淋巴细胞的分离、计数_第1页
淋巴细胞的分离、计数_第2页
淋巴细胞的分离、计数_第3页
淋巴细胞的分离、计数_第4页
淋巴细胞的分离、计数_第5页
已阅读5页，还剩10页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

淋巴细胞的分离、计数中山医学院免疫学教研室2013-04

实验目的和要求掌握外周血单个核细胞分离的方法掌握细胞计数的方法

实验原理

外周血中细胞种类

细胞密度

红细胞和多形核白细胞1.092

淋巴细胞和单核细胞（PBMC）

1.075-1.092

血小板

1.030-1.035

葡聚糖—泛影葡胺密度梯度离心法：

根据外周血中各种血细胞比重不同使不同密度的细胞呈梯度分布，从而分离出PBMC。

实验材料1.

肝素抗凝血2.

Hank’s液3.

淋巴细胞分离液（F-H)4.水平离心机，加样枪5.显微镜，吸管6.细胞计数板，台盼蓝计数液

实验方案抽取外周血分离单个核细胞（淋巴细胞和单核细胞）（PBMC）

细胞计数实验步骤肝素抗凝静脉血1.5ml加1.5mlHank’s液稀释置于2ml淋巴细胞分离液上(交界液面：一定不要打乱)稀释后的抗凝血淋巴细胞分离液注意：稀释的肝素抗凝血，沿管壁轻轻叠加于分离液上，使两者形成一个清晰地界面。细胞计数板

细胞计数

原则：

数上不数下，数左不数右长1mm宽1mm

结果计算22个大方格内细胞总数单个核细胞浓度（细胞数/ml)×104×10=(稀释倍数）活细胞百分率=活细胞数细胞总数×100%细胞活力检测：（死细胞被染成蓝色，活细胞不着色）细胞数量：方法评价

纯度在90%以上淋巴细胞约占90-95%细胞收获率可达80-90%活细胞百分率在95%以上密度梯度离心法分离外周血单个核细胞：

细胞计数的仪器血细胞分

人人文库> 全部分类> 办公材料 > 办公文档

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论