胰腺癌KRAS异质性的多维度解析与治疗展望

胰腺癌KRAS异质性的多维度解析与治疗展望【提要】胰腺导管腺癌（PDAC）的高度异质性是其恶性进展与治疗抵抗的核心原因。KRAS作为PDAC中最关键的驱动基因，其突变所导致的下游信号通路强度异质性，直接制约了靶向治疗的疗效。这种异质性不仅体现为G12D、G12V等突变亚型在生化功能与信号偏好上的差异，更深层地表现为等位基因剂量失衡、组织特异性演化时序及瘤内空间分布不均。高剂量KRAS突变通常与CDKN2A失活协同发生，驱动肿瘤向恶性演进，并与免疫抑制微环境重塑、代谢重编程密切相关，共同导致治疗抵抗。当前靶向策略虽已从共价抑制剂扩展至非共价结合、泛RAS抑制及蛋白降解等多种机制，但仍面临获得性耐药和微环境屏障等挑战。本文系统梳理KRAS在遗传、动态演化及功能输出层面的异质性，探讨不同分子分型对治疗响应的影响以及靶向治疗策略的演进与局限。未来PDAC的精准治疗需整合多组学分型、突变剂量分层及动态监测，推动癌症防治从被动治疗向主动拦截转变，为PDAC个体化精准治疗提供理论基础与实践路径。【关键词】KRAS；胰腺导管腺癌；异质性；肿瘤微环境；精准医疗；等位基因；演化胰腺导管腺癌（PDAC）是消化系统常见的恶性肿瘤之一，总体预后很差，5年生存率不足13%［1］。预计到2030年，其将成为癌症相关死亡的第二大原因［2］。约85%的患者在确诊时已处于局部晚期或远处转移，失去了手术机会［3］。对于不可手术的晚期患者，化疗的客观缓解率仅约20%，中位无进展生存期不足6个月，且常在治疗后出现耐药与复发［4⁃6］。胰腺癌的高度异质性是其恶性进展及治疗抵抗的核心因素。笔者所在课题组围绕胰腺癌细胞可塑性、微环境异质性等方面，系统解析了其高度异质性的本质与形成机制。此外，KRAS突变作为胰腺癌的首要驱动事件，其下游信号强度同样呈现高度异质性［7］，不仅体现为不同密码子替换所致的致癌强度及下游信号通路偏好的差异，更延伸至等位基因剂量失衡、组织特异性演化时序、瘤内空间分布不均及克隆演化动态等多个层面［8⁃10］。本文系统阐述胰腺癌中KRAS异质性的现象及其分子机制，评估当前靶向治疗策略的进展与局限，旨在拓展对其高度异质性的认知，并为构建精准的个体化治疗方案提供理论参考。一、KRAS异质性的全景图谱1.遗传层面的异质性：突变亚型与生化功能差异。KRAS是一种受上游信号调控的GTP酶，通过在GTP结合的活化态与GDP结合的失活态之间循环，精确调控细胞增殖与存活等关键过程［11］。生理状态下，GTP酶激活蛋白（GAP）促进GTP水解，使KRAS失活以关闭信号通路［12］。而在PDAC中，集中于第12位密码子的点突变（最常见的亚型包括G12D、G12V和G12R）破坏了这一负反馈机制［13］。结构生物学证据表明，不同突变亚型可诱导特异性的构象改变，如p⁃loop区域扭转应变升高、疏水相互作用丧失、SwitchⅠ/Ⅱ区域角度偏移等。这些微观结构变化不仅阻碍了GAP介导的水解反应，将KRAS锁定于持续活化状态，更改变了其与下游效应蛋白（RAF、PI3K、RAL⁃GEF）的亲和力，从而塑造差异化的信号转导模式［10］。这种异质性既解释了不同突变亚型之间致癌强度的差异，也为亚型特异性靶向药物的设计提供了结构基础。在经典的KRAS信号传导网络中，活化的KRAS主要通过3条核心下游通路调控肿瘤细胞表型：RAF⁃MEK⁃ERK级联通路，主导细胞周期进程与增殖信号［14］；PI3K⁃AKT⁃mTOR通路，参与细胞生长、代谢重编程及应激适应［15］；RAL⁃GEF相关信号轴，调控囊泡运输、细胞骨架动力学及迁移侵袭能力［16］。Mondal等［17］指出，不同KRAS突变亚型对这些效应通路的偏好及激活强度存在显著差异，进而影响肿瘤的整体信号状态、代谢依赖模式以及与免疫微环境的相互作用。临床队列研究进一步揭示，不同KRAS突变亚型在PDAC中呈现出可区分的预后模式和分子特征［18］。一项纳入超过2000例KRAS突变PDAC患者的大规模分析显示，携带G12R突变的患者通常表现出较长的无治疗间隔时间（6.0个月）和总生存期（13.2个月），而G12D和G12V突变则与更高的疾病进展和死亡风险相关［19⁃20］。结合基因表达谱与免疫表型的深入分析表明，G12D型肿瘤往往伴随更强的MAPK通路激活、更高的PD⁃L1表达水平以及特定的伴随突变（如ARID1A、KMT2D等）。上述生物学差异直接导致不同亚型对靶向药物（如MAPK抑制剂）的敏感性存在明显区别［21］。2.动态特征：等位基因剂量失衡与时序特异性的演化法则。随着新一代测序及多组学技术的深入应用，研究揭示KRAS驱动的PDAC远非简单的“突变与否”二元模型，其生物学行为受到等位基因剂量、组织特异性背景及克隆演化等多维度因素的共同调控。突变KRAS等位基因剂量的增加（如基因扩增或野生型等位基因的杂合性缺失）被视为驱动恶变的关键“二次打击”。在胰腺癌中，单拷贝的KRAS突变往往不足以驱动肿瘤发生［22］。Lennerz与Stenzinger［23］指出，突变等位基因频率对肿瘤表型的影响显著超越KRAS突变本身的存在与否。事实上，突变KRAS等位基因的绝对拷贝数及其与野生型等位基因的比例，直接关联下游MAPK等信号通路的输出强度［8，24］。由基因组事件（如局部扩增、全基因组加倍或野生型等位基因杂合性缺失）导致的剂量失衡［25］，解除了野生型KRAS对致癌信号的竞争性抑制，推动肿瘤向基底样型等高侵袭性亚型演进［26⁃27］。Varghese等［28］针对2336例PDAC患者的大规模研究证实，约20%的KRAS突变肿瘤存在等位基因剂量增加，该事件是独立于临床分期的强效不良预后因素，即使在可切除患者中也预示着更短的总生存期。KRAS剂量增加在不同器官中的演化时序截然不同［9］。在胰腺中，KRAS剂量增加通常发生在极早期（PanIN阶段），这与结直肠癌（多发生于晚期或转移阶段）和肺癌（多发生于中间阶段）形成鲜明对比。这种胰腺特异性的早期剂量爆发，源于胰腺组织特殊的表观遗传背景：在胰腺组织中，CDKN2A基因座的染色质处于开放状态，基础表达水平高，构成了强大的抑癌屏障。因此，胰腺癌的演化遵循先发生CDKN2A表达沉默（纯合缺失率>80%）、后扩增KRAS的共突变时序，这与结直肠癌和肺癌的演化路径截然不同。这种独特的演化路径塑造了胰腺癌特有的克隆架构，即高剂量KRAS克隆往往与特定抑癌基因的失活紧密耦合。在上述动态演化机制的驱动下，胰腺肿瘤内部形成了复杂的亚克隆结构。胰腺癌前病变PanIN的3D重建与全外显子测序显示，同一病灶内可能存在多种KRAS突变，且不同KRAS突变在空间上归属不同细胞群，提示其为多克隆起源［29⁃30］。这种空间分布的差异同时离不开肿瘤微环境中缺氧及营养梯度的严格筛选，特定的KRAS等位基因（如G12D）因能更有效地重编程代谢以适应低氧环境，从而在特定生态位中占据优势［31］。此外，在化疗或新型靶向药物的选择性压力下，携带TP53失活或MYC扩增等高侵袭性突变的亚克隆往往获得生存优势，并在治疗后复发时占据主导地位，进而推动肿瘤向更具侵袭性与治疗抵抗性的表型演进［32⁃33］。3.功能输出层面的异质性：代谢重编程与免疫微环境塑造。KRAS异质性最终体现在于对肿瘤生态系统的双重塑造，即代谢重编程适应与免疫微环境抑制。在代谢层面，PDAC细胞高度依赖突变KRAS驱动的代谢重塑以应对营养匮乏。致癌性KRAS不仅增强葡萄糖摄取并引导其流向己糖胺合成途径与非氧化性磷酸戊糖通路，还重构谷氨酰胺代谢以维持氧化还原平衡及核苷酸合成［34⁃35］，并通过诱导大胞饮作用摄取胞外蛋白，获取必需氨基酸以支持生长［36］。不同KRAS突变亚型在代谢表型上呈现明显的功能分化：G12D突变倾向于通过持续激活PI3K/AKT信号轴驱动合成代谢并维持生存优势；而G12R突变则在PI3Kα结合及大胞饮激活方面存在结构性缺陷，提示其代谢适应可能更依赖于替代性合成途径［37⁃38］。这种亚型特异性的代谢偏好提示针对大胞饮或单一代谢节点的治疗策略，其疗效可能受限于肿瘤的KRAS突变谱系。肿瘤内部的空间异质性进一步加剧了代谢复杂性，在缺氧及高氧化应激区域，癌细胞往往表现出更强的谷氨酰胺依赖和抗氧化程序［37］。这种由亚型特异性偏好与微环境压力共同构成的代谢可塑性，意味着干预策略若仅靶向单一代谢节点或大胞饮，其疗效将受到突变谱系与空间分布的双重限制。在免疫微环境层面，突变KRAS是构建免疫抑制壁垒的关键驱动因素［39］。在遗传修饰小鼠模型中，持续的KRAS信号不仅维持肿瘤细胞的自主性增殖，还通过系统性重塑细胞因子与趋化因子分泌谱［40⁃41］，促进髓源性抑制细胞（myeloid⁃derivedsuppressorcells，M⁃MDSCs）、M2型肿瘤相关巨噬细胞（tumor⁃associatedmacrophages，TAMs）以及调节性T细胞（regulatoryTcells，Treg）等免疫抑制性群体在肿瘤实质及间质中富集，从而抑制CD8⁺T细胞的浸润与功能［42⁃43］。此外，KRAS激活还诱导癌相关成纤维细胞（cancer⁃associatedfibroblasts，CAFs）活化及大量细胞外基质沉积，形成高度纤维化、低灌注的物理屏障，进一步阻碍化疗药物递送与免疫细胞向肿瘤核心区的浸润，加剧免疫逃逸与治疗抵抗［12，41］。免疫表型同样表现出显著的亚型差异。与G12D样本相比，G12R亚型倾向于呈现更高的免疫原性特征，包括CD8⁺T细胞浸润升高，而PD⁃L1表达及多种炎症性细胞因子显著降低［21，44］。这一现象提示，未来基于KRAS亚型的免疫治疗策略需进行更精细的区分与个体化设计。二、KRAS异质性驱动的分子分型与治疗响应转录组学和功能研究将PDAC划分为经典型和基底样两大分子亚型，两者在分化程度、信号依赖和治疗敏感性方面存在系统性差异［45⁃46］。经典型亚型通常保持较高的腺泡或导管样分化特征，其致癌依赖相对集中于KRAS⁃RAF⁃MEKRAF⁃ERK（MAPK）轴，表现出明显的癌基因成瘾特征，因此对以MAPK通路为核心的细胞毒化疗或靶向抑制剂在初始阶段往往较为敏感［46⁃48］。相比之下，基底样亚型呈现低分化、上皮⁃间质转化（epithelial⁃mesenchymaltransition，EMT）活跃及显著代谢重编程等特征，其KRAS驱动信号常与TP53失活、TGF⁃β通路激活及YAP1等替代通路高度耦联，形成高度可塑的信号网络架构［46，49］。这种网络结构使得单一通路抑制易被旁路激活或细胞状态转换所补偿，导致治疗反应短暂，并与不良预后及对标准化疗的原发性耐药密切相关。因此，不同分子亚型对KRAS靶向治疗的响应具有内在差异：经典型PDAC更可能从以KRAS/MAPK抑制为中心的强化初始治疗中获益，而基底样亚型则需要自起始阶段就考虑多通路联合，以对抗其高度可塑的信号网络。综合现有证据，KRAS靶向治疗在PDAC中的效果与耐药本质上是由肿瘤内在的分子亚型特征、信号网络结构及微环境所构成的生态系统共同塑造的。因此，治疗前应基于多组学进行精准分型，针对通路脆弱性节点进行联合设计，并对克隆演化与微环境重塑实施动态监测，采用多样化的治疗方式以阻断逃逸路径［50］。经典型PDAC因其相对依赖规范的MAPK通路传导，可优先采用以直接KRAS抑制剂为核心、联合上游或下游关键节点的强化初始抑制方案，以实现更深层及持久的初始病理缓解。而对于具有显著基底样或间质特征的肿瘤，其固有的高可塑性与免疫抑制微环境，则要求治疗初始即采用多轴联合策略，例如KRAS抑制剂与免疫调节剂、靶向代谢重编程或微环境调控药物的复合干预，以同步阻断多个生存依赖路径，克服其更强的适应与逃逸能力［51］。三、靶向KRAS的治疗策略演进1.抑制剂机制的多元化突破。KRAS抑制剂的设计已从传统的共价靶向，发展为涵盖非共价可逆结合、广谱RAS抑制剂及蛋白降解等多种作用机制。共价抑制剂通过不可逆结合KRAS突变位点将其锁定于失活状态［52］，代表性药物索托拉西布和阿达格拉西布在非小细胞肺癌中取得了显著临床获益［53］，但在KRASG12C仅占1%~2%的PDAC中疗效有限［54］；非共价抑制剂则依赖可逆结合实现选择性抑制［55］，针对PDAC中高频的KRASG12D突变，非共价小分子抑制剂MRTX1133［56］已在临床前模型中显示出显著的抗肿瘤活性，并进入早期临床试验阶段。广谱RAS抑制剂如RMC⁃6236，通过结合环孢素家族蛋白形成三元复合物，竞争性阻断RAS与效应蛋白（如RAF）的结合界面，可覆盖多种KRAS乃至RAS家族突变［57⁃58］。此外，基于分子胶、PROTAC等新型作用模式的分子也正处于积极探索阶段，有望通过促进突变蛋白降解来补充传统抑制剂的不足［59⁃60］。2.早期拦截策略。KRAS驱动的时序特性为早期拦截提供了契机。Stanger团队［61］证实，在PanIN癌前阶段应用KRAS抑制剂（如RMC⁃7977/9945）并采用节拍式给药，可将临床前模型中位生存期从138d延长至376d。这一发现提示，针对高危人群的预防性干预可能改变疾病进程。目前，结构类似的daraxonrasib（对应RMC⁃7977）和zoldonrasib（对应RMC⁃9945）等新一代抑制剂已进入临床试验阶段，有望验证这一转化医学假设。3.获得性耐药机制。尽管直接抑制剂疗效显著，但仍普遍面临获得性耐药的严峻挑战。临床前及早期临床观察表明，耐药机制呈现高度异质性：一方面，KRAS基因自身可通过二次点突变（如G12C抑制剂治疗后出现的G12D/R/V等突变）、等位基因扩增或拷贝数增加，导致药物结合位点改变［62］；另一方面，肿瘤细胞可通过上游受体酪氨酸激酶（如EGFR、MET）信号的自分泌再激活，或下游替代通路（如PI3K/AKT、RAF/MEK）的代偿性上调，部分甚至完全绕开被抑制的KRAS轴［32，62］。这些复杂的适应过程共同表明，针对单一节点的直接抑制往往难以长期封锁KRAS依赖的信号网络，进一步凸显了联合干预及动态监测在克服耐药中的必要性。4.联合干预策略。鉴于直接靶向KRAS在PDAC中存在作用谱系局限及易诱导适应性耐药等挑战，联合干预策略已成为重要的突破方向。在上下游联合方面，使用SHP2抑制剂RMC⁃4550联合KRAS抑制，或应用ERK抑制剂LY3214996抑制KRAS下游信号，在多种PDAC小鼠模型（CDX、PDX和原位移植模型）中均显示出显著的肿瘤生长抑制作用［63］。在多元联合方面，将KRAS抑制与EGFR阻断、免疫检查点抑制剂或标准化疗相结合的多元联合策略，也已成为当前临床转化研究的活跃领域［64］。在微环境靶向方面，联用抗纤维化药物（如FAK抑制剂）瓦解CAFs构建的物理屏障，并结合髓系重编程策略（如CSF1R抑制剂）逆转免疫抑制微环境，可消除微环境介导的旁分泌保护，协同增强KRAS抑制剂的免疫原性，从而克服适应性免疫逃逸［65］。可见，KRAS靶向治疗在PDAC中正逐步从单一药物干预，演进为一整套整合精确分子分型、理性联合策略与实时耐药监测的系统工程，有望为这一致死性肿瘤实现更持久且精准的疾病控制。四、当前主要困难与未来展望尽管针对KRAS的靶向治疗和个体化医疗为胰腺癌治疗带来了新的希望，但在实际应用中仍面临诸多挑战。1.检测与拦截窗口。现有检测手段（如血液ctDNA分析）难以全面捕获肿瘤内部的时空异质性，癌症拦截策略的临床转化面临PanIN病变检测困难的瓶颈。单细胞测序虽精度高，但成本与操作复杂性限制了其临床应用［66］。未来需开发高灵敏度的早期诊断技术，结合液体活检动态追踪KRAS突变，在影像学可见肿瘤之前识别癌前病变，从而为高危人群提供药物拦截机会［67⁃68］。2.剂量分层。KRAS靶向治疗要实现个体化，不仅需要区分突变亚型，更需将突变剂量纳入考量。现有临床检测报告通常忽略浅度扩增，而相关研究证明其对预后具有显著影响，亟需实现标准化检测与规范报告。在未来的临床试验设计中，尤其是评估KRAS抑制剂等新药时，应将KRAS突变体剂量作为分层因素，以更准确地评估药物在不同分子亚群中的疗效［9］。3.耐药干预。靶向KRAS治疗所致耐药的机制极为复杂，仅依赖单一生物标志物难以准确预测。临床上迫切需要建立实时耐药监测体系，结合多层面的分子分析及早识别耐药迹象，并探索联合阻断多条信号通路的治疗策略［12］。4.转化模型构建。当前研究多基于细胞系或基因工程小鼠模型，在再现人类PDAC高度异质的微环境结构及动态克隆演化方面仍存在局限［69］。未来需要构建能够模拟典型共突变特征的小鼠模型、患者来源的类器官或移植瘤模型，并在这些长期用药模型中观察肿瘤细胞的演变过程，从而更真实地评估药物疗效与耐药机制［22，69］。综上所述，KRAS突变在PDAC中呈现出多维异质性，这一特征对精准治疗策略具有深远影响。传统认知主要聚焦于突变亚型的生化功能差异，而最新研究揭示，KRAS等位基因剂量失衡与组织特异性演化时序是决定PDAC侵袭性与治疗响应的关键变量。高剂量KRAS突变作为独立预后因素，通过与共突变基因协同作用，驱动肿瘤恶性演进，并塑造免疫抑制微环境与代谢可塑性。基于上述机制突破，PDAC未来的精准治疗体系需整合多组学分型、剂量分层及液体活检动态监测，构建覆盖高危人群预防、联合用药优化及耐药实时追踪的全程化管理模式。这不仅要求开发覆盖更广谱突变且具备蛋白降解功能的新型药物，更需通过深入解析肿瘤生态系统的动态演化，推动PDAC治疗向真正个体化的精准医学迈进。参考文献[1]StoopTF,JavedAA,ObaA,etal.Pancreaticcancer[J].Lancet,2025,405(10485):1182-1202.DOI:10.1016/S0140-6736(25)00261-2.[2]SiegelRL,GiaquintoAN,JemalA.Cancerstatistics,2024[J].CACancerJClin,2024,74(1):12-49.DOI:10.3322/caac.21820.[3]NakasoneES,CovelerAL.Targetingmetabolisminpancreaticductaladenocarcinoma:challengesandinsightsfromtheAVENGER500trial[J].JGastrointestOncol,2025,16(3):1351-1355.DOI:10.21037/jgo-2025-61.[4]NichettiF,RotaS,AmbrosiniP,etal.NALIRIFOX,FOLFIRINOX,andgemcitabinewithnab-paclitaxelasfirst-linechemotherapyformetastaticpancreaticcancer:asystematicreviewandmeta-analysis[J].JAMANetwOpen,2024,7(1):e2350756.DOI:10.1001/jamanetworkopen.2023.50756.[5]梁廷波.胰腺癌新辅助治疗的现状与展望[J].临床肝胆病杂志,2019,35(5):946-952.[6]ConroyT,DesseigneF,YchouM,etal.FOLFIRINOXversusgemcitabineformetastaticpancreaticcancer[J].NEnglJMed,2011,364(19):1817-1825.DOI:10.1056/NEJMoa1011923.[7]TimarJ,KashoferK.MolecularepidemiologyanddiagnosticsofKRASmutationsinhumancancer[J].CancerMetastasisRevs,2020,39(4):1029-1038.DOI:10.1007/s10555-020-09915-5.[8]MuellerS,EngleitnerT,MareschR,etal.EvolutionaryroutesandKRASdosagedefinepancreaticcancerphenotypes[J].Nature,2018,554(7690):62-68.DOI:10.1038/nature25459.[9]MuellerS,deAndradeKrätzigN,TschurtschenthalerM,etal.Adiseasemodelresourcerevealscoreprinciplesoftissue-specificcancerevolution[J].Nature,2026.DOI:10.1038/s41586-026-10187-2.[10]GerberM,GoelS,MaitraR.InsilicocomparativeanalysisofKRASmutationsatcodons12and13:StructuralmodificationsofP-Loop,switchⅠ&ⅡregionspreventingGTPhydrolysis[J].ComputBiolMed,2022,141:105110.DOI:10.1016/pbiomed.2021.105110.[11]KirschnerT,MüllerMP,RauhD.TargetingKRASDiversity:CovalentModulationofG12XandBeyondinCancerTherapy[J].JMedChem,2024,67(8):6044-6051.DOI:10.1021/acs.jmedchem.3c02403.[12]LinehanA,O'ReillyM,McDermottR,etal.TargetingKRASmutationsinpancreaticcancer:opportunitiesforfuturestrategies[J].FrontMed,2024,11:1369136.DOI:10.3389/fmed.2024.1369136.[13]LuoX,ZhouF,TangY,etal.NovelparadigmsinKRAStargeting:Unveilingstrategiestocombatdrugresistance[J].ChinMedJ(Engl),2025,138(18):2243-2267.DOI:10.1097/CM9.0000000000003776.[14]MannKM,YingH,JuanJ,etal.KRAS-relatedproteinsinpancreaticcancer[J].PharmacolTher,2016,168:29-42.DOI:10.1016/j.pharmthera.2016.09.003.[15]FrumanDA,ChiuH,HopkinsBD,etal.ThePI3Kpathwayinhumandisease[J].Cell,2017,170(4):605-635.DOI:10.1016/j.cell.2017.07.029.[16]BaharME,KimHJ,KimDR.TargetingtheRAS/RAF/MAPKpathwayforcancertherapy:frommechanismtoclinicalstudies[J].SignalTransductTargetTher,2023,8(1):455.DOI:10.1038/s41392-023-01705-z.[17]MondalK,PosaMK,ShenoyRP,etal.KRASmutationsubtypesandtheirassociationwithothererivermutationsinoncogenicpathways[J].Cells,2024,13(14):1221.DOI:10.3390/cells13141221.[18]JiangY,MaiG,ZhaoX,etal.MolecularcharacterizationandprognosticimplicationsofKRASmutationsinpancreaticcancerpatients:insightsfrommulti-cohortanalysis[J].NPJPrecisOncol,2025,9(1):299.DOI:10.1038/s41698-025-01087-1.[19]NortonC,ShawMS,RubnitzZ,etal.KRASmutationstatusandtreatmentoutcomesinpatientswithmetastaticpancreaticadenocarcinoma[J].JAMANetwOpen,2025,8(1):e2453588.DOI:10.1001/jamanetworkopen.2024.53588.[20]YousefA,YousefM,ChowdhuryS,etal.ImpactofKRASmutationsandco-mutationsonclinicaloutcomesinpancreaticductaladenocarcinoma[J].NPJPrecisOncol,2024,8(1):27.DOI:10.1038/s41698-024-00505-0.[21]ArdalanB,CinerA,BacaY,etal.DistinctmolecularandclinicalfeaturesofspecificvariantsofKRAScodon12inpancreaticadenocarcinoma[J].ClinCancerRes,2025,31(6):1082-1090.DOI:10.1158/1078-0432.CCR-24-3149.[22]Drizyte-MillerK,TalabiT,SomasundaramA,etal.KRAS:theAchilles'heelofpancreascancerbiology[J].JClinInvest,2025,135(16):e191939.DOI:10.1172/JCI191939.[23]LennerzJK,StenzingerA.AllelicratioofKRASmutationsinpancreaticcancer[J].Oncologist,2015,20(4):e8-e9.DOI:10.1634/theoncologist.2014-0408.[24]FeySK,NajumudeenAK,WattDM,etal.KRASLossofheterozygositypromotesMAPK-DependentpancreaticductaladenocarcinomainitiationandinducestherapeuticsensitivitytoMEKinhibition[J].CancerRes,2025,85(2):251-262.DOI:10.1158/0008-5472.CAN-23-2709.[25]Chan-Seng-YueM,KimJC,WilsonGW,etal.Transcriptionphenotypesofpancreaticcanceraredrivenbygenomiceventsduringtumorevolution[J].NatGenet,2020,52(2):231-240.DOI:10.1038/s41588-019-0566-9.[26]ParkJK,JeongH,KimH,etal.Single-celltranscriptomeanalysisrevealssubtype-specificclonalevolutionandmicroenvironmentalchangesinlivermetastasisofpancreaticadenocarcinomaandtheirclinicalimplications[J].MolCancer,2024,23(1):87.DOI:10.1186/s12943-024-02003-0.[27]SchulteL,BeckA,MarienfeldR,etal.Unveilingtheintriguingrelationship:oncogenicKRAS,morphologicalshifts,andmutationalcomplexityinpancreaticmucinouscysticneoplasms[J].JPathol,2025,265(4):401-407.DOI:10.1002/path.6397.[28]VargheseAM,PerryMA,ChouJF,etal.ClinicogenomiclandscapeofpancreaticadenocarcinomaidentifiesKRASmutantdosageasprognosticofoverallsurvival[J].NatMed,2025,31(2):466-477.DOI:10.1038/s41591-024-03362-3.[29]ZhangH,KarnoubE,UmedaS,etal.Applicationofhigh-throughputsingle-nucleusDNAsequencinginpancreaticcancer[J].NatCommun,2023,14(1):749.DOI:10.1038/s41467-023-36344-z.[30]BraxtonAM,KiemenAL,GrahnMP,etal.3Dgenomicmappingrevealsmultifocalityofhumanpancreaticprecancers[J].Nature,2024,629(8012):679-687.DOI:10.1038/s41586-024-07359-3.[31]KerkSA,PapagiannakopoulosT,ShahYM,etal.MetabolicnetworksinmutantKRAS-driventumours:tissuespecificitiesandthemicroenvironment[J].NatRevCancer,2021,21(8):510-525.DOI:10.1038/s41568-021-00375-9.[32]DillyJ,HoffmanMT,AbbassiL,etal.MechanismsofResistancetoOncogenicKRASInhibitioninPancreaticCancer[J].CancerDiscov,2024,14(11):2135-2161.DOI:10.1158/2159-8290.CD-24-0177.[33]JiangY,MaiG,ZhaoX,etal.MolecularcharacterizationandprognosticimplicationsofKRASmutationsinpancreaticcancerpatients:insightsfrommulti-cohortanalysis[J].NPJPrecisOncol,2025,9(1):299.DOI:10.1038/s41698-025-01087-1.[34]SonJ,LyssiotisCA,YingH,etal.GlutaminesupportspancreaticcancergrowththroughaKRAS-regulatedmetabolicpathway[J].Nature,2013,496(7443):101-105.DOI:10.1038/nature12040.[35]BryantKL,ManciasJD,KimmelmanAC,etal.KRAS:feedingpancreaticcancerproliferation[J].TrendsBiochemSci,2014,39(2):91-100.DOI:10.1016/j.tibs.2013.12.004.[36]CommissoC,DavidsonSM,Soydaner-AzelogluRG,etal.MacropinocytosisofproteinisanaminoacidsupplyrouteinRas-transformedcells[J].Nature,2013,497(7451):633-637.DOI:10.1038/nature12138.[37]KerkSA,PapagiannakopoulosT,ShahYM,etal.MetabolicnetworksinmutantKRAS-driventumours:tissuespecificitiesandthemicroenvironment[J].NatRevCancer,2021,21(8):510-525.DOI:10.1038/s41568-021-00375-9.[38]HobbsGA,BakerNM,MiermontAM,etal.AtypicalKRAS(G12R)mutantisimpairedinPI3Ksignalingandmacropinocytosisinpancreaticcancer[J].CancerDiscov,2020,10(1):104-123.DOI:10.1158/2159-8290.CD-19-1006.[39]YingH,KimmelmanAC,BardeesyN,etal.Geneticsandbiologyofpancreaticductaladenocarcinoma[J].GenesDev,2025,39(1-2):36-63.DOI:10.1101/gad.351863.124.[40]Molina-ArcasM,DownwardJ.ExploitingthetherapeuticimplicationsofKRASinhibitionontumorimmunity[J].CancerCell,2024,42(3):338-357.DOI:10.1016/j.ccell.2024.02.012.[41]IschenkoI,D'AmicoS,RaoM,etal.KRASdrivesimmuneevasioninageneticmodelofpancreaticcancer[J].NatCommun,2021,12(1):1482.DOI:10.1038/s41467-021-21736-w.[42]MahadevanKK,McAndrewsKM,LeBleuVS,etal.KRAS(G12D)inhibitionreprogramsthemicroenvironmentofearlyandadvancedpancreaticcancertopromoteFAS-mediatedkillingbyCD8(+)Tcells[J].CancerCell,2023,41(9):1606-1620.DOI:10.1016/j.ccell.2023.07.002.[43]UniyalP,KashyapVK,BehlT,etal.KRASmutationsincancer:understandingsignalingpathwaystoimmuneregulationandthepotentialofimmunotherapy[J].Cancers(Basel),2025,17(5):785.DOI:10.3390/cancers17050785.[44]JeongJH,ShinD,KimS,etal.SpatialdistributionandactivationchangesofTcellsinpancreatictumorsaccordingtoKRASmutationsubtype[J].CancerLett,2025,618:217641.DOI:10.1016/j.canlet.2025.217641.[45]MoffittRA,MarayatiR,FlateEL,etal.Virtualmicrodissectionidentifiesdistincttumor-andstroma-specificsubtypesofpancreaticductaladenocarcinoma[J].NatGenet,2015,47(10):1168-1178.DOI:10.1038/ng.3398.[46]BaileyP,ChangDK,NonesK,etal.Genomicanalysesidentifymolecularsubtypesofpancreaticcancer[J].Nature,2016,531(7592):47-52.DOI:10.1038/nature16965.[47]O'KaneGM,GrünwaldBT,JangG,etal.GATA6expressiondistinguishesclassicalandbasal-likesubtypesinadvancedpancreaticcancer[J].ClinCancerRes,2020,26(18):4901-4910.DOI:10.1158/1078-0432.CCR-19-3724.[48]CollissonEA,SadanandamA,OlsonP,etal.Subtypesofpancreaticductaladenocarcinomaandtheirdifferingresponsestotherapy[J].NatMed,2011,17(4):500-503.DOI:10.1038/nm.2344.[49]ZhouX,HuK,BaileyP,etal.Clinicalimpactofmolecularsubtypingofpancreaticcancer[J].FrontCellDevBiol,2021,9:743908.DOI:10.3389/fcell.2021.743908.[50]TangD,KroemerG,KangR.KRAS-targetedtherapiesincancer:novelapproachesandovercomingresistance[J].BMJOncol,2025,4(1):e946.DOI:10.1136/bmjonc-2025-000946.[51]FalcomatàC,BärthelS,WidholzSA,etal.Selectivemulti-kinaseinhibitionsensitizesmesenchymalpancreaticcancertoimmunecheckpointblockadebyremodelingthetumormicroenvironment[J].NatCancer,2022,3(3):318-336.DOI:10.1038/s43018-021-00326-1.[52]OstremJM,PetersU,SosML,etal.K-Ras(G12C)inhibitorsallostericallycontrolGTPaffinityandeffectorinteractions[J].Nature,2013,503(7477):548-551.DOI:10.1038/nature12796.[53]PalmaG,KhurshidF,LuK,etal.SelectiveKRASG12Cinhibitorsinnon-smallcelllungcancer:chemistry,concurrentpathwayalterations,andclinicaloutcomes[J].NPJPrecisOncol,2021,5(1):98.DOI:10.1038/s41698-021-00237-5.[54]StricklerJH,SatakeH,GeorgeTJ,etal.SotorasibinKRASp.G12C-mutatedadvancedpancreaticcancer[J].NEnglJMed,2023,388(1):33-43.DOI:10.1056/NEJMoa2208470.[55]HallinJ,BowcutV,CalinisanA,etal.Anti-tumorefficacyofapotentandselectivenon-covalentKRAS(G12D)inhibitor[J].NatMed,2022,28(10):2171-2182.DOI:10.1038/s41591-022-02007-7.[56]WangX,AllenS,BlakeJF,etal.IdentificationofMRTX1133,anoncovalent,potent,andselectiveKRAS(G12D)inhibitor[J].JMedChem,2022,65(4):3123-3133.DOI:10.1021/acs.jmedchem.1c01688.[57]ZhangJ,DarmanL,HassanMS,etal.TargetingKRASforthepotentialtreatmentofpancreaticductaladenocarcinoma:Recentadvancementsprovidehope(Review)[J].OncolRep,2023,50(5):206.DOI:10.3892/or.2023.8643.[58]FilisP,SalgkamisD,MatikasA,etal.BreakthroughinRAStargetingwithpan-RAS(ON)inhibitorsRMC-7977andRMC-6236[J].DrugDiscovToday,2025,30(1):104250.DOI:10.1016/j.drudis.2024.104250.[59]BondMJ,ChuL,NalawanshaDA,etal.TargeteddegradationofoncogenicKRAS(G12C)byVHL-recruitingPROTACs[J].ACSCentSci,2020,6(8):1367-1375.DOI:10.1021/acscentsc