2026年病理学技术师试题及答案

2026年病理学技术师试题及答案第一部分：单项选择题（A1型题）本题共30题，每题1分。每题有5个备选答案，只有1个最符合题意。1.2026年病理学技术师考试中，关于10%中性缓冲福尔马林（NBF）的配制，下列描述正确的是：A.40%甲醛饱和溶液10ml+蒸馏水90mlB.40%甲醛饱和溶液10ml+蒸馏水90ml+磷酸盐缓冲液C.甲醛粉末4g+蒸馏水100mlD.40%甲醛饱和溶液100ml+蒸馏水900mlE.37%甲醛溶液10ml+蒸馏水90ml2.在常规石蜡包埋过程中，组织块经过透明处理后，浸蜡的温度通常设定为：A.CB.CC.CD.CE.C3.苏木精-伊红（H&E）染色中，常用的分化液是：A.0.5%盐酸乙醇B.1%氨水C.95%乙醇D.苯二甲酸酐E.伊红染液4.下列哪种固定剂主要用于免疫组织化学染色中，以最大程度保留抗原性：A.10%中性缓冲福尔马林B.95%乙醇C.丙酮D.戊二醛E.Zenker固定液5.脱钙是骨组织制片的关键步骤，下列关于脱钙的叙述，错误的是：A.脱钙前应将骨组织固定B.脱钙液常用硝酸或EDTAC.脱钙过程中需要每日更换脱钙液D.脱钙终点判断可用针刺法E.EDTA脱钙属于强酸脱钙，对组织结构损伤大6.在常规病理技术中，组织切片最常用的厚度是：A.1B.3C.6D.10E.207.下列染色方法中，用于显示糖原（如PAS反应）的是：A.刚果红染色B.Masson三色染色C.过碘酸-雪夫反应D.维多利亚蓝染色E.普鲁士蓝染色8.抗原修复是免疫组化染色的重要步骤，热诱导抗原修复（HIER）常用的缓冲液是：A.Tris-HCl缓冲液(pH7.4)B.柠檬酸盐缓冲液(pH6.0)C.磷酸盐缓冲液(PBS)D.碳酸氢钠缓冲液E.醋酸盐缓冲液9.下列关于冷冻切片技术的描述，正确的是：A.冷冻切片主要用于常规石蜡包埋前的诊断B.恒冷箱切片机温度通常设定在−C至C.冷冻切片的分辨率高于石蜡切片D.冷冻切片固定时间通常需要24小时E.OCT包埋剂的主要成分是水10.网状纤维染色常用的银染方法是：A.Warthin-Starry法B.Gomori法C.Grimelius法D.Fontana-Masson法E.Bielschowsky法11.在细胞病理学涂片制作中，巴氏染色（Papanicolaoustain）主要用于显示：A.细菌和真菌B.上皮细胞的胞核和胞质细微结构C.脂肪滴D.结缔纤维E.神经轴突12.下列哪种情况是免疫组化染色中出现“边缘效应”的主要原因：A.抗体浓度过高B.封片剂未干C.切片干燥不均匀D.DAB显色时间过长E.缓冲液pH值错误13.透射电子显微镜（TEM）样品制备中，常用的固定剂是：A.10%福尔马林B.4%多聚甲醛C.2.5%戊二醛D.甲醇E.冰醋酸14.组织脱水过程中，高浓度乙醇（如95%-100%）停留时间过长会导致：A.组织收缩B.组织变硬C.脱水不彻底D.染色不均E.组织溶解15.在特殊染色中，用于显示淀粉样物质的是：A.刚果红染色B.油红O染色C.甲苯胺蓝染色D.瑞氏染色E.吉姆萨染色16.下列关于石蜡切片机刀刃角度的说法，正确的是：A.刀刃角度越大，切片越容易碎B.刀刃角度越小，对组织挤压越小C.常用的刀刃角度约为D.刀刃角度与切片厚度无关E.硬组织应使用较小的刀刃角度17.免疫荧光技术中，常用的荧光素是：A.辣根过氧化物酶(HRP)B.碱性磷酸酶(AP)C.异硫氰酸荧光素(FITC)D.二氨基联苯胺(DAB)E.四甲基联苯胺(TMB)18.病理技术中，为了防止组织块在脱水过程中产生变形，应采取的措施是：A.直接放入100%乙醇B.脱水试剂容量应大于组织块体积的20倍以上C.缩短脱水时间D.提高温度E.减少组织块大小19.下列哪种染色常用于鉴别诊断霍奇金淋巴瘤中的R-S细胞：A.抗酸染色B.免疫组化CD30染色C.糖原染色D.脂肪染色E.弹性纤维染色20.组织透明剂二甲苯最显著的缺点是：A.透明效果差B.易使组织收缩变脆C.价格昂贵D.挥发性小E.与石蜡不相溶21.在常规HE染色中，伊红染液通常为：A.水溶液B.酒精溶液C.甘油溶液D.甲醛溶液E.二甲苯溶液22.下列关于细胞凋亡的形态学特征，描述错误的是：A.细胞体积缩小B.染色质凝聚C.形成凋亡小体D.伴有明显的炎症反应E.DNA断裂23.为了消除内源性过氧化物酶对免疫组化染色的干扰，通常使用：A.正常羊血清封闭B.3%甲醇溶液C.Tris缓冲液洗涤D.生物素阻断E.DAB显色24.脂肪组织在制片过程中，为防止脂肪溶解，应选用：A.酒精固定B.福尔马林固定后常规石蜡包埋C.甲醛固定，冷冻切片D.戊二醛固定E.丙酮固定25.下列试剂中，属于酶消化的试剂是：A.胰蛋白酶B.TritonX-100C.DMSOD.Tween-20E.BSA26.Masson三色染色结果中，胶原纤维通常被染成：A.红色B.黄色C.蓝色D.黑色E.绿色27.在病理档案管理中，蜡块和切片的保存温度要求是：A.室温即可B.CC.−D.−E.液氮温度28.下列关于Gomori六胺银染色的描述，正确的是：A.用于显示糖原B.用于显示基底膜C.用于显示脂肪D.用于显示黑色素E.用于显示铁29.在免疫组化自动化染色机中，防止干片的关键技术是：A.振荡B.湿盒环境C.高温修复D.梯度脱蜡E.延长一抗孵育时间30.核酸原位杂交（ISH）技术中，用于检测DNA探针的常用显色系统是：A.碱性磷酸酶/BCIP/NBTB.HRP/DABC.荧光素D.放射性同位素E.酶联金颗粒第二部分：多项选择题（X型题）本题共10题，每题2分。每题有5个备选答案，有2个或2个以上正确答案，少选得0.5分，多选、错选不得分。31.常用的组织固定方法包括：A.浸泡固定B.灌注固定C.微波固定D.蒸汽固定E.冷冻固定32.下列哪些因素会影响苏木精染色的结果：A.染液的pH值B.染色时的温度C.金属离子的存在D.组织固定的好坏E.切片的厚度33.免疫组化染色中，出现非特异性背景染色的常见原因有：A.一抗浓度过高B.孵育时间过长C.血清封闭不足D.洗涤不充分E.组织中内源性生物素活性未阻断34.病理技术中常用的脱水剂包括：A.乙醇B.丙酮C.正丁醇D.叔丁醇E.二甲苯35.下列哪些属于特殊染色范畴：A.抗酸染色B.网状纤维染色C.脂肪染色D.免疫荧光染色E.原位杂交染色36.关于冷冻切片的优缺点，描述正确的有：A.速度快，适用于术中快速诊断B.不需要经过脱水透明，脂质保存好C.切片厚度较石蜡切片厚D.细胞核结构不如石蜡切片清晰E.可以做酶组织化学定位37.组织切片中出现裂隙或空洞的可能原因有：A.组织固定不及时B.脱水梯度跳度过大C.包埋时石蜡温度过低D.蜡块冷却过快E.切片刀有缺口38.下列关于病理实验室废液处理，正确的做法有：A.甲醛废液需中和后排放B.二甲苯废液需回收处理C.酸性废液可直接倒入下水道D.含有放射性同位素的废液需专门处理E.DAB废液（含致癌物）需按有毒废物处理39.在电子显微镜技术中，超薄切片前常用的染色剂是：A.醋酸铀B.柠檬酸铅C.锇酸D.戊二醛E.乙醇40.提高病理切片质量的技术控制要点包括：A.组织取材及时，固定充分B.严格掌握脱水、透明、浸蜡的时间和温度C.保持切片刀锋利D.染色分化适度E.封片剂无气泡第三部分：共用题干单选题（B型题）本题共5题，每题1分。每组题共用一组备选答案，每题只有1个最符合题意。（41-45题共用备选答案）A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.戊二醛E.四氧化锇（锇酸）41.常规病理最常用的固定剂，穿透力强，对组织收缩小的是：42.能沉淀蛋白并固定糖原，常用于糖原和核酸固定的固定剂是：43.对微细结构保存极好，常用于电镜标本初固定，但穿透力弱的是：44.电镜标本后固定常用的固定剂，能固定脂类并增加电子反差的是：45.免疫组化中常用的冷固定剂，能溶解脂质，有利于抗原暴露的是：第四部分：填空题本题共10空，每空1分。46.10%中性缓冲福尔马林中，甲醛的实际浓度约为\_\_\_\_\_%。47.在常规H&E染色中，苏木精染细胞核呈\_\_\_\_\_色，伊红染细胞质呈\_\_\_\_\_色。48.组织切片脱蜡到水的过程，通常先使用\_\_\_\_\_洗去石蜡，再经过梯度乙醇下行至水。49.免疫组化染色中，SP法即\_\_\_\_\_法，其中的P代表\_\_\_\_\_。50.病理组织大体检查中，描述肿瘤大小通常使用\_\_\_\_\_（单位）。51.刚果红染色在偏振光显微镜下，淀粉样物质呈现\_\_\_\_\_色双折射。52.脱钙液中，EDTA是一种\_\_\_\_\_性脱钙剂。第五部分：简答题本题共5题，每题5分。53.简述石蜡切片制作的基本流程及各步骤的主要目的。54.简述免疫组织化学染色（SP法）的主要步骤。55.列出三种特殊染色方法及其对应的显示成分。56.简述冷冻切片制作中容易出现的问题及其解决方法。57.简述病理技术师在处理甲醛标本时应采取的职业防护措施。第六部分：综合应用与分析题本题共3题，每题10分。58.某病理实验室在进行一批乳腺组织标本的H&E染色时，发现切片着色普遍偏浅，细胞核与细胞质对比度差，且难以分辨核仁。请分析可能的原因，并提出相应的改进措施。59.在进行一张淋巴组织的免疫组化染色（检测CD20）时，阳性对照组织着色良好，但患者的组织切片中未见阳性信号，且背景较深，有弥漫性淡棕色沉淀。请详细分析造成该现象的可能原因，并设计排查方案。60.一名技术师在处理一份含骨组织的肿瘤标本时，因赶时间，直接将未固定的骨组织放入强酸脱钙液中，并在室温下放置48小时。随后进行常规脱水、包埋和切片。结果显微镜下观察发现：细胞核模糊不清，组织结构疏松，染色效果极差。请运用病理学技术原理分析该操作中的错误，并说明正确的处理流程。参考答案及详细解析第一部分：单项选择题1.B[解析]10%中性缓冲福尔马林由40%甲醛饱和溶液10ml+90ml磷酸盐缓冲液配制而成。实际甲醛浓度为4%。A项未加缓冲液；C项甲醛粉末不常用；D项浓度错误；E项浓度不准确且未提及缓冲。2.C[解析]浸蜡温度应略高于石蜡熔点，通常为56-60℃，以使石蜡充分渗入组织内部。温度过高易烫伤组织，过低则石蜡粘稠，浸蜡不透。3.A[解析]0.5%-1%盐酸乙醇是H&E染色中最常用的分化液，用于分化苏木精的过度染色。B是返蓝液；C是脱水；D是氧化剂；E是胞质染料。4.C[解析]丙酮是良好的沉淀剂，能很好地保存抗原活性，常用于冷冻切片的固定或免疫组化的冷固定。A和B对部分抗原遮蔽；D穿透力弱；E含有重金属，对抗原影响大。5.E[解析]EDTA（乙二胺四乙酸）是一种螯合剂，属于弱碱性或中性脱钙剂，对组织结构损伤极小，但脱钙速度慢。E项称其为强酸是错误的，硝酸才是强酸脱钙。6.B[解析]常规石蜡切片厚度为3-5μm，最常用为3-4μm。1μm为半薄切片；6μm以上较厚，用于特殊染色或细胞学。7.C[解析]PAS反应（过碘酸-雪夫反应）是显示多糖（糖原、粘多糖等）的经典方法。A是淀粉样蛋白；B是胶原纤维；D是弹力纤维；E是铁。8.B[解析]柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）和Tris-EDTA（pH9.0）是最常用的抗原修复液，其中柠檬酸盐应用最广泛。9.B[解析]恒冷箱切片机温度通常设定在-20℃至-25℃左右。A错，冷冻切片用于术中诊断；而C错，分辨率通常低于石蜡；D错，固定只需数分钟；E错，OCT主要成分是聚乙二醇和树脂。10.B[解析]Gomori银染法是显示网状纤维的标准方法。A是螺旋体；C是嗜银颗粒；D是黑色素；E是神经纤维。11.B[解析]巴氏染色能清晰显示上皮细胞的胞核和胞质结构，特别是角化蛋白，主要用于妇科宫颈涂片等。12.C[解析]边缘效应通常是由于切片边缘干燥，导致抗体非特异性吸附或蛋白浓缩所致。13.C[解析]戊二醛是电镜标准的初固定剂，能精细保存超微结构。A和B是光镜固定；D和E一般不用作电镜固定。14.B[解析]高浓度乙醇停留过久会导致组织过度硬化、收缩，切片时易碎裂。15.A[解析]刚果红染色是诊断淀粉样变性的特异性染色，偏振光下呈苹果绿双折射。16.C[解析]常用的石蜡切片刀刃角度为3°-5°。角度过大切片易皱，角度过小刀刃易受损。17.C[解析]FITC（异硫氰酸荧光素）发出黄绿色荧光，是最常用的荧光素。A和B是酶显色底物；D是HRP发色团。18.B[解析]脱水试剂容量必须远大于组织块体积（通常20倍以上），以保证浓度梯度稳定，避免组织周围脱水剂浓度降低导致脱水不净。19.B[解析]CD30是霍奇金淋巴瘤中R-S细胞的特异性标记物之一。20.B[解析]二甲苯易使组织收缩、变脆，透明时间不宜过长。21.B[解析]伊红是水溶性染料，但为了增强染色效果和与水溶性媒染剂配合，通常配制成乙醇溶液（如0.5%-1%伊红乙醇）。22.D[解析]细胞凋亡是单个细胞死亡，不引起炎症反应。坏死才伴有明显炎症反应。23.B[解析]3%甲醇溶液能破坏组织内的内源性过氧化物酶活性，消除非特异性显色。24.C[解析]脂肪在常规石蜡制片（有机溶剂处理）中会被溶解，必须用冷冻切片技术保存脂质。25.A[解析]胰蛋白酶常用于消化抗原暴露，特别是甲醛固定后的石蜡切片。26.E[解析]在Masson三色染色中，胶原纤维呈蓝色（或绿色，视配方而定，现代改良Masson多为绿色），肌纤维呈红色。27.A[解析]蜡块和切片在室温、干燥、避光条件下可长期保存。虽然低温保存更佳，但标准档案室室温即可。28.B[解析]六胺银染色主要用于显示真菌（也可显示基底膜），但在病理技术中常指显示基底膜（如肾小球GBM）。注意：PAS-六胺银常用于基膜。29.B[解析]自动化染色机通过保持湿盒环境或液体覆盖来防止干片。30.A[解析]原位杂交常用AP/BCIP/NBT（紫蓝色沉淀）或HRP/DAB（棕色）系统。DNA探针非放射性显色常用AP系统以获得高灵敏度沉淀。第二部分：多项选择题31.ABCD[解析]浸泡、灌注、微波、蒸汽固定均为常用方法。冷冻固定通常指急速冷冻，也是一种固定方式，但通常不列为常规化学固定选项，若选E也可，但ABCD为核心。32.ABCDE[解析]所有选项均会影响苏木精染色效果。33.ABCDE[解析]以上均为导致非特异性背景染色的常见原因。34.ABCD[解析]乙醇、丙酮、正丁醇、叔丁醇均为常用脱水剂。二甲苯是透明剂。35.ABC[解析]抗酸、网状纤维、脂肪属于经典的“特殊染色”。免疫荧光和原位杂交属于免疫学和分子病理技术，虽特殊但不归类于常规特殊染色（特染）。36.ABCDE[解析]冷冻切片速度快，脂质保存好，可做酶组化；但厚度稍厚，精细结构略逊于石蜡。37.ABCD[解析]切片刀有缺口会导致划痕，而非裂隙。裂隙主要与固定、脱水、包埋有关。38.ABDE[解析]酸性废液需中和后排放，不能直接倒入下水道。39.AB[解析]超薄切片后的染色常用“双重染色”，即醋酸铀和柠檬酸铅。锇酸是固定剂。40.ABCDE[解析]全流程的质量控制均影响最终切片质量。第三部分：共用题干单选题41.A[解析]甲醛（福尔马林）。42.B[解析]乙醇（Carnoy氏液中也含乙醇/冰醋酸，但纯乙醇固定糖原和核酸较好）。43.D[解析]戊二醛（电镜初固定）。44.E[解析]四氧化锇（电镜后固定）。45.C[解析]丙酮（冷固定，溶解脂质，利于抗原）。第四部分：填空题46.4[解析]10%福尔马林即4%甲醛。47.蓝；红[解析]苏木精蓝，伊红红。48.二甲苯[解析]脱蜡使用二甲苯。49.链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶；过氧化物酶[解析]SP法即Streptavidin-Peroxidasemethod。50.厘米[解析]肿瘤大小通常以cm记录。51.苹果绿[解析]刚果红染色淀粉样物质偏振光下呈苹果绿。52.螯合[解析]EDTA通过螯合钙离子脱钙。第五部分：简答题53.石蜡切片制作基本流程及目的：(1)取材与固定：去除坏死组织，选取有代表性的病变组织，使用固定液（如福尔马林）使细胞蛋白质沉淀，终止细胞酶活性，防止自溶和腐败，保持组织结构。(2)脱水：利用梯度乙醇由低浓度到高浓度，逐步去除组织内的水分，为有机溶剂透明做准备。(3)透明：使用二甲苯等溶剂置换出组织中的乙醇，使组织透明，并便于石蜡渗入。(4)浸蜡：在熔化的石蜡中温浴，使透明剂被石蜡置换，石蜡渗入组织内部，提供支撑介质。(5)包埋：将浸蜡后的组织放入蜡槽中，用石蜡包裹形成蜡块，凝固后提供硬度和形状便于切片。(6)切片：使用切片机将蜡块切成极薄的薄片（3-5μm）。(7)展片与烤片：将切片在温水中展平，裱贴于载玻片上，烘干使切片牢固附着。(8)染色：进行H&E或其他染色，使不同组织成分着色，形成对比。(9)封片：滴加封片剂，加盖玻片，永久保存切片。54.免疫组化SP法主要步骤：(1)石蜡切片脱蜡至水：二甲苯脱蜡，梯度乙醇下水。(2)抗原修复：采用热修复（高压、微波）或酶修复，暴露被遮蔽的抗原决定簇。(3)阻断内源性过氧化物酶：使用3%孵育，消除非特异性显色。(4)封闭非特异性位点：使用正常羊血清等封闭，减少背景。(5)滴加一抗：孵育特异性抗体，与抗原结合。(6)滴加二抗（生物素化IgG）：桥接一抗。(7)滴加SP复合物（链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶）：与二抗的生物素结合。(8)DAB显色：在HRP作用下氧化DAB，生成棕色沉淀。(9)复染核：苏木精复染。(10)脱水、透明、封片。55.三种特殊染色方法及显示成分：(1)网状纤维染色（Gomori银染）：显示网状纤维（黑色）。(2)Masson三色染色：显示胶原纤维（蓝色/绿色）、肌纤维（红色）。(3)PAS染色（过碘酸-雪夫反应）：显示糖原、粘多糖、基底膜等（紫红色）。(注：答案不唯一，如抗酸-结核杆菌；普鲁士蓝-含铁血黄素等均可)(注：答案不唯一，如抗酸-结核杆菌；普鲁士蓝-含铁血黄素等均可)56.冷冻切片常见问题及解决方法：问题1：切片卷曲、破碎。原因：组织块过大、冷冻温度过低、刀刃钝。原因：组织块过大、冷冻温度过低、刀刃钝。解决：修整组织块（<2cm），调整恒温箱温度（-20℃左右），磨刀或换刀。解决：修整组织块（<2cm），调整恒温箱温度（-20℃左右），磨刀或换刀。问题2：切片有冰晶或细胞形态模糊。原因：组织未速冻或固定不及时。原因：组织未速冻或固定不及时。解决：取材后立即投入-50℃异戊烷或液氮中速冻，或使用OCT包埋剂速冻。解决：取材后立即投入-50℃异戊烷或液氮中速冻，或使用OCT包埋剂速冻。问题3：染色过浅或过深。原因：固定时间不当、染色时间控制不准。原因：固定时间不当、染色时间控制不准。解决：优化固定时间（甲醛30-60秒），严格监控染色时间，特别是快速染色时。解决：优化固定时间（甲醛30-60秒），严格监控染色时间，特别是快速染色时。57.甲醛标本职业防护措施：(1)工程控制：实验室保持良好通风，安装通风橱或排风系统，取材和标本处理在通风橱内进行。(2)个人防护（PPE）：佩戴防毒口罩（活性炭滤罐）、护目镜、防渗透手套（丁腈手套）、实验服。(3)操作规范：避免甲醛液体直接接触皮肤，操作时动作轻柔防止飞溅。(4)环境监测：定期监测空气中甲醛浓度，确保低于职业接触限值。(5)应急处理：配备眼部冲洗设施，一旦接触立即大量清水冲洗。第六部分：综合应用与分析题58.分析：现象：H&E染色偏浅，核质对比差，核仁不清。原因分析：1.固定不当：组织固定不足或固定液浓度过低，导致核蛋白固定不良，着色力下降。2.苏木精染液问题：苏木精染液陈旧氧化失效，或染色时间过短。3.分化过度：在盐酸乙醇分化步骤中停留时间过长，将细胞核的颜色过度褪去。4.蓝化不足：返蓝液（氨水或水）作用不够，苏木精盐未恢复为蓝色，颜色偏红且淡。5.脱水不当：组织脱水不净，导致染液难以渗入。改进措施：1.检查固定：确保组织固定时间足够（6-24小时），固定液浓度准确。2.更换或调整染液：检查苏木精成熟度，必要时配制新液或延长染色时间。3.控制分化：严格监控分化时间，镜下观察至核质清晰即可立即停止。4.加强蓝化：使用流动自来水冲洗足够时间（15-30分钟）或使用弱氨水返蓝。5.检查脱水流程：确保乙醇梯度正确，彻底脱水。59.分析：现象：阳性对照好（说明系统工作正常），患者组织阴性，背景深。原因分析：1.抗原丢失/遮蔽：患者组织固定时间过长（福尔马林固定超过48小时常见抗原交联严重），或未进行有效的抗原修复。2.组织坏死：肿瘤组织中心坏死导致抗原丢失，同时坏死物质产生非特异性吸附导致背景深。3.抗体不匹配：虽CD20是B细胞标记，但若肿瘤去分化或标记选择错误