届高三一轮复习生物：微生物的培养技术和应用课件

2026届高考一轮复习第50讲

微生物的培养技术和应用考情分析1．从命题题型和内容上看，选择题是较为常见的题型，题目难度相对较低，但需要考生准确掌握基础知识。而解答题的分值较高，通常会设置较为复杂的情境，考查学生对知识的综合运用能力、分析问题和解决问题的能力以及实验设计和分析能力等。2．从命题思路上看，从以下几个方面进行考查(1)基于基础知识考查：重点考查微生物培养的基本技术，要求学生准确理解和掌握这些基础知识，并能进行准确的表述和应用；(2)结合实际情境考查：常以生产生活中的实际问题为背景，要求学生运用所学的微生物培养知识，分析和解决实际问题，考查学生的知识迁移能力和综合运用能力；(3)考查实验设计与分析能力：微生物培养技术本身具有很强的实验性，高考命题中常常会涉及到实验设计、实验结果分析等内容，以考查学生的科学探究能力和逻辑思维能力。复习目标1．分析培养基的成分及其作用；平板划线法和稀释涂布平板法异同；选择培养基和鉴别培养基的区别(科学思维)2．探究微生物培养的条件及如何分离某种微生物等。(科学探究)考情解码·考点定标人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出其生长繁殖的营养基质。①培养、分离、鉴定、保存微生物。②积累其代谢物。①按照物理性质分类：液体培养基、固体培养基、半固体培养基液体培养基不含凝固剂，呈液体状态。+琼脂琼脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固。琼脂仅作为凝固剂，不能为微生物生长提供能量和碳源。含凝固剂，呈固态。扩大培养、工业生产微生物的分离与鉴定，活菌计数，保存菌种，实验室最常用的培养基。半固体培养基观察微生物的运动、分类鉴定。1、概念：2、用途：3、类型：固体培养基（一）培养基的配制一、微生物的基本培养技术3、类型：②按照化学成分分类：合成培养基：天然培养基：含有化学成分还不清楚或化学成分不明确的天然有机物。用已知的化学物质配制表1牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌)的营养组成组分含量提供的主要营养牛肉膏5g碳源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10g氮源和维生素等NaCl5g无机盐H2O定容至1000ml水表2查氏培养基（培养霉菌）的营养组成蔗糖（C12H22O11）10g硝酸钠（NaNO3）3g磷酸氢二钾（K2HPO4）1g硫酸镁（MgSO4·7H2O）0.5g氯化钾（KCl）0.5g硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）0.01g琼脂15～20gH2O定容至1000mL一、微生物的基本培养技术（2）按照培养基的用途选择培养基鉴别培养基允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。P16在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物。以尿素为唯一氮源的培养基可用于选择培养_____________；以纤维素为唯一碳源的培养基可用于选择培养_______________。尿素分解菌纤维素分解菌伊红美蓝培养基（大肠杆菌）

大肠杆菌的代谢产物（有机酸）能与伊红美蓝结合，从而形成深紫色、并带有绿色金属光泽的菌落。3、类型：一、微生物的基本培养技术选择培养基鉴别培养基一、微生物的基本培养技术异养微生物只能利用

。单质碳

碳源。碳源无机碳源：CO2、HCO3-等有机碳源：糖类、石油、花生粉饼等（1）碳源：能为微生物的代谢提供

的物质。碳元素有机碳源不能作为（2）氮源：能为微生物的代谢提供

的物质。氮元素氮源无机氮源：N2、NH3、NO3-、NH4＋等有机氮源：蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨等

只有固氮微生物才能利用N2。一、微生物的基本培养技术4．培养基的化学成分水、无机盐、碳源、氮源

（基本成分）和生长因子（3）水（4）无机盐功能：良好的溶剂；维持生物大分子结构的稳定功能：提供无机营养；调剂pH；维持渗透压特殊需求：培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。④培养厌氧微生物时，需要提供

的条件。①培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加

；②培养霉菌时，需要将培养基调至

；③培养细菌时，需要将培养基调至

；维生素酸性中性或弱碱性无氧主要指生长因子：维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等思考：所有微生物是否都可以用培养基进行培养?否。病毒是没有细胞结构的微生物,必须在活细胞内寄生并以复制的方式增殖,因此不能用培养基进行培养。生长因子：通常是指微生物自身不能合成或合成量不足，但又是微生物生长和代谢所必需的小分子。一、微生物的基本培养技术常见微生物的营养和能量来源3.含有C、H、O、N的有机物可作为异养型微生物的

；微生物碳源氮源能源蓝细菌硝化细菌根瘤菌大肠杆菌CO2NO3-、NH4＋等光能CO2NH3NH3氧化的化学能糖类等有机物N2有机物中的化学能糖类、蛋白质等有机物有机氮源为主，部分可利用无机氮源有机物中的化学能1.自养型微生物与异养型微生物培养基的主要差别在于

；2.无机氮源不但能给有些自养型微生物提供

，也能作为

，碳源氮源能源物质NH3：既是硝化细菌的氮源，又是它的能源物质光能自养化能自养异养、固氮菌异养碳源、氮源、能源一、微生物的基本培养技术1.目的：2.关键：3.方法：获得

的微生物培养物。纯净防止

污染。杂菌消毒与灭菌（二）无菌技术一、微生物的基本培养技术是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。操作的空间、操作者的衣着和手用于培养微生物的器皿、接种用具和培养基-----与消毒最本质区别消毒无菌技术灭菌是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中部分微生物的方法。应用场景：概念：应用场景：概念：注意：避免已经灭菌的材料用具与周围物品接触为了避免周围环境微生物污染，操作应在超净工作台并在酒精灯火焰旁进行。项目消毒灭菌作用强度较为

的理化因素

的理化因素作用程度杀死物体表面或内部________微生物杀死物体内外的

微生物芽孢和孢子一般不能杀灭能杀灭温和强烈一部分所有适用对象实验操作的空间、操作者衣着和双手微生物培养器皿、接种用具和培养基等一、微生物的基本培养技术(2)常用的消毒和灭菌方法a.煮沸消毒法：b.巴氏消毒法：c.化学药剂消毒法：d.紫外线消毒法：①

消毒方法：100℃煮沸5～6min，可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。62～65℃下消毒30min或80～90℃处理30s～1min，适合一些不耐高温的液体，如牛奶。可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且不破坏牛奶的营养成分。用70%酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等。接种室、接种箱或超净工作台在使用前可用紫外线照射30min。在照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果。一、微生物的基本培养技术原理：高温蒸汽破坏蛋白质、核酸等结构使其变性。优点：操作简便，效果可靠，可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体。基本保持培养基的营养成分不被破坏。对象：培养基等注：使用后的培养基必须灭菌后才能丢弃，以免污染环境。a.湿热灭菌：高压蒸汽灭菌锅②

灭菌方法：高压蒸汽灭菌锅内100kPa、121℃下维持15～30min。一、微生物的基本培养技术原理：使微生物细胞膜破坏、蛋白质变性和原生质干燥等。对象：耐高温，需保持干燥的物品，适用于

玻璃器皿(如试管、培养皿、吸管、注射器)

金属器具(如针头、镊子、剪刀等)的灭菌。干热灭菌箱内160～170℃下加热2～3h。干热灭菌箱b.干热灭菌：一、微生物的基本培养技术酒精灯火焰灼烧原理：使微生物燃烧对象：接种工具如接种环、接种针，以及接种过程中的试管口或瓶口等易被污染部位。c.灼烧灭菌：一、微生物的基本培养技术消毒与灭菌的对比表类型适用范围操作方法消毒灭菌较为温和理化方法，杀死部分微生物(不包括芽孢、孢子)强烈的理化方法，杀死所有微生物(包括芽孢、孢子)煮沸消毒法日常生活用品100℃煮沸5～6min巴氏消毒法不耐高温的液体62～65℃煮30min或80-90℃煮30s-1min化学药剂生物活体、水源等擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源紫外线紫外线照射30min灼烧灭菌接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧干热灭菌耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等物品放入干热灭菌箱,160～170℃加热2～3h湿热灭菌培养基、培养皿等,生产和实验室常用高压蒸汽灭菌锅内,100kPa,温度121℃,15～30min接种室、接种箱，超净工作台一、微生物的基本培养技术4．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。无菌技术除了用来

外，还能

。防止实验室的培养物被其他外来微生物污染有效避免操作者自身被微生物感染一、微生物的基本培养技术纯培养物培养物纯培养在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含有特定种类微生物的群体。获得纯培养物的过程。由单一个体繁殖所获得的微生物群体。配制培养基灭菌倒平板接种和分离培养制备培养基步骤一轮复习，夯实基础！（三）微生物的纯培养（以酵母菌的纯培养为例）一、微生物的基本培养技术1、实验原理分散或稀释繁殖单个细胞微生物群单个菌落①分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、

有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。（一个菌落就是一个种群）鉴别菌种：菌落的大小、形状、颜色、透明度、光泽度等是鉴定菌种的重要依据。②采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，

之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。稀释涂布平板法平板划线法一、微生物的基本培养技术培养基灭菌:

;培养四灭菌:

;配制培养基：灭菌：倒平板：制备培养基湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)法干热灭菌去皮马铃薯200g,切成块加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂用纱布过滤用蒸馏水定容至1000ml加入20g葡萄糖15-20g琼脂待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。等待平板冷却凝固后才能进行2、实验步骤一、微生物的基本培养技术得到滤液滤液中加入20g葡萄糖，15~20g琼脂。加水1000mL，加热煮沸至马铃薯软烂。用纱布过滤用蒸馏水定容至1000mL切成小块称取去皮的马铃薯200g2、实验步骤一、微生物的基本培养技术去皮马铃薯200g,切成块加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂用纱布过滤用蒸馏水定容至1000ml加入20g葡萄糖15-20g琼脂（1）制备培养基①配制②灭菌【注意】若需要调节pH，应在蒸馏水定容之后、灭菌之前进行操作。一、微生物的基本培养技术③倒平板：培养基冷却到50℃左右，在酒精灯火焰附近倒平板。1拔出锥形瓶的棉塞。2将瓶口迅速通过火焰。3用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基倒入培养皿（10～20mL），立即盖上皿盖。4等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。温度过高容易烫伤，温度过低琼脂会凝固。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。不能完全打开，以免杂菌污染培养基。1.防止皿盖上冷凝水滴入培养基，造成污染。2.防止培养基水分过快蒸发。一、微生物的基本培养技术连续划线稀释分散繁殖单个细胞微生物群单个菌落指在无菌条件下将微生物或含菌材料转移到合适其生长繁殖的培养基中的过程。通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。（平板划线法）经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。接种方法：平板划线法、稀释涂布平板法、穿刺接种法、斜面接种法接种分离连续划线法分区划线法12345接种环（2）接种和分离酵母菌一、微生物的基本培养技术平板划线的具体操作见下面的流程图：

①将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红。②在火焰旁冷却接种环，并拔出装有酵母菌培养液的试管的棉塞③将试管口通过火焰④将已冷却的接种环伸入菌液中，蘸取一环菌液⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞⑥在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基一、微生物的基本培养技术⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将最后一次的划线与第一次划线相连。平板划线法的操作一、微生物的基本培养技术12345【平板划线法注意事项】1.接种环只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次；2.划线首尾不能相接；3.每次划线前灼烧接种环进行灭菌；4.划线操作结束后，仍需灼烧接种环。连续划线法分区划线法一、微生物的基本培养技术灼烧时期目的蘸取菌液前每次划线前划线操作结束后杀死接种环上原有的微生物，防止杂菌污染。杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端。杀死接种环上残留的菌种，避免菌种污染环境和感染操作者。平板划线法通过连续的划线实现将聚集的菌体逐步稀释分散以便得到单菌落。一、微生物的基本培养技术右图接种环共需灼烧几次？6次平板划线操作中灼烧接种环的目的：完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24-48h。划3个平板（重复实验）1个不划线（空白对照）用记号笔标记培养皿中菌落皿底上平板划线法可以对菌种进行分离，不能对培养液中菌种进行计数（3）培养酵母菌：一、微生物的基本培养技术作用：作对照，检验培养基灭菌是否合格；检验培养过程是否有杂菌污染。原因：防止皿盖上冷凝水滴落，造成污染。例1、在实验室培养微生物，需要人为地为微生物提供适宜的营养和环境条件。下列关于培养基配制的说法正确的是(

)A.培养基中需要碳源、氮源、水和无机盐齐全B.培养基中必须添加琼脂C.培养基制备中均需调节pH至酸性D.无论哪种培养基均需要灭菌D培养固氮微生物时，培养基中可以不添加氮源只有配制固体(或半固体)培养基时才需要添加琼脂培养霉菌时需要将pH调至酸性，培养细菌时需要将pH调至中性或弱碱性习题巩固例2、下图为微生物的实验室培养的有关操作，下列相关叙述错误的是(

)A．步骤①中，需将接种工具灼烧至变红，以杀灭杂菌B．步骤②中，将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远C．图中接种方法的目的是使菌种逐渐稀释，经培养后获得单个菌落D．接种后应将培养皿倒置培养，培养后可以根据结果进行微生物计数D图示的平板划线法不能用于微生物的计数习题巩固

在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。1.选择培养基的概念：加入青霉素的培养基不加氮源的无氮培养基不加含碳有机物的无碳培养基分离自养型微生物分离固氮菌分离酵母菌、霉菌等真菌分离金黄色葡萄球菌分离能消除石油污染的微生物加高浓度食盐石油是唯一碳源二、

微生物的选择培养和计数（一）微生物的选择培养

人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和pH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。2.实验室中微生物筛选的原理：3.实例：用于鉴别不同类型微生物的培养基称为选择培养基。1.鉴别培养基的概念：2.鉴别培养基的原理：

在培养基中加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正常生长)，使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应。从而达到鉴定的作用。伊红——亚甲蓝培养基鉴别大肠杆菌（大肠杆菌菌落呈深紫色并有金属光泽）刚果红培养基鉴别纤维素分解菌二、

微生物的选择培养和计数具体处理原理目的鉴别尿素分解菌鉴别纤维素分解菌鉴别大肠杆菌酚红培养基刚果红培养基伊红-亚甲蓝培养基刚果红培养基鉴别纤维素分解菌伊红-亚甲蓝培养基鉴别大肠杆菌酚红培养基鉴别尿素分解菌尿素被分解产生氨，培养基呈碱性，使酚红指示剂变红。刚果红与纤维素能形成红色复合物，当纤维素被分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以菌落为中心的透明圈。在伊红-亚甲蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽。3.实例：二、

微生物的选择培养和计数①纤维素分解菌的筛选与鉴定方法:②纤维素分解菌的筛选方法的原理:【拓展】纤维素分解菌的筛选（通过颜色反应直接对微生物进行筛选与鉴定）刚果红染色法我们就可以通过观察是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。二、

微生物的选择培养和计数【拓展】纤维素分解菌的筛选③纤维素分解菌的实验过程:土壤取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选产生透明圈的菌落富含纤维素的环境用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的浓度，以纤维素为唯一碳源的选择培养基（液体培养基）制备系列稀释液将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上（含刚果红的鉴别培养基）（固体培养基）二、

微生物的选择培养和计数稀释涂布平板法：分离：获得分解尿素的细菌的纯培养物计数：测定分解尿素的细菌的数量仅通过选择培养基可以知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌吗？能利用平板划线法，进行微生物的培养计数吗？不能。平板划线法最开始的划线区域，细菌可能会长成一片，导致无法计数，此外灼烧接种环的时候也会杀死一部分细菌。平板划线法稀释涂布平板法

将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。菌液梯度稀释涂布平板繁殖单个细胞微生物群单个菌落可计数。1mL1mL1mL1mL1mL1mL1×1021×1031×1041×1051×1061×1079mL无菌水90mL无菌水注意：取土样用的小铁铲和盛土样的的纸袋在使用前都要灭菌。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。10g①铲取土样，将样品装入纸袋中②将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。1×10（1）梯度稀释2、稀释涂布平板法二、

微生物的选择培养和计数（二）微生物的数量测定样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目。通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，选择菌落数为30-300的平板计数同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值统计的菌落往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落统计的结果一般用菌落数而不是活菌数01040302注意二、

微生物的选择培养和计数③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。⑤将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。注意：多余的酒精在烧杯中滴尽，然后再放在火焰上灼烧。④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。（2）涂布平板二、

微生物的选择培养和计数细菌一般选用104、105、106稀释倍数的菌液进行涂布培养。

注意事项：本实验使用的平板和试管较多，为了避免混淆，最好在使用前做好标记。例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。二、

微生物的选择培养和计数⑦待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30-37℃的恒温培养箱中，培养1-2d。在涂布有____________菌液的平板上就可以观察到分离的_________。（3）菌落培养与观察稀释104倍稀释105倍稀释106倍恒温培养箱合适浓度单菌落检验培养基灭菌是否合格；检验培养过程是否有杂菌污染。空白对照二、

微生物的选择培养和计数稀释涂布平板法的操作步骤二、

微生物的选择培养和计数项目分离图像关键操作接种用具优点缺点共同点平板划线法稀释涂布平板法接种环在固体培养基表面连续划线一系列的梯度稀释；涂布平板操作可以观察菌落特征，对混合菌进行分离可以计数，可以观察菌落特征接种环涂布器不能计数操作复杂，需要涂布多个平板都要用到固体培养基；都需进行无菌操作；都会在培养基表面形成单个菌落；都可用于观察菌落特征。二、

微生物的选择培养和计数（1）计数原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测除样品中大约含有多少活菌。一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后取其平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。

统计结果一般用

而不用活菌数来表示。菌落数恰当的稀释度、涂布是否均匀是成功统计菌落数目的关键。原因：因为当两个或多个细胞连在一起，平板上观察到的只是一个菌落。（4）计算公式：每g样品中的菌落数＝(C÷V)×MC：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数；V：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)；M：代表稀释倍数。一轮复习，夯实基础！1、稀释涂布平板法（间接计数法）（2）计数原则：（3）缺点：二、

微生物的选择培养和计数利用特定的细菌计数板或血细胞计数板在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。2、优点：3、缺点：血细胞计数板——细菌计数板——较厚，常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。较薄，对细菌等较小的细胞进行观察和计数。细菌计数板血细胞计数板快速、直观；能观察微生物的形态特征。不能区分死菌和活菌→结果偏大。如何操作可避免上述缺点？能被染色的为死菌可用台盼蓝染色后再进行显微镜计数。（1）计数原理：2、显微镜直接计数二、

微生物的选择培养和计数例1、下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计，不合理的是(

)A．选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株B．在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源C．适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落D．可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌D在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成NH3，NH3使培养基的pH升高，酚红指示剂变红，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，能对分离的菌种做进一步鉴定习题巩固例2、某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，包括制备培养基、灭菌、接种培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关问题的叙述正确的是(

)A．实验用过的带菌培养基经过加热后就能倒掉B．利用平板划线法对细菌进行分离纯化并计数C．观察细菌培养的实验时，最好是在另一块平板上接种清水作为对照实验D．培养基中的淀粉提供碳源，蛋白胨提供碳源、氮源和维生素D

实验用过的带菌培养基要高压蒸汽灭菌后才能倒掉，以免污染环境应利用稀释涂布平板法对细菌进行分离纯化并计数要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照实验习题巩固A、小麦、麸皮等原料含有蛋白质、糖类等多种营养成分，蛋白质可以为微生物提供氮源，糖类等可以为微生物提供碳源，所以能为酒曲中微生物的生长繁殖提供碳源和氮源等营养物质，A正确；B、扩大制曲前对留存的酒曲不能灭菌，因为酒曲本身含有发酵所需的菌种，若灭菌会杀死这些菌种，导致无法进行正常的发酵过程，B错误；C、糯米、大米蒸煮后温度较高，立即与酒曲混合，高温会使酶的空间结构改变，导致酶活性降低，从而降低其催化效率，C正确；D、酒曲中含有淀粉酶等酶类，将酒曲混合糯米、大米处理一段时间，淀粉酶可将糯米、大米中的淀粉分解为葡萄糖，从而为后续酒母（含酵母菌）发酵提供底物葡萄糖，D正确。1．（2025·云南·高考真题）黄酒是我国古老的发酵酒之一，传统酿制中，先用蒸煮过的小麦或麸皮为原料，对之前发酵留存的少量酒曲（曲种）进行扩大制曲；再将酒曲和蒸煮后的糯米、大米混合处理一段时间后，添加足量酒母（含酵母菌）完成发酵，压榨成品。下列说法错误的是（）A．小麦、麸皮等原料为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源等营养物质B．为避免制曲过程被杂菌污染影响黄酒品质，扩大制曲前需对留存的酒曲灭菌C．糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合会导致酶空间结构改变而降低其催化效率D．将酒曲混合糯米、大米处理一段时间，是为了获得酒母发酵时的底物葡萄糖B真题感知·命题洞见2．（2025·贵州·高考真题）金龟子绿僵菌（Ma）是一种昆虫病原真菌，可以侵染某些农林