分子生物 第5章 自测题

第五章自测题一、单选题1．识别并切割特异DNA序列的酶是（）A．非限制性核酸外切酶B．限制性核酸内切酶C．限制性核酸外切酶D．非限制性核酸内切酶2．下列哪种OD260/OD280比值表示所提取的DNA纯度较好（）A．1.0~1.2B．1.8~2.0C．1.5~1.7D．2.1~2.03．普通琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段的上限是（）A．30kbB．40kbC．50kbD．60kb4．关于荧光探针SYBRGreen=1\*ROMANI的叙述正确的是（）A．带有两种荧光基团B．只能与双链DNA结合C．可以区分不同的双链DNAD．是序列特异性的5．SDS电泳分离蛋白质时，决定电泳迁移率的主要因素是蛋白质的（）A．等电点B．相对分子质量C．电荷D溶解度6．质谱技术中，MALDI-TOF的工作原理是基于（）A．蛋白质的等电点B．肽段的质量和电荷比（m/z）C．蛋白质的荧光标记D．蛋白质的酶解效率7．真核生物细胞内含量最少的RNA是（）A．rRNAB．tRNAC．ncRNAD．mRNA8．总RNA提取常用方法是（）A．异硫氰酸胍-苯酚抽提法B．甲酰胺解聚法C．乙醚抽提法D．索氏抽提法9．脉冲电场凝胶电泳（PFGE）适用于分离（）A．小片段DNAB．超大片段DNAC．RNAD．蛋白质10．由于一些大肠杆菌细胞会切除带有5'-甲基胞嘧啶的外源DNA，所以实验中常选用（）菌株以防止cDNA被降解A．mrr-tonA-B．mcrA-mcrB-C．mrr-mutS-D．mrr-malA-11．在RFLP作图中，1cM（厘摩）相当于重组率（）A．1%B．2%C．5%D．10%12．RAMPAGE技术使用山梨醇和海藻糖的目的是（）A．提高酶的热稳定性B．提高酶的催化性C．提高酶的高效性D.提高酶的专一性13.下列不属于调控型ncRNA的是（）A．rRNA和tRNAB．miRNA和siRNAB．piRNA和snRNAD．snoRNA和lncRNA14．TAIL-PCR主要用于（）A．分离非编码RNAB．构建基因组文库C．扩增T-DNA插入位点的侧翼序列D．分析蛋白质表达15．双向电泳技术分离不同蛋白质依据蛋白质的哪些差异？（）A．电荷数和相对分子质量B．化合价和相对分子质量C．电荷数和结构D．等电点和相对分子质量二、多选题1．可改造成基因工程载体的有（）A．质粒B．噬菌体C．哺乳动物的病毒D．逆转录病毒DNA2．提取基因组DNA时，CTAB的作用是（）A．去除多糖B．去除蛋白C．裂解细胞膜D．沉淀DNA3．基因文库的筛选方法主要包括（）A．核酸杂交法B．PCR筛选法C．免疫筛选法D．酶切筛选法4.DNA分子上碱基的主要修饰类型包括（）A．5-甲基胞嘧啶B．5-羟甲基胞嘧啶C．5-甲酰基胞嘧啶D．5-羧基胞嘧啶5．报告基因必须具备的条件有（）A．表达产物在受体细胞中不存在，即无背景B．可分泌表达C．其表达产物容易测定D．对受体细胞无不良影响6．引物设计时应注意（）A．长度一般为18~27bpB．GC含量控制在40%~60%C．Tm值在60℃为宜D．3'端可加外切核酸酶的识别位点7．基因组DNA文库可用于（）A．分离特定的基因片段B．分析特定基因结构C．研究基因表达调控D．全基因组物理图谱的构建8．cDNA合成过程中，如何保证所获得双链cDNA的方向性（）A．应选用活性较高的反转录酶及甲基化dCTPB．应选用活性较高的DNA聚合酶及甲基化dCTPC．cDNA两端应加入不同内切酶所识别的接头序列D．cDNA两端应加入相同内切酶所识别的接头序列9．DNA的5-甲基胞嘧啶(5mC)修饰检测方法有（）A．全基因组亚硫酸盐测序（WGBS）B．TET辅助吡啶硼烷测序（TAPS）C．酶促甲基化测序（EM-Seq）D．APOBEC偶联表观遗传测序（ACE-Seq）10．可用于基因组文库构建的载体包括（）A．λ噬菌体载体B．细菌人工染色体（BAC）C．P1源人工染色体（PAC）D．酵母人工染色体（YAC）11．下列关于RACE技术的叙述正确的是（）A．需要一段已知的cDNA序列B．需要去掉mRNA的5'帽子结构，加上特异性RNA寡聚接头C．5'RACE需要在cDNA链的3'端加入oligo(dC)尾巴D．需要以特异性寡聚dT为引物，合成cDNA链12．关于Gateway克隆技术，叙述正确的是（）A．包括TOPO反应和LR反应两步B．TOPO反应中，Entry载体上的CCCTT能被限制性内切酶切开暴露出3'突出端GTGGC．PCR产物的末端接头序列CACC与载体3'突出端GTGG与配对，使PCR产物以正确方向连入Entry载体D．LR反应将目的片段从Entry载体中重组入表达载体13．基因的图位克隆法需要（）A．通过染色体步移技术将位于这两个标记之间的基因片段分离并克隆出来B．通过建遗传连锁图，将目的基因定位到某个染色体的特定位C．通过对相同生态型个体的大量限制性内切酶和杂交探针分析，找出与目的基因距离最近的分子标记D．确定紧密连锁的RFLP或RAPD分子标记14．关于TAIL-PCR的叙述正确的是（）A．常用于扩增T-DNA插入位点侧翼序列B．需使用一套巢式特异引物（TR）和一个短的随机简并引物（AD）C．PCRⅠ要经过1轮高严谨性循环和5轮低严谨性循环后，再用1个高严谨和1个低严谨循环交替进行15个循环。D．PCRⅡ和PCRⅢ分别以TR2和TR3为特异性引物与AD配对进行PCR循环，扩增特异性序列。15．RNA修饰的主要检测技术包括（）A．斑点印迹法B．LC-MSC．二维薄层层析法D．纳米孔测序技术三、判断正误1．提取组织RNA后进行电泳，如果rRNA大小完整，而且28SrRNA和18SrRNA亮度接近1∶2，则认为RNA质量较好。（）2．实时定量PCR只能用于绝对定量，不能用于相对定量。（）3．凝胶电泳分离核酸分子通过电荷效应将其分开。（）4．核酸分子在电场中向负极移动，蛋白质向正极移动。（）5．SYBRGree=1\*ROMANI探针与TaqMan探针激发的荧光强度均可反映PCR产物的产量。（）6．基因组中所有编码区DNA序列克隆的总汇，称为基因组DNA文库。（）7．基因组DNA文库的代表性取决于克隆的随机性和数量。（）8．对于cirRNA，可以利用其3'末端poly(A)这一特殊结构将其分离出来。（）9．核酸杂交和PCR扩增都需要已知序列的特异性探针或引物。（）10．通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的外源基因是否表达。（）11．真核生物的基因组中，蛋白质编码区占据基因组绝大部分位置，非蛋白质编码区只占很少一部分。（）12．RAMPAGE技术可确定启动子的具体位置，并且能够高通量检测基因表达水平。（）13．Gateway大规模扩增技术利用T2噬菌体进行位点特异性DNA片段重组，实现不需要传统酶切连接过程的克隆。（）14.高通量测序（high-throughputsequencing）包括第二代测序和第三代测序，可以一次性测定几十万甚至几百万条DNA序列。（）15．蛋白质在SDS凝胶电场中的运动速度和距离取决于其相对分子质量和其所带电荷。（错）16．不同生物的个体、组织或细胞在不同发育时期、分化阶段，以及不同的生理、病理条件下基因表达不同，因此所对应的蛋白质组也具有特异性。（）参考答案一、单选题1．B；2．B；3．C；4．B；5．B；6．C；7．D；8．A；9．B；10．B；11．A；12．A；13．A；14．C；15．D.二、多选题1．A,B,C,D；2．A,C，D；3．A，B,C；4．A,B,C,D5．A,C,D；6．A,B,C；7．A,B,C,D；