江苏专用2025版高考生物一轮复习专题25基因工程与蛋白质工程专题检测含解析

专题25基因工程与蛋白质工程

专题检测A组

一、单项选择题

1.（2025届浙江七彩阳光高三联考,9）若要使FI的基因在受体细胞中表达,须要通过质粒等

载体导入受体细胞而不能干脆将•目的基因导入受体细胞,其缘由不包括（）

A.目的基囚无法插入受体细胞DNA

B.目的基因无法更制

C.目的基因无转录所需的启动部位

D.目的基因与受体细胞遗传信息传递方式不同

答案I）目的基因无法插入受体细胞DNA,也无法完成复制，且缺少转录所需的启动部位，

因此须要借助质粒等载体导入受体细胞,而目的基因与受体细胞遗传信息传递方式相同,这

不是须要借助质粒等载体的缘由，D符合题意。

2.（2025届5-3改编）下面是4种限制酶所识别的DNA分子序列和剪切位点（I表示剪切点、

切出的断面为黏性末端）：

限制酶l:一1GATC-c限制酶2:-CATGI-0限制酶3:-GIGATCC-。限制前4：—CCGC

IGG一。

清指出下列哪项表达正确（）

A.在运用限制酶的同时还须要解旋酶

B.限制酶1和3剪出的黏性末端相同

C.限制酶1、2、4识别的序列都由4个脱氧核昔酸组成

D.限制酶1和2切出的DNA片段可通过T.DNA连接酹拼接

答案B运用限制性核酸内切酶是为了切割目的基因和载体，不须要解旋前解开DNA双螺

旋,A错误；限制性核酸内切酹1和3切出的黏性末端相同，都是GATC一,B正确；限制性核酸

内切酶1、2识别的序列都由4个脱氧核甘酸组成，限制酶3、4识别的序列都由6个脱氧核

甘酸组成,C错误;限制性核酸内切酶1和2切割形成的DM片段的黏性末端不同，前者是GATC

—,后者是一CATG,不能通过T.DNA连接酶拼接,D错误。

3.（2024浙江宁波一模,2E）为获得抗病毒的马铃薯植株,采纳转基因技术将病毒亚制酶基因

转移到马铃薯体内。下列相关叙述正确的是（）

A.该转基因马铃薯植株产生的配子中,肯定含有目的基因

B.将目的基因导入植物细抱可用农杆菌转化法或显微注射法

C.由愈伤组织产生胚状体后再萌发形成完整植株的过程须要生根培育基

D.转化了的马铃薯细胞在合适条件下经脱分化即可形成抗病毒马铃薯植株

答案B若只将目的基因整合到马铃薯细胞的•条染色体匕则通过减数分裂产生的配子

中不肯定含有目的基因,A错误;将目的基因导入植物细胞可用农杆菌转化法或显微注射

法,B正确；由愈伤组织产生胚状体后再萌发形成完整植株的过程不须要生根培育基,C错误;

转化了的马铃薯细胞在合适条件下经脱分化和再分化形成抗病毒马铃薯植株,1）错误。

4.（2024江苏扬、通、泰、徐、淮、宿二模,20）农杆菌中的Ti质粒是植物基因工程中常用

的载体，相关叙述正确的是（）

A.Ti质粒是能够自主复制的单链DNA分子

B.Ti质粒中磷酸基团都与两个脱氧核糖相连接

C.重组Ti质粒的受体细胞只能是•梢物愈伤组织细胞

D.Ti质粒上的基因可全部整合到受体细胞染色体上

答案BTi质粒是能够自主复制的环状双链DNA分子,其分子内部的磷酸基团都与两个脱

氧核糖相连接,A错误,B正确;重组Ti质粒的受体细胞可以是植物愈伤组织细胞，也可以是植

物的其他细胞,C错误;农杆菌有Ti质粒,Ti质粒上有一段T-DNA,目的基因可插入Ti质粒上

的T-DNA中，从而导入农柠菌,让农杆菌侵染植物,农杆菌的Ti质粒上的T-DNA片段（内有目

的基因）整合到受体细胞的奥色体上，即只有Ti质粒上的T-DNA片段（内有目的基因）而不是

Ti质粒上的全部基因可整合到受体细胞染色体上,D错误。

误区警示环状的双链DNA分子中没有游离的磷酸基团,而链状的双链DNA分子中有2个游

离的磷酸基团,分别分布在单链的一端。

5.（2024海南调研,20）某试验小组将人牛.长激素基因导入大肠杆菌以制备工程菌，下列相关

叙述正确的是（）

A.人生K激素基因可以通过以下丘脑细胞的niRNA为模板的反收录获得

B.将人的生长激素基因导入大肠杆菌常采纳C『处理细胞

C.利用工程菌制备的生长激素和人体细胞合成的具有相同的空间结构

【）.在生长激素基因的苜端插入终止子的目的是保证目的基因胜利转录

答案B人的生长激素mRNA只能从人的垂体细胞中提取，下丘脑细胞生长激素基因不表

达,A错误;用CzF处理大肠杆菌可使大肠杆菌成为易于汲取四周环境中DNA分子的状态,B正

确；生长激素属于分泌蛋白，人体细胞合成的生长激素须要经过内质网和高尔基体的加工，

程菌内没有内质网和高尔基体，故人体细胞和工程菌内合成的生长激素的空间结构不同,c

错误;为保证生长激素基因的正常转录,表达载体中目的基因的首端应有启动子，尾端应有终

止子,D错误。

6.（2024江苏南京、盐城二模，17）下列关于生物学中常见的几种酶的叙述，正确的是

（）

A.DNA连接酹将目的基因的黏性末端与载体的黏性末端之间的碱基黏合

B.用限制性核酸内切酶从质粒上切下一个目的基因需消耗4个水分子

C.7%均能是PCR仪扩增DNA分子时常用的一种耐高温的DNA连接酶

D.在解离根尖分生区细胞时加入纤维素酶有利于提高解离的效果

答案B黏性末端与黏性末端之间的互补配对的碱基自动形成氢键,DNA连接酶催化形成

磷酸二酯键,A错误;切下一个目的基因须要打开2个切口，水解4个磷酸二酯键,故需消耗4

个水分子,B正确：Ao酶是耐高温的DNA聚合酶,C错误:对根尖分牛区细胞讲行解离时用解

离液处理,不须要纤维素酹,D错误。

7.（2024浙江稽阳联考，11）如图是基因文库的构建和获得目的基因的示意图。

下列叙述正确的是（）

A.通过该途径获得的目的基因，通常是序列已知的

B.①过程通常只用一种DNA酶切割全部DNA

C.③过程需用CaCL处理，使大肠杆菌细胞壁的通透性增加

D.④过程可用相应抗体，利用核酸分子杂交技术钓取目的基因

答案C通过该途径获得的目的基因，通常是序列未知的,A错误;①过程要用限制性核酸

内切睡切割全部DNA,B错混;③过程需用CaCL处理，使大肠杆菌细胞壁的通透性增加而成为

感受态细胞,C正确;④过程可利用核酸分子杂交技术钓取目的基因,但不能用抗体,D错误。

8.（2024江苏苏、锡、常、镇三模，15）科研人员利用CR1SPR/Cas9技术敲除了生物节律核心

基因RlfALJ,获得了具有睡眠紊乱症状的舜猴,取其中一只舜猴的体细胞又克隆了5只BMAL1

基因敲除的克隆猴，用作睡眠障碍等疾病的药物研发模型。下列叙述错误的是（）

A.该探讨涉及的现代生物技术有基因工程、核移植、胚胎工程

B.不用鼠作药物研发模型的缘由是鼠昼伏夜出的生活习性与人相反

10.（2024山东泰安模拟,38）由腊梅凝集素基因限制合成的某种蛋白质能与蛛虫肠道黏膜上

的受体结合,从而抑制蜥虫汲取养分物质。通过基因工程将腊梅凝集素基因转入烟草,可增加

其抗蛎虫的实力。请回答下列问题：（15分）

（1）在逆转录酶的作用下，能以腊梅凝集素基因产生的mRNA作为模板依据原

则获得cDNA片段，以获得目的基因。

（2）将目的基因导入烟草组胞常用的方法是农杆菌转化法。农杆菌的Ti质粒上的T-DNA具有

的特点。在该过程中须要添加酚类物质，目的是。筛选胜利导

入目的基因的烟草细胞,再通过技术获得转基因烟草幼苗。

（3）将转基因烟草幼苗与非转基因烟草幼苗隔区种植,并接种等量的妫虫,肯定时间后用—

法统计鲂虫的种群密度,若,则说明

转基因烟草具有抗蛤虫实力。

（4）上述方法获得的转某因烟草,抗虫基因可能会随（填“花粉”或“卵细胞”）扩散

传播,产生基因污染,故可以通过基因枪法将打入烟草细胞叶绿体以实现

转化,提高转基因烟草的平安性。

答案（1）碱基互补配对

（2）可转移至受体细胞并且能整合到烟草细胞中染色体的DNA上吸引农杆菌感染烟草细胞

植物组织培育

（3）样方转基因烟草幼苗区内的妫虫种群密度低于非转基因烟草幼苗区

（4）花粉抗虫基因表达载体

解析本题通过转基因烟草的培育等考查科学思维中的归纳与概括实力。（1）在逆转录前的

作用下，能以腊梅凝集素基因产生的mRNA作为模板依据碱基互补配对原则获得cDNA片段，

以获得目的基因。（2）农杆菌的Ti质粒上的T-DNA具有汇转移至受体细胞并且能整合到烟草

细胞中染色体的DNA上的特点。在该过程中须要添加酚类物质，目的是吸引农杆菌感染烟草

细胞。笳选胜利导入目的基因的烟草细胞,再通过植物组织培育技术获得转基因烟草幼苗。

（3）将转基因烟草幼苗与非转基因烟草幼苗隔区种植,并接种等量的蛎虫,肯定时间后用样方

法统计蛎虫的种群密度,若转基因烟草幼苗区内的财虫种群密度低「非转基因烟草幼苗区，

则说明转基因烟草具有抗蜴虫实力。（4）上述方法获得的转基因烟草，抗虫基因可能会随花粉

扩散传播,产生基因污染，故可以通过基因枪法将抗虫基因表达载体打入烟草细胞叶绿体以

实现转化,提高转基因烟草的平安性。

11.（2024浙江绍兴一模,29）（8分）如图是基因文库的构建示怠图。请回答下列问题。

兑Jkft体

外禄DNA分子（单黛制于借DNA分子）

连接反应

CK蛆的联合

•DNA很合物

”化工体■工

■**闪文岸

I◎A|

I◎B|10c|

基丁文丁

IO»I

I©E~~II◎F|

（1）获得目的基因时，假如目的基因的是未知H勺，可以建立一个包括目的基因在

内的基因文库，再从基因文库中获得目的基因。对于高等动植物困难的染色体DNA来说，单个

基因所占比例微小,将其分别出来并非易事,一般须要先对DNA进行,以产生足够多

的数量。

（2）如图所示基因文库用克隆载体构建,载体中目的基因可通过细菌的完成片段的

克隆。从基因文库中分别目的基因时主要利用核酸探针，核酸探针在基因工程的操作过程中

还有许多方面的应用，如检测F1的基因是否导入受体细胞，以

及。

（3）培育转基因羊时,可利用显微注射法将从基因文库中获得的目的基因导入（受体）

细胞,再经过,移植到的发情母羊的输卵管或子宫角。目的基因在受

体细胞中的整合率不太稳定,这除与注射的位置和时间有关外,还要考虑目的基因的构型

和。

答案（1）核甘酸序列扩增（2）繁殖①检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA

中;②检测目的基因是否转录出mRNA（答对1点即可）（3）受精卵胚胎体外培育未经配

种浓度

解析（1）获得目的基因时，假如目的基因的核甘酸序列是未知的，可以通过建立基因文库并

从中获得。由于单个基因占比很小,须要对DNA进行扩增，以便产生足够多的数最用于试验。

（2）基因文库的基因可通过细菌的繁殖完成克隆。核酸探针除了可以从基因文库中调取目的

基因,还可以检测目的基因是否导入受体细胞,检测目的基因是否插入受体细胞的染色体

DNA中，检测目的基因是否转录出mRNAo（3）培育转基因羊时，利用显微注射法可将目的基因

导入受精卵细胞,再通过胚胎体外培育，移植到未经配种的发情母羊的输卵管或子宫角。目的

基因在受体细胞中的整合率不太稳定的缘由与注射时间和位置、目的基因的构型和浓度等有

关。

12.（2024辽宁大连一模,38）（10分）微卫星DNA是广泛分布于真核生物基因组中的简洁重复

序列。由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，因此,微卫星DNA可以

作为分子标记,并有着广泛应用。

3,-----11[|~~[-----$

n1iv1

5*'—HI------------*TTT-------3，

|--微II星DNA序列一

注：I、II、nkN祭职物.雷奏肚釐伸方向

（1）为了分别捕获到某种生物的微卫星DNA分子标记,可以用生物素标记的特定简洁重复序

列作为探针,与该生物的文库进行杂交,然后再经多个步骤筛选获得微卫星DNAo

（2）扩增分别到的微卫星DNA序列的PCR反应体系中含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、

dCTP、dGTP、dTTP）、引物及热稳定DNA聚合酶等。其中dNTP的作用

是;该技术的前提是,以便依据这

一序列合成引物,所以引物应选用图中（填图中标号）。

（3）PCR的基本反应步骤为,其产物量

以形式扩增。

（4）依据“微卫星DM”的特点推断，这种分子标记可应用于（填字母）。

A.人类亲子鉴定B.种群遗传多样性探讨

C.诱导基因突变D.冠状病毒遗传物质测序

答案（1）基因组（2）合成DNA的原料、供应能量有一段已知目的基因的核甘酸序列I

和N（3）DNA解链一引物结合到互补链一互补链的合成（或变性、复性/退火、延长或高温

解链一冷却引物结合一加热互补链合成）指数（约为（4）AB

解析（1）由于微卫星DNA是简洁重复序列,可以用生物素标记的特定简洁重复序列作为探

针,与该生物的基因组文库进行杂交,然后再经多个步骤筛选获得微卫星DNAo（2）dNTP在PCR

过程中作为合成DMA分子的原料和供应能量。PCR技术的前提是有一段已知目的基因的核首

酸序列，以便依据这一序列合成引物,这两个DNA引物分别与目的基因双链各一端序列相互

补,所以引物应选用图中I和IV。（3）PCR的反应步骤为目的基因DNA受热变性后解链为单链，

引物与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合醐作用下进行延长，如此重复循环，因而每一

次循环后目的基因的量可以增加一倍，即成指数形式扩增（约为2",其中〃为扩增循环的次

数）。PCR技术的步骤可简洁概括为变性、复性/退火、延长。（4）微卫星DNA是真核生物基

因组中的简洁重更序列,且重到单位的重复次数在个体间呈高度特异性,因此可用于人类亲

子鉴定、物种间亲缘关系鉴定、遗传多样性的探讨等.A、B正确：诱导基因突变的因素有物

理因素、化学因素和生物因素，与微卫星DNA的特性无关,C错误;冠状病毒的遗传物质是RNA,

其测序不能用微卫星DNA进行标记,I）错误。

13.（2024浙江台州一模,30）现代生物技术在医药、农业等领域都有广泛应用。回答下列问

题：

（1）将人体中B蛋白基因导入大肠杆菌，以生产药物B蛋白。

①由于人体基因的转录初始产物需切除部分序列，才能加工成为成熟的mRNA,因此干脆将从

人类基因文库中获得的B蛋白基因导入大肠杆菌,B蛋白基因无法正常表达。可采纳

的方法合成B蛋白基因，以解决这一问题。

②导入过程所用载体PUC19质粒如图所示,£加2基因表达产物能水解X-gal,使菌落呈蓝色，

不能水解X-gal的菌落呈白色。已知三种限制性核酸内切酶X、Y、Z所识别的序列分别是C

ICGG、GIGATCC.IGATC（I表示剪切点）。为便于筛选导入重组质粒的大肠杆菌,应选用的

限制性核酸内切能是,并且在培育基中加入,接种培育后选择

色菌落。

③筛选得到胜利导入B蛋白基因的大肠杆菌菌株,为检验B蛋白基因是否表达,可以用含放射

性标记的B蛋白基因单链作为探针，检测受体菌是否0

（2）现代生物技术应用于农作物育种，也取得可喜成果。利用基因工程育种技术可培育转基因

农作物。在此过程中，为胜利获得新植株,应选择性状优良、作为受

体材料。除此之外，影响受体材料能否胜利再生出新植株的因素还有光温条件、植物生长调

整剂及的配比，利用多倍体育种技术或者技术则可培育异源多倍

体。

答案（1）①提取mRNA进行逆转录（或人工合成、化学合成）②Y氨茉青霉素、X-gal（写

全给分）白③胜利转录（合成相应RNA）（2）全能性表达充分的基因型养分物质植

物体细胞杂交（植物细胞工程）

解析（1）①人体基因转录的mRNA须要加工为成熟的mRNA用于翻译，所以人体基因干脆导入

大肠杆菌无法正常表达。采纳提取成熟的mRNA进行逆转录的方法合成相应目的基因（或化学

合成）可以解决这个问题,②口”基因表达产物能水解X-ga],使菌落呈蓝色,不能水解X-gal

的菌落呈白色,因此可通过Laci基因是否完整来推断Fl的基因是否插入质粒,选择的限制性

核酸内切酶应是Y,并且在培育基中加入氨羊青霉素、X-gal,接种培育后选择白色菌落，③

为检验B蛋白基因是否表达,可用含放射性标记的B蛋白基因单链作为探针,检测受体菌有无

合成相应的RNA。（2）转基因植株培育中，要选择性状优良、全能性表达充分的基因型作为受

体材料，培育条件应为相宜的光照温度、植物生长调整剂以及养分物质的配比。利用多倍体

育种技术或者植物体细胞杂交技术可培育异源多倍体。

14.（2025届浙江温丽地区高三一模,30）（10分）探讨发觉，勿〜尸基因位于某种环状DNA分

子中。将日/次基因导入马铃薯，使之表达即可获得抗PVY病毒的马铃薯。如图表示PVY-CP

重组质粒的构建过程,相美酶切位点如表。

转会方向

Sau3A

BaniAIHin6W\BglWSmaI

I

GGATCCAAGCTTAGATCTGATC

CCCGGG

CCTAGGTTCG/\ATCTAGACTAG

GGGCCC

⑴步骤②选用的klenow酶与细胞内的（填酶的名称）的功能相像。步骤④应选用

的限制性核酸内切酶是。

⑵若氏就II附切的粘性末端与密/H酶切的粘性末端连接,连接部位的6个碱基对序列

为,对于该剖位,这两种酶（填“都能”“都不能”或“只有一种能”）

切开。

（3）若用Sau3kI切图中所示的质粒（多个），最多可能获得种大小不同的DNA片

段。

（4）步骤⑤获得的重组质粒通过农杆菌转入马铃薯的原生质体,并诱导形成细胞壁，再转入—

（A.细胞分裂素多，生长素少B.细胞分裂素少，生长素多C.细胞分裂素和生长素比例适合

D.细胞分裂素中等,生长素少）的培育基中培育，形成,再进行生根培育，获得转基因

马铃薯。

（5）可用的方法,从个体水平检测马铃薯植株中川/”基因是否胜利表达。

答案（DDNA聚合酹物/H和5阳1（2）—GGATCT—

—CCTAGA—（或一AGATCC一

—TCTAGG—）都不能（3）7（4）A丛状苗（5）PVY病毒感染

解析（1）图示过程②,公加加酶将DNA片段的粘性末端补平，因此相当于DNA聚合酶的作

用。步骤④将Fl的基因和质粒连接起来，目的基因一端是Bank\I剪切后的粘性末端，另一端

是平末端,要将目的基因依据转录方向正确连接,须要用BglH和Sma］剪切。（2）的加I酶切

后的粘性末端与场711酶切的粘性末端相连，连接部位为一GGATCT一

—CCTAGA—（或一AGATCC-

-TCTAGG-,对此片段这两种酶都不能切开,体现了酶的专一性。（3）若用Sa送AI切割图示

的多个质粒，由于存在3个酶切位点,最多能产生7种大小不同的DNA片段。（4）原生质体诱

导形成细胞壁,再转入细胞分裂素多、生长素少的的培育基中，培育形成丛状苗,再进行生根

培育。（5）要检测日/"基因是否胜利表达，可用PVY病毒感染转基因马铃薯检测其是否有

抗性.

B组

一、单项选择题

1.（2024山东师大附中4月模拟，14）基因工程培育的“工程菌”通常经发酵工程生产的产品

有（）

①石油②人生长激素③紫草素④聚乙二醉⑤胰岛素⑥重组乙肝疫苗

A.®®@B.®@©

C.③©⑥D.②®@

答案B石油是从地层中获得的，①错误；人生长激素的化学本质是蛋白质，可以通过基因

工程培育的“工程菌”发醉获得,②正确;紫草素是植物组织培育技术获得的，③错误;聚乙二

醇是由环氧乙烷聚合而成的，这是一个化学反应，不须要用基因工程培育的“工程菌”，④错

误;胰岛素的化学本质是蛋白质，可以通过基因工程培育的“工程菌”发酵获得，⑤正确;重组

乙肝投苗的化学本质是蛋白质，可以通过基因，程培育的“_L程菌”发酵获得，⑥正确。

2.（2024北京海淀期中,29）科研人员通过PCR技术获得肝细胞特异性启动子一一自蛋白启动

子,将该启动子与Cre重组酶基因结合构建表达载体,培育出在肝细胞特异性表达Cre重组酶

的转基因小鼠。下列叙述正确的是（）

A.将该表达载体导入肝细胞以获得转基因小鼠

B.PCR技术获得白蛋白启动子需设计特异性的引物

C.构建该表达载体须要限制睡和DNA聚合酹

D.通过核酸分子杂交技术检测目的基因是否完成表达

答案B将表达载体导入肝细胞无法获得转基因小鼠个体，应将表达载体导入受精卵，后者

可以发育成新的个体,A选项错误。依据碱基互补配对原则，需设计特异性引物才能通过PCR

技术获得白蛋白启动子,B选项正确。构建该表达载体须要限制酶和DNA连接酶,不须要DNA

聚合酶,C选项错误。通过核酸分子杂交技术只能检测目的基因是否转入（运用DNA-DNA分子

杂交技术）以及目的基因是否转录（运用DNA-RNA分子杂交技术），检测是否表达，须要检测蛋

白质，故用抗原一抗体杂交技术,D选项错误。

3.（2024山东潍坊临胸模拟一,20）关于基因工程的叙述，下列说法正确的是（）

A.基因工程获得的新品种可以干脆投放到环境中不会影响生态环境

B.细菌质粒是基因工程常用的运教体

C.通常用•种限制酶处理含目的基因的DNA,用另•种处理运载体DNA

D.获得抗除草剂的农作物新品种，导入的抗除草剂的基因只能以受精卵为载体

答案B基因工程获得的新品种有可能会扩散到种植区域外，或通过花粉进入近亲杂草，破

坏这一区域的生态平衡,A错误;细菌质粒是基因工程常用的运载体,B正确;在基因工程中通

常用同一种限制酶对运载体和目的基因进行切割，以利于连接,C错误;获得转基因植物时，

因植物细胞的全能性相对简洁表达，故通常将•目的基因导入植物的体细胞然后再对其进行组

织培育,D错误。

易错警示切取目的基因与切割载体时并非“只能”运用“同种酶”

在获得目的基因和切割载体时通常用同一种限制的,以获得相同的黏性（或平）末端。但

假如用两种不同限制晦切割后形成的末端相同,在DNA连接前的作用下目的基因与载体也可

以连接起来。

4.（2024江苏南通、连云港等七市三模，17）科学家构建了含有大洋鳏鱼抗冻蛋白基因启动子

和大鳞酷鱼生长激素基因的表达教体,并将其导入了大西洋鞋的细胞中，获得了生长速度加

快的转基因大西洋蛙。相关叙述正确的是（）

A.转基因大西洋鞋体内抗冻蛋白明显增加

B.构建基因表达载体须要限制酶和DNA聚合酶

C.大鳞鞋鱼生长激素基因不能通过PCR技术扩增获得

D.转基因大西洋鲤生长激素含量增加导致生长速度加快

答案D依据题干信息转基因大西洋鞋体内并不含有大洋鳄鱼的抗冻蛋白基因，因此体内

抗冻蛋白不会明显增多,A错误;构建基因表达载体须要限制能和DNA连接酹,不须要DNA聚

合能,B错误;通过PCR方法扩增，可获得大鳞鞋鱼生长激素基因,C错误;转基因大西洋鲜体内

的大鳞鲜鱼生长激素基因表达,生长激素含量增加导致生长速度加快,D正确。

易错警示审题不严密，易犯马虎大意的错误,认为转基因大西洋蛙转入了大洋鲜鱼抗冻蛋

白基因，题干中给的信息只是转入了大洋用鱼抗冻蛋白基因的启动子,而不是抗冻蛋白基

因。

5.(2024江苏无锡一模，17)下列关于基因工程的叙述，正确的星()

A.构建表达载体时须要在目的基因前加上起始密码子

B.农杆菌转化法可以将目的基因随机插入受体细胞的染色体DNA

C.标记基因中不能有限制酶的识别位点以防止其被破坏而失去作用

D.导入人胰岛素基因的大扬杆菌可干脆生产出有活性的人胰岛素

答案B本题考查学生对基因工程的基本操作程序的相关学问的识记和理解实力。构建基

因表达载体时须要在目的基因前加上启动子,A错误;采纳农杆菌转化法，可.以将目的基因随

机插入受体细胞的染色体DNA上,B正确;标记基因中可以有限制晦的识别位点,为了防止标

记基因被破坏而失去作用:在构建基因表达载体时,运用的限制酹应当不具有识别标记基因

中的限制酶的识别位点的实力,C错误；导入人胰岛素基因的大肠杆菌，因没有内质网和高尔

基体,不能对胰岛素进行加工,所以不能干脆生产出有活性的人胰岛素,D错误。

6.(2025届5・3原创)红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种激素物质，是当今最

胜利的基因工程药物,可用丁治疔肾哀性贫血等疾病。由丁自然EPO来源极为有限，目前临床

运用的红细胞生成素主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)。其简要生

产流程如图,下列相关说法正确的是()

人乐频画Ci

心中国仓取卵巢检测,.选商效表达基

细胞系(CHO)'"因的羽组CHO细胞

体培|分

养恒

毂体

rhEPO

A.过程①用到的工具酣有DNA聚合随、限制酶和DNA连接酶

B.构建的重组表达载体中终止子的作用是终止翻译过程

C.检测重组细胞是否表达出rhEPO常用抗原一抗体杂交技术

D.用乳腺生物反应器生产EPO可将人基因导入哺乳动物体细胞获得

答案C过程①构建基因的表达载体，需用限制酶切割目的基因和载体，并用DNA连接酶连

接,该过程无需DNA聚合酹参加,A错误;终止子的作用是终止转录过程,B错误;检测重组细胞

是否表达出rhEPO,可利用抗原一抗体特异性结合的原理采纳抗原一抗体杂交技术检测,C

正确;采纳细胞培育生产EPO成本比较高,可以采纳乳腺生物反应器,将基因表达载体转入雌

性哺乳动物受精卵中，使肥〃基因在转基因动物的乳腺细胞中表达,通过泌乳生产EPO,目前

还不能干脆用高度分化的体细胞克降哺乳动物,D错误。

7.矮牵牛花瓣紫色的深浅由花青素的含量凹凸确定，花青素由查耳酮合酶(CHS)催化合成，为

获得紫色更深的矮牵牛,科研人员将磁基因导入野生型紫花矮牵牛叶肉细胞中，得到的转

某因梢株花色反而出现了浅紫色,检测磁基因的转录水平,得到如图所示电泳图谱(2道和3

道分别表示野生型和转基因植株)。下列推断正确的是()

＜内海

A.用不同的限制酶处理含磁基因的DNA和运载体

B.转基因植株中内源皈基因的转录水平明显低于野生型

C.转基因植株内外源第S基因的转录均被抑制

D.没有获得紫色更深的植株是因为06基因没有胜利转入

答案B用相同的限制酹组合(都选用固定的两种黏性末端不同的限制的)处理含。状基因

的DNA和运载体，使两者含有相同的粘性末端，以便两者构建重组分子,A错误；由图分析2道

野生型内源的条带较粗,而3道转基因内源的条带较细,说明转基因植物的内源基因的转录

水平明显低于野生型,B正确;转基因植株内源侬'基因的转录被抑制，外源筋5基因的转录

正常,C错误;从图中看到,外源基因转入胜利,没有获得紫色更深的植株可能是因为转基因

植株内源a/s基因表达被抑制,转基因植株外源基因和内源C股基因的综合表达量没有

野生型的内源。后基因表达量高,D错误。

8.（2024浙江超级全能生联考,27）某一品系的棉花野生型植株既不抗虫也不抗除草剂,如图

为构建转基因植株M（抗虫、抗除草剂）的过程示意图，有关叙述错误的是（）

抗虫抗除

草剂14

抗虫M因A

抗除草御注囚B抗虫不抗

Ti*tt除草制I

««r作①棉花盒伤蛆期不抗虫抗

ttAMI

A.采纳Ti质粒作为载体的优势是其具备可转移至受体细胞的T-DNA

B.为防止自身环化及相互连接,打算工作①中应至少运用4种不同的限制酶

C.过程⑤可能依次经验了细胞团、球形胚、心形胚、胚次体、完整植株的过程

D.基因A、B可能插入到组胞M的染色体上，但不行能同时存在于同一条染色体上

答案1）本题中转基因植物的培育采纳了典型的农杆菌转化法,Ti质粒作为载体的优势是

其T-DNA可转移至受体细胞,A正确;为防止自身环化,切割目的基因两端的限制酶应是不同

的，又要防止基因A、B的相互连接，因此打算工作①中至少须要4种不同的限制酶,B正确；

处于适当的液体培育条件为单个植物细胞,经过培育基中成分的诱导,可依次经验从单细胞

到细胞团、球形胚、心形如、胚状体、完整植株的过程,C正确;植株M自交后，抗虫：不抗

虫=15：1,抗除草剂：不抗除草剂=15：1,说明植株M的2对染色体上插入了2个A基因和2

个B基因，各自符合自由组合定律，乂因为后代未出现野生型植株,说明一对同源染色体的两

条染色体上,分别插入了A和B基因,而另一对同源染色体,有两种状况:可能A、B两个基因

都插入到了一条染色体上:也可能分别插入到两条染色体上，以上两者状况均会导致

14：1：1的结果，植株M的基因型示意图如图：

综上所述,D错误。

二、非选择题

9.[2024浙江新高考探讨联盟联考,32（-）]（7分）回答与基因工程和动物克隆有关的问题。

（1）以人基因组DNA为模板,采纳扩增人胰岛素原基因，然后将其与含有标记基因

的载体用相同的切割之后，用DMA连接酶将目的基因和载体连接在一起

形成重组DNA分于。

（2）若要利用转基因动物的乳腺来生产人胰岛素,则可将重组DNA分子用的方法

导入动物的受精卵中，受精卵在体外培育到阶段,再移植到代孕母体

的，之后着床、并接着生长发育。也可以将重组DNA分子先导入动物的

体细胞中，再通过是否含有标记基因来筛选出含有人胰岛素原基因的体细胞,然后在肯定物

质的介导下使其与去核卵细胞进行形成一个重建的“合子”，经过胚

激活、胚胎培育和胚胎移植后得到转基因动物。

（3）相比细菌基因工程，以转基因动物的乳腺作为反应器来生产人胰岛素的优点

是_______________________________________________________________

答案（DPCR技术限制性核酸内切酶（2）显微注射早期囊胚子宫角或输卵管细

胞融合（或融合）（3）乳腺细胞可以将无生物活性的胰岛素原蛋白加工成有生物活性的胰岛

素

解析（1）目的某因口「采纲PCR技术讲行大展扩增：对目的某因和载体用相同的限制性核酸

内切酶进行切割,产生相同的末端,再用DNA连接睡进行连接形成重组DNA分子。（2）将目的

基因导入动物细胞常采纳显微注射法，当受精卵在体外培育到早期囊胚时，再移植到代孕母

体的子宫角或输卵管,之后胚胎在子宫着床,并接着生长发育。利用动物细胞来生产人的胰岛

素，也可将重组DNA先导入动物的体细胞,再筛选出含有人胰岛素原基因的体细胞,然后在肯

定物质的介导下使其与去核卵母细胞进行融合，经胚激活、胚胎移植后得到转基因动物,（3）

细菌中无内质网、高尔基体等细胞器，因此通过细菌基因工程生产的人的胰岛素没有生物学

活性而转基因动物的乳腺细胞可以将无生物活性的胰岛素原蛋白加工成有生物活性的胰岛

素。

10.（2024福建三明二模,38）（10分）糖尿病是一种常见病，其发病率呈逐年上升的趋势,治疗

糖尿病少不了胰岛素。如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的几条途径,请据图回答下列

问题：

人的腆岛素基因

受体细胞A受体细胞B受体细胞C

③I④I⑤I

转基因羊转基因苒伐转基因大肺杆菌

乳汁中提取体细胞中提取培养液中搬取

⑴图中过程①为,在此之前可以依据

设计引物利用PCR技术对目的基因进行扩增。将重组质粒M转移到受体细胞A中常用的方

法是o

（2）过程②可用的方法是。过程③用到的技术手段

有o

（3）若该转基因“胰岛素羊”乳汁中检测到胰岛素,该胰岛素与转基因“胰岛索大肠杆菌”产

生的胰岛素相比，不同之史

是,其缘由

是o

答案（1）构建基因表达教体人胰岛素基因的核甘酸序列显微注射法（2）农杆菌转化

法（或基因枪法或花粉管通道法）早期胚胎培育、胚胎移植（3）“胰岛素羊”乳腺细胞分

泌的胰岛素具有牛物活性，而转某因“胰岛素人・肠杆菌”产牛的胰岛素无牛物活性乳腺细

胞有内质网与高尔基体，能加工相关的蛋白质，而大肠杆菌没有内质网和高尔基体

解析（1）图中①表示构建基因表达载体,构建之前可以依据人胰岛素基因的核甘酸序列设

计引物，利用PCR技术对目的基因进行扩增。将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微

注射法。（2）过程②表示H的基因导入植物细胞，可用农杆菌转化法（答基因枪法、花粉管通

道法也可）。过程③表示动物的个体发育，此过程用到的技术手段有早期胚胎培育、胚胎移植。

（3）由于乳腺细胞有内质网弓高尔基体，能加工相关的蛋白质，而大肠杆菌没有内质网和高尔

基体，因此“胰岛素羊”乳腺细胞分泌的胰岛素具有生物活性，而转基因“胰岛素大肠杆菌”

产生的胰岛素无生物活性，

学问归纳不同受体细胞的转化

依据受体细胞不同，导入重组DNA分子的方法也不一样,将目的基因导入植物细胞的方

法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显

微注射法，将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

11.（2025届江苏南京一模,32）（14分）乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的危害奶牛

养殖业的两种严峻疾病。探讨者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰索（抗

病毒）基因的双转基因奶牛品种。如图1为基因表达载体，图2为培育流程。请据图回答问题：

启动子

图1

图2

干扰素基因

图3

（D构建基因表达载体时须要用到的工具酶是o

（2）基因表达过程包括,图1中一般能同时表达的基因

是。新毒素抗性基因的作用是o

（3）图2中探讨者可利用技术筛选出干扰素基因胜利表达的胚胎进行移

植.

（4）若利用PCR技术增加目的基因的数晟，由图3可知,A、B、C、D四种单链DNA片段中应选

取作为引物（DNA复制子链的延长方向5'-3'）。若上图所示基因复制2次,则

共须要这两种引物各个;PCR程序中“适温延长”中的适温是酶

的最适温度。

答案（1）限制酶和DNA连接酶（2）转录和翻译干扰素基因和新霉素抗性基因便于筛

选出含有目的基因的细胞（3）抗原一抗体杂交（4）B和C3Tuq（耐高温的DNA聚合）

解析（1）构建基因表达载体时须要用到的工具的是限制酶和DNA连接防。（2）基因表达过程

包括转录和翻译,据图可知,干扰索基因与新霉索抗性基因均位于相同的启动子和终止子之

间，可同时转录。新霉素抗性基因的作用是便于筛选出含有目的基因的细胞。（3）牛乳铁蛋白

基因在成年牛的乳腺中才能表达,人干扰素基因可在牛全身细胞表达,因此筛选胚胎时可利

用抗原一抗体杂交技术筛选干扰素基因胜利表达的胚胎。（4）若利用PCR技术增加目的基因

的数量，由图3可知,1）NA复制只能从5'到3',因此构建前利用FCK技术犷增干扰素基因时,A、

B、C、D四种单链DNA片段中应选取B和C作为引物。若上图所示基因复制2次，则共须要

这两种引物各3个;PCR程序中“适温延长”中的适温是Taq（耐高温的DNA聚合）酶的最适温

度。

解题关键明确牛乳铁蛋白肽基因只在转基因奶牛的乳腺细胞表达，人干扰素基因则可在全

身细胞表达，据此可推断筛选胚胎时应选择的方法。

12.（2025届浙江名校新高考探讨联盟一模,30）（10分）如图表示某探讨小组为探讨水稻B基

因表达对其卵细胞的影响的设计思路,其中基因表达的荧光素酶能够催化荧光素产生荧

光。

请回答：

⑴图中水稻B基因编码蛋白的序列和基因拼接时,必需运用酶,其作用

是°融合基因必需连接到启动子和终止子之间，其中启动子是

的结合部位。

⑵当愈伤组织细胞受到损伤时会分泌酚类物质，吸引农杆菌移动过来,Ti质粒上的T-DNA可

以O

（3）愈伤组织通过调整养分物质和生长调整剂的适当配比,可以诱导

出,并可由此再生出新植株。为获得植物克隆的胜利,应尽量选择—

的基因型。

（4）图中第一次鉴定筛选的目的是筛选出。若借助基因的表达

产物来完成图中其次次鉴定筛选,则详细方法是O

（5）从转基因植株未成熟种子中分别出胚，视察到细胞内仅含一个染色体组，判定该胚是由未

受精的卵细胞发育形成的,而一般水稻卵细胞是不进行发育的。这表明水稻B基因的表达能

使其卵细胞,而B基因在一般水稻卵细胞中是（填“表达”或

“不表达”）的。

答案（10分）（1）DNA连接催化形成磷酸二酯键RNA聚合酶

（2）转移至愈伤组织细胞井整合到其染色体DNA上

（3）芽和根的顶端分生组织性状优良、细胞全能性表达充分

（4）导入胜利的受体细胞检测加入荧光素的细胞中是否发出荧光

（5）不经受精干脆发育成胚不表达

解析本题通过水稻B基因对其卵细胞的影响试验探究,考查了基因工程技术操作流程以及

植物克隆的方法，也体现了对科学探究素养中试验设计、结果分析的考查。（1）目的基因和

基因拼接，须要DNA连接酶催化形成磷酸二酯键,从而将两段DNA片段连接。基因上的启

动子是转录时RNA聚合酹的结合部位。⑵农杆菌中Ti质粒上的T-DNA片段可以转移至愈伤

组织细胞并整合到其染色体DNA上。（3）愈伤组织通过调整养分物质和生长调整剂的适当配

比,可以诱导出芽和根的顶端分生组织,并可由此再生出新植株。为提高植物克隆的胜利率，

应尽量选择性状优良、细胞全能性表达充分的基因型。（4）图中过程有两次筛选，第一次是选

出导入胜利的受体细胞,其次次是通过c基因的表达产物选出导入目的基因的细胞，由于

基因表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光,因此加入荧光素的细胞可以发出荧光,（5）

转某因植株的杯只含有一个染色体组，与一般水稻卵细胞不讲行发育相比表明：B基因能促

使卵细胞不经受精干脆发育成胚，而B基因在一般水稻卵细胞中是不表达的。

13.（2024福建漳州二模,38）（11分）新型肺炎的病原体一一新冠病毒,结构如图所示（棘突、

脂质膜、包膜成分都是含有蛋白质，它们分别是由病毒RNA的基因S、M、E的指导合成的）。

依据相关学问回答下列问题：

统突健与细胞膜I：受体结合.

打开进入细胞内部的大门

脂质膜能与细胞麻融合.

方便其进入引腮

包股击白组成,保护病毒

包眼

病毒结构示意图

1E义单镰RNA

pplapp2^SEMN

整囚的结施示废图

（1）新冠病毒侵染过程中，棘突首先与细胞膜上受体结合,可能作为病毒的疫苗。假如利用基

因工程研制新冠病毒疫苗:第一步是得到目的基因S,以用于后续操作,请简述获得目的基因

S过程O基因工程的核心步骤

是:完成该步骤所须要的酶有。理论

上，目的基因S应当导入细胞中让其表达，以得到合适

的产物。

（2）制备出来的“产品”必需具备、才能作

为疫苗来运用。

（3）检测新型肺炎的一般策略是检测疑似病例是否携带新冠病毒。新冠病毒主要由核酸和蛋

白质构成,假如检测核酸，一•般的方法是;假如检测其特异性蛋白，方法

是a

答案（1）提取病毒的RNA,反转录成对应DNA后,PCR技术扩增得到基因S（或对病毒基因S

测序，然后人工合成基因8）基因表达载体的构建限制酶和DNA连接酶哺乳动物（或大

肠杆菌、哺乳动物）（2）没有传染性和致病性（或:没有“毒性”）能引起对新冠病毒的特

异性免疫（3）探针法（或:PCR技术或分子杂交技术）抗原一抗体杂交

解析⑴假如利用基因工程研制新冠病毒疫苗,第•步是得到基因S,以用于后续操作,Ftl

于新冠病毒的遗传物质是RNA,故应提取病毒的RNA,反转录成对应DNA后,PCR技术犷增得到

基因S（或对病毒某因S测序,然后人工合成基因S）°某因工程的核心步骤是某因表认载体的

构建,完成该步骤所须要的酹有限制酶和DNA连接能。理论上目的基因S应当导入受体细胞

如哺乳动物（或大肠杆菌、哺乳动物）细胞中让其表达,才能得到合适的蛋白质产物。（2）制备

出来的“产品”不能对接受疫苗的生物有害,还应使其产生抗体,即必需具备没有传染性和致

病性（或:没有“毒性”）、能引起对新冠病毒的特异性免疫才能作为疫苗来运用。（3）检测新

型肺炎的•般策略是检测疑似病例是否携带新冠病毒,升冠病毒主要由核酸和蛋白质构成，

假如检测其核酸RNA,RNA可由DNA转录而来，一般用探针法（或分子杂交技术或PCR技术）;

假如检测其表达的特异性蛋白，方法是抗原一抗体杂交。

14.（2024浙江9+1中学联盟期中，30）（8分）抗生素滥用导致的耐药性细菌目前已成为一个严

峻的公共健康问题,近年来“超级细菌”等事务的发生更显示出这一问题的严峻性。抗菌肽

（AMPs）是一类具有广谱抗菌性，且不易产生耐药性的物质。为了改善抗菌肽的抗菌功能，常利

用基因工程技术使抗菌肽在不同来源的宿主细胞内进行蛋白的重组表达。防卫素是一种

抗菌肽，构建。-防卫素（defensi/ilSO）表达载体在大肠杆菌中表达。表达载体（pET-28a）

和含有目的基因防卫素的片段如图，结合已知条件回答下列问题：

（说明：扇〃'和力磔'分别表示卡那得素和第革育福素抗性基囚promoter表示基囚的启砌部

位）

（1）获得含有目的基因的重组DNA分子,需用和两种能分别切割表达载体和

含有目的基因的片段,并用酶将它们连接。

（2）把构建好的重组DNA分子导入受体细胞,用相宜浓度的氯化钙处理受体细胞,增加细胞壁

的通透