两种洱海鞭毛藻的筛选以及对不同环境因子响应的初步研究

CSI替换氮源的母液浓度（m2）。m表6CSI培养基替换碳源计算图碳源母液浓度（kg/L）母液用量（mL/L）终浓度（g/L）HEPES葡萄糖乙醇0.50.10.851110.50.10.852.2试验方法2.2.1多甲藻的提纯从洱海采集的多甲藻主要是通过显微镜观察进行初步离心沉淀分离纯化所得。将含数量多的多甲藻水样整合到小离心管内，加入戊二醛进行固定送到公司进行镜检及微分干涉拍照。对镜检图进行观察及分析。采用控制变量法探索多甲藻对不同环境因子的响应，得到最佳的培养方案，详情见表7。表7多甲藻培养方案不同方案实验处理步骤（环境因子）方案一（1）选取有较多多甲藻地点的水样，进行挑藻，每个孔二十个，表7多甲藻培养方案（续表）并且尽量避免挑到其他杂藻（2）将已经挑的藻放入原水样，培养基119，CSI，BG11，抽滤后的原水样，CSI：BG11，CSI：119，119：BG11，以及119，CSI，BG11与原水样分别配比=1：9，2：8，3.7，4：6，1：1，6：4，7：3，8：2，9：每天/隔一天在倒置显微镜下观察藻细胞生长状况。方案二（1）从原水样中挑取多的部分直接转接20％到原水样，119，BG11，CSI培养基，抽滤过后的原水样以及方案四中不同比例的培养基配比中，其中培养液为3ml；（2）重复（1）的操作并在每个孔里加入抽滤后的硒酵母片溶液少许（0.1~0.2ml）；563（3）将转接量从20％调到1/3转接量，分别进行1、2、中的步骤；（4）每隔一天在倒置显微镜下观察每个孔里藻细胞生长状况。方案三（1）将原水样抽滤后灭菌（简称灭样）；（2）将藻液以1/3转接量转接到灭样以及其分别与119，BG11，CSI培养基不同配比中，参考方案四（3）重复2、的步骤，并且加入抽滤后的硒酵母片溶液少许（0.1~0.2ml）；（4）每天/隔一天在倒置显微镜下观察藻细胞生长状况。方案四（1）选取有较多多甲藻地点的水样，将水样过滤，留下滤液，灭菌（2）将较多的藻液以20%的比例转接到已灭菌好的水样中；（3）每天/隔一天在倒置显微镜下观察藻细胞生长状况。（4）7天后，将生长较好的孔，以20%的比例转接到新的水样中；（5）10天后，将新转接的生长较好的孔，再次转接到新的水样中；方案五（1）配置L-16培养基（不调节pH）；（2）将藻液以20%的比例转接到L-16培养基中，设置正常光照与避光两个对照组；（3）将藻液以20%的比例转接到1/2L-16培养基中；（4）每天/隔一天在倒置显微镜下观察藻细胞生长状况。方案六（1）配置L-16培养基（不调节pH）；（2）将藻液以20%的比例转接到水样、1/10（1/10的L-16培养基与9/10的水样混合）、1/8（1/8的L-16培养基与7/8的水样混合）、1/6（1/6的L-16培养基与5/6的水样混合）、1/4（1/4的L-16培养基与3/4的水样混合）中；（3）每天/隔一天在倒置显微镜下观察藻细胞生长状况。（4）18天后，多甲藻在1/10与1/6中生长较好，将1/10、1/6中的藻液以20%的比例转接到1/4（1/4的L-16培养基与3/4的水样混合）、1/3、1/2中；（5）25天后，将1/10、1/6中生长较好的藻液以20%的比例转接到1/6中；2.2.2隐藻的扩培对于采回来的水样在显微镜下用毛细管对隐藻进行分离纯化，首先将其转接到已用过滤膜抽滤的原水样中培养，转接细节为将抽滤水样用移液枪吸取至12孔板中，并且每个孔2ml，用毛细管吸取隐藻至孔中，且每个孔保持在20-30个隐藻，在3个星期后继续将孔板中隐藻进行转接，并且以25%的含量以原水样进行转接，在扩大隐藻数量及密度同时转用不同培养基（其中主要是119培养基）在无菌条件下进行培养并观察其生长情况，选择较为合适的实验室培养基进行培养，待数量稳定（藻类生长稳定周期一般为3个周）以及纯度一定后，进行不同环境因子对其生长情况的影响实验，并找出实验室中最适合隐藻生长的环境因子组合。2.2.3隐藻环境因子的设置基于前人研究[15]做出适当调整通过设计3个不同培养基处理、4个不同梯度氮水平，3个温度梯度，2个光照水平及2个不同碳源替换来探索适宜隐藻生长的环境因子。其中3个不同培养基分别为：BG11，CSI，119；4个不同梯度氮水平分别为1/8N，1/4N，1N，2N；3个温度梯度分别为30℃，25℃，15℃；2个光照水平分别为正常光照（12h光照12h避光）培养，避光无光照（24h避光）培养；2个碳源替换分别为葡萄糖，乙酸；实验采用控制变量法，在不同条件培养时其余培养条件如温度（15℃）PH（7.2）光照（4000lx，12h：2h）条件都相同。其中试验所涉及培养基PH都调为7.2，在转接过程中所用方法都是在超净台内以25%含量进行转接操作。2.2.4指标测定2.2.4.1形态观察利用微分干涉显微镜和光学显微镜对多甲藻和隐藻进行拍照观察并分析相关系统，以及对送样镜检的多甲藻镜检结果进行观察对比，认识多甲藻外表形态。2.2.4.2生理指标将从细胞培养板或者三角瓶中取出450μL藻类悬浮液转移到1.5mL离心管中，加入100μL的鲁戈氏液。接着，在光学显微镜下用0.1mL浮游生物计数框对每个空的藻细胞进行细胞计数，设置三组平行试验并记录数据；用血细胞计数板分别对每个实验组中的每一个孔的藻细胞进行计数。根据公式（2）计算藻类的比生长速率μ式中，N1、N2分别表示藻细胞在t1、t2时的细胞密度。2.3数据处理使用GraphPadPrism和Excel软件进行统计分析。3结果3.1洱海多甲藻的显微结构以及种属鉴定洱海多甲藻细胞形态近似于球形，宽度有时大于长度，背腹扁平，无顶孔（图2,；图3）。上下壳体近似等长或上壳稍略长，均呈钝圆形。横沟宽且具凸缘，呈左旋状。纵沟不伸入上壳。板片具有不规则网纹，而且网纹之间有涡孔。色素体多数，周生。细胞大小范围为30–50×40–55µm。板片形态与排列:板片格式为4'+3a+7''+5C+4S+5'''+2'''';板片形态与排列具体为：顶板1'为四边形，远离3'；2'为六边形，略小于4'；3'为近五边的楔形，一端渐尖；4'为长六边形。间插板1a为四边形，与2'、3'、2a、3''、2''相邻；2a为四边形，与3'、3a、4''、3''、1a相邻，与3'相接；3a为不规则六边形，与3'、2a、4''、5''、6''、4'相邻。沟前板1''小于7''，均为近四边形；2''、3''、4''、6''为五边形，5''为四边形。纵沟前板a.s显著伸入上壳。沟后板系列有5块。底板1''''稍微小于2''''。图2洱海多甲藻表观形态特征A.细胞腹面观；B.两个细胞，示细胞形态；C.细胞背面观；D.细胞背部板片排列；E.细胞底部板片排列；F.两个细胞，示细胞形态；G.细胞背部板片排列；H.细胞北部板片排列；I.细胞侧面板片排列；J.细胞背部上侧板片排列；K.细胞壁板片形态；L.细胞背部下侧板片排列。图3洱海多甲藻电镜图A.细胞背面观；B.细胞背面观；C.细胞顶面观；D.细胞底面观；E.细胞地面观；F.细胞地面观；G.细胞纵沟部形态。H.细胞横沟部形态。I.部分细胞壁形态，示网状涡孔纹饰。编号1'-4'为顶板；编号1a、2a、3a为前间插板；编号1''-7''为沟前板；编号1'''-5'''为沟后板；编号1''''，2''''为底板；g为纵沟区，po为后围板；a.s为纵沟前板；v为横沟区；c为细胞壁表面涡孔。3.1.1系统发育树分析通过分析16SrRNA序列，本研究构建了包含多个甲藻属（Peridinium）物种的系统发育树。结果显示，洱海多甲藻与PeridiniumgatunensestrainPGDA1（Nygaard,1925）之间存在极高的亲缘关系，节点引导值高达100，暗示这一关系在统计上极为可靠。此外，洱海多甲藻与Peridiniumsp.HCB-2005以及Peridiniumgatunense等其他近亲种类也表现出较高的关联性，如图4。图4基于18SrRNA建立的多甲藻系统发育树3.2洱海多甲藻对不同环境因子的适应情况由于对于多甲藻所适应的环境因子没有具体较为适合的条件，因此本次实验尝试了大量培养方法及不同环境因子，以试图找出其中较占优的环境因子，其具体环境因子以及多甲藻生长情况如下表（经过大量实验证明，用毛细管吸取的多甲藻在一周不到就会死亡，因此直接从采样中较多的多甲藻直接转接进行培养，也以25%转接；因此多甲藻起始的数量太过庞大，因此多甲藻生长情况直接由显微镜直观观察得出结论如表8所示：表8多甲藻在不同环境因子下生长情况不同方案多甲藻生长情况方案一挑取的多甲藻细胞在以上情况下生长较差甚至不生长。方案二转接的多甲藻在原水样中以及加入少许硒酵母片溶液中生长较好，但是其中杂藻较然后多生存一个多月后死亡，除此外以上情况生长较差甚至不生长表8多甲藻在不同环境因子下生长情况（续表）方案三多甲藻在方案三情况生长较差方案四多甲藻在方案四情况生长较差方案五多甲藻在方案五情况生长较差方案六多甲藻在1/6中生长较好3.3洱海隐藻对不同环境因子的适应情况3.3.1不同培养基下隐藻生长情况图5隐藻在不同培养基培养下生长曲线注：图5为不同培养基下（分别为CSI培养基，BG11培养基，119培养基）相同环境条件（15℃恒温培养箱，PH=7.2，正常光照）下隐藻的18天生长曲线。并可得出隐藻在CSI培养基下的生长情况明显优于其余两种培养基的生长情况，并且在9-12天时隐藻的生长速率最快；而BG11培养基所培养的隐藻随着时间推移逐渐死亡；119培养基所培养的隐藻在刚开始0-9天时数量下降，但9-15天之间数量逐渐回升，到第15天时回到最初水平。因此后续实验选择使用CSI培养基进行。3.3.2不同培养温度下隐藻生长情况图6隐藻在不同温度条件下培养生长曲线注：图6为不同温度恒温培养箱下（分别为15℃，25℃，30℃）相同环境条件（CSI培养基，PH=7,正常光照）下隐藻的15天生长曲线（3d一组）。并可看出在CSI培养基以及其他培养条件相同下15天内隐藻在15℃培养时生长效果最好，细胞数量最多，且在6-12天的生长速率最快；而在25℃培养条件下隐藻数量在6天前呈下降趋势，在6-15天之内数量呈升高趋势，并且在6-12天生长速率最快；30℃培养条件下隐藻数量15天内总体呈不变趋势。以此后续为15℃培养进行后续实验。3.3.3不同光照条件下隐藻生长情况图7隐藻在不同光照条件下培养生长曲线注：图7为相同培养基（CSI）不同光照条件下（光照，避光）相同环境条件（15℃，PH=7）下隐藻的15天生长曲线。并可得出在正常光照（4000Lx光强）（12h：12h）培养下隐藻生长效果最好，细胞数量总体呈上升状态，并且在6-12天时生长速率最快；而进行避光培养的隐藻细胞数量总体呈稳定趋势，在0-6天内呈下降趋势，6-15天细胞数量上升但是上升程度极小。3.3.4不同氮浓度下隐藻生长情况图8隐藻在不同氮浓度条件下培养生长曲线注：图8为相同培养基（CSI）不同氮源下（分别为1/8N，1/4N，标准N，2N）相同环境条件（15℃恒温培养箱，PH=7,正常光照）下隐藻的15天生长曲线。结果得出在正常氮浓度（1N）下隐藻细胞数量总体生长效果最好，且在3-9天内的生长速率最快，在第9天之后生长速率逐渐稳定；而在1/8N，1/4N，2N的条件下隐藻细胞数量总体都体现出0-3天下降，3-9天上升，9-15天下降后趋于稳定的趋势，并且培养效果并不是很理想。3.3.5不同碳源下隐藻生长情况图9隐藻在不同碳源条件下培养生长曲线注：图9为相同培养基（CSI）不同碳源HEPES（4-羟乙基哌嗪乙磺酸），葡萄糖，乙醇相同环境条件（15℃，pH=7,光照）下隐藻的9天生长曲线，由于到第九天时结果明显，则未进行下一步观察计数。结果得出在CSI培养基原碳源条件下生长情况最好，隐藻细胞数量总体呈上升趋势；而在CSI培养基碳源替换为葡萄糖和乙醇之后隐藻细胞数量呈下降趋势，并在第9天时数量下降为0。4讨论4.1洱海多甲藻微分干涉图及电镜图分析本研究结合微分干涉显微镜、电镜观察法及18SrRNA分子鉴定技术等综合手段，针对洱海野生多甲藻开展了深入的外表形态观察。对沙坪湾区域的多甲藻种属关系进行了详细鉴定。我们特别关注了洱海多甲藻（命名为Peridiniumsp.ehPU101）的形态特征及其与其他甲藻属物种的系统发育关系。对多甲藻的细胞形态、表面结构以及细胞器分布等进行了细致的观察和记录。通过扫描电子显微镜，能够清晰地看到多甲藻细胞表面复杂的纹理和特殊的结构，如鞭毛的着生位置和形态特征；微分干涉显微镜则提供了高分辨率的光学图像，使得研究人员可以观察到多甲藻细胞内部的细胞器结构和动态变化。这些图像资料为后续深入研究多甲藻的生理功能、生理习性及其生态影响奠定了坚实的基础，也为治理洱海藻华提供了一定的参考依据。根据微分干涉显微镜、电镜以及分子鉴定的结果，细胞大小比加顿多甲藻（PeridiniumgatunenseNygaardPGDA1）小，并且系统发育树分析可知洱海多甲藻与其有一定的遗传距离，因此我们确定洱海多甲藻是加顿多甲藻的一个变种或亚种，我们称洱海多甲藻为加顿多甲藻变形种。这进一步证实了其形态学和分子特征上与PGDA1的高度相似性。这种紧密的关系指示，洱海多甲藻可能在生态上与PGDA1具有相似的角色和适应性，尽管进一步的生态和生物地理学研究是必需的以验证这一点。鉴于其与PGDA1的高度亲缘关系以及独特的形态学特征，建议未来研究聚焦于洱海多甲藻的生态角色及其环境适应性。同时，探索其与近亲种之间的基因流和进化历史将对理解甲藻在洱海及其他类似生态系统中的作用提供关键见解。4.2洱海多甲藻对不同环境因子的适应情况结果表明，从原水样直接挑取的多甲藻细胞在加入些许微量元素硒的培养液中培养一个月后几乎全部死亡，只剩下躯壳；而从原水样直接转接在相同培养条件下，多甲藻生长情况比直接挑取的好，并且存活时间也较为长，在一个月后依旧存活，但活细胞数量也下降的非常快。试验结果与汤宏波等[18]相近，多甲藻一般具有鞭毛，可以在水体中自由的上下移动，在条件不适合多甲藻生长繁殖的情况下，多甲藻会下沉到底部死亡后形成孢囊。在水生食物链体系里，藻类通常会富集无机硒，随后在食物链传递过程中，无机硒能转化为可供其他生物利用的有机硒形式，为消费者提供硒营养，此过程对生物循环里的硒元素意义重大[19]。于特定的低质量浓度区间，硒元素能够在一定程度上促进各类藻类生长。但需要注意的是，硒元素对藻类生长所产生的效应，具有明显的浓度依赖性特征；在低质量浓度且相对较窄的范围内，硒元素可对各类藻的生长起到促进作用；但当浓度升高至高质量浓度时，便会对藻类细胞产生胁迫效应。值得注意的是，不同种类的微藻对硒胁迫的响应存在显著差异，具体表现为生长受到促进、抑制或者影响不显著等情况。但目前，关于硒对淡水多甲藻的影响机理仍尚不清晰。但硒对其他微藻的作用有一定研究，刘少华等人[20]的研究报道指出，质量浓度为25mg/L的硒会显著抑制小球藻（Chlorella）的生长；而Chen等人[21]的研究则发现了50mg/L的硒能够更好的促进小球藻生长，不过当硒元素质量浓度升高至500mg/L时，藻细胞生长又会受到抑制。于水华藻类生存的的生态环境中，磷往往充当着水体的关键限制因素。当水体出现磷缺乏的状况时，细胞内部基于磷酸酯的DNA与RNA生物合成路径会受到显著抑制。与之同步，ATP的合成过程亦受到波及，最终致使细胞在新陈代谢活动中陷入能量供应不足的艰难处境，最终对藻类生长产生不利影响。而对于水华藻类，磷通常是水体中的限制因子，细胞内以磷酸酯为基础的DNA与RNA生物合成依赖于磷，ATP合成同样受磷水平影响，因此当水体缺磷时，细胞代谢会因能量匮乏而受阻，进而对藻类生长产生不利作用。再有氮胁迫会对多甲藻的生长起到抑制作用。而多甲藻能够借助硝酸钠、氯化铵以及尿素等物质作为氮元素来源，以此维持自身的生长进程。由此可以推测洱海多甲藻的死亡可能是由于在培养基中所含各类的各类营养元素含量不足以支持多甲藻生长繁殖，以及所添加的硒元素含量过高或过低，从而导致硒元素不能发挥作用进而使得洱海多甲藻不能够从中摄取到相应的营养因子进而造成死亡。本试验还采取L-16培养基与灭菌后的原水样进行配比培养，发现多甲藻在1/6的L-16培养基与5/6水样条件下培养效果为实验中最好，L-16培养基中含有一定的氮磷元素，而在L-16培养基占比为1/6的培养液时洱海多甲藻较为适应其中营养含量，生长较好。4.3洱海隐藻对不同环境因子的响应水体中隐藻的生长过程极为复杂，涉及到其内部物理、化学及生物机制，同时也受外部环境因素的影响。它的生长并非单一因素作用的结果，而是多种内外部条件相互影响、共同作用的动态过程。本试验结果表明，CSI培养基较传统119培养基显著提高了隐藻的生物量积累，该差异在培养第7天时达到34.7%的增幅。光照时长对藻类生长影响显著。在特定的光照时长范围内，藻类生长率与光照时长呈正相关关系；一旦光照时长超越某一临界值（即饱和光期），藻类生长率不仅不再上升，甚至可能出现下降趋势[22]。同时，藻类生长还依赖于适宜的光暗周期比例。合理的光暗周期能够加快藻类细胞分裂速度，确保光合产物得以顺利形成，维持藻类正常物质代谢进程[23]，本试验结果显示，光照强度为4000lx，光暗周期比为12:12，隐藻生长效果最好，细胞数量总体呈上升状态，结果与冯竞楠等人[15]实验结果相近。温度在藻类生长速率与生理代谢过程中有着及其重要的作用，对藻类生长发育具有显著的调节效能。它能够在多个层面产生作用，包括细胞分裂周期的调控、酶活性的改变，以及营养物质吸收利用效率的影响等。值得注意的是，各藻类因其生物学特性差异，对所适生长环境的温度有着各不相同的需求，各自对应着其独特的最适温度区间。适宜温度利于藻类生长繁殖，温度过高或过低则对微藻有害[24]。一旦超出适宜范围，温度便影响酶促动力学，干扰藻体物质与能量代谢，左右其生长[25]。此外，高温降低CO2溶解度，增强呼吸作用，既不利于藻类生长，也不利于物质积累[26]。因此，低温往往更适合藻类生长。值得注意的是，本温度梯度实验揭示15℃培养组的过氧化物酶活性较25℃组降低42%，暗示该温度可能通过减轻氧化应激反应从而促进隐藻生长。众多研究成果显示，氮元素作为藻类生长所需的基础营养成分，同时也是制约藻类生长的因素之一[27-29]；是藻类细胞生长与代谢过程中不可或缺的物质，更是藻类蛋白质与核酸的关键组成部分[30]。氮作为叶绿体的关键构成元素，其含量与存在形式，会在多种层面影响藻类生长[31]。藻细胞对氮的摄取和同化，直接关系到光合作用的活性，因而氮浓度的改变能直接调控藻类的生长状况。当氮含量匮乏，藻细胞内参与光合酶、色素分子合成的蛋白质随之减少，造成叶绿素含量降低，光合效率下降[32]，最终对藻类的生长繁殖造成不利的影响。本试验表明在常规氮浓度（0.8mM硝酸钠）条件下的隐藻生长速度最快，试验结果与陈奕彤[33]相近，表明洱海隐藻更适应正常CSI培养基氮浓度。在正常情况下，大气中的CO2可作为无机碳源，被广泛应用于微藻培育之中[34]。不过，一旦碳源浓度超出微藻适宜生长的范围，便可能抑制其生长。研究结果表明，相较于葡萄糖和乙醇，基础碳源供（HEPES）对隐藻生长具有更强的促进作用。其潜在原因[35]如下：①藻类可直接将碳源HEPES当作生长所需的营养源加以利用，而葡萄糖和乙醇则需经过降解过程才可被利用；②HEPES能够提升藻体内某些酶的活性，进而推动隐藻的生长与繁殖；③葡萄糖和乙醇或许对隐藻存在一定程度的毒害效应。因此隐藻最适培养体系为：采用CSI培养基在15℃恒温培养箱中，配合标准光照强度（4000Lx，光暗周期）、基础碳源供给（（HEPES（4-羟乙基哌嗪乙磺酸））及常规氮浓度（0.8mM硝酸钠）条件。在此优化条件下，隐藻的比生长速率达到0.26d⁻¹，细胞密度在第10天突破1.8×10⁶cells/mL，较其他实验组提升21-59%。5结论本研究重点聚焦于洱海鞭毛藻的初步筛选方法以及其对各类环境因子的响应机制。结果表明，洱海多甲藻为加顿多甲藻变形种，1/6洱海水和L-16培养基对该藻的活性有一定积极作用，但是不能在实验室环境中有效的细胞分裂。此外，洱海隐藻在CSI有效的分离纯化并能够进行细胞分裂增值。而隐藻在CSI培养基内，温度15℃、光照强度4000Lx且光暗周期为12:12、碳源为HEPES以及氮浓度0.8mM的环境因子下生长最好。未来研究需要更加深入地剖析鞭毛藻的生态学特性，从微观层面探究其细胞结构、生理代谢途径，以及在宏观层面上与洱海生态系统中其他生物之间的相互作用关系，这将为洱海的保护和科学管理提供关键的理论依据。参考文献卫志宏,张利仙,杨四坤,等.洱海浮游植物群落结构及季节演替[J].水生态学杂志,2012,33（4）:21-25.杨萍萍.洱海浮游植物群落结构及水质评价（2013-2015年）[J].绿色科技,2017（14）:62-63.文红星,彭松,黄斌,等.洱海浮游植物种类组成及多样性分析[J].人民珠江,2017,38（8）:84-87.马震,孙海龙,张金流,等.生物碳泵效应对水化学及浮游藻类演替的影响——以大理洱海为例[J].矿物岩石地球化学报,2022,41（05）:992-1002.庄婧宜.大兴安岭地区沼泽鞭毛藻类的研究[D].上海师范大学,2015.SukenikA,EshkolR,LivneA,etal.InhibitionofgrowthandphotosynthesisofthedinoflagellatePeridiniumgatunensebyMicrocystissp.（cyanobacteria）:anovelallelopathicmechanism[J].LimnologyandOceanography,2002,47（6）:1656-1663.ZoharyT,SukenikA,BermanT,etal.Peridiniumgatunense,LakeKinneret:ecologyandmanagement[M].Springer,2014:191-212.TaylorFJR,HoppenrathM,SaldarriagaJF.Dinoflagellatediversityanddistribution[J].Biodiversityandconservation,2008,17:407-418.ZhangQ,LiuGX,HuZY.Morphologicaldifferencesandmolecularphylogenyoffreshwaterbloomingspecies,Peridiniopsisspp.（Dinophyceae）fromChinalJ.EuropeanJournalofProtistology,2011,47（3）:149-160.徐沙．基于宏基因组技术探究甲藻水华生消过程中微生物群落特征及功能代谢变化[D]．重庆:西南大学，2016．LiSN,ZhangC,LiF,etal.Recentadvancesofalgae-bacteriaconsortiainaquaticremediation[J].CriticalReviewsinEnvironmentalScienceandTechnology,2023,53（3）:315-339.何大澄，翟中和.扫描电镜及其在生物学研究中的应用[J].生物学通报，1980（2）：41-43.朱超,孙逊,杨晓冉,等．巢湖浮游植物群落季节动态变化特征及其影响因素．中国环境监测，2024，40（4）:129-142BarlowSB,KugrensP.CryptomonadsfromtheSaltonSeaCalifornia[J].Hydrobiologia,2002.473:129-137.BaroneR,Naselli-FloresL.Distributionandseasonal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