新教材2025版高中生物第1章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用第1课时微生物的基本培养技术学生用书新人教版选择性必修3

第1课时微生物的基本培育技术

课堂互动探究案

课程标准

1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培育物的前提。

2.阐明无菌技术是在操作过程中保持无菌物品与尢菌区域不被微生物污染的技术。

3.概述平板划线法和稀释涂布平板法是试验室进行微生物分别和纯化的常用方法。

素养达成

1.依据微生物的代谢类型分析培育基的组成。（科学思维）

2.探讨并驾驭无菌技术的试验操作方法；探讨并驾驭微生物的纯培育的方法。（科学探

究）

设疑激趣

同学们，右图中正在进行科学探讨的老人是谁？他是法国微生物学家和化学家巴斯德！

19世纪中期的法国，葡萄酒酿成后的变酸问题，始终困扰着酿酒业主。巴斯德探讨证明，

酒质变酸是发酵液体中的细菌在捣鬼。他经过一次又一次试验，最终发觉把前萄酒加温到

55摄氏度，既歼灭了细菌，又保持了酒的美味不变，一个困扰酿酒业的难题最终解决了。

由此人们相识到保持培育物纯净的重要性。

防止杂菌入侵，获得纯净的培育物，是探讨和应用微生物的前提。在试验室培育微生物,

一方面须要为培育的微生物供应合适的养分和环境条件，另一方面须要确保其他微生物无法

混入。本节课我们将通过酵母菌的纯培育试验，学习微生物培育的基本技术。

夯基提能-分层突破一一互动•探究•智涂

学习主题•培育基的配制

帅问导学1

活动1下表是培育两种细菌的培育基的配方，据此回答问题。

表一培育基A

成分KH2P0.INa2HP0,MgSO.1・7H2O匍萄糖尿素琼脂

含量/g1.42.10.210.01.015.0

将上述物质溶解后，加蒸储水定容至1（）00ml.

表二培育基B（牛肉膏蛋白陈固体培育基）

成分牛肉甘蛋白陈NaCl

含量/g5.010.05.0

将上述物质溶解后，添加蒸储水，定容至1000mL,调整pH为7.0~7.2,并加入15〜20g

琼脂

1.表一中的碳源是一，氮源是O表二中的氮源是一

琼脂(填“供应”或“不供应”)养分成分，其作用是作为。

2.由上表可以看出，虽然培育不同微生物的详细配方不同，但一般都要有、

、、这四类物质。

3.不同培育基还要满意不同微生物生长对、以及的

要求。

4.牛肉育蛋白陈培育基是一种常见的细菌培育基，其中牛肉膏、蛋白膝能够供应哪些

养分成分？

活动2阅读教材R-o,思索回答下列问题：

1.能够利用无机碳源的微生物的同化作用类型是什么？

2.为什么各种培育基的详细配方不同，但一般都有水、无机盐、碳源和氮源？

乡智演笔记

［易错提示］

有关培育基养分物质的四点提示

(1)培育不同的微生物所须要的养分物质可能不同。

①自养型微生物的培育基中可不添加有机碳源，因其可利用CO?等无机碳源。

②异养型微生物的培育基中必需添加有机碳源。

(2)对异养微生物来说，含C、H、0、N的化合物既是碳源，又是氮源、能源。

(3)微生物须要补充生长因子，是由于缺乏合成生长因子所须要的酶或合成实力有限。

(4)微生物须要量最大的养分物质是碳源。能合成含碳有机物的是自养型，反之则为异

养型。

配帅说丽

1.培育基的配制原则

(1)目的要明确：不同的微生物需求不同，依据培育目的进行配制。

(2)养分要协调：养分物质的浓度和比例要相宜。

⑶阴要相宜:为维持pH的相对恒定,可在培育基中加入缓冲剂，常用K2HpOd-KH2P0”

2.培育基的成分及功能

养分作用功能主要来源

物质

无机碳源：C&、NaHCO

构成生物体的细胞物质;）

能为微生物的代谢供应等；有机碳源：罐类、

碳源和一些代谢产物，有些

碳元素脂质、蛋白质、有机酸

是异养生物的能源物质

等

无机化合物:用、源、

能为微生物的代谢供应合成蛋白质、核酸以及铁盐、硝酸盐等；有机

氮源

氮元素含氮的代谢产物氮源：尿素、牛肉膏、

蛋白豚等

不仅是优良的溶剂，而

水是生命活动所必需的且可维持生物大分子结外界摄入

构的稳定

细胞内的组成成分；生

为微生物供应除碳、氮

无机理调整物质：某些化能

以外的各种重要元素，无机化合物

盐自养菌的能源；能的激

包括大量元素

活剂

3.几种微生物的养分和能量来源

微生物碳源氮源能源

NH：、NO；等

蓝细菌C02光能

硝化细菌co2NHnNH.3的氧化

根瘤菌糖类等有机物有机物

N2

糖类、蛋白质

大肠杆菌蛋白质等有机物

等有机物

4.培育基的类型

分类培育基

培育基特点作用

标准种类

微生物的分别与鉴

固体培

定、活菌计数、保藏

养基加凝固剂，如

菌种

琼脂

物理性质半固体视察微生物的运动、

培育基分类、鉴定

液体培

不加凝固剂工业生产

养基

含化学成分不

自然培

明确的自然物工业生产

育基

化学成分质

合成培培育基成分明

分类、鉴定

育基确

Y过程评价O-

1.（学业水平一、二）下列关丁微生物养分物的叙述中，正确的是（）

灼烧灭菌：

干热灭菌：____________________________________________________________

湿热灭菌：____________________________________________________________

5.注射药液前，常用酒精擦拭注射部位，这是消毒还是灭菌？体积分数为70%和95%

的酒精，哪种效果更好？为什么？

少智源笔记

［名师提示］

有关消毒和灭菌的几点提示

1.酒精消毒液中酒精浓度对杀菌效果的影响：70用的酒精杀菌效果最好。缘由是浓度过

高，菌体表面蛋白质变性过快而凝固成一层爱护膜，酒精不能渗入其中；浓度过低，杀菌实

力减弱。

2.无菌技术措施的选择原则。

(1)考虑效果：灭菌的效果比消毒要好。

(2)考虑操作对象的承受实力：接种环或接种针等金属用具一般用灼烧灭菌；培育皿等

玻璃那皿用干热灭菌；培育基用湿热菌。操作者双手一般用酒精擦拭，即化学消毒。牛奶用

巴氏消毒法。

彳帅说核山

1.无菌技术的重要性

防止杂菌污染是获得纯净培育物的关键。防止外来杂菌污染培育物，离不开无菌技术;

要防止培育物污染人体和环境，也离不开无菌技术。

2.常用灭菌与消毒方法的比较

灭菌和消毒的种类主要方法应用范围

100kPa、121£维持15、

湿热灭菌培育基及多种器材、物品

30min

玻璃器皿(如吸管、培育皿等)、金属用具

干热灭菌箱】60〜170℃

灭干热灭菌等凡不相宜用其他方法灭菌而又能耐高

加热1〜2h

菌温的物品

微生物接种工具，如接种环、接种钎或其

灼烧灭菌酒精灯火焰灼烧他金属用具等，接种过程中的试管口或瓶

口等

煮沸消毒法：00℃煮沸5〜6min家庭餐具等生活用品

63〜65℃消毒30min或

牛奶、啤酒、果酒和酱油等不宜进行高温

巴氏消毒法72〜76℃处理15s或

灭菌的液体

消80〜85℃处理10〜15s

毒紫外线消毒30W紫外灯照耀30min接种室空气

用体积分数为70驱〜75%的

皮肤、伤口、动植物组织表面和空气、手

化学药物消毒乙原、碘酒涂抹，来苏尔

术器械、塑料或玻璃器皿等

喷洒等

Y过程评价O-

1.（学业水平一、二）获得纯净培育物的关键是（）

A.将用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基等器具进行灭菌

B.接种纯种细菌

C.相宜环境条件下培育

D.防止外来杂菌的入侵

2.（学业水平一、二）高温灭菌的原理是（）

A.每种微生物生长的最适温度是肯定的

B.微生物对于高温环境不适应

C.高温破坏了微生物的蛋白质等生物大分子，影响其生命活动

D.高温降低了环境中氧的浓度

3.（学业水平三）关于灭菌和消毒的不正确的理解是（）

A.灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽花和泡子

B.消毒和灭菌实质上是相同的

C.接种环用灼烧的方法灭菌

D.常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌等

4.学（业水平二，不定项选择）微生物的试验室培育要进行严格灭菌和消毒。下列大于

灭菌和消毒的叙述，正确的是（）

A.灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽泡和抱子

B.无菌操作时，对试验操作的空间、操作者的衣物和手进行灭菌

C.灼烧法灭菌的对象是金属器具，也可以是玻璃器具

D.消毒和灭菌的原理都是使微生物的核酸或蛋白质变性

学习主题三微生物的纯培育

八师阿S浮

活动1阅读教材即73内容，结合下图，回答问题。

图一图二

图三

1.为什么须要使锥形瓶的瓶口通过火焰？

2.从防止杂菌污染的角度思索，培育基冷却凝固后将培育皿倒置的缘由是什么？

3.采纳平板划线法接种菌种时，哪些操作可防止杂菌污染？

4.在做其次次划线以及其后的操作时，为什么总是从上一次划线的末端起先划线?

5.接种操作时每次划线接种前与接种后都要灼烧接种环或接种针，其目的分别是什么？

活动2思索回答下列问题：

1.培育基灭菌后，须要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么方法来估计

培育基的温度？

2.在倒平板的过程中，假如不当心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还

能用来培育微生物吗？为什么？

3.接种结束后，为什么要将一个未接种的培育基和一个接种的培育基放在一起培育？

未接种的培育基表面是否有菌落生长很关键。假如有菌落生长，说明白什么？

乡村温笔记

［方法技巧］

单细胞菌落的获得

(1)利用平板划线法接种时，单细胞菌落从后划线的区域挑取。

(2)利用稀释涂布平板法接种时，只有合适的稀释度才能得到单细胞菌落。

［归纳提升］

倒平板操作的留意事项

(1)培育基灭菌后须要冷却至5()℃左右时才能倒平板。温度过高，培育基凝固后皿盖

上冷凝水过多，落入培育基，造成污染；温度过低，培育基又会凝固。

(2)将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不要完全打开，以免杂菌污染培育基。

(3)在倒平板的过程中，假如不当心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板应

弃用，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生。

(4)整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行，避开杂菌污染。

。帅说核心

1.平板划线法

平板划线操作及培育结果：接种环在固体培育基表面连续划线，将聚集的菌种逐步分散

到培育基的表面。平板划线示意图(A)及培育后菌落分布示意图(B)如下图所示。

2.稀释涂布平板法

(1)主要操作环节：系列稀释和涂布平板。

(2)系列稀释和涂布平板后培育结果如图所示:

菌液稀释一IxlO2IxlO3IxlO4IxlO3IxlO61X107

每个平板加III

0.1mL样品

函数太多难以计数菌落数菌落数菌落数

3.平板划线法与稀粒涂布平板法的留意事项

(1)平板划线法：

①接种环的灼烧：

a.第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避开污染培育物.

b.每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端。

c.划线结束后：杀死残留菌种，避开污染环境和感染操作者。

②灼烧接种环之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高杀死菌种。

③划线时最终一区域不要与第一区域相连。

④划线用力要大小适当，防止用力过大划破培育基。

(2)稀释涂布平板法：

①稀释操作时：每支试管及其中的9mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移

液管应在离火焰1〜2cm处。

②涂布平板时：

a.涂布器浸在体积分数为70%的酒精中，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将

沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。

b.不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。

c.酒精灯与培育皿距离要合适，移液管管头不接触任何物体。

4.两种纯化细菌方法的比较

|雨|

可以视察菌落特征，对混合菌进行

平板划线法不能计数

分别

汲取量较小，较麻烦，平板不干燥

稀释涂布平板法可以计数，可以视察菌落特征

效果不好，简洁扩散

Y过程评价O-

1.（学业水平一、二）如图是微生物平板划线示意图，划线的依次为1-2-3f4f5,

下列说法不正确的是（）

A.操作前要将接种式在酒精灯火焰上灼烧

B.划线操作须在酒精灯火焰旁边进行

C.只有在5区才可以得到所需菌落

D.在1、2、3、4、£区域中划线前后都要对接种环灭菌

2.（学业水平二）某同学运用划线法纯化酵母菌。下列叙述正确的是（）

A.灭菌时，高压蒸汽灭菌锅压力达到1kg/cm?后，需持续15min

B.制平板时，需将培育基匀称地倒在培育皿的整个底部

C.接种时，每次划线前，接种环均需蘸一次菌液

D.培育时，需将培育皿倒置于4°C的冰箱中

3.（学业水平三、四）下图为试验室培育和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列

说法错误的是（）

A.步骤操作时须要在酒精灯火焰旁进行

B.步骤①中待倒入的培育基冷却后盖上培育皿的皿盖

C.步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灭苗处理

【）.划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培育箱中培育

4.（学业水平三、四，不定项选择）将没有吃完的西瓜，盖上保鲜膜后放入冰箱，是许

多人日常保存西瓜的方法，有这样一种说法：盖上保鲜膜保存的西瓜中细菌种类和数目反而

比没用保鲜膜的多。某生物探讨小组针对上述说法进行探究，他们用盖上保鲜膜保存了两天

的西瓜表面的瓜瓢制备浸出液，探讨细菌的种类和数显.下列说法正确的是（）

A.应当采纳稀群涂布平板法进行接种

B.瓜觎浸出液是液体，因此培育时平板不用倒置

C.仅须要设置盛有培育基的空白平板作比照

D.可通过平板I：菌落的特征初步推断细菌的种类

强化落实-学业达标一一归纳-提升•素养

生物

网本培

技术

络

建

构

1.各种培育基都含有水、碳源、氮源和无机盐等养分物质。

2.获得纯净微生物培育物的关键是防止杂菌污染。

3.消毒是指运用较为温柔的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一皆分微

生物。

4.灭菌是指运用剧烈的理化方法杀死物体内外全部的微生物，包括芽抱和抱子。

5.由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培育物，获得纯培育物的过程就是纯

培育。

6.菌落是分散的微生物在相宜的固体培育基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、

有肯定形态结构的子细胞群体。

高效课堂-实践运用一一随堂•巩固•达标

1.不同培育基的详细配方不同，但一般都含（）

A.碳源、磷酸盐和维生素

B.氮源和维生素

C.水、碳源、氮源和无机盐

【）.碳元素、氧元素、氢元素、氮元素

2.采纳干热灭菌、灼烧灭菌、湿热灭菌、紫外线照耀等几种方法，可分别杀死啸些部

位的杂菌（）

A.接种环、吸管、培育基、接种室

B.吸管、接种环、培育基、接种箱

C.培育基、吸管、接种环、接种箱

D.培育皿、吸管、培育基、双手

3.下列有关平板划线操作的描述，错误的是（）

A.将接种环放在酒精灯火焰上灼烧，直到接种环烧红

B.接种环在平板上划线的位置是随机的

C.在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过酒精灯火焰

D.最终一区的划线不能与第一区相连

4.下列关于微生物试验操作的叙述，错误的是（）

A.培育微生物的试剂和器具都要进行湿热灭菌

B.接种前后，接种衣都要在酒精灯火焰上进行灼烧

C.接种后的培育皿要倒置，以防培育基被污染

D.菌种分别和菌落计数都可以运用固体培育基

5.广泛用于牛奶、奶酪、啤酒等产品的消毒方法是（）

A.湿热灭菌B.巴氏消毒法

C.酒精消毒D.火焰灼烧

6.下表是培育某微生物的培育基的配方，请回答下列问题:

组分牛肉育蛋白陈NaCl琼脂水

用量5g10g5g20g1000mL

（1）培育基的类型许多，但培育基中一般都含有水、碳源、和无机盐。上述培

育基配方中能充当碳源的成分是。培育基配制完成以后，一般还要调整pH

并对培育基进行_______处理。

（2）在配制培育基时，除考虑养分条件外，还要考虑、和渗透压等条

件。

（3）在微生物培育操作过程中，为防止杂菌污染，需对培育基和培育器皿进行

（填“消毒”或“灭菌”）;操作者的双手需进行清洗和:空气中的细菌可

用紫外线杀灭，其缘由是紫外线能使蛋白质________,还能损伤DNA的结构。

（4）分别纯化微生物最常运用的接种方法是和。

（5）在接种前须要检测培育基是否被污染。对于固体培育基应采纳的检测方法是

疑难解答・名师指津一一释疑-解惑-教材

第1小节

（―）从社会中来

提示：应当先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接种纯的菌种，并限制发酵条件，避

开杂菌进入。

（二）旁栏思索题

1.培育基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。

2.无菌技术还能有效避开操作者自身被微生物感染。

（三）探究•实践

1.在未接种的培育基表面应当没有菌落生长，假如有，说明培育基被杂菌污染。

2.提示：能视察到单一菌落，这些菌落的颜色、形态和大小〜样。假如视察到了不同

形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等缘由引起的。

3.依据实际状况回答。

（四）思维训练

提示：所谓“酵素”，就是“酶”的另一种说法。“酵素”制作的原理就是利用微生物

进行无氧呼吸，进行像制作泡菜一样的发酵。这样制作的“酵素”中可能有糖类（包括一些

简洁的糖和膳食纤维等）、蛋白质（包括多种酶）、有机酸等成分，不存在它独有的、特别的

养分物质，其中甚至可能含有微生物发醉产生的有毒物质，食用后可能会危害人体健康。因

此，“吃水果'酵素•'可以美容、减肥、促进消化和提高免疫力”的论点值得怀疑。可以通

过查阅专业学术期刊上发表的有关探探讨文，或亲自检测水果“酵素”中的成分，获得科学

牢靠的证据进行全面论证。

(五)练习与应用

概念检测

1.(l)x(2)V⑶X

2.提示：日常生活中保存食品的方法有干制、腌制、低温储存等。干制可以降低食品

的水分含量；腌制可以通过食盐、糖等制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖；低温

则是通过降低微生物的代谢速率来抑制微生物的生长和繁殖。

拓展应用

1.(1)培育皿和培育基

(2)提示：接种。

(3)提示：通过试验结果可以看到，洗手后手上还有一些微生物，不能干脆进行无菌操

作。

可以通过用酒精棉球擦拭双手，或戴消过毒的手套等方法来避开手上微生物的污染。

2.(1)意味着培育液中&含量不同。

(2)在肯定转速范围内，摇床的转速越高酵母菌的种群密度越大。其缘由是摇床转速越

高，培育基中G越足够。

(3)提示：培育基中养分物质和溶氧量是有限的，此时，酵母菌种群数量已经达到了环

境容纳量，种群密度达到隐定。

第1课时微生物的基本培育技术

夯基提能-分层突破

学习主题一

【师问导学】

活动1

1.提示：葡萄糖尿素牛肉育、蛋白陈不供应凝固剂

2.提示：水碳源氮源无机盐

3.提示：pH特别养分物质0，

4.提示：牛肉膏、蛋白陈能够供应碳源、氮源、维生素(生长因子)和无机盐。

活动2

1.提示：能利用无机碳源的微生物的同化作用类型是自养型。

2.提示：培育的微生物不同，对养分物质的需求不同，养分基质的详细配方就不同。

而水、碳源、氮源、无机盐是微生物生命活动的主要养分物质，因此培育基中一般都有。

【过程评价】

1.解析：无机物碳源不供应能量，A错误；同一种物质可以既作碳源又作氮源，如牛

肉膏，B错误：自然界中一些微生物如硝化细菌，可以以无机氮源合成细胞物质，同时通过

氧化外界无机氮源获得生长所需能量，叫做化能合成作用，C正确；无机物也可供应碳源和

氮源，如碳酸盐和硝酸盐，D错误。

答案：C

2.解析：配制培育基时，养分要协调，留意各种养分物质的浓度及比例，A正确：培

育基通过调整各种养分物质的组成等可实现分别、鉴定微生物等不同1=1的，B正确；不同微

生物生长所须要的最适PE不同，如细菌为7.0〜8.0,醉母菌为3.8〜6.0,C错误；虽然各

种培育基的配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐等养分物质，D正确。

答案：C

3.解析：培育基一般都含有碳源、氮源、无机盐和水等养分物质，而分别自生固氮菌

的培育基中，不须要加入氮源，A错误：碳源和氮源必需具有肯定比例，但碳元素的含量不

肯定最多，如自养型微生物的培育基不须要加入碳源，E错误；养分物质的浓度过高可能会

造成微生物渗透失水死亡，D错误。

答案：C

4.解析：制备牛肉膏蛋白豚固体培育基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，

其依次不能颠倒，A错误；牛肉音比较黏稠，所以称好后需将称量纸一同放入烧杯中加热，

当牛肉膏溶化并与称量纸分别后，用玻璃棒取出称显纸，B正确；待培育基冷却至50℃左

右，起先倒平板，C正确；培育基冷却凝固后需将平板倒置，D正确。

答案：BCD

学习主题二

【师问导学】

活动1

1.提示：无菌技术还能有效避开操作者被微生物感染。

2.提示：用于生物消毒的微生物能产生杀死其他微生物的代谢产物或是寄生性的微生

物。

活动2

1.提示：都是使微生物的蛋白质变性，借此杀死微生物。

2.提示：灭菌可杀死处理材料中的全部微生物（包括芽泡和抱子），而消毒仅杀死部分

微生物（一般不包括芽狗和抱子）。

3.提示：不是，无菌技术既要考虑效果，又要考虑操作对象的承受实力。例如，活体

生物材料、操作者的手等只能消毒，而不能灭菌。

4.提示：④⑥⑧①③⑤⑦©②

5.提示：酒精擦拭属于消毒。酒精消毒时，70冬的酒精杀菌效果最好。浓度过高，使菌

体表面蛋白质凝固成一层爱护膜，酒精分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌实力减弱。

【过程评价】

1.解析：将用F微生物培育的器皿、接种用具和培育基等器具进行灭菌只是无菌技术

的一个方面，不是无菌技术的全部；接种纯种细菌是获得纯净培育物的前提；相宜条件下培

育只能供应微生物生长的条件，不能防止杂菌污染；防止外来杂菌的入侵是获得纯净培育物

的关键。

答案：D

2.解析：高温灭菌主要是使微生物的蛋白质等生物大分子发生不行逆转的变性。

答案：C

3.解析：消毒是指月温柔的理化方法杀死体表或内部的部分微生物（不包括芽胞和抱

子），灭菌则是用剧烈的理化因素杀死体内外全部的微生物，包括芽抱和抱子。

答案：B

4.解析：灭菌是指运用剧烈的理化方法杀死物体内外全部的微生物，包括芽抱和抱子,

消毒只能杀死物体表面或内部的部分微生物，不能杀死芽泡和孩子，A错误；无菌操作时，

对试验操作的空间、操作者的衣物和手进行消毒，B错误；灼烧法灭菌的对象可以是金属器

具和玻璃器具，C正确；消毒和灭菌的原理相同，都是使微生物的核酸或蛋白质变性，D正

确。

答案：CD

学习主题三

【师问导学】

活动1

1.提示：对瓶口进行灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培育基。

2.提示：培育基冷却凝固后，培育皿的皿盖上会凝聚水珠，将培育皿倒置，可以防止

皿盖上的水珠落入培育基造成污染。

3.提示：(1)接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧。

(2)接种环蘸取菌液前后，要将试管口通过火焰。

(3)划线时将培育皿的皿盖打开一条缝隙，将蘸有菌种的接种环快速伸入平板内，划线

后刚好盖上皿盖。

(4)每次划线结束后，灼烧接种环，冷却后再进行下一次划线。

(5)整个接种过程要在酒精灯火焰旁进行。

4.提示：划线末端含有的菌体数目较少，每次从上一次划线的末端起先划线能够使菌

体的数目随划线次数的增加而渐渐削减，最终分散成单个的菌体。

5.提示：划线前灼烧是为了杀死上次划线结束后残留的菌种。划线结束后灼烧，能刚

好杀死接种环或接种针上残留的菌种，避开污染环境和感染操作者。

活动2

1.提示：可以用手触摸盛有培育基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。

2.提示：不能用这个平板培育微生物。因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的

培育基上滋生而导致污染，

3.提示：作比照培育基被杂菌污染

【过程评价】

1.解析：在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法是在酒精灯火焰

上灼烧；接种时划线操作是在酒精灯火焰旁边进行：在5个区域中，只要有单个活细菌，通

过培育即可获得所需菌落；每次划线前都要灼烧接种环，目的是杀死接种环上原有的微生物

(第一次划线前)和上次划线结束后接种环上残留的菌种,使每次划线的菌种都来自上一次划

线的末端，划线结束后灼烧接种环以防止污染环境和感染操作者。

答案：C

2.解析：灭菌时，高压蒸汽灭菌锅压力达到1kg/cm?后，需持续15min,A正确；制

平板时:将培育基倒在培育皿中，并轻轻摇匀即可，B错误；接种时，每次划线前，接种环

均需灼烧灭菌，C错误；培育时，需将培育皿倒置于恒温培育箱中，D错误。

答案：A

3.解析：由图可知，①是倒平板，②是用接种环蘸取菌液，③是进行平板划线，④是

培育。①②③步骤操作时须要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，A正确；倒完平板后

应马上盖上培育皿，冷却后将平板倒过来放置，B错误；每次划线前灼烧接种环是为J'杀死

上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种干脆来源于上次划

线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目渐渐削减，以便得到单曲•落,

c正确；划线接种结束后，将平板倒置后放入培育箱中培育，可以避开培育基中的水分过快

地挥发和防止皿盖上的水珠落入培育基造成污染，I）正确.

答案：B

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