DB43-T 2474-2022 湘东黑山羊冷冻精液生产技术规程

ICS65.020.30CCSB4343IDB43/T2474—2022前言 12规范性引用文件 13术语和定义 14基本要求 1 16精液处理 27精液冷冻 38冻精活力检查 39包装、标签、贮存和运输 3 4附录A（资料性）湘东黑山羊冷冻精液生产仪器设备 5附录B（资料性）羊采精操作技术 6附录C（资料性）细管冷冻精液标识方法 7附录D（资料性）羊精液生产记录表 8DB43/T2474—2022本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由湖南省农业农村厅提出。本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。本文件起草单位：湖南省光大牧业科技有限公司、湖南省畜牧兽医研究所、浏阳市农业发展事务中心、长沙学院、长沙市动植物疫病预防控制中心、湘阴县畜牧水产服务中心。本文件主要起草人：段洪峰、刘海林、张佰忠、朱立军、张翠永、李昊帮、罗璋、李安定、刘东翔、朱建军、樊志坚、冯小花、刘伯承、向静、奉佳、薛爽、陈新娟、赵晓。DB43/T2474—20221湘东黑山羊冷冻精液生产技术规程本文件规定了湘东黑山羊冷冻精液生产的基本要求，采精，精液处理，精液冷冻，冻精活力检查，包装、标签、贮存和运输，记录。本文件适用于湘东黑山羊冷冻精液生产。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB20557山羊冷冻精液GB/T30396牛冷冻精液包装、标识、贮存和运输NY/T810湘东黑山羊NY/T1234牛冷冻精液生产技术规程NY/T3186羊冷冻精液生产技术规程DB43/T2410湘东黑山羊种羊选育技术规范3术语和定义NY/T3186界定的术语和定义适用于本文件。4基本要求4.1种公羊品种特征特性应符合NY/T810的规定，体质健康，无传染病和规定疫病，3代以上系谱完善，等级综合评定为特级或者一级，等级综合评定方法按DB43/T2410规定执行。4.2仪器设备见附录A。4.3器具器具清洗、消毒、贮存按NY/T3186规定执行。4.4稀释液使用商品化的山羊专用稀释液。5采精2DB43/T2474—20225.1环境采精场所应环境安静，清洁卫生，地面平坦防滑，有护栏等安全设施。5.2采精前准备5.2.1器具集精管、假阴道、漏斗、水浴锅、干燥箱。5.2.2采精器润滑剂将凡士林与液体石蜡1:1混合，用水浴煮沸消毒10min后置于62℃~65℃水浴锅内待用。5.2.3台羊台羊应选择健壮、性情温顺、无疫病且性成熟的母羊，体表、外阴、臀部应清洁卫生，并保定于牢固的采精架内。5.2.4公羊种公羊体表应修剪过长的阴毛，体表清洁卫生。包皮需冲洗的，冲洗干净30min后才准许采精。5.2.5采精器将采精器安装好后，注入温水约130mL，外壳与内胎容积的三分之二。采精时内胎温度应达到38℃~43℃,有一定压力，外口呈三角形。集精杯温度维持在33℃~35℃。采精器的消毒和润滑剂的使用应符合NY/T3186的要求。5.3采精操作见附录B。6精液处理接触精液的器皿均应放在34℃恒温箱中，稀释液放在34℃恒温水浴箱中备用。稀释精液的稀释瓶应做明显标记。6.2外观检查检查精液的色泽，气味及是否有脓性分泌物或血液等异物。正常情况下，精液为乳白色或微黄，略有腥味。6.3采精量测定直接读取集精管上刻度（精确到0.1mL），记录采精量。6.4精子密度测定使用精子密度测定仪进行测定，应符合GB20557的规定。6.5精子活力测定DB43/T2474—20223取精液和稀释液5μL～10μL于载玻片上，加盖盖玻片后在37℃恒温装置的相差显微镜上评定活力，用百分率表示。应符合GB20557的规定。6.6精液评价及处理外观正常、密度大于等于6×108个/mL、活力大于等于65%、畸形率小于等于15%的精液用于冻精生产。6.7稀释、平衡、灌装应符合NY/T1234的规定。6.8标识细管冷冻精液标识方法见附录C。7精液冷冻灌装、封口、标识后的细管上架码放时，应注意细管摆放的方向，棉塞封口端靠近操作者，超声波封口端远离操作者。放入程控冷冻仪时亦应如此放置。用区分棒做好不同羊号细管间的识别。7.2冷冻采用程控冷冻仪冷冻精液，程控冷冻仪与低温平衡柜应尽量靠近，设置好冷冻程序，4℃下降至-10℃用时180s，-10℃降至-100℃用时150s，-100℃降至-140℃用时120s，应按照程控冷冻仪的操作程序进行冷冻。7.3收集冷冻完成后，打开程控冷冻仪盖子，把细管的棉塞封口端在下，快速将冻精收集到贮精管内，每管收集25支，按种公羊号投入盛满液氮的不同提筒中，并迅速浸泡在液氮中。8冻精活力检查参照NY/T1234的方法。每只羊每批次取1支冻精迅速浸入37℃~38℃水中并晃动20s，取出擦干水珠，剪去细管的超声波封口端，用专用推针把精液挤入一小试管内。取解冻精液进行活力检查，操作方法见6.5。检查合格的冻精作为初检合格品保存。9包装、标签、贮存和运输9.1包装和标签9.1.1在液氮内将细管分类装入冻精储存管，包装后的细管其棉塞端朝下。包装袋规格应符合GB/T9.1.2包装袋标签应标记生产单位、品种、种羊号、数量。DB43/T2474—202249.2贮存和运输应符合GB/T30396的规定。记录内容和格式见附录D。DB43/T2474—20225湘东黑山羊冷冻精液生产仪器设备表A.1湘东黑山羊冷冻精液生产仪器设备123456789DB43/T2474—20226羊采精操作技术B.1准备公羊靠近台羊时，应采取控制措施，不让公羊立即爬跨，使其充分排泄副性腺后进行2次～3次空爬，等待3min～5min后采精，空爬时不让阴茎触及台羊。性欲不强的公羊采取观摩、引诱、被爬跨和更换台羊、地点等措施引导采精。B.2采精方法采精员手持采精器站在公羊侧后方，当公羊阴茎伸出爬跨时，迅速向前托着公羊包皮，采精器口斜向下方，双手配合将阴茎引入采精器口内，公羊往前一冲完成射精。采精器紧随公羊阴茎移动，当阴茎缩回后立即将采精器口斜向上方，打开活塞，取下集精管，迅速送至精液处理室。安装好的采精器只能使用一次，不应重复使用。B.3采精量公羊一般3d～4d采精1次，视年龄、身体状况增减次数，每次可连续采精2回（间隔时间30min以上），采精充分（集精管内泡沫丰富，精液量大且稠密）的公羊不宜连续采精。DB43/T2474—20227细管冷冻精液标识方法C.1标记组成细管冷冻精液标记由四部分组成，排列顺序从棉塞封口端到超声波封口端依次为“产地代号”或“公牛站代号”+“种公羊品种代号”+“冻精生产日期”+“种公羊号”。C.2标记代码C.2.1生产单位代码或用汉语拼音大写首字母表示。C.2.2种公羊品种代码为该品种汉字的汉语拼音大