高致病性禽流感防治技术规范

高致病性禽流感防治技术规范

高致病性禽流感(HighlyPathogenicAvianInfluenza,HPAI),

是由正粘病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的禽类烈性传染病。

世界动物卫生组织(0IE)将其列为A类动物疫病，我国将其列为一

类动物疫病。

为预防、控制知消灭高致病性禽流感，根据《中华人民共和国

动物防疫法》及有关的法律法规，特制定本规范。

1合用范围

本规范要求了高致病性禽流感日勺诊疗、疫情报告、疫情处理、

防治措施、控制和净化原则。

本规范合用于中华人民共和国境内日勺一切从事禽类喂养、经营和禽

类产品生产、经营，以及从事动物防疫活动的单位和个人。

2诊疗

2.1有下列情况之一的，可确觉得高致病性禽流感：

2.1.1有经典的临床症状和病理变化，发病急、死亡率高，且

能排除鸡新城疫和中毒性疾病，血清学检测阳性。

2.1.2未经免疫鸡场日勺家禽出现H5.H7亚型禽流感血清学阳性。

2.1.3在禽群中分离到H5.H7亚型禽流感病毒株或其他亚型高致病

力禽流感毒株。

2.2流行特点

鸡、火鸡、鸭、鹅、鹤鹑、雉鸡、鹅鸡、鸵鸟、鸽、孔雀等多

种禽类均易感。

传染源主要为病禽和带毒禽（涉及水禽和飞禽）。病毒可长久

在污染的粪便、水等环境中存活。

病毒的传播主要经过接触感染禽及其分泌物和排泄物、污染的饲

料、水、蛋托（箱）、垫草、种蛋、鸡胚和精液等媒介，经呼吸

道、消化道感染，也可经过气源性媒介传播。

2.3临床症状

潜伏期从几小时到数天，最长可达21天。

体现为忽然死亡、高死亡率，饲料和饮水消耗量及产蛋量急剧下降,

病鸡极度沉郁，头部和脸部水肿，鸡冠发给、脚鳞出血和神经紊

乱；鸭鹅等水禽有明显神经和腹泻症状，可出现角膜炎症，甚至失

明。

2.4病理变化

2.4.1剖检病变：全身组织器官严重出血。腺胃粘液增多，刮

开可见腺胃乳头出血、腺胃和肌胃之间交界处粘膜可见带状出血;

消化道粘膜，尤其是十二指肠广泛出血；呼吸道粘膜可见充血、出

血；心冠脂肪及心内膜出血；输卵管的中部可见乳白色分泌物或凝

块；卵泡充血、出血、萎缩、破裂，有的可见“卵黄性腹膜炎”。水

禽在心内膜还可见灰白色条状坏死。胰脏沿长轴常有淡黄色斑点和

暗红色区域。

急性死亡病例有时未见明显病变。

2.4.2病理组织学变化：主要体现为脑、皮肤及内脏器官（肝、

脾、胰、肺、肾）的出血、充血和坏死。脑的病变涉及坏死灶、血

管周围淋巴细胞管套、神经胶质灶、血管增生和神经元性变化；胰

腺和心肌组织局灶性坏死。

2.5试验室诊疗

2.5.1病原鉴定

2.5.1.1符合用应生物安全级别日勺，巨经国务院畜牧兽医行政管

理部门认定日勺省级以上动物疫病诊疗试验室和研究机构日勺试验室，可

开展病原鉴定工作C

2.5.1.2样品采集

活禽样品应采集泄殖腔拭子和气管拭子；死禽样品应采集气

管、脾、肺、肝、肾和脑等组织器官；小珍禽样品应采集新鲜粪便

（见附件一）。

2.5.1.3病原学诊疗

主要涉及病原分离、鉴定（见附件二）和毒力测定（见附件

三）。

2.5.2血清学诊疗

主要涉及琼脂凝胶免疫扩散试验（AG1D）（不合用于水禽）

（见附件四）、血凝克制试验（HI）（见附件五）。

3疫情报告

3.1任何单位知个人发觉患有本病或疑似本病的禽类，都应该

立即向本地动物防疫监督机构报告。

3.2动物防疫监督机构接到疫情报告后，按农业部《动物疫情报告

管理措施》和《国家高致病性禽流感防治应急预案》等有关要求执

行。

4疫情处理

实施以紧急扑杀为主的综合性防治措施。

4.1发觉疑似高致病性禽流感疫情时，畜主应立即将病禽

（场）隔离，并限制其移动。动物防疫监督机构要及时派员到现场

进行调查核实，进行流行病学调查、临床症状检验、病了解剖、采

集病料、试验室诊疗等，根据诊疗成果采用相应措施。

4.2当发生高致病性禽流感时，按下列要求处理：

4.2.1划定疫点、疫区、受威胁区

由所在地县级以上畜牧兽医行政管理部门划定疫点、疫区、受

威胁区。

疫点：指患病动物所在的地点。一般是指患病禽类所在的禽场

（户）或其他有关屠宰、经营单位；如为农村散养，应将自然村划

为疫点。

疫区：指以疫点为中心，半径3-5公里范围内区域。疫区划分

时，应注意考虑本地的喂养环境和天然屏障（如河流、山脉等）。

受威胁区：指疫区外延5-30公里范围内的区域。

4.2.2封锁

由县级以上畜牧兽医行政管理部门报请同级人民政府决定对疫

区实施封锁；人民政府在接到封锁报告后，应在二十四小时内公布

封锁令，并对疫区进行封锁。

对疫点、疫区采用不同的处理措施。其中：

疫点出入口必须有消毒设施。禁止人、禽、车辆进出和

禽类产品及可能受污染的物品运出，在特殊情况下必须出入时，须

经所在地动物防疫监督机构同意，经严格消毒后，方可出入。

疫区交通要道建立动物防疫监督检验站，派专人监视动

物和动物产品日勺流动，对进出人员、车辆须进行消毒。停止疫区内

禽类及其产品日勺交易、移动。水禽必须圈养，或在指定地点放养。

4.2.3扑杀

确觉得高致病性禽流感时，在动物防疫监督机构的监督指导下

对疫点内全部的禽只进行扑杀。

4.2.4无害化处理

对全部病死禽、被扑杀禽及其禽类产品（涉及禽肉、蛋、精

液、羽、绒、内脏、骨、血等）按照GB16548《畜禽病害肉尸及其

产品无害化处理规程》执行；对于禽类排泄物和被污染或可能被污

染的垫料、饲料等物品均需进行无害化处理。

禽类尸体需要运送时，应使用防漏容器，须有明显标志，并在

动物防疫监督机构日勺监督下实施。

4.2.5紧急免疫

对疫区和受威胁区内的全部易感禽类进行紧急免疫接种，登记免疫

接种的禽群及其养禽场（户），建立免疫档案。

4.2.6消毒

对疫点内禽舍、场地以及全部运载工具、饮水用具等必须进行

严格彻底地消毒（见附件六）。

4.2.7紧急监测

对疫区、受威胁区内禽类实施紧急疫情监测，掌握疫情动态。

4.2.8疫源分析与追踪调查

根据流行病学调查成果，分析疫源及其可能扩散、流行的情

况。

对仍可能存在的传染源，以及在疫情潜优期和发病期间售出的

禽类及其产品、可疑污染物（涉及粪便、垫料、饲料等）等应立即

开展追踪调查，一经查明立即按照GB16548-1996《畜禽病害肉尸

及其产品无害化处理规程》采用就地销毁等无害化处理措施。

4.2.9封锁令时解除

疫点内全部禽类及其产品按要求处理后，在动物防疫监督机构

日勺监督指导下，对有关场合和物品进行彻底消毒。最终一只禽只扑

杀21天后，经动物防疫监督机构审验合格后，由本地畜牧兽医行政

管理部门向原公布封锁令的同级人民政府申请公布解除封锁令。

疫区解除封锁后，要继续对该区域进行疫情监测，6个月后如

未发觉新日勺病例，即可宣告该次疫情被扑灭。

4.2.10处理统计

对处理疫情的全过程必须做好完整的详细统计，以备检验。

5预防与控制

5.1加强喂养管理，提升环境控制水平。

喂养、生产、经营场合必须符合动物防疫条件，取得《动物防

疫合格证》。喂养场实施全进全出喂养方式，控制人员出入，严格

执行清洁和消毒程序。

鸡和水禽禁止混养，养鸡场与水禽喂养场应相互间隔3公里以

上，且不得共用同一水源。

养禽场要有良好的预防禽鸟（涉及水禽）进入喂养区日勺设施，

并有健全的灭鼠设施和措施。

5.2加强消毒，做好基础防疫工作

各喂养场、屠宰厂（场）、动物防疫监督检验站等要建立严格

日勺卫生（消毒）管理制度。

5.3监测

5.3.1由县级以上动物防疫监督机构组织实施。

5.3.2监测措施

未经免疫区域：以流行病学调查、血清学监测为主（涉及琼脂

扩散试验、血凝克制试验等措施），结合病原分离和毒型鉴定、毒

力鉴定进行监测。

免疫区域：以病原学监测为主，结合血清学监测。

5.3.3监测对象：以鸡、火鸡、鸭、鹅等为主，也涉及鹤鹑、雉

鸡、鹏鹄、鸵鸟、鸽、孔雀和候鸟等易感禽类。

5.3.4监测环节与措施

5.3.4.1产地监测：对未免疫和免疫的养禽场均可采用病原学

监测措施进行监测C

对全部原种、理祖代、祖代和父母代养禽场，有出口任务的养

禽场，商品代养禽场每年要进行两次监测；散养禽不定时抽检。

采样百分比：每群采10只禽的棉拭子，放在同一容器内，混合

为一种样品，用于鸡胚接种，进行病毒分离。

对于未免疫的养禽场以血清学监测为主。

有出口任务养禽场的监测，每批次按照0.5%的百分比采样；每

批次数量超出10万只日勺，按0.现时百分比采样；其他全部养禽场

每六个月至少监测一次。父母代以上种禽场，每批次（群）按照

0.5%的百分比进行监测；商品代养禽场，每批次（群）按照0.设日勺

百分比进行监测。散养禽不定时抽检。

每批次（群）监测数量不得少于20份。

5.3.4.2流通环节的监测

对交易市场、禽类屠宰厂（场）、异地调入日勺活禽和禽产品进

行不定时日勺病原学知血清学监测。

5.3.5监测成果处理

监测成果要及时汇总，由省级动物防疫监督机构定时上报全国

畜牧兽医总站。发觉病原学和非免疫禽血清学阳性的，要按照《农

业部动物疫情报告管理措施》的有关要求立即报告和处理。

监测中发觉因使用未经农业部同意生产的禽流感疫苗而造成血

清学阳性禽群，一律按发生禽流感疫情处理。

5.3.6免疫

在发生疫情时，对疫区、受威胁区内的全部易感禽只进行紧急

免疫；在曾发生过疫情区域的水禽，必要时也可进行免疫。

所用疫苗必须是经农业部同意使用的禽流感疫苗。

5.3.7引种检疫

国内异地引入种禽及精液、种蛋对，应该先到本地动物防

疫监督机构办理检疫审批手续且检疫合格，引入的种禽必须隔离喂

养21天以上，并由动物防疫监督机构进行检测，合格后方可混群喂

养。

从国外引入种禽及精液、种蛋时，按国家有关要求执行。

6无高致病性禽流感区原则

无高致病性禽流感区，必须满足如下条件：

6.1达成国家无要求疫病区基本条件。

6.2有定时、迅速的动物疫情报告统计。

6.3在过去3年内没有发生过高致病性禽流感；在过去6个月

内，没有接种过禽流感疫苗；停止免疫接种后，没有引进接种过禽

流感疫苗的禽类。

6.4有有效日勺监测体系和监测区，过去3年内实施疫病监测，

未检出H5、H7病原或H5、H7禽流感HI试验阴性。

6.5全部的报告、监测统计等有关材料精确、详实、齐全。

6.6若发生高致病性禽流感时，在采用扑杀措施及血清学监测的情

况下，最终一只病禽扑杀后6个月；或采用扑杀措施、血清学监测

及紧急免疫情况下，最终一只免疫禽屠宰后6个月，经实施有效的

疫情监测和血清学检测确认后，方可重新申请无高致病性禽流感

区。

附件一：

样品采集与处理

活禽病料应涉及气管和泄殖腔拭子，最佳是采集气管拭子。小

珍禽用拭子取样易造成损伤，可采集新鲜粪便。死禽采集气管、

脾、肺、肝、肾和脑等组织样品。将每群采集的10份棉拭子，放在

同一容器内，混合为一种样品；容器中放有具有抗菌素日勺pH值为

7.0-7.4PBS液c抗生素日勺选择视本地情况而定，组织和气管拭

子悬液中应具有青霉素(2023IU/mL)、链霉素(2mg/mL),庆大霉

素(50ug/mL),制霉菌素(1000IU/mL),但粪便和泄殖腔拭子全

部的抗生素浓度应提升5倍。加入抗生素后pH值应调至7.0-7.4O

若不加抗生素，可用细菌过滤器过滤除菌，粪便、研碎的组织用含

抗生素的溶液配成10-20%(W/V)的悬液，冰浴放置1-2小时内样

品应尽快处理，如来不及处理，可放在-70七或如下保存，若放在

4(保存不能超出5天。

将混合样品用抗生素制成悬液，接种到9T1日龄鸡胚尿囊腔内，

0.1mL/胚；置于35-37寸孵育4-7天，检测死胚和全部到孵化末期鸡

胚尿囊液日勺血凝活性。用浓缩病毒和全部A型流感病毒共有的核衣

壳或基质抗原的抗血清作免疫扩散试验，能确诊A型流感病毒。

测定毒株对禽日勺致病力措施：将感染鸡胚尿囊液用生理盐水1：10

稀释，以0.1mL/羽的剂量翅静脉接种至少8只4-8周龄日勺易感

鸡。每日观察鸡日勺死亡情况，连续观察10天。10天内假如死亡率

高于75玳则觉得该病毒毒株为高致病力。

附件二:

病原鉴定方法

增殖A型流感病毒的很好措施是将其接种于无特定病原体

（SPF）鸡胚。粪便和组织悬液经1000rp/m离心10分钟，上清液以

0.2mL/胚日勺剂量经尿囊腔途径接种9〜11日龄SPF鸡胚，每个样品

接种5个胚，于37C孵化箱内孵育4-7天。18小时后每8小时观察

鸡胚死亡情况，死亡鸡胚或者濒死鸡胚以及孵育末期全部日勺鸡胚放

在49冷却，检测尿囊液的HA活力（见附件4）。阳性反应阐明很

可能有正粘病毒科的流感病毒，呈阴性反应的尿囊液至少应再接种

一批鸡胚。

用AGID试验（见附件5）检测流感病毒，可证明A型流感病毒

属全部组员共同存在的核衣壳和基质抗原,

抗原制备措施：

1用浓缩的尿囊液病毒或者用已感染日勺绒毛尿囊膜时提取物，这些

抗原用原则血清进行标定。将含毒尿囊液以超速离心或者在酸性条

件下进行沉淀以浓缩病毒。

酸性沉淀法是将l.0mol/LHC1加入到含毒尿囊液中,调pH值到

4.0,将混合物置于冰浴中作用1小时，经1000rp/m,4C离心10

分钟，弃去上清液c病毒沉淀物悬于甘氨-肌氨酸缓冲液中（含1%

十二烷酰肌氨酸缓冲液，用0.5mol/L甘氨酸调pH值至9.0）。沉

淀物中具有核衣壳知基质多肽。

2用含丰富病毒核衣壳的尿囊膜制备，从尿囊液呈HA阳性日勺感

染鸡胚中提取绒毛尿囊膜，将其匀浆或研碎，然后反复冻融三次，

经1000rp/m离心10分钟，弃沉淀，取上清液用0.1%福尔马林处理,

制备抗原。

附件三:

静脉接种致病指数（IVPI）试验操作措施

收获接种病毒日勺SPF鸡胚日勺感染性尿囊液，测定其血凝价不不不不

大于1/16（24或lg24）,将含毒尿囊液用灭菌生理盐水稀释10倍

（切忌使用抗生素），将此稀释病毒液以0.1mL/羽静脉接种10只6

周

龄SPF鸡，2只一样鸡只接种0.1mL稀释液作对照（对照鸡不应发病,

也不计入试验鸡）。每隔二十四小时检验鸡群一次，共观察10天。

根据每只鸡日勺症状用数字措施每天进行统计：正常鸡记为0,病鸡

记为1,重病鸡记为2,死鸡记为3（病鸡和重病鸡的判断主要根据

临床症状体现。一般而言，“病鸡”体既有下述一种症状，而“重

病鸡”则体现下述多种症状，如呼吸症状、沉郁、腹泻、鸡冠和/或

肉髯发给、脸和/或头部肿胀、神经症状。死亡鸡在其死后的每次观

察都记为3)o

IVPI值=每只鸡在10天内全部数字之和/(10只鸡X10天)，

如指数为3.00,阐明全部鸡二十四小时内死亡；指数为0.00,阐明

10天观察期内没有鸡体现临床症状。

当IVPI值不不不不大于1.2时，鉴定分离株为高致病力禽流感

病毒(HPAIV)o

附件四：

琼脂凝胶免疫扩散试验(AGID)

因为A型流感病毒都有抗原性相同的核衣壳和基质抗原，能够

利用免疫扩散试验检测A型流感病毒的存在是否。制备的浓缩病毒

制剂具有基质和核灰壳抗原；基质抗原与核衣壳抗原相比扩散得较

快。琼脂免疫扩散试验已作为常规试验措施来检测鸡与火鸡的特异

性抗体，并可作为鸡群感染证据。

1抗原制备

一般常用的核衣壳浓缩制剂是从被感染的10日龄鸡胚绒毛尿囊

膜中取得日勺，将其匀浆冻融三次，以1000rp/m离心10分钟，取上

清液加0.1%福尔马林或丙内酯灭活，再离心即可作为抗原。

流感病毒感染后不是全部的禽种都能产生沉淀抗体。

2琼脂板制备

该试脸常用1克优质琼脂粉或0.81克琼脂糖加入

100mLO.Olmol/L.pH值7.2日勺8%氯化钠-磷酸缓冲液中，水浴

加热融化，稍凉（609-65（）,倒入琼脂板内（厚度为3nlm）,待

琼脂凝固后，4P冰箱保存备用。用打孔器在琼脂板上按7孔梅花图

案打孔，孔径约3mm-4mm,孔距为3mmo

3加样

用移液器滴加抗原于中间孔，周围1.4孔加阳性血清，其他孔

加被检血清，每孔均以加满不溢出为度，每加一种样品应换一种滴

头，并设阴性对照血清。

4感作

将琼脂板加盖保湿，置于37C温箱。24-48小时后，鉴定成

果。

5成果鉴定

5.1阳性。［CX］阳性血清与抗原孔之间有明显沉淀线时，被检

血清与抗原孔之间也形成沉淀线，并与阳性血清日勺沉淀线末端吻合,

则被检血清判为阳性。

5.2弱阳性。被检血清与抗原孔之间没有沉淀线，但阳性血清的沉

淀线末端向被检血清孔偏弯，此被检血清判为弱阳性（需反复试

验）。

5.3阴性。被检血清与抗原孔之间不形成沉淀线，且阳性血清沉淀

线直向被检血清孔，则被检血清判为阴性，

附件五:

血凝克制(HI)试验

1操作程序

1.1抗原血凝效价测定

1.1.110%和0.5%鸡红细胞液的制备

1.1.1.1采鸡血：用注射器吸收阿氏液约1mL,取3日龄70日

龄SPF鸡(至少2只)，心脏采血约2mL-4mL,与阿氏液混合，放

入装10mL阿氏液日勺离心管中混匀。

1.1.1.2洗涤鸡红细胞:将离心管中的血液经1500rp/mT800

rp/m离心8分钟，弃上清液，沉淀物加入阿氏液，轻轻混合，再经

1500rp/m-1800rp/n］离心8分钟，用吸管移去上清液及沉淀红细胞

上层的白细胞薄膜，再屡次反复以上过程后，加入阿氏液20mL,

轻轻混合成红细胞悬液，4七保存5天备用。

1.1.1.310%鸡红细胞悬液：取阿氏液保存不超出5天日勺红细胞,

在锥行刻度离心管中离心1500rp/m-1800rp/m8分钟,弃去上清液,

精确观察刻度离心管中红细胞体积GnL),加入9倍体积(mL)的生理

盐水，用吸管反复吹吸使生理盐水与红细胞混合均匀。

1.1.1.40.5%鸡红细胞液：取混合均匀的10%鸡红细胞悬液1

mL,加入19ml,生理盐水，混合均匀即可:，

1.1.2抗原血凝效价测定

1.1.2.1于微量血凝板日勺A-G排各孔分别加入生理盐水50u

Lo

1.1.2.2A-G排每排日勺第1孔加入抗原50uL,每一种抗原日勺血凝效

价测定应作两排检验，如A1孔与B1孔各加入新城疫病毒抗原50

uL；Cl孔与D1孔各加入禽流感病毒（A型）抗原50HL,以此类

推。

1.1.2.3用微量移液器从第1孔至第12孔对抗原作系列倍匕稀

释，即将第1孔的抗原与生理盐水用移液器反复吹吸3次，吸出50

uL移至第2孔，用生理盐水清洗吸头3次后，再用于下一种孔的

混合，以此类推，直至第12孔，从第12孔吸出50uL弃去，此孔

抗原时最终稀释度为1:4096。

1.1.2.4每孔中加入0.5%鸡红细胞悬液50uL,涉及H11

孔与H12孔。

1.1.2.5将血凝板置振荡器上中速振荡1-2分钟。

1.1.2.6置室温（18℃-22℃）感作45分钟。

1.1.2.7抗原血凝价鉴定：感作完毕，观察血凝板，判读成果（见

下表）。

表孔底所见成果

1:

血凝

试验

成果

判读

原则

类别

1红细胞全部凝集，均匀铺于孔底，即100%红细++++

2胞凝集+++

3红细胞凝集基本同上，但孔底有大圈++

4红细胞于孔底形成中档大的圈，四面有小凝块+

5红细胞于孔底形成小圆点，四面有少许凝集块

红细胞于孔底呈小圆点，边沿光滑整齐，即红

细胞完全不凝集

红细胞于孔底呈小圆点，边沿光滑整齐，即红

细胞完全不凝集

能使红细胞完全凝集（100%凝集，++++）的抗原最高稀释度为

该抗原日勺血凝效价，此效价为1个血凝单位。注意对照孔应呈现完

全不凝集（-）,不然此次检验无效。

1.2血凝克制试验

1.2.1被检血清样品准备

1.2.1.1血清灭活：被检血清，涉及3日性、阴性血清，56C水

浴30-45分钟，以破坏补体及血凝克制因子。

1.2.2抗原准备

禽流感病毒（A型）作血凝克制试验时多种抗原所用血凝单位

是8个与4个血凝单位。

8个血凝单位抗原的配置：假如某抗原的血凝效价为1：1024,

8个血凝单位为1024/8=128（即1：128）,取生理盐水11.8mL,加

入1：10稀释的抗原1.0mL,混合均匀即为1：128稀释液。

1.2.3抗原血凝效价日勺重测定

1.2.3.1为了确保血凝克制试验时使用抗原的活性，有必要对

已配置日勺8个血凝单位抗原进行血凝效价的重测定，此项试验常与

血凝克制试验同步进行。

1.2.3.2A至H各排第1孔分别加入100UL8个血凝单位抗

原。

1.2.3.3A-H各排第2-8孔分别加入生理盐水50HL。

1.2.3.4将抗原分别作系列倍比稀释至第8孔，从第8孔吸出

50uL弃去。

1.2.3.5每孔加0.5%鸡红细胞悬液50UL。

1.2.3.6将血凝板置微量振荡器振荡1-2分钟。

1.2.3.7室温（18℃-22℃）感作45分钟。

1.2.3.8观察成果，若血凝单位偏离两个以上稀释度，则血凝

克制试验无效。若血凝单位偏离1个稀释度，属可校正范围，按常

规对被检血清的血凝克制效价进行校正。

1.2.4血凝克制试验

1.2.4.1血凝板每排检测一份被检血清。第1孔分别加入被检

血清20uL,再加入生理盐水80HL,被检血清稀释度为1：5o

1.2.4.2设阳性血清和阴性血清对照，

1.2.4.3每排第2孔分别加入50HL8个单位抗原，第3T1孔

分别加入50uL4个单位抗原。

1.2.4.4用移液器自第1孔吹吸3次后，取出50uL移至第2

孔，以此倍比稀释至第11孔，从11孔吸出50uL弃去。

1.2.4.5第1孔为血清对照，第2孔被检血清为1：10稀释，

第3孔为1：20,第4孔为1：40,以此类推，第11孔为1：

5120o

1.2.4.6每孔加入0.5%鸡红细胞悬液50uL。

1.2.4.7将血凝板置微量振荡器上振荡1-2分钟。

1.2.4.8置室温（18℃-22℃）感作45分钟。

1.2.4.9感作完毕，将血凝板倾斜70°,凡沉淀于孔底的红细

胞沿倾斜面对下呈线状流动，呈现与红细胞对照孔一样者为完全不

凝集孔。出现完全不凝集的血清最高稀释度为该被检血清血凝克制

效价。

2成果鉴定

禽流感（A型）的血凝克制效价21：10为阳性。

该试验中，鸡血清极少出现非特异性阳性反应，被检血清不必进行

预处理。其他禽类血清可能对鸡红细胞有非特异性凝集反应，可用

鸡红细胞对被检血清进行吸附，以除去这种非特异性凝集特征。措

施是在每0.5mL时被检血清中加入0.025n.L的鸡红细胞，轻摇后静

置30分钟以上，1500rp/m离心2〜5分钟。也可用不具有特异性抗

体的被检禽红细胞替代鸡红细胞。

附件六:

消毒

1药物种类

烧碱、醛类、氧化剂类、氯制剂类、双季胺盐类等。

2消毒范围

禽舍地面及内外墙壁，舍外环境，喂养、饮水等用具，运

送等设施设备以及其他一切可能被污染的场合和设施设备。

3消毒前的准备

3.1消毒前必须清除有机物、污物、粪便、饲料、垫料等;

3.2消毒药物必须选用对禽流感病毒有效的；

3.3备有喷雾器、火焰喷射枪、消毒车辆、消毒防护器械（如

口罩、手套、防护靴等）、消毒容器等。

4消毒措施

4.1金属设施设备的消毒，可采用火焰、薰蒸等方式消毒；

4.2禽舍、场地、车辆等，可采用消毒液清洗、喷洒等方式消

毒；

4.3养禽场的饲料、垫料等，可采用堆积发酵或焚烧等方式处

理；

4.4粪便等可采用堆积密封发酵或焚烧等方式处理；

4.5喂养、管理等人员可采用淋浴消毒；

4.6衣、帽、鞋等可能被污染的物品，可采用消毒液浸泡、高

压灭菌等方式消毒；

4.7疫区范围内办公、喂养人员的宿舍、公共食堂等场合，可采用

喷洒的方式消毒；

4.8屠宰加工、贮藏等场合以及区域内池塘等水域日勺消毒可采用相

应日勺方式进行，预防造成污染。

马传染性贫血防治技术规范

马传染性贫血(EquineInfectiousAnemia,EIA,简称马传

贫)，是由反转录病毒科慢病毒属马传贫病毒引起的马属动物传奥

病。世界动物卫生组织(0IE)将其列为B类动物疫病，我国将其列

为二类动物疫病。

为预防、控制而消灭马传贫，根据《中华人民共和国动物防疫

法》及有关日勺法律法规，特制定本规范。

1合用范围

本规范要求了马传贫的诊疗、疫情报告、疫情处理、防治措

施、控制和消灭原则。

本规范合用于中华人民共和国境内一切从事马属动物喂养、经

营，马属动物产品的生产、经营，及从事动物防疫活动日勺单位和个

人。

2诊疗

本病根据流行特点、临床症状、病理变化可做出初步诊疗，确

诊需进一步做琼脂扩散试验(AGID)或酶联免疫吸附试验(ELISA)

或病原分离鉴定。

2.1流行特点

本病只感染马属动物，其中，马最易感，驴、骡次之，且无品

种、性别、年龄的差别。病马和带毒马是主要的传染源。主要经过

虻、蚊、刺蝇及螺等吸血昆虫的叮咬而传染，也可经过病毒污染的

器械等传播。多呈地方性流行或散发，以7〜9月份发生较多。在流

行早期多呈急性型经过，致死率较高，后来呈亚急性或慢性经过。

2.2临床症状

本病潜伏期长短不一，一般为20〜40天，最长可达90天。

根据临床症状，常分为急性、亚急性、慢性和隐性四种类

型。

急性型高热稽留。发烧早期，可视粘膜潮红，轻度黄染；随

病程发展逐渐变为黄白至苍白；在舌底、口腔、鼻腔、阴道粘膜及

眼结膜等处，常见鲜红色至暗红色出血点（斑）等。

亚急性型呈间歇热。一般发烧39七以上，连续3〜5天退热

至常温，经3〜15天间歇期又复发。有的患病马属动物出现温差倒

转现象。

慢性型不规则发烧，但发烧时间短。病程可达数月或数

年。

隐性型无可见临床症状，体内长久带毒。

2.3病理变化

2.3.1剖检变化

急性型主要体现败血性变化，可视粘膜、浆膜出现出血点

（斑），尤其以舌下、齿龈、鼻腔、阴道粘膜、眼结膜、回肠、盲

肠和大结肠日勺浆膜、粘膜以及心内外膜尤为明显。肝、脾肿大，肝

切面呈现特征性槟榔状花纹。肾明显增大，实质浊肿，呈灰黄色，

皮质有出血点。

心肌脆弱，呈灰白色煮肉样，并有出血点。全身淋巴结肿大,

切面多汁，并常有出血。

亚急性和慢性型主要体现贫血、黄染和细胞增生性反应。脾

中（轻）度肿大，坚实，表面粗糙不平，呈淡红色；有日勺脾萎缩，

切面小梁及滤泡明显；淋巴小结增生，切面有灰白色粟粒状突起。

不同程度的肝肿大，呈土黄或棕红色，质地较硬，切面呈豆蔻状花

纹（豆蔻肝）；管状骨有明显的红髓增生灶。

2.3.2病理组织学病变

主要体现为肝、脾、淋巴结和骨髓等组织器官内日勺网状内皮细

胞明显肿胀和增生°急性病例主要为组织细胞增生，亚急性及慢性

病例则为淋巴细胞增生，在增生日勺组织细胞内，常有吞噬日勺铁血黄

素o

2.4试验室诊疗

2.4.1马传贫琼脂扩散试验（AGID）（见附件一）。

2.4.2马传贫酶联免疫吸附试验（ELISA）（见附件二）。

2.4.3马传贫病原分离鉴定（见附件三）。

2.4.4成果鉴定

AGID试验阴性反应马属动物，还应在1〜2周后再次采血检验,

方可确诊。

ELISA可检测早期和较低浓度日勺抗体。基于ELISA试验易产生

假阳性，有必要时，阳性反应血清需再次用AGID试验确诊。

幼驹检测为阳性的，必须检验母体日勺抗体情况。假如母体存在

马传贫抗体，须隔6个月后再次检验幼驹方可确诊。

3疫情报告

3.1任何单位知个人发觉患有本病或疑似本病的动物，都应该

及时向本地动物防疫监督机构报告。

3.2动物防疫监督机构接到疫情报告后，按《动物疫情报告管

理措施》及有关要求执行。已经经过农业部验收达成消灭原则的地

域，一旦再次发觉疫情，视同新发动物疫病的疫情报告要求处理和

上报。

4疫情处理

4.1发觉疑似马传贫病马属动物后，畜主应立即隔离疑似患病

马属动物，限制其移动，并立即向本地动物防疫监督机构报告。动

物防疫监督机构接到报告后，应及时派员到现场诊疗，涉及流行病

学调查、临床症状检验、病了解剖检验、采集病料、试验室诊疗等,

并根据诊疗成果采用相应防治措施。

4.2在马属动物喂养地，确诊为马传贫病畜后，本地县级以上

人民政府畜牧兽医行政管理部门应该划定疫点、疫区、受威胁区；县

级以上地方人民政府根据需要组织有关部门和单位采用隔离、扑

杀、销毁、消毒、限制易感动物和动物产品及有关物品出入等控

制、扑灭措施。

若呈暴发流行时，由本地畜牧兽医行政管理部门，及时报请同

级人民政府决定对疫区实施封锁，逐层上报国务院畜牧兽医行政管

理部门。县级以上人民政府根据需要组织有关部门和单位采用隔

离、扑杀等强制性控制和扑灭措施，并迅速通报毗邻地域。

4.2.1划定疫点、疫区、受威胁区

疫点指患病马属动物所在的地点，一般是指患病马属动物所在

的养殖场（户）或其他有关屠宰、经营单位。

疫区是指患病马属动物所在的自然村（屯）、马属动物喂养单

位以及发病前3个月经常活动，可能污染的地域或以疫点为中心，

半径3〜5公里范围内日勺区域。疫区划分时注意考虑疫区的喂养环境

和天然屏障（如河流、山脉等）。

受威胁区是指疫区邻近的自然村（屯）、单位，或疫区外顺延

5〜30公里范围内日勺区域。

4.2.2封锁

疫点（区）封锁期间，禁止染疫和疑似染疫的马属动物及其产品出

售、转让和调群；繁殖马属动物要用人工授精措施进行配种；种用

马属动物不得对疫区外马属动物配种；对可疑马属动物要严格隔离

检疫；关闭马属动物交易市场。禁止非疫区的马属动物进入疫区，

并根据扑灭疫情的需要对出入封锁区的人员、运送工具及有关物品

采用消毒和其他限制性措施。

4.2.3隔离

当发生马传贫时，要及时应用临床检验、血清学试验等措施进

行检测，根据检测成果，将马属动物群分为患病群、疑似感染群和

假定健康群三类。立即扑杀患病群，隔离疑似感染群、假定健康群,

经过3个月观察，不再发病后，方可解除隔离。

4.2.4监测

疫区内应对同群马属动物隔离喂养，全部马属动物每隔1个月

进行一次血清学监测；受威胁地域每3个月进行一次血清学监测。

4.2.5扑杀

患病马属动物、阳性马属动物在不放血条件下进行扑杀。

4.2.6无害化处理

病畜和阳性畜及其胎儿、胎衣、排泄物等按照GB16548《畜禽

病害肉尸及其产品无害化处理规程》进行，

4.2.7消毒

对患病和疑似患病的马属动物污染的场合、用具、物品严格进

行消毒；受污染日勺粪便、垫料等必须采用堆积密封发酵1个月等措

施处理。

4.2.8封锁日勺解除

封锁日勺疫区内最终一匹阳性马属动物扑杀处理后，并经彻底消

毒等处理后，对疫区监测90天，未见新病例；且经血清学检验3次

（每次间隔30天），未检出阳性马属动物的，对所污染场合、设施

设备和受污染日勺其他物品彻底消毒，经本地动物防疫监督机构检验

合格后，方可由原公布封锁令机关解除封锁。

5预防与控制

5.1加强喂养管理，提升马匹抗病能力。

5.2仔细做好卫生消毒、消灭蚊虻等工作，预防疫病传播。

5.3控制区、稳定控制区和无疫区，禁止接种疫苗。

5.4异地调入的马属动物，必须来自无疫区。

调出马属动物的单位和个人，应按要求报检，经本地动物防疫监督

机构进行检疫（应涉及血清学检验），合格后方可调出。

调入后必须隔离观察30天以上，并经本地动物防疫监督机构两次临

床综合诊疗和血清学检验，确认健康无病，方可混群喂养。

5.5运出县境的马属动物，运送部门要凭本地动物防疫监督机

构出具的检疫证明运送。运送途中发觉疑似马传贫病畜时，货主及

运送部门应及时向就近的动物防疫监督机构报告，确诊后，由动物

防疫监督机构就地监督畜主实施扑杀等处理措施。

5.6监测

马传贫控制区、稳定控制区采用“监测、扑杀、消毒、净化”的

综合防治措施。每年对全县6〜12月龄的幼驹，用血清学措施监测

一次。假如检出阳性马属动物，除按要求扑杀处理外，应对疫区内

的全部马属动物进行临床检验和血清学检睑，每隔3个月检验一次,

直至连续2次血清学检验全部阴性为止。

马传贫消灭区采用“以疫情监测为主”的综合性防治措施，每县每年

抽查存栏马属动物日勺1%（存栏不足10000匹的，抽检数不少于100

匹，存栏不足100匹的全检），做血清学检验，进行疫情监测，及时掌

握疫情动态。

6控制和消灭原则

6.1稳定控制原则

6.1.1县级稳定控制原则必须满足如下两个条件：

A.全县（市、区或旗）范围内连续5年没有马传贫临床病例；

B、全县（市、区或旗）停止注苗一年后，连续两年每年抽检

300匹份马属动物血清（不满300匹全检），经血清学检验，全部

阴性。

6.1.2市级稳定控制原则

全市（地、盟、州）全部县（市、区、旗）均达成稳定控制原

则。

6.1.3省级稳定控制原则

全省全部市（地、盟、州）均达成稳定控制原则。

6.1.4全国稳定控制原则

全国全部省（市、自治区）均达成稳定控制原则。

6.2消灭原则

6.2.1县级达成消灭原则，在达成稳定控制原则的基础上,

还应符合如下两个条件：

A.全县（市、区或旗）范围内临床综合诊疗无病畜。

B、全县（市、区或旗）范围内在达成稳定控制原则后，连续两

年每年抽检200匹份马属动物血清（不满200匹者全检），血清学

检验全部为阴性。

6.2.2市级消灭原则

全市（地、盟、州）全部县（市、区、旗）均达成消灭原则。

6.2.3省消灭原则

全省全部市（地、盟、州）均达成消灭原则。

6.2.4全国消灭原则

全国全部省（市、自治区）均达成消灭原则。

附件一：

马传染性贫血琼脂扩散反应试行操作措施

1检验用琼脂板的制备

1.1取高级琼脂糖1克或一般琼脂1.2克直接放入加有

500mL蒸储水日勺三角瓶中，配成2%的琼脂溶液，在沸水浴中煮沸，

全融化后再冷凝，切成1〜L5cm3小块，装入洁净砂布袋中，用10

倍量自来水冲漂两天，每天换水两次，然后改用无离子水冲漂1〜2

天，每天换水两次c将冲漂完毕日勺琼脂小块装入1000mL三角烧瓶中,

同步加入500mL无离子水再加入相当于配制1000mL磷酸缓冲液

（PBS液）或硼酸缓冲液（BBS液）的多种盐类用量，再加入1%硫

柳汞溶

液10mL,在沸水浴中使之全融化并混匀。

若是取优质琼脂1克时，可直接放入具有"万硫柳汞的100mL

的PBS或BBS液中，用热水浴融化混匀。

1.2融化后以两层纱布夹薄层脱脂棉过滤，除去不溶性杂质。

1.3将直径90mm日勺平皿放在水平台上，每平皿倒入热融化琼脂液

15〜18mL,厚度约25nlm左右,注意不要产愤怒泡,冷凝后加盖,

把平皿倒置，预防水分蒸发，放在一般冰箱中可保存两周左右。根

据受检血清样品多少亦可采用大、中、小三种不同规格日勺玻璃板。

10X16cm的玻璃板加注热琼脂液40mL；6X7cm附加注11mL；32X

7.6cm附加注6mLo

琼脂经处理后配成的琼脂液，可装瓶中用胶塞盖好，以防水分蒸发,

待使用琼脂板时，现融化现倒。

1.4打孔

反应孔现用现打。打孔器为外径4及6mm直径的薄壁型金属打

孔器。在坐标纸上画好七孔型图案。把坐标纸放在带有琼脂板的平

皿或玻璃板下面，照图案在固定位置上用金属管打孔，将切下的琼

脂板取出，勿使琼脂膜与玻璃面离动。外周孔径为6mm,中央孔径

为4mm,孔间距3nim,如图1所示。

图17孔型

(1)(2)

(3)G(4)

(5)(6)

当受检血清数量多时，可用如图2所示的检测40份血清日勺图

案。

图240孔型

010203040506

+G+G+G+

070809101112

1314151617181920

+GG+G+G+

2122232425262729

293031323334

十G十G+G+

353637383940

注解：图1.图2中的“G”字周围应有圆圈。

2抗原

检验用抗原按马传贫琼扩抗原生产制造及检验规程进行生产。

3血清

3.1检验用原则阳性血清：能与合格抗原在12小时内产生明显

致密的沉淀线的马传贫血清，做8倍以上的稀释仍保持阳性反应者

为宜，小量分装，冻结保存，使用时要注意预防散毒。

3.2受检血清：来自受检马的不腐败日勺血清，勿加防腐剂和抗凝

剂。

4抗原及血清的添加

打孔完毕，在琼脂板上端写上日期及编号等。在图1（7孔型）的

中央孔加抗原，2.5孔加检验用原则阳性血清，其他1.3.4.6孔加

入受检血清。在图2（40份血清）的孔型全部①②③……数字号孔分

别加入受检马血清，G为加抗原孔，+为加检验用包被阳性血清孔，

加至孔满为止。平皿加盖，待孔中液体吸干后，将平皿倒置，以防

水分蒸发；琼脂板则放入铺有数层湿纱布的带盖搪瓷盘中。置15〜

3（TC条件下进行反应，逐日观察3天并统计成果。

5鉴定

阳性：当检验用原则阳性血清孔与抗原孔之间只有一条明

显致密的沉淀线时，受检血清孔与抗原孔之间形成一条沉淀线；或

者阳性血清的沉淀线末端向毗邻时受检血清的抗原侧偏弯者，此种

受检血清鉴定为阳性。

阴性：受检血清与抗原孔之间不形成沉淀线，或者原则阳

性血清孔与抗原孔之间的沉淀线向毗邻的受检血清孔直伸或向受检

血清孔侧偏弯者，比种受检血清为阴性。

疑似：原则阳性血清孔与抗原孔之间日勺沉淀线末端，似乎向毗邻受

检血清孔内侧偏弯，但不易判断时，可将抗原稀释2倍、4倍、6

倍、8倍进行复试，最终鉴定成果。观察时间可延至5天。

鉴定成果时，应从不同折光角度仔细观察平皿上抗原孔与受检血清

孔之间有无沉淀线C

判断时要注意非特异性沉淀线。例如当受检马匹近期注射过组织培

养疫苗，如乙型脑炎疫苗等，可见与检验用原则阳性血清的沉淀线

末端不是融合而为交叉状，两个血清间产生的自家免疫沉淀线等。

6溶液的配制

6.1pH7.4日勺0.01moi/L磷酸缓冲生理盐水（PBS液）

6.212水磷酸氢二钠（Na2HP04•12H20）2.9克

磷酸二氢钾0.3克

氯化钠8.0克

无离子水或蒸储水加至1000mL

6.3pll8.6硼酸缓冲液（BBS液）

四硼酸钠8.8克

硼酸4.65克

无离子水或蒸储水加至1000mL

6.4硫柳汞溶液

硫柳汞1.0克

无离子水或蒸得水1000mL

附件二：

马传染性贫血酶联免疫吸附试验（间接法）

1总则

本规程所要求日勺酶联免疫吸附试验（ELISA）合用于马传染性贫血

（如下简称马传贫）的检疫，也能够用于马传贫弱毒苗免疫马的抗

体监测。

2材料准备

2.1器材

2.1.1聚苯乙烯微量反应板

2.1.2酶标仪

2.2抗原、酶标识抗体和阴、阳性原则血清

2.3试验溶液（配置措施见附录）

2.3.1抗原稀释掖

2.3.2冲洗液

2.3.3酶标识抗体及血清稀释液

2.3.4底物溶液

2.3.5反应终止液

3操作措施

3.1包被抗原

用抗原稀释液将马传贫ELISA抗原作20倍稀释，用微量移液器将稀

释抗原加到各孔内，每孔1001U。盖好盖，置4寸冰箱放置二十四

小时。

3.2冲洗

甩掉孔内的包被液，注入冲洗液浸泡3分钟，甩干，再重新注

入冲洗液，按此措施洗3次。

3.3被检血清

每份被检血清及阳性对照血清、阴性对照血清均以血清稀释液

作20倍稀释，每份被检血清依次加两孔，每孔加100口1。每块反

应板均需设阳性及阴性对照血清各两孔，盖好盖，置37C水浴作用

1小时。

3.4冲洗

措施同“3.2”。

3.5加酶标识抗体

将酶标识抗体用稀释液作1000倍稀释。每孔加100U1,盖好

盖，置37。（2水浴作用1小时。

3.6冲洗

措施同"3.2”o

3.7加底物溶液

每孔加新配制B勺底物溶液100U1,于25T〜30C避光反应10

分钟。

3.8终止反应

每孔滴力口终止剂25U1。

3.9比色

用酶标测试仪在波长492nm下，测各孔降解产物日勺吸收值。

4成果鉴定

被检血清两孔B勺平均吸收值与同块板阴性对照血清两个孔的平

均吸收值之比22,且被检血清吸收值20.2者，为马传贫阳性。

5附录

5.1聚苯乙烯微量板的处理

5.1.1将聚苯乙烯微量板用温水反复冲洗，彻底冲掉灰

尘。

5.1.2用无离子水冲洗3〜4遍，室温或37T温箱晾干，

置无尘干燥处保存备用。

5.2试液日勺配制

5.2.1抗原稀释液：0.Imol/LpH9.5碳酸盐缓冲液。

甲液：0.Imol/LpH9.5碳酸钠溶液，称取无水Na2co310.6克,以

无离子水溶液溶解至1000mLo

乙液：0.Imol/LpH9.5碳酸氢钠溶液，称取NaHC038.4克，以无

离子水溶液溶解至lOOOniLo

取甲液200mL、乙液700mL混合即成。

5.3冲洗液：0.02mol/LpH7.2PBS-O.05%吐温-20。

5.3.10.02mol/LpH7.2PBS液

甲液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液称取Na2HP04.12H20

71.64克，以无离子水溶液溶解至1000mL,

乙液：0.2mol/'L磷酸二氢钠溶液称取NaH2P04.2H2031.21

克，以无离子水溶液溶解至1000mL。

取甲液360mL,乙液140mL,NaCL38克,无离子水溶解至

5000mLo

5.3.20.02mol/LpH7.2PBS液1000mL,加吐温-20液

0.5mL混匀即成。

5.3.3酶标识抗体而血清稀释液：

0.02mol/LpH7.2PBS-0.05%吐温-20,加0・1%明胶,加10%健康

牛血清。

5.3.4底物溶液：pH5.0磷酸盐-柠檬酸缓冲液，内含

0.04%邻苯二胺和0.045%过氧化氢。

5.3.4.1pH5.0磷酸盐-柠檬酸缓冲液：

甲液0.linol/L柠檬酸溶液，称取柠檬酸(C6H807-H20)21.01

克以无离子水溶液溶解至1000mLo

乙液0.2mol/L磷酸氢二钠溶液。

取甲液243mL,乙液257mL混合即成。

5.3.4.2称取邻苯二胺40mg溶于pH5.0磷酸盐-柠檬酸缓冲液

100mL中。临用前加30%过氧化氢15011L即成。根据试验需要可按

此百分比增减。

5.3.5反应终止剂：

2moi/L硫酸；取浓H2sCh(纯度95〜98%)4mL加入32mL无离子

水中混匀即成。

附件三:

马传染性贫血病毒分离鉴定

一般是将病料接种于健康马驹或接种于马白细胞培养物，其中以接

种马驹法更为敏感C

1马匹接种试验

1.1试验驹：选自非马传染性贫血（如下简称马传贫）疫

区，1〜2岁，经3周以上系统检验，确认健康者。

1.2接种材料：无菌采用可疑马传贫马（最佳是可疑性较大或高热

期病马）的血液。如怀疑混合感染时，须用细菌滤器过滤血清，接

种材料应尽量低温保存，保存期不宜过长，接种迈进行无菌和安全

检验。

L3接种措施：常用2〜3匹马的材料等量混合，接种2匹以上日勺试

验驹，皮下接种0.2〜0.3mL左右。

1.4观察期3个月。每日早、晚定时测温两次,定时进行临

床、血液学及抗体检验。当马驹发生经典马传贫的症状和病理变化,

或血清中出现马传贫特异性抗体时，即证明被检材料中具有马传贫

病毒。

2用白细胞培养物分离病毒

培养驴白细胞1〜2天后，细胞已贴壁并伸出突起，换入新鲜营

养液，并在营养液中加入被检材料，接入被检材料日勺量应不不不不

不大于营养液量日勺10%,不然可能使培养物发生非特异性病变。

也可在倾弃旧营养液后，直接接种被检材料，371吸附1〜2小时

后吸弃接种物，换入新鲜营养液。初代分离培养一般难以出现细胞

病变，一般需盲传2〜3代，甚至更多的代次（每代7〜8天）。假

如被检材料中有马传贫病毒存在，培养物将最终出现以细胞变圆、

破碎、脱落为特征的细胞病变。为了证明细胞病变是由马传贫病毒

而不是由其他原因引起的，应该以马传染性贫血酶联免疫吸附试验

（间接法）（附件二）等检验培养物日勺抗原性。假如引起白细胞出

现细胞病变并具有明显的马传贫抗原性，则阐明被检材料中具有马

传贫病毒。

马鼻疽防治技术规范

马鼻疽(Glanders)是由假单胞菌科假单胞菌属日勺鼻疽假单胞菌

感染引起日勺一种人兽共患传染病。世界动物卫生组织(OIE)将其列

为B类动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。

为预防、控制而消灭马鼻疽，根据《中华人民共和国动物防疫

法》及有关日勺法律法规，特制定本规范。

1合用范围

本规范要求了马鼻疽的诊疗、疫情报告、疫情处理、防治措

施、控制和消灭原则。

本规范合用于中华人民共和国境内一切从事马属动物的喂养、经营

和马属动物产品日勺生产、经营，以及从事动物防疫活动日勺单位和个

人U

2诊疗

无临床症状慢性马鼻疽的诊疗以鼻疽菌素点眼为主，血清学检

验为辅；开放性鼻疽的诊疗以临床检验为主，病变不经典日勺，则须

进行鼻疽菌素点眼试验或血清学试验。

2.1流行特点

以马属动物最易感，人和其他动物如骆驼、犬、猫等也可感

染。鼻疽病马以及患鼻疽的其他动物均为本病的传染源。自然感染

主要经过与病畜接触，经消化道或损伤的皮肤、粘膜及呼吸道传

染。本病无季节性，多呈散发或地方性流行。在初发地域，多呈急

性、暴发性流行；在常发地域多呈慢性经过。

2.2临床症状

本病日勺潜伏期为6个月。

临床上常分为急性型和慢性型。

急性型病初体现体温升高，呈不规则热（39〜4UC）和颌下淋巴

结肿大等全身性变化。肺鼻疽主要体现为干咳，肺部可出现半浊

音、浊音和不同程度的呼吸困难等症状；鼻腔鼻疽可见一侧或两侧

鼻孔流出浆液、粘液性脓性鼻汁，鼻腔粘膜上有小米粒至高粱米粒

大的灰白色圆形结节突出粘膜表面，周围绕以红晕，结节坏死后形

成溃疡，边沿不整，隆起如堤状，底面凹陷呈灰白色或黄色；皮肤

鼻疽常于四肢、胸侧和腹下等处发生不足有热有痛的炎性肿胀并形

成硬固日勺结节。结节破溃排出脓汁，形成边沿不整、喷火口状的溃

疡，底部呈油脂样，难以愈合。结节常沿淋巴管径路向附近组织蔓

延，形成念珠状的索肿。后肢皮肤发生鼻疽时可见明显肿胀变粗。

慢性型临床症状不明显，有时可见一侧或两侧鼻孔流出灰黄色脓

性鼻汁，在鼻腔粘膜常见有糜烂性溃疡，有时在鼻中膈形成放