《胡椒花叶病监测技术规程》标准文本征求意见稿

T/HNBXXXX—2026胡椒花叶病监测技术规程本文件规定了胡椒花叶病（peppermosaicdisease）监测网点设置、监测方法、病情统计和档案保存等内容。本文件适用于胡椒花叶病的监测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T1805胡椒种苗黄瓜花叶病毒检测技术规程3术语和定义界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1胡椒花叶病blackpeppermosaicdisease由黄瓜花叶病毒（cucumbermosaicvirus，CMV）侵染，引起胡椒受害植株生长受到显著抑制、主蔓萎缩、节间缩短，叶色斑驳、叶片皱缩变厚、变小、变狭、卷曲、畸形等症状。4监测网点设置4.1设置原则4.1.1监测范围应覆盖我省胡椒种植区。4.1.2监测点所处位置应具有区域代表性。4.1.3充分利用现有的其它作物有害生物监测点及监测网络资源。4.2设置要求4.2.1固定监测点在胡椒主产区县，根据气候特征、区域种植模式和植物病害发生史，选择胡椒主产区作为固定监测区，每个固定监测区设立3个监测点，每个监测点面积为10mu～15mu。4.2.2随机监测点在固定监测区所属的种植户，对固定监测点范围外，每季度随机抽取1个面积为2mu～3mu的地块作为随机监测点。5监测方法5.1固定监测点5.1.1监测频次每年1～3月份，每月上旬和下旬各监测1次；其余时段每月监测1次。5.1.2监测内容胡椒长势、胡椒花叶病发生情况，同时收集气象数据填写附录A.1。T/HNBXXXX—20265.1.3监测方法每个监测点按五点取样法，每点选20株，共确定100株观测植株，逐一编号。按不同方位选择每株胡椒中上部叶片20片，调查统计病株率和病情指数。原始数据按填写附录A.2和A.3。5.2随机监测点5.2.1监测频次全年监测4次，每次间隔3个月。5.2.2监测内容与5.1.2监测内容一致，同时收集气象数据填写附录A.1。5.2.3监测方法按照5.1.3方法进行，原始数据按附录A的表A.2和A.3填写。5.3普查5.3.1普查频次每年4～12月份，以固定监测区以外的胡椒种植区作为普查区域，调查1次。5.3.2普查内容与5.1.2监测内容一致，同时收集气象数据填写附录A.1。5.3.3普查方法按照5.1.3方法进行，原始数据按附录A的表A.2和A.3填写。6病害诊断6.1田间诊断对照附录B，判断是否为胡椒花叶病。现场不能确诊的，采集疑似叶片样本带回实验室做进一步的检测鉴定。6.2室内检测6.2.1检测方法6.2.1.1显微观察取少许感病叶片放入研钵中，加入少量0.02M的PBS缓冲液（pH7.0），充分研磨。将研磨液转入1.5mL离心管中，4℃6000×g离心5min，取上清。将200目铜网置于上清液表面，吸附5min。然后用2%醋酸铀（pH4.2）染色10s，吸去多余液体，烘干铜网。6.2.1.2酶联免疫检测采用双抗夹心酶联免疫吸附测定（DAS-ELISA）法检测。按照NY/T1805执行。6.2.2检测结果记录将检测鉴定结果登记在附录A的A.4。7病情统计7.1病情分级以发病叶片数占调查叶片总数的病叶率进行病情分级，病情分级标准见表1。T/HNBXXXX—2026表1胡椒花叶病病情分级标准7.2病株率病株率（R）用式（1）计算：R=×100······················································(1)T——发病株数；S——调查总株数；计算结果保留到小数点后一位。7.3病情指数病情指数（DI）用式（2）计算：···················································(2)A——各病级叶片数；B——相应病情分级级值；C——调查的总叶片数；计算结果保留到小数点后一位。8监测结果当监测点出现病株后，结合天气趋势分析，及时发出预报；当病株率﹥5%或病情指数﹥10时，提出病害预警。9样品及档案保存监测信息数据应做好档案保存，保存2年。T/HNBXXXX—20266（规范性）胡椒花叶病病情登记表A.1气象数据登记表气象数据登记见表A.1。表A.1气象数据登记表(℃)(℃)(℃)12345......A.2胡椒花叶病病情监测记录表胡椒花叶病病情监测记录见表A.2。表A.2胡椒花叶病病情监测记录表县（市、区监测区：样点编号调查株数感病株数0135791234512T/HNBXXXX—20267表A.2胡椒花叶病病情监测记录表（续）点样点编号调查株数感病株数013579345A.3胡椒花叶病病情监测统计表胡椒花叶病病情监测统计见表A.3。表A.3胡椒花叶病病情监测统计表......T/HNBXXXX—2026A.4胡椒花叶病样本鉴定胡椒花叶病样本鉴定见表A.4。表A.4胡椒花叶病样本鉴定表T/HNBXXXX—2026（资料性）胡椒花叶病监测调查统计表B.1田间症状胡椒花叶病的田间发病症状主要有以下几种：感病胡椒植株叶片斑驳、变小、皱缩、变厚、变硬易碎、变小、变狭、卷曲、畸形，严重时叶片会出现脱落的迹象。花穗易脱落，果穗短小，果实稀疏，导致产量显著下降。主蔓萎缩，节间缩短，生长受到明显抑制。地下茎蔓部分的皮层组织变厚且成暗褐色，严重时根部坏死。图B.1胡椒花叶病整株症状图B.2胡椒花叶病叶片症状B.2病毒粒子的形态特征黄瓜花叶病毒（Cucumbermosaicvirus，CMV粒体球形，质粒直径大小为270～300A，形态特征具体按照陈作义的《胡椒花叶病病原体的电子显微镜研究》。T/HNBXXXX—2026[1]车海彦，曹学仁，贺延恒，等.海南岛黄瓜病毒病种类鉴定及其发生分布研究[J].热带作物学报，2020，4(11):2280-2284.318_319.[3]HaiyanChe,XuerenCao,PeipeiLiu,etal.Occurrenceandcharacterizationof