调控肝细胞PCD机制可缓解或加剧纤维化进展［3］。因此，调控肝细胞PCD可能是防治肝纤维化的有效措施。本文基于肝细胞的不同PCD形式，对肝细胞PCD对肝纤维化的作用、诱导肝细胞PCD的相关机制及通过干预肝细胞PCD以调控肝纤维化的相关措施进行综述。一、肝细胞凋亡过度的肝细胞凋亡则会促进肝纤维化的发生和发展。各种肝病诱因上调肝细胞内促凋亡蛋白与抑凋亡蛋白的比值，会促使肝细胞凋亡，凋亡肝细胞会释放凋亡小体（apoptoticbody，AB），AB被HSC和巨噬细胞吞噬可诱导促纤维化反应［4］。因此，阻止肝细胞凋亡或许能抑制促纤维化反应，延缓肝纤维化进展。肝细胞凋亡受到复杂且多样化的分子调控网络影响，包括特定基因、非编码RNA、信号蛋白及激素等在内的多种因子，均可通过调节肝细胞凋亡的平衡，深刻影响肝纤维化的发生与发展。在四氯化碳肝纤维化小鼠体内及原代肝细胞体外实验中，铁调素可通过抑制蛋白激酶R样内质网激酶通路促使B细胞淋巴瘤/白血病-（2B-celllymphoma/leukemia-2，Bcl-2）蛋白表达升高、其相关X蛋白（Bax）表达降低，阻止肝细胞凋亡并改善肝纤维化［5］。通过代谢相关脂肪性肝炎（metabolicassociatedsteatohepatitis，MASH）小鼠体内实验及肝细胞体外实验结果显示，上调新型抗凋亡信号（CD1d-JAK2-STAT3）轴可增加Bcl-xL和Mcl-1的表达，同时减少胱天蛋白酶（caspase）-3/7的表达，进而抑制肝细胞凋亡，防止MASH进一步恶化［6］。通过体内外研究证明，缺氧相关因子（hypoxia-associatedfactor，HAF）可上调肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域蛋白（TNFRSF1A-associatedviadeathdomain，TRADD）和受体相互作用蛋白激酶（receptor-interactingproteinkinase，RIPK）1的转录，激活核因子（nuclearfactor，NF）-κB通路增加磷酸化NF-κBp65亚基（P-p65）和p50亚基（P-p50）的表达，抑制肝细胞凋亡，改善MASH预防其进展为HCC［7］。PNPLA3基因的I148M变体表达可导致肝脏脂质积累，使肝细胞发生脂毒性凋亡，产生AB和损伤相关分子模式（damageassociatedmolecularpattern，DAMP），诱导巨噬细胞M1型极化和HSC活化，促进肝纤维化进展［8］。Wang等［9］发现成纤维细胞生长因子4可磷酸化肝细胞中的雌激素相关受体γ，促使其泛素化降解，避免乙醇刺激雌激素相关受体γ后，使细胞色素P4502E1基因过表达，导致肝细胞凋亡增加以及肝脏炎症和纤维化的发生。let-7miRNA可通过甲基胞嘧啶双加氧酶3siRNA的负反馈回路减少肝细胞中转化生长因子β1的产生，也可经转录后直接抑制Fas表达，进而抑制两种死亡因子介导的肝细胞凋亡，减轻胆管结扎诱导的肝纤维化［10］。研究发现，敲低趋化因子（C-X-C基元）配体1可减弱小鼠肝脏中性粒细胞的浸润，降低炎性细胞因子的表达，并显著下调活性氧（reactiveoxygenspecies，ROS）的产生和caspase-3相关肝细胞凋亡，从而改善慢加急性肝衰竭的肝损伤［11］。过度训练产生的乳酸体会促进髓系细胞白血病序列1基因表达，相关蛋白可上调促凋亡基因BAX和BAK的表达，进而诱导肝细胞凋亡释放AB，使HSC活化［12］。经乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭患者前瞻性多中心队列研究结合肝细胞体外实验发现，信号蛋白-6B（SEMA6B）在肝细胞中过表达可通过停滞G0/G1细胞周期抑制肝细胞增殖并诱导细胞凋亡，上调炎症相关通路，加剧肝功能衰竭［13］。除上述调控肝细胞凋亡的机制性研究外，部分天然化合物和益生菌也被发现可通过干预上述机制，抑制肝细胞凋亡，改善不同病因引起的肝纤维化。橙皮苷可通过恢复血管内皮生长因子A-磷酸肌醇3-激酶（phosphoinositide3-kinase，PI3K）/蛋白酶B（AKT）信号通路的传导抑制肝细胞凋亡，缓解代谢相关脂肪性肝病（metabolicassociatedfattyliverdisease，MAFLD）［14］。桧木酮可通过上调法尼醇-X受体及其下游靶基因SHP和CES1的表达，减弱肝细胞脂质沉积并降低caspase-8水平，从而抑制肝细胞凋亡，减轻MASH纤维化［15］。副干酪乳杆菌HY7207能下调Bax/Bcl-2蛋白的比值，抑制HepG2细胞凋亡；还能下调Srebp1c等脂肪生成基因、Tnf等炎症基因和Col1a1等纤维化基因的表达，改善MAFLD小鼠的肝脏脂肪堆积、炎症和纤维化［16］。二、肝细胞坏死性凋亡肝细胞坏死性凋亡具有促纤维化作用，抑制肝细胞坏死性凋亡是治疗肝纤维化的新途径。当凋亡相关因子受体被激活但caspase-8缺乏的情况下，去泛素化酶柱状素会激活RIPK1，RIPK1通过与RIPK3相互作用，募集并激活混合谱系激酶结构域样蛋白（mixedlineagekinasedomain-likeprotein，MLKL），进而诱导肝细胞坏死性凋亡释放DAMP，诱发肝脏炎症并激活HSC，促进肝纤维化进展［2］。经多种动物及细胞实验证明，肝细胞坏死性凋亡的核心分子通路RIPK3/MLKL是肝脏受多种病理刺激如肥胖、胆汁淤积、缺氧及乙醇等后，驱动肝纤维化发生和发展的重要途径。Selvarani等［17］发现，RIPK3和MLKL高表达所诱导的肝细胞坏死性凋亡，会使肥胖小鼠肝脂肪变性进展为肝纤维化和肝细胞腺瘤的概率显著增加，而下调肝细胞MLKL蛋白的表达，可显著减轻四氯化碳诱导的肝纤维化；进一步的研究显示，MLKL缺失可通过减少肝细胞坏死性凋亡，抑制HSC激活来阻断肝纤维化。肝细胞受胆汁酸刺激可释放JNK/c-Jun信号上调C-C基序趋化因子配体2和3的表达，进而促进CD14＋和CD16＋型单核细胞浸润并分泌肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-α，TNF-α）和凋亡相关因子配体（FasL），两种死亡因子与RIPK1/RIPK3/MLKL轴相互作用可驱动肝细胞坏死性凋亡，加剧胆汁淤积性肝损伤［18］。缺氧引起的线粒体损伤和Z-DNA积累可导致肝细胞Z-DNA结合蛋白1（Z-DNAbindingprotein1，ZBP1）/RIPK3依赖性坏死性凋亡，加重肝缺血再灌注损伤［19］。在酗酒诱发的慢加急性肝衰竭体内外模型实验中，乙醇可促进中性粒细胞浸润和胞外陷阱增加，进而触发肝细胞释放RIPK3诱导坏死性凋亡，加剧慢加急性肝衰竭［20］。基于上述肝细胞坏死性凋亡诱导蛋白的研究结果显示，临床药物和强致癌物也可通过干预相关途径影响肝纤维化进展。二甲双胍可作用于肝细胞和肝巨噬细胞中的腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activatedproteinkinase，AMPK）-沉默信息调节因子1信号通路（Sirt1）通路，激活三甾四脯氨酸，进而抑制肝巨噬细胞释放TNF-α，减少肝细胞坏死性凋亡，缓解MAFLD［21］。低剂量黄曲霉毒素B1可通过促进Toll样受体（Toll-likereceptor，TLR）4介导肝细胞坏死性凋亡加重MASH［22］。四溴双酚S会抑制PINK1-PAKIN信号通路介导的线粒体自噬，导致THLE-2和AML12细胞中的受损线粒体积累，随后累积的ROS可促进RIPK3/MLKL的表达，诱导肝细胞坏死性凋亡，加剧肝脏炎症［23］。三、肝细胞焦亡肝细胞焦亡导致的持续性炎症会促进肝纤维化发展，在肝纤维化过程中发挥关键作用。肝细胞内的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NOD-likereceptorthermalproteindomainassociatedprotein3，NLRP3）炎性小体可诱导肝细胞焦亡，焦亡肝细胞所释放的炎性小体颗粒被HSC内化后，可诱导HSC活化，促进肝纤维化发展［24］。在肝纤维化的进程中，NLRP3炎性小体介导的肝细胞焦亡是驱动肝脏炎症与纤维化的核心环节，其活性受到关键抑制性分子、核心促进分子、新发现的表观遗传学机制及其他分子调控机制等多层次分子网络的精密调控。关键抑制性分子，核受体亚家族5组A成员2上调醛脱氢酶1家族成员B1的表达，降低ROS水平，抑制NF-κB-NLRP3通路，减少肝细胞焦亡并缓解MASH［25］；NT5E编码的CD73蛋白可通过下调PI3K/AKT信号通路抑制NLRP3炎性小体介导的肝细胞焦亡，减轻酒精性脂肪性肝炎导致的肝损伤［26］；G蛋白偶联受体56通过抑制NF-κB/NLRP3通路介导的肝细胞焦亡，可减少HSC活化，缓解肝纤维化进展［27］；生长停滞特异性5分子可通过调节miR-684-AHR轴抑制肝细胞焦亡和HSC激活，阻止肝纤维化进一步发展［28］。核心促进分子，胞苷/尿苷单磷酸激酶2和高尿酸均可诱导NLRP3/人D蛋白（gasderminD，GSDMD）通路介导的肝细胞焦亡，促进MAFLD进展为MASH；进一步的干预试验显示，通过基因调控或给予去甲二氢愈创木酸药物抑制胞苷/尿苷单磷酸激酶2活化，可影响后续通路，减少肝细胞焦亡，缓解肝脏炎症和纤维化［29-30］。新发现的表观遗传学机制表明，甲基转移酶样3（methyltransferase-like3，METTL3）可分别通过与DLGAP5结合或与蛋白磷酸酶2A相互作用，激活NF-κB/NLRP3信号通路促进肝细胞焦亡，驱动肝巨噬细胞代谢重编程和M1型极化，加剧MASH纤维化；而使用METTL3的靶向抑制剂STM2457可显著减轻HBx-Tg小鼠NLRP3依赖性MASH［31-32］；活化的干扰素基因刺激因子（stimulatorofinterferongenes，STING）-WDR5/DOT1L/IRF3-NLRP3信号通路可诱导肝细胞焦亡，增强肝脏炎症促进肝纤维化进展［33］。其他分子调控机制，硒蛋白W可通过调节代谢重编程来激活巨噬细胞的cGAS/STING信号传导，从而促进肝细胞焦亡，加剧MAFLD的进展［34］。在脂毒性AML12和原代小鼠肝细胞体外模型中，敲低含溴结构域蛋白4可抑制NLRP3/GSDMD通路介导的肝细胞焦亡，缓解MASH的进展［35］。免疫层面，PD-1＋CD8＋T细胞可通过增加颗粒酶B和穿孔素1的产生诱导肝细胞焦亡，加剧自身免疫性肝病的炎症进展［36］。基于上述NLRP3炎性小体的核心调控机制研究，靶向抑制其介导的肝细胞焦亡已成为开发抗肝纤维化治疗策略的重要方向，其中多种天然化合物在动物和细胞实验中展现出显著潜力。龙胆苦苷、低聚原花青素、特女贞子苷及鸦胆子素A等中药单体可分别通过下调TLR4、减少组织蛋白酶B泄漏并下调ROS-MLKL-织蛋白酶B信号通路、上调沉默调节蛋白6抑制嘌呤受体P2X7表达、阻断肝细胞内的核受体亚家族2组F成员2-高迁移率族蛋白B1炎症信号级联通路来抑制NLRP3激活诱导的肝细胞焦亡，进而抑制HSC活化、巨噬细胞M1型极化及白细胞介素-1β和白细胞介素-18诱导的炎症扩散，从而分别改善MASH、酒精相关性肝病（alcohol-associatedliverdisease，ALD）型肝纤维化［37-40］。中药复方“益气健脾方”也被证实可下调NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路或通过调节三羧酸循环恢复线粒体功能，抑制肝细胞焦亡，改善肝脏炎症和纤维化［41］。四、肝细胞泛凋亡细胞凋亡、坏死性凋亡、细胞焦亡通过泛凋亡机形成动态分子网络，泛凋亡既有三者的主要特征，也有自己独特的调控机制，如ZBP1和黑素瘤缺乏因子（2absentinmelanoma2，AIM2）便是合成泛凋亡复合物的关键启动分子，在特定条件下可主导完成泛凋亡复合物的组装，进而通过激活caspase-1、caspase-8和RIPK3，启动三条程序性细胞死亡通路诱导细胞泛凋亡。肝细胞泛凋亡是多种慢性肝病的刺激因素，如可促进MASH的发展，导致炎症性纤维化和肝细胞死亡［42］。ZBP1和AIM2诱导的细胞泛凋亡在多种诱导肝纤维化的病理损伤如ALD、MAFLD、肝缺血再灌注损伤及药物性肝损伤中广泛存在，受多种细胞因子调控，主要以诱导肝细胞死亡的形式，促进肝纤维化进展。经纤维连接蛋白Ⅲ型结构域包含蛋白4处理的HepG2细胞，被TNF-α刺激后的肝细胞泛凋亡减弱，MAFLD炎症及纤维化缓解［43］。而STING可通过感知线粒体DNA的释放，诱导肝细胞泛凋亡，加重肝缺血再灌注损伤［44］。Zeng等［45］研究发现，敲低AIM2基因能减少肝细胞泛凋亡，从而显著减轻对乙酰氨基酚过量所诱导的药物性肝损伤；反之，利用腺相关病毒9恢复AIM2表达则会增加泛凋亡，加重肝损伤；此外，过量对乙酰氨基酚会导致人原代肝细胞泄漏线粒体DNA，进而通过激活TLR9通路促进中性粒细胞胞外陷阱形成，诱导肝细胞泛凋亡；而预注射脱氧核糖核酸酶Ⅰ可有效缓解该过程引发的药物性肝损伤。基于上述泛凋亡机制，给予MAFLD肝细胞模型铁死亡抑制剂利普司他汀-1可防止其在脂质应激下由促泛凋亡分子如TNF-α，脂多糖和nigericin等诱导出现泛凋亡；利普司他汀-1明显降低了MAFLD小鼠模型ROS的含量和肝纤维化相关分子的表达［46］。这证明了抑制肝细胞泛凋亡可缓解肝纤维化进展，也说明铁死亡与泛凋亡之间可能存在潜在联系。此外，急性肝衰竭与法尼基转移酶的表达呈正相关，而法尼基转移酶的抑制剂PD083176可通过减少肝细胞泛凋亡，显著减轻急性肝衰竭小鼠的肝损伤［47］。法尼基转移酶可能是肝细胞泛凋亡的正向调节因子。中医药领域也发现，四物汤可通过抑制小鼠原代肝细胞泛凋亡，阻断巨噬细胞M1型极化和HSC活化，改善MAFLD纤维化［48］。肝细胞铁死亡和铜死亡在抗脂质过氧化体系如谷胱甘肽过氧化物酶（4glutathioneperoxidase4，GPX4）失效的前提下，铁积累可通过芬顿反应诱导细胞内脂质过氧化物积累，引起细胞铁死亡。目前细胞铁死亡与肝纤维化的相关性研究主要集中在肝细胞。研究表明，肝细胞铁死亡是促纤维化机制的核心之一，抑制肝细胞铁死亡可以改善肝纤维化［49］。多个独立研究从不同分子途径共同揭示，肝细胞铁死亡是促进肝纤维化发生和发展的核心枢纽。在肝纤维化小鼠模型中，肝细胞特异性敲除转化生长因子激酶1会促进肝细胞铁死亡，因此衍生的氧化DNA损伤将激活STING信号，诱导M1型巨噬细胞极化；此外，肝细胞铁死亡也会促进DAMP释放，诱导HSC活化，加重肝纤维化［50］。另有研究发现，睾酮缺乏可通过靶向基本的螺旋-环-螺旋ARNT样蛋白1下调昼夜节律蛋白，诱导小鼠肝细胞铁死亡，从而加重高脂饮食诱导的MAFLD［51］。FUN14结构域包含蛋白1是一种线粒体自噬受体，通过96～133氨基酸结构域可与GPX4相互作用，促使GPX4从细胞质募集到线粒体中自噬降解，导致肝细胞铁死亡，其缺失可改善四氯化碳诱导小鼠的肝纤维化［52］。另一方面，大量研究揭示了通过细胞疗法、菌类代谢物、激素及许多天然化合物干预肝细胞铁死亡的调控机制，从而改善慢性肝病的广阔前景。肝移植物中的人骨髓间充质干细胞可通过外泌体将miR-16-5p递送至肝细胞中，并在转录后抑制溶质载体家族3成员14依赖性肝细胞铁死亡，减轻肝脏缺血再灌注损伤［53］。毛螺菌代谢物可通过提高N-乙酰谷氨酸水平并通过kelch样ECH关联蛋白1泛素化降解及核因子-E2相关因子2（nuclearfactorerythroid-2-relatedfactor2，NRF2）途径抑制肝细胞铁死亡来缓解ALD［54］。外源性褪黑激素可通过褪黑素受体2-环磷酸腺苷-蛋白激酶A-肌醇需求酶1（MT2/cAMP/PKA/IRE1）信号通路抑制内质网应激，减少肝细胞铁死亡，改善MAFLD［55］。毛蕊花糖苷通过靶向多聚（rC）结合蛋白2基因，而丹参酸B通过上调细胞外基质蛋白1基因表达，均能抑制肝细胞铁死亡，分别改善肝缺血再灌注损伤与肝纤维化［56-57］。山奈酚、连翘苷-A、桧木醇及桃红四物汤内的苦杏仁苷、羟基藏红花黄A和芍药苷等中药单体均可通过上调NRF2-GPX4轴来抑制肝细胞铁死亡，从而分别在对乙酰氨基酚诱导肝损伤、胆管结扎诱导肝纤维化以及肝纤维化模型中发挥保护作用［58-61］。总桑黄菌提取物除可上调肝细胞内NRF2-GPX4通路抑制肝细胞铁死亡外，还能在肝纤维化小鼠体内下调转化生长因子-β1/Smad蛋白信号转导通路以抑制HSC活化，改善肝纤维化［62］。二聚胍内酯倍半萜类化合物则可通过减少肝细胞内的细胞衰老相关蛋白1介导的脂质积累与铁死亡，来改善肝脂肪变性［63］。铜死亡是由于细胞内过度聚积的铜离子与三羧酸循环中的脂酰化成分直接结合，导致脂酰化蛋白聚集和铁硫簇蛋白不稳定，从而引发细胞死亡。Mao等［64］分析过往研究认为，肝脏中过量的铜积累会损害肝细胞并激活HSC，加速肝纤维化进展，靶向铜代谢可能是治疗肝纤维化的可行策略。已有研究证明，敲除铁氧还蛋白1可保护人HepaRG细胞免受对乙酰氨基酚的攻击，其机制与铜死亡相关；对小鼠的铁氧还蛋白1基因进行敲除，也改善了乙酰氨基酚诱导的肝损伤［65］。然而，关于肝细胞铜死亡在肝纤维化中的诱发机制，目前缺乏系统性研究；且铜积累对肝脏的损伤也待开展多种动物模型实验验证，并进一步分析其对具体细胞的影响和相关机制。六、肝细胞自噬正常肝细胞自噬会产生存活信号，维持肝细胞的正常生理功能和结构，发挥保护肝脏、缓解肝纤维化的作用［66］，而过度的自噬则会导致肝细胞发生其他形式的PCD，促进肝纤维化进展。多项研究表明，维持正常的肝细胞自噬活性是肝脏保护的关键。在ALD中，抑制内质网应激传感器X框结合蛋白1可恢复被乙醇抑制的溶酶体功能和自噬活性，进而减少肝细胞凋亡，改善纤维化［67］。肝细胞来源的血浆糖蛋白Fetuin-A可通过抑制TLR介导的自噬-溶酶体降解和肝巨噬细胞M2型极化，加剧ALD进展［68］。在MASH中，TNF-α/Miz1正反馈环可抑制肝细胞线粒体自噬加剧肝纤维化［69］。在HepG2和L02肝细胞体外模型中，TLR4通路可上调膜联蛋白A2的表达，减少AMPK/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）介导的自噬通量促进脂质积累和MASH肝损伤［70］。此外，巨噬细胞通过Sting-YAP轴可激活AMPK并诱导肝细胞发生脂噬，通过促进脂滴相关蛋白降解来控制MAFLD进展［71］。3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1通过介导组蛋白去乙酰化酶2的降解，可上调过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisomeproliferator-activatedreceptor，PPAR）-α介导的肝细胞自噬，改善单纯缺氧诱导的MAFLD［72］。相反，在某些病理条件下，过度或选择性的肝细胞自噬会加剧肝损伤，促进肝纤维化。例如，慢性间歇性缺氧会触发肝细胞选择性自噬，降解DNA修复酶Eepd1，从而加剧DNA损伤并上调促纤维化基因表达［73］。甲基胞嘧啶双加氧酶3通过促进ENPP1的低甲基化来增强肝细胞自噬，从而恶化MAFLD，使肝纤维化持续存在［74］。研究发现，可促进肝细胞自噬的临床药物和天然化合物大多起抑制肝纤维化的作用。Shen等［75］研究发现，许多可激活和恢复肝细胞自噬的药物能促进肝细胞中的脂滴清除、抑制促炎因子产生和HSC活化，改善肝纤维化减缓MAFLD的进展。非诺贝特可诱导溶酶体Ca2+通过肝细胞内的粘磷脂1释放，激活钙调神经磷酸酶和钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶β-AMPK-Unc-51样激酶（ULK1）通路，促进转录因子EB和转录因子E3去磷酸化和核易位，增强肝细胞自噬，改善MAFLD纤维化［76］。阿培利司和地高辛可通过激活肝细胞自噬，减少肝脏内脂质积累，减轻MASH的炎症和纤维化［77］。武替拉布利定（vutiglabridin）是一种新开发的抗肥胖候选药，经体外研究发现，vutiglabridin治疗可促进L02细胞系的脂质分解、自噬和线粒体功能改善，显著减少肝脂肪变性、纤维化和炎症［78］。千层纸苷可通过影响PPAR-α同源受体PPAR-γ调节AMPK-ULK1途径，启动肝细胞自噬，减少氧化应激、DNA损伤和炎症细胞因子白细胞介素-6的产生，抑制HSC活化和纤维化进展［79］。然而也有少部分药物会引起肝细胞过度自噬导致肝细胞死亡，加重肝纤维化。如吉特替尼会导致药物性肝损伤加剧肝纤维化；靶向抑制自噬途径是减轻吉特替尼诱导的肝毒性的潜在治疗策略［80］。总结与展望基于上述研究可知，肝细胞凋亡、坏死性凋亡、焦亡、铁死亡、铜死亡、泛凋亡和病理性肝细胞自噬会促进肝纤维化进展，而维持正常的肝细胞自噬活性则可以抑制肝纤维化进展。虽然诱发肝细胞各PCD形式的关键分子和各肝细胞PCD对肝纤维化的作用已初步明确（图1），但肝细胞PCD发生后的下游信号分子通路与肝巨噬细胞、肝窦内皮细胞和HSC发生相互作用，进一步引发肝纤维化的细胞和分子机制研究仍然匮乏，有待进一步探索发现，为肝纤维化的防治提供更多的理论依据。此外，目前开展的实验性研究并未指明不同病因诱导的肝纤维化，是否具有激活特异肝细胞PCD通路的倾向性，这方面仍待开展动物及人肝组织模型实验进一步验证；不同病因诱导的肝纤维化中主要涉及的肝细胞PCD形式见表1。临床转化方面，肝细胞PCD过程中释放的特异性分子或可作为新型生物标志物用于肝纤维化的早期诊断与预后评估；而靶向肝纤维化相关机制的促进或抑制分子，可能成为新型抗肝纤维化靶向药物研发的突破口；部分药物的药理学机制也有待进一步开展实验验证，或许其未开发的药理作用能使其成为新的临床抗肝纤维化候选药物；此外，许多天然化合物及中药复方已被证实，可通过调控肝细胞PCD途径改善肝纤维化，因而中医药在肝纤维化防治方面是一个巨大的宝库，有待进一步发掘。参考文献1KisselevaT,BrennerD.Molecularandcellularmechanismsofliverfibrosisanditsregression[J].NatRevGastroenterolHepatol,2021,18(3):151-166.DOI:10.1038/s41575-020-003-72-7.2GaoR,TangH,MaoJ.P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