标准解读
《GB/T 47334-2026 蛋白检测 CRISPR Cas12a蛋白反式切割活性检测方法》是一项国家标准,旨在提供一种标准化的方法来评估CRISPR-Cas12a系统的Cas12a蛋白在识别特定DNA序列后触发的非特异性单链DNA(ssDNA)切割活性。该标准适用于科研机构、生物医药公司以及任何需要对Cas12a酶活性进行精确测量的场合。
标准首先定义了术语和定义部分,明确了诸如“CRISPR-Cas系统”、“Cas12a蛋白”、“反式切割活性”等关键概念的具体含义。接着,在原理章节中,介绍了Cas12a如何通过与crRNA复合物结合到目标双链DNA(dsDNA),进而激活其对于周围环境中任意ssDNA分子的切割能力。这种特性使得Cas12a成为一种强大的分子生物学工具,特别是在基因编辑、疾病诊断等领域有着广泛的应用前景。
随后,《GB/T 47334-2026》详细描述了实验所需材料与设备清单,包括但不限于纯化的Cas12a酶、合成的crRNA、靶向dsDNA片段及荧光标记的报告子ssDNA等。此外,还提供了具体的实验步骤指南,从样品准备到反应条件设置,再到最终的数据分析过程都有详尽说明。其中特别强调了温度控制、pH值调整等因素对实验结果准确性的影响,并给出了推荐的最佳实践参数范围。
最后,本标准还规定了质量控制措施,包括内部对照设立、重复性测试要求等,以确保检测结果的一致性和可靠性。通过遵循这些指导原则,研究人员可以更有效地利用CRISPR-Cas12a技术开展相关研究工作,促进生物医学领域的发展。
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....
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- 即将实施
- 暂未开始实施
- 2026-03-31 颁布
- 2026-07-01 实施
文档简介
ICS07080
CCSA.40
中华人民共和国国家标准
GB/T47334—2026
蛋白检测CRISPRCas12a蛋白反式切割
活性检测方法
Proteindetection—MethodformeasuringCRISPRCas12atrans-cleavageactivity
2026-03-31发布2026-07-01实施
国家市场监督管理总局发布
国家标准化管理委员会
GB/T47334—2026
目次
前言
…………………………Ⅲ
范围
1………………………1
规范性引用文件
2…………………………1
术语和定义
3………………1
缩略语
4……………………2
原理
5………………………2
试剂
6………………………2
仪器设备
7…………………3
试验步骤
8…………………3
试验数据处理
9……………4
质量控制
10…………………5
试验报告
11…………………5
附录资料性试剂中相关组分的序列信息
A()…………6
附录资料性试验步骤中反应组分体系配制信息
B()…………………7
附录资料性试验数据处理中的结果示例
C()…………8
参考文献
………………………9
Ⅰ
GB/T47334—2026
前言
本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定
GB/T1.1—2020《1:》
起草
。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任
。。
本文件由全国生化检测标准化技术委员会提出并归口
(SAC/TC387)。
本文件起草单位深圳市第二人民医院无锡吐露港生物医药科技有限公司深圳大学清华大学
:、、、、
深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司江南大学成都医学院第一附属医院中国计量测试学会上海市
、、、、
计量测试技术研究院有限公司国健药业深圳集团有限公司四川振兴检测科技股份有限公司
、()、。
本文件主要起草人顾大勇王金庄松宽刘翼振李捷王怡祁欢谢倩张译文李卫峰崔文璟
:、、、、、、、、、、、
许颖李兰英戴继海杨扬仲夫宋乔刘川杨杰
、、、、、、。
Ⅲ
GB/T47334—2026
蛋白检测CRISPRCas12a蛋白反式切割
活性检测方法
1范围
本文件描述了蛋白反式切割活性检测方法的原理试剂仪器设备试验步骤试
CRISPRCas12a、、、、
验数据处理
。
本文件适用于蛋白反式切割活性的检测
CRISPRCas12a。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文
。,
件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于
,;,()
本文件
。
分析实验室用水规格和试验方法
GB/T6682
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件
。
31
.
簇状规律间隔短回文重复序列clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeatsCRISPR
;
原核生物基因组中由短重复序列与间隔序列相间排列组成的一种遗传结构
,。
注1该结构通常源于整合到基因组中的外源片段是原核生物适应性免疫系统的组成部分
:DNA,。
注2其上游的前导序列通常包含启动子用于启动该结构的转录短重复序列长度通常为个个碱基对
:,。28~37,
间隔序列长度通常为个个碱基对用于识别同源外源
32~38,DNA。
32
.
Cas12a蛋白Cas12aprotein
系统中第类第型的一种引导的核酸酶切割靶标双链并反式切割非
CRISPR-Cas2ⅤRNA,DNA
靶标单链
DNA。
注其功能由核酸酶结构域介导
:RuvC。
33
.
CRISPR来源RNACRISPR-derivedRNAcrRNA
;
一段和目的片段序列互补引导蛋白剪切目的片段的序列
,Cas12aRNA。
34
.
Cas12a蛋白反式切割活性
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