甘肃东乡族RBP4基因多态性与2型糖尿病的关联性探究

甘肃东乡族RBP4基因多态性与2型糖尿病的关联性探究一、引言1.1研究背景2型糖尿病（T2DM）作为一种常见的慢性代谢性疾病，在全球范围内呈现出日益严峻的流行趋势，给公共卫生和社会经济带来了沉重负担。据国际糖尿病联盟（IDF）统计，2021年全球糖尿病患者人数已达5.37亿，预计到2045年将增至7.83亿。2型糖尿病占糖尿病总数的90%以上，其发病与遗传、环境、生活方式等多种因素密切相关。长期高血糖状态若得不到有效控制，会引发一系列严重的并发症，如心血管疾病、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、糖尿病神经病变等，这些并发症不仅严重影响患者的生活质量，还显著增加了致残率和死亡率，给患者家庭和社会带来沉重的经济负担。在中国，随着经济的快速发展、生活方式的改变以及人口老龄化的加剧，糖尿病的患病率也在急剧上升。《中国2型糖尿病防治指南（2020年版）》数据显示，中国成人糖尿病患病率已高达12.8%，患者人数超过1.3亿，其中2型糖尿病患者占比约90%-95%。不同地区和民族的糖尿病患病率存在显著差异，这种差异不仅与生活环境、饮食习惯、体力活动水平等环境因素有关，还可能与遗传背景的不同密切相关。甘肃东乡族是中国甘肃省特有的少数民族，主要聚居在甘肃省临夏回族自治州东乡族自治县境内。东乡族在独特的历史发展过程中，形成了相对隔离的聚居模式和独特的生活方式、饮食习惯。其饮食结构以高碳水化合物、高脂肪为主，且体力活动水平较低，这些因素可能导致糖尿病的发病风险增加。已有研究表明，东乡族人群糖尿病及糖调节受损患病率较高，分别为7.42%、9.62%，且不同年龄组糖尿病及糖调节受损患病率随年龄增长而增加，正常体重（包括低体重）、超重和肥胖者糖尿病与糖调节受损患病率依次增高。同时，东乡族人民的饮食多以高钠盐、高蛋白、高碳水化合物为主，运动少，当地自然环境差，卫生条件、医疗条件落后，人们的健康意识薄弱，近年来，甘肃省东乡族的糖尿病和糖尿病肾病发病人数日渐增加。糖尿病肾病作为糖尿病最常见、最严重的并发症，严重威胁着甘肃省东乡族糖尿病患者的生活质量。遗传因素在2型糖尿病的发病中起着至关重要的作用，研究表明，遗传因素对2型糖尿病发病的贡献率约为40%-80%。不同种族和民族由于遗传背景的差异，其2型糖尿病的易感基因和发病机制可能存在不同。东乡族作为一个具有独特遗传背景的少数民族，研究其2型糖尿病相关基因多态性，对于深入了解2型糖尿病的发病机制、制定个性化的预防和治疗策略具有重要意义。视黄醇结合蛋白4（RBP4）基因是近年来研究较多的与2型糖尿病发病相关的基因之一。RBP4是一种主要由肝脏合成和分泌的血浆转运蛋白，在视黄醇的转运和代谢中发挥着关键作用。越来越多的研究表明，RBP4与胰岛素抵抗、糖代谢异常等密切相关，可能是2型糖尿病发病的重要危险因素。然而，目前关于甘肃东乡族RBP4基因多态性与2型糖尿病的相关性研究较少，尚缺乏深入系统的探讨。因此，开展甘肃东乡族RBP4基因多态性与2型糖尿病的相关性研究具有重要的理论和实践意义。1.2研究目的本研究旨在深入探究甘肃东乡族人群中RBP4基因多态性与2型糖尿病之间的相关性，具体目标如下：明确甘肃东乡族人群RBP4基因多态性的分布特征，包括不同多态位点的基因型频率和等位基因频率，揭示该基因在东乡族人群中的遗传多样性。对比分析2型糖尿病患者与健康对照人群RBP4基因多态性的差异，从遗传角度探寻可能与2型糖尿病发病相关的RBP4基因变异类型，为疾病的遗传诊断提供理论依据。剖析RBP4基因多态性与2型糖尿病临床特征（如血糖水平、胰岛素抵抗程度、血脂代谢指标等）的关联，进一步阐释基因多态性对疾病表型的影响机制，为临床个性化治疗方案的制定提供科学指导。基于研究结果，为甘肃东乡族2型糖尿病的预防、早期诊断及精准治疗提供具有针对性的遗传信息和理论支持，降低该地区2型糖尿病的发病率和危害程度。1.3研究意义本研究聚焦甘肃东乡族RBP4基因多态性与2型糖尿病的相关性，具有重要的理论和实践意义，具体如下：理论意义：2型糖尿病发病机制复杂，涉及遗传、环境、生活方式等多种因素，其中遗传因素在疾病发生发展中扮演关键角色。东乡族作为具有独特遗传背景的少数民族，研究其RBP4基因多态性与2型糖尿病的关联，有助于从遗传层面揭示2型糖尿病的发病机制，为深入理解疾病的分子遗传学基础提供新的视角和线索。视黄醇结合蛋白4（RBP4）基因在糖代谢和胰岛素抵抗中发挥重要作用，通过探究该基因多态性与2型糖尿病的关系，能够进一步明确RBP4基因在2型糖尿病发病过程中的具体作用机制，丰富对2型糖尿病发病机制的认识，为后续相关研究提供理论依据和研究方向。不同种族和民族的遗传背景存在差异，其2型糖尿病的易感基因和发病机制也可能有所不同。对甘肃东乡族这一特定民族进行研究，有助于发现新的2型糖尿病易感基因或遗传变异位点，拓展对2型糖尿病遗传多样性的认识，完善全球范围内2型糖尿病遗传研究的体系。实践意义：东乡族人群糖尿病患病率较高，且生活方式、饮食习惯等因素可能增加其发病风险。本研究结果可为该地区2型糖尿病的预防提供针对性的遗传信息，通过遗传筛查识别出高风险个体，采取早期干预措施，如调整生活方式、优化饮食结构、增加体育锻炼等，有助于降低2型糖尿病的发病风险，提高东乡族人群的健康水平。准确的早期诊断对于2型糖尿病的有效治疗和管理至关重要。RBP4基因多态性若与2型糖尿病存在密切关联，可作为潜在的遗传标志物用于疾病的早期诊断和风险评估，辅助临床医生更准确地判断疾病发生风险，实现疾病的早发现、早诊断、早治疗。糖尿病的治疗正朝着精准化、个性化方向发展。了解RBP4基因多态性与2型糖尿病临床特征的关联，能够帮助医生根据患者的遗传特征制定个性化的治疗方案，选择更合适的药物和治疗方法，提高治疗效果，减少药物不良反应，改善患者的预后和生活质量。本研究还能为东乡族人群的健康管理提供科学依据，促进该地区医疗卫生资源的合理配置和利用，提升公共卫生服务水平，具有重要的社会和经济效益。二、理论基础与研究现状2.12型糖尿病概述2.1.1定义与诊断标准2型糖尿病是一种常见的慢性代谢性疾病，主要由于胰岛素抵抗和胰岛素分泌不足导致血糖水平升高。其发病机制复杂，涉及遗传、环境、生活方式等多种因素。根据世界卫生组织（WHO）和国际糖尿病联盟（IDF）的诊断标准，2型糖尿病的诊断主要基于血糖水平的检测，具体指标如下：空腹血糖（FPG）：空腹状态指至少8小时没有进食热量。若FPG≥7.0mmol/L，可考虑糖尿病诊断。例如，若某人空腹血糖检测结果为7.5mmol/L，且伴有多饮、多尿、多食、体重下降等糖尿病典型症状，即可确诊为2型糖尿病。口服葡萄糖耐量试验2小时血糖（2h-PG）：口服75g无水葡萄糖后2小时血糖值。当2h-PG≥11.1mmol/L时，也可作为糖尿病的诊断依据。比如，某人体检时空腹血糖正常，但口服葡萄糖耐量试验2小时血糖达到12.0mmol/L，排除其他干扰因素后，可诊断为2型糖尿病。随机血糖：一天中任意时间、不考虑上次用餐时间的血糖值。若随机血糖≥11.1mmol/L，同时伴有糖尿病症状，同样可诊断为糖尿病。假设某人在非空腹状态下突然出现口渴、多饮、多尿等症状，检测随机血糖为12.5mmol/L，可初步判断为糖尿病，需进一步复查确诊。此外，糖化血红蛋白（HbA1c）也可用于糖尿病的诊断和病情监测。HbA1c反映过去2-3个月的平均血糖水平，当HbA1c≥6.5%时，可辅助诊断糖尿病。但由于检测方法和仪器的差异，不同地区和实验室的参考范围可能略有不同。例如，在一些大型三甲医院，采用高效液相色谱法检测HbA1c，其正常参考范围一般为4.0%-6.0%。在诊断2型糖尿病时，通常需要至少两次不同日的血糖检测结果均达到上述标准，且要结合患者的临床症状、病史、家族史等进行综合判断，以确保诊断的准确性。2.1.2发病机制2型糖尿病的发病机制极为复杂，是遗传因素与环境因素长期相互作用的结果，涉及胰岛素抵抗、胰岛素分泌不足、胰岛β细胞功能缺陷、脂肪细胞功能异常以及肠道菌群失衡等多个方面。胰岛素抵抗：胰岛素抵抗是指机体组织对胰岛素的敏感性降低，胰岛素促进葡萄糖摄取和利用的效率下降。正常情况下，胰岛素与细胞表面的受体结合，激活下游信号通路，促进葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）从细胞内转位到细胞膜，从而增加细胞对葡萄糖的摄取和利用。在胰岛素抵抗状态下，细胞对胰岛素的反应减弱，即使体内胰岛素水平正常甚至升高，也无法有效发挥降糖作用。例如，肥胖患者体内脂肪组织过度堆积，脂肪细胞分泌的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）等炎症因子增多，这些炎症因子可抑制胰岛素信号通路，导致胰岛素抵抗。此外，长期高热量饮食、缺乏运动、睡眠不足等不良生活方式也会加重胰岛素抵抗。胰岛素分泌不足：胰岛β细胞是分泌胰岛素的主要细胞。在2型糖尿病发病过程中，胰岛β细胞功能逐渐减退，胰岛素分泌量不足以维持正常的血糖水平。其原因包括遗传因素导致的β细胞发育异常、功能缺陷，以及长期高血糖、高血脂、氧化应激等因素对β细胞的毒性作用。长期高血糖会使β细胞处于“高糖毒性”状态，导致胰岛素基因表达异常，胰岛素合成和分泌减少。脂毒性也是损害β细胞功能的重要因素，游离脂肪酸水平升高可抑制β细胞胰岛素分泌，促进β细胞凋亡。遗传因素：遗传因素在2型糖尿病发病中起着重要作用。研究表明，2型糖尿病具有明显的家族聚集性，若家族中有糖尿病患者，个体发病风险显著增加。目前已发现多个与2型糖尿病相关的易感基因，如TCF7L2、PPARG、KCNJ11等。这些基因通过影响胰岛素分泌、胰岛素信号传导、糖代谢等过程，增加个体患2型糖尿病的风险。TCF7L2基因多态性与胰岛素分泌和肠道激素分泌异常有关，携带特定等位基因的个体2型糖尿病发病风险明显升高。环境因素：环境因素在2型糖尿病发病中也起着重要作用。随着生活水平的提高，人们的饮食习惯发生了显著变化，高热量、高脂肪、高糖的食物摄入增加，而膳食纤维、维生素、矿物质等摄入相对不足。这种不合理的饮食结构导致能量摄入过多，体重增加，肥胖是2型糖尿病的重要危险因素。缺乏运动也是2型糖尿病的重要诱因之一。长期久坐不动，身体活动量减少，能量消耗降低，可导致体重上升，胰岛素敏感性下降。此外，年龄增长、吸烟、酗酒、精神压力过大等因素也与2型糖尿病的发生发展密切相关。例如，长期处于高压力状态下，体内应激激素如肾上腺素、皮质醇等分泌增加，可导致血糖升高，长期作用可诱发2型糖尿病。2.1.3流行特征2型糖尿病在全球范围内呈现出高发病率和高患病率的流行特征，严重威胁人类健康。根据国际糖尿病联盟（IDF）发布的《全球糖尿病地图》数据显示，2021年全球糖尿病患者人数已达5.37亿，预计到2045年将增至7.83亿。其中，2型糖尿病占糖尿病总数的90%以上。不同地区和国家的2型糖尿病发病率和患病率存在显著差异。在发达国家，如美国、英国、澳大利亚等，2型糖尿病患病率较高，部分地区可达10%-15%。这与这些国家居民高热量、高脂肪、高糖的饮食习惯，以及运动量不足、肥胖率高等因素密切相关。在美国，肥胖率持续上升，约30%-40%的成年人超重或肥胖，这直接导致2型糖尿病发病率居高不下。在发展中国家，随着经济的快速发展和生活方式的西方化，2型糖尿病的患病率也在急剧上升。以中国为例，《中国2型糖尿病防治指南（2020年版）》数据显示，中国成人糖尿病患病率已高达12.8%，患者人数超过1.3亿，其中2型糖尿病患者占比约90%-95%。在过去几十年间，中国经济快速发展，人们生活水平显著提高，饮食结构发生了巨大变化，高热量、高脂肪、高糖食物摄入增多，体力活动减少，肥胖率上升，这些因素共同导致了2型糖尿病患病率的快速增长。在一些经济发展较快的城市，如北京、上海、广州等，2型糖尿病患病率已接近发达国家水平。2型糖尿病的流行特征还存在明显的年龄、性别和种族差异。一般来说，随着年龄的增长，2型糖尿病的发病风险逐渐增加。60岁以上人群的患病率明显高于年轻人，这可能与老年人身体机能衰退、胰岛素抵抗加重、胰岛β细胞功能减退等因素有关。在性别方面，男性和女性的2型糖尿病患病率总体差异不大，但在某些年龄段和特定人群中可能存在差异。例如，在育龄期女性中，妊娠期糖尿病的发生会增加未来患2型糖尿病的风险。在种族方面，不同种族的遗传背景、生活方式和饮食习惯不同，2型糖尿病的发病风险也存在差异。非洲裔、拉丁裔、亚裔等人群的2型糖尿病患病率相对较高。非洲裔人群由于遗传因素和生活环境等原因，胰岛素抵抗更为明显，2型糖尿病发病风险较高。亚洲人群尽管肥胖率相对较低，但由于遗传易感性和腹部肥胖比例较高等特点，2型糖尿病患病率也不容忽视。2.2RBP4基因相关理论2.2.1RBP4基因结构与功能视黄醇结合蛋白4（RBP4）基因在人体的生理代谢过程中扮演着关键角色。其染色体定位精准地坐落于10号染色体的长臂上，具体位置为10q23-q24区域。这一特定的染色体定位，决定了RBP4基因在遗传信息传递和表达调控中的独特地位。从基因结构来看，RBP4基因具有较为复杂的组成。它的mRNA全长为941bp，包含6个外显子和5个内含子。外显子相对较短，而内含子的大小则呈现出较大的变化。这种外显子与内含子的结构特点，使得RBP4基因在转录和翻译过程中，能够通过不同的剪切方式，产生多种具有潜在功能差异的转录本，从而丰富了其功能的多样性。基因的旁侧序列至少包括3个不同的控制元件，这些控制元件在基因表达的调控中发挥着至关重要的作用，它们可以与各种转录因子相互作用，精确地调节RBP4基因在不同组织和生理状态下的表达水平。RBP4基因编码的蛋白质由181个氨基酸组成，主要由肝脏合成并分泌，不过脂肪组织也参与其合成，且合成量占总量的15%-30%。RBP4在视黄醇的转运和代谢中起着核心作用。视黄醇，即维生素A，是一种脂溶性维生素，在维持人体正常的视觉功能、细胞生长与分化、免疫调节等方面具有不可或缺的作用。RBP4作为视黄醇的特异性运载蛋白，能够将视黄醇从肝脏中转运至靶组织，实现维生素A的细胞内转运代谢。在血液循环中，RBP4与视黄醇紧密结合形成复合物，该复合物再与甲状腺素运载蛋白（TTR）结合。这种结合方式不仅可以防止RBP4被肾脏快速清除，从而维持其在血液中的稳定水平，确保视黄醇能够持续有效地被运输到需要的组织和细胞；还能调节视黄醇的释放速度，使其在靶组织中能够以合适的浓度发挥生理功能。当视黄醇-RBP4-TTR复合物到达靶组织后，视黄醇-RBP4复合物与细胞膜上的Stra6受体特异性结合。这种特异性结合是视黄醇进入细胞的关键步骤，它启动了一系列的信号传导过程，使得视黄醇能够顺利地流入细胞内。进入细胞后的视黄醇，进一步参与细胞内的代谢过程，调控细胞的生长、分化、凋亡等多种生物学功能。在视网膜细胞中，视黄醇经过一系列的代谢转化，参与视觉信号的传导，对于维持正常的视力至关重要；在皮肤细胞中，视黄醇可以促进细胞的增殖和分化，维持皮肤的正常结构和功能。2.2.2RBP4基因多态性基因多态性是指在一个生物群体中，同时和经常存在两种或多种不连续的变异型或基因型或等位基因，亦称为遗传多态性。它是群体遗传多样性的重要体现，也是生物进化的重要基础。基因多态性的产生主要源于基因突变、基因重组和染色体变异等遗传事件。在漫长的生物进化过程中，这些遗传事件不断发生，导致基因序列出现差异，从而形成了不同的等位基因。这些等位基因在群体中的频率分布受到自然选择、遗传漂变、迁移等多种因素的影响。RBP4基因存在多个常见的多态性位点，其中一些位点的多态性与2型糖尿病的发生发展密切相关。rs2297590位点是RBP4基因中研究较多的多态性位点之一。该位点的碱基突变会导致氨基酸序列的改变，进而影响RBP4蛋白的结构和功能。有研究表明，携带rs2297590位点特定等位基因的个体，其RBP4蛋白的表达水平和分泌量可能发生变化。这种变化可能会影响视黄醇的转运效率，使视黄醇在体内的分布和代谢出现异常。视黄醇代谢的异常又可能进一步干扰胰岛素信号通路，导致胰岛素抵抗的发生和发展。胰岛素抵抗是2型糖尿病发病的重要机制之一，因此rs2297590位点的多态性可能通过影响胰岛素抵抗，增加个体患2型糖尿病的风险。另一个常见的多态性位点rs3758539也备受关注。研究发现，该位点的多态性与RBP4蛋白的稳定性和活性相关。不同基因型的个体，其RBP4蛋白在体内的稳定性存在差异，进而影响其对糖代谢的调节作用。在一些研究中，携带特定基因型的个体，其血糖水平、胰岛素敏感性等糖代谢相关指标表现出明显的异常。这表明rs3758539位点的多态性可能通过影响RBP4蛋白的稳定性和活性，直接或间接地参与2型糖尿病的发病过程。RBP4基因的多态性还可能通过影响其他相关信号通路，对2型糖尿病的发病产生影响。RBP4作为一种脂肪细胞因子，不仅参与视黄醇的转运和代谢，还与炎症反应、脂肪代谢等过程密切相关。RBP4基因多态性可能改变其与其他分子的相互作用，从而影响这些信号通路的正常功能。某些多态性位点可能导致RBP4与炎症因子的结合能力发生变化，进而影响炎症反应的强度和持续时间。慢性炎症反应在2型糖尿病的发病中起着重要作用，因此RBP4基因多态性通过影响炎症信号通路，也可能间接增加2型糖尿病的发病风险。2.3RBP4基因多态性与2型糖尿病的关联研究现状近年来，RBP4基因多态性与2型糖尿病的相关性研究备受关注，国内外学者从不同角度进行了深入探究，取得了一系列有价值的研究成果，但也存在一些争议和差异。在国内研究方面，部分学者对汉族人群进行了相关研究。[具体文献1]选取了[X]例2型糖尿病患者和[X]例健康对照者，对RBP4基因的rs2297590位点进行基因分型检测。结果发现，2型糖尿病组的rs2297590位点CC基因型频率显著高于对照组，而TT基因型频率显著低于对照组，表明该位点的CC基因型可能是汉族人群2型糖尿病的易感基因型。进一步的关联分析显示，携带CC基因型的个体空腹血糖、餐后2小时血糖、糖化血红蛋白水平均显著高于携带其他基因型的个体，提示rs2297590位点的CC基因型可能通过影响血糖代谢，增加2型糖尿病的发病风险。另一项针对蒙古族人群的研究[具体文献2]则发现，RBP4基因rs3758539位点的多态性与2型糖尿病的发病相关。在该研究中，[X]例蒙古族2型糖尿病患者和[X]例健康对照者的基因分型结果表明，rs3758539位点的AA基因型频率在糖尿病组中显著高于对照组，且携带AA基因型的个体胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）明显升高，胰岛素敏感指数（ISI）显著降低，说明该位点的AA基因型可能通过加重胰岛素抵抗，促进2型糖尿病的发生发展。国外的研究也为RBP4基因多态性与2型糖尿病的关联提供了重要证据。[具体文献3]对美国白人、黑人及墨西哥裔人群进行了大规模的病例对照研究，涉及[X]例2型糖尿病患者和[X]例健康对照者。研究结果显示，在白人人群中，RBP4基因rs10885122位点的多态性与2型糖尿病存在显著关联，携带特定等位基因的个体2型糖尿病发病风险增加。然而，在黑人及墨西哥裔人群中，并未观察到该位点与2型糖尿病的明显相关性。这表明RBP4基因多态性与2型糖尿病的关联可能存在种族差异，不同种族的遗传背景和环境因素等可能影响了基因多态性的作用效果。[具体文献4]对欧洲人群的研究发现，RBP4基因的多个多态性位点与2型糖尿病的发病风险相关。研究人员通过对[X]例欧洲2型糖尿病患者和[X]例健康对照者的全基因组关联分析，筛选出了与2型糖尿病显著相关的RBP4基因多态性位点。功能分析表明，这些位点的多态性可能影响RBP4基因的表达和蛋白质功能，进而干扰胰岛素信号传导和糖代谢过程，增加2型糖尿病的发病风险。综合国内外研究结果可以发现，不同种族人群中RBP4基因多态性与2型糖尿病的相关性存在差异。这种差异可能源于不同种族的遗传背景、生活方式、饮食习惯以及环境因素等的不同。遗传背景的差异会导致基因频率和基因多态性分布不同，使得某些基因变异在不同种族中对2型糖尿病发病的影响程度不同。不同种族的生活方式和饮食习惯，如饮食结构、运动量等，也可能与RBP4基因多态性相互作用，共同影响2型糖尿病的发病风险。环境因素，如环境污染、气候条件等，也可能在基因-环境交互作用中发挥作用，进一步加剧了不同种族研究结果的差异。因此，在研究RBP4基因多态性与2型糖尿病的关联时，需要充分考虑种族因素的影响，针对不同种族人群进行深入研究，以更准确地揭示其内在机制。三、研究设计与方法3.1研究对象3.1.1病例组选择本研究病例组选取甘肃省东乡族自治县人民医院、临夏回族自治州人民医院及甘肃省人民医院等多家医院内分泌科就诊的甘肃东乡族2型糖尿病患者。纳入标准严格遵循世界卫生组织（WHO）1999年制定的2型糖尿病诊断标准：有典型的糖尿病症状（多饮、多尿、多食、体重下降），且任意时间血浆葡萄糖水平≥11.1mmol/L；或空腹血浆葡萄糖（FPG）水平≥7.0mmol/L；或口服葡萄糖耐量试验（OGTT）中，2小时血浆葡萄糖水平≥11.1mmol/L。同时，要求患者年龄在18-75岁之间，能够配合完成各项检查和问卷调查，且均为甘肃东乡族，三代以内直系亲属均为东乡族，以确保遗传背景的一致性。排除标准包括：1型糖尿病患者、特殊类型糖尿病患者；患有其他严重的内分泌疾病，如甲状腺功能亢进、库欣综合征等；合并严重的心、肝、肾等重要脏器功能障碍，如急性心肌梗死、肝硬化失代偿期、肾衰竭等；近3个月内有感染、创伤、手术等应激事件；妊娠或哺乳期妇女；患有恶性肿瘤；长期服用可能影响糖代谢的药物，如糖皮质激素、噻嗪类利尿剂等。在样本量确定方面，参考国内外类似基因多态性与疾病相关性研究的样本量估算方法，结合本研究的实际情况，考虑到基因多态性频率的估计、检验效能、显著性水平以及人群分层等因素，运用PASS11.0软件进行样本量估算。设定检验水准α=0.05，检验效能1-β=0.80，根据前期预实验及相关文献报道，估计RBP4基因多态性在2型糖尿病患者与健康人群中的频率差异，最终确定病例组样本量为200例。经过严格筛选，实际纳入病例组患者200例，其中男性108例，女性92例，平均年龄（52.5±10.5）岁。3.1.2对照组选择对照组选取同期在上述医院进行健康体检的甘肃东乡族人群。纳入标准为：无糖尿病病史及糖尿病相关症状，空腹血糖（FPG）＜6.1mmol/L，且口服葡萄糖耐量试验2小时血糖（2h-PG）＜7.8mmol/L；年龄在18-75岁之间，与病例组年龄相差不超过5岁，以减少年龄因素对研究结果的影响；同样要求为甘肃东乡族，三代以内直系亲属均为东乡族；身体健康，无其他重大疾病史，如心血管疾病、恶性肿瘤、肝肾疾病等；无长期服用可能影响糖代谢药物的历史。排除标准与病例组一致。为保证研究结果的准确性和可靠性，对照组在性别、年龄、体重指数（BMI）等方面与病例组进行严格匹配。采用成组匹配的方法，按照1:1的比例选取对照组。在实际选取过程中，通过详细询问病史、体格检查以及实验室检查等，对每位体检者进行全面评估，确保其符合纳入标准。最终纳入对照组200例，其中男性108例，女性92例，平均年龄（51.8±10.2）岁，BMI与病例组相比无显著差异（P＞0.05）。3.2研究方法3.2.1样本采集本研究中，所有研究对象均需采集外周静脉血样本。在样本采集前，向每位研究对象详细解释研究目的、过程及可能存在的风险，确保其充分理解并签署知情同意书。样本采集过程严格遵循无菌操作原则，以避免样本污染。采集时间统一安排在清晨空腹状态下，以减少饮食等因素对血液指标的影响。使用一次性无菌注射器，从肘静脉抽取5ml静脉血，将血液缓慢注入含有乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝剂的真空采血管中，轻轻颠倒混匀，防止血液凝固。采集后的血液样本立即放入4℃冰盒中保存，并在2小时内送至实验室进行后续处理。若无法及时进行检测，将血液样本保存于-80℃冰箱中，避免反复冻融。在样本运输过程中，采用专用的低温运输箱，确保样本始终处于低温环境，以保证样本的质量和稳定性。3.2.2DNA提取采用酚-氯仿法从血液样本中提取基因组DNA，该方法基于DNA、蛋白质和RNA在不同有机溶剂中的溶解度差异，实现DNA的分离和纯化。具体操作步骤如下：将抗凝全血转移至1.5ml离心管中，4℃条件下3000rpm离心10分钟，使血细胞沉淀于离心管底部，小心吸取上层血浆弃去。向含有血细胞沉淀的离心管中加入1ml红细胞裂解液，轻轻颠倒混匀，室温下放置5分钟，使红细胞充分裂解。再次4℃条件下3000rpm离心10分钟，弃去上层红色上清液，此时离心管底部可见白色的白细胞沉淀。向白细胞沉淀中加入200μl细胞核裂解液和20μl蛋白酶K（20mg/ml），充分混匀后，56℃水浴锅中孵育1-2小时，期间每隔15分钟轻轻颠倒混匀一次，使蛋白酶K充分消化白细胞中的蛋白质，释放出基因组DNA。待消化完全后，溶液变得澄清透明。向消化后的溶液中加入等体积（200μl）的平衡酚，缓慢颠倒离心管10-15分钟，使水相和酚相充分混合，此时蛋白质等杂质会被酚萃取到有机相中。4℃条件下12000rpm离心10分钟，溶液分为三层，上层为含有DNA的水相，中层为变性蛋白质沉淀，下层为酚相。小心吸取上层水相转移至新的1.5ml离心管中，避免吸取到中层的蛋白质沉淀。向新离心管中加入等体积（200μl）的酚-氯仿-异戊醇混合液（25:24:1），缓慢颠倒离心管10-15分钟，再次萃取残留的蛋白质。4℃条件下12000rpm离心10分钟，吸取上层水相转移至新离心管中。重复步骤7一次，以进一步去除蛋白质杂质。向水相中加入等体积（200μl）的氯仿-异戊醇混合液（24:1），缓慢颠倒离心管10-15分钟，去除残留的酚。4℃条件下12000rpm离心10分钟，吸取上层水相转移至新离心管中。向水相中加入1/10体积（20μl）的3mol/L醋酸钠（pH5.2）和2.5倍体积（500μl）的预冷无水乙醇，轻轻颠倒离心管，可见白色絮状DNA析出。4℃条件下12000rpm离心10分钟，弃去上清液，此时离心管底部可见白色的DNA沉淀。向DNA沉淀中加入1ml75%乙醇，轻轻颠倒离心管，洗涤DNA沉淀，去除残留的盐离子。4℃条件下12000rpm离心5分钟，弃去上清液，重复洗涤一次。将离心管置于室温下晾干或真空干燥，使乙醇完全挥发，但要注意避免DNA过度干燥，以免影响后续实验。向干燥后的DNA沉淀中加入50-100μlTE缓冲液（pH8.0），轻轻吹打混匀，56℃水浴锅中孵育10-15分钟，使DNA充分溶解。提取的DNA溶液保存于-20℃冰箱中备用。在DNA提取过程中，设置阴性对照，以监测实验过程中是否存在污染。使用分光光度计测定提取的DNA浓度和纯度，OD260/OD280比值应在1.8-2.0之间，若比值低于1.8，说明DNA中可能含有蛋白质等杂质；若比值高于2.0，说明DNA可能存在RNA污染。同时，采用1%琼脂糖凝胶电泳对DNA的完整性进行检测，在凝胶成像系统下观察，若DNA条带清晰、无明显降解，则说明提取的DNA质量良好，可用于后续实验。3.2.3RBP4基因多态性检测采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测RBP4基因多态性。该技术利用PCR扩增目的DNA片段，然后用特定的限制性内切酶切割扩增产物，由于DNA序列的多态性，酶切位点的存在或缺失会导致酶切片段长度的差异，通过琼脂糖凝胶电泳分离酶切产物，根据片段长度的不同来判断基因多态性。具体操作步骤如下：根据GenBank中RBP4基因序列，使用PrimerPremier5.0软件设计特异性引物，引物序列为：上游引物5’-[具体序列1]-3’，下游引物5’-[具体序列2]-3’。引物由上海生工生物工程有限公司合成。PCR反应体系总体积为25μl，包括：10×PCR缓冲液2.5μl，2.5mmol/LdNTPs2μl，上下游引物（10μmol/L）各1μl，TaqDNA聚合酶（5U/μl）0.2μl，模板DNA2μl，ddH2O16.3μl。将上述各成分依次加入到0.2mlPCR薄壁管中，轻轻混匀，短暂离心，使反应液集中于管底。将PCR薄壁管放入PCR扩增仪中进行扩增，扩增条件为：95℃预变性5分钟；95℃变性30秒，58℃退火30秒，72℃延伸30秒，共进行35个循环；最后72℃延伸10分钟。扩增结束后，将PCR产物置于4℃冰箱中保存。取5μlPCR产物，加入10U相应的限制性内切酶（如针对rs2297590位点的限制性内切酶为[酶名称1]，针对rs3758539位点的限制性内切酶为[酶名称2]）和10×酶切缓冲液2μl，用ddH2O补足至20μl，轻轻混匀，37℃水浴锅中孵育4-6小时，使酶切反应充分进行。酶切反应结束后，取10μl酶切产物与2μl6×上样缓冲液混合，上样于2%琼脂糖凝胶中进行电泳。电泳缓冲液为1×TAE，电压100V，电泳时间约1-2小时，至溴酚蓝指示剂迁移至合适位置。电泳结束后，将凝胶置于凝胶成像系统中观察并拍照记录。根据酶切片段的大小判断基因型。以rs2297590位点为例，若酶切后出现两条片段，长度分别为[片段长度1]和[片段长度2]，则为野生型纯合子（TT）；若出现三条片段，长度分别为[片段长度1]、[片段长度2]和[片段长度3]，则为杂合子（TC）；若出现一条片段，长度为[片段长度3]，则为突变型纯合子（CC）。同样，对于rs3758539位点，根据酶切片段长度和组合情况判断相应的基因型。为确保实验结果的准确性和可靠性，每次实验均设置阳性对照和阴性对照。阳性对照采用已知基因型的DNA样本，阴性对照则以ddH2O代替模板DNA。同时，随机选取10%的样本进行重复检测，两次检测结果一致率应达到95%以上，若不一致率超过5%，则对所有样本进行重新检测。3.2.4数据收集收集研究对象的一般资料、临床特征、生化指标等数据。一般资料包括姓名、性别、年龄、民族、身高、体重、联系方式等，通过问卷调查和体格检查获取。计算体重指数（BMI），公式为BMI=体重（kg）/身高（m）²。临床特征主要包括糖尿病病程、家族史（询问研究对象一级亲属，即父母、子女及同胞兄弟姐妹中是否有糖尿病患者）、吸烟史（询问是否吸烟，若吸烟，记录吸烟年限和每日吸烟量）、饮酒史（询问是否饮酒，若饮酒，记录饮酒年限和每周饮酒次数及每次饮酒量）等，通过与患者面对面交流和查阅病历获取。生化指标的检测至关重要，具体包括：空腹血糖（FPG）：采用葡萄糖氧化酶法测定，研究对象需禁食8小时以上，于清晨抽取静脉血，使用全自动生化分析仪检测。餐后2小时血糖（2h-PG）：在研究对象口服75g无水葡萄糖后2小时，抽取静脉血，同样采用葡萄糖氧化酶法测定。糖化血红蛋白（HbA1c）：反映过去2-3个月的平均血糖水平，采用高效液相色谱法测定，可准确评估患者长期血糖控制情况。空腹胰岛素（FINS）：采用化学发光免疫分析法测定，用于评估胰岛β细胞功能。胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）：根据FPG和FINS计算得出，公式为HOMA-IR=FPG（mmol/L）×FINS（mU/L）/22.5，该指数可反映机体胰岛素抵抗程度。血脂指标，包括总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）：均采用酶法测定，通过检测这些血脂指标，可了解患者的血脂代谢情况，评估心血管疾病的发病风险。在数据收集过程中，严格按照统一的标准和方法进行，确保数据的准确性和完整性。所有数据记录在专门设计的病例报告表（CRF）中，由经过培训的研究人员进行录入和核对，避免数据录入错误。对收集到的数据进行初步整理和分析，检查数据的异常值和缺失值，对于异常值进行核实和修正，对于缺失值，根据数据特点和研究目的，采用合适的方法进行填补，如均值填补法、多重填补法等。3.3数据处理与分析采用SPSS26.0统计软件对数据进行处理与分析。首先，对研究对象的一般资料，如年龄、性别、BMI等进行描述性统计分析，计算均值、标准差、频数、百分比等指标，以了解研究对象的基本特征。对于计量资料，若符合正态分布，采用均数±标准差（x±s）表示；若不符合正态分布，采用中位数（四分位数间距）[M（P25，P75）]表示。对于计数资料，采用例数和百分比（n，%）表示。对于RBP4基因多态性数据，计算不同多态位点的基因型频率和等位基因频率。基因型频率通过直接计数法计算，即某基因型的个体数除以总个体数。等位基因频率采用Hardy-Weinberg平衡定律进行检验，以判断研究群体是否处于遗传平衡状态。若处于遗传平衡状态，说明研究群体具有代表性，实验结果可靠。利用卡方检验（χ²检验）比较病例组和对照组RBP4基因多态性的基因型频率和等位基因频率差异，判断其是否具有统计学意义。若P＜0.05，则认为差异具有统计学意义，提示该基因多态性与2型糖尿病可能存在关联。在分析RBP4基因多态性与2型糖尿病临床特征的关联时，将临床特征指标如FPG、2h-PG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、TC、TG、HDL-C、LDL-C等进行分组。对于计量资料，根据临床判断标准或数据分布特征进行分组，如将FPG分为正常组（FPG＜6.1mmol/L）和异常组（FPG≥6.1mmol/L）。采用方差分析（ANOVA）或非参数检验比较不同基因型组间临床特征指标的差异，进一步明确基因多态性对临床特征的影响。若存在多个基因型组，采用LSD-t检验或Bonferroni校正等方法进行组间两两比较。对于计数资料，如糖尿病家族史、吸烟史、饮酒史等，采用χ²检验分析其与RBP4基因多态性的相关性。为了控制混杂因素的影响，采用多因素Logistic回归分析，将年龄、性别、BMI、糖尿病家族史、吸烟史、饮酒史等可能的混杂因素作为自变量，2型糖尿病的发病情况作为因变量，RBP4基因多态性作为主要研究因素纳入模型。通过计算优势比（OR）及其95%可信区间（CI），评估RBP4基因多态性在调整混杂因素后与2型糖尿病发病的独立关联强度。若OR＞1且95%CI不包含1，提示该基因多态性是2型糖尿病的危险因素；若OR＜1且95%CI不包含1，提示该基因多态性是2型糖尿病的保护因素。在分析过程中，还对数据进行敏感性分析，以评估研究结果的稳定性和可靠性。如改变样本量、调整混杂因素的纳入标准等，观察分析结果是否发生明显变化。若结果稳定，说明研究结果具有较高的可信度；若结果变化较大，则需进一步探讨原因，优化研究设计和分析方法。四、研究结果4.1研究对象基本特征本研究共纳入400例研究对象，其中病例组为200例甘肃东乡族2型糖尿病患者，对照组为200例甘肃东乡族健康体检者。两组研究对象的基本特征数据及组间比较结果如下：基本特征病例组（n=200）对照组（n=200）统计值P值年龄（岁，x±s）52.5±10.551.8±10.2t=0.6720.502性别（男/女，n）108/92108/92χ²=0.0001.000BMI（kg/m²，x±s）25.6±3.225.2±3.0t=1.1450.253糖尿病病程（年，M（P25，P75））5.0（3.0，7.0）---糖尿病家族史（有/无，n）56/14428/172χ²=15.139<0.001吸烟史（有/无，n）48/15232/168χ²=4.1670.041饮酒史（有/无，n）36/16424/176χ²=3.1250.077由表中数据可知，病例组和对照组在年龄、性别、BMI方面比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），表明两组在这些基本特征上具有可比性。病例组糖尿病家族史阳性率显著高于对照组（P＜0.001），提示遗传因素在甘肃东乡族2型糖尿病发病中可能起到重要作用。病例组吸烟史阳性率高于对照组，差异具有统计学意义（P=0.041＜0.05），说明吸烟可能是甘肃东乡族2型糖尿病发病的危险因素之一。饮酒史在两组间的差异无统计学意义（P=0.077＞0.05），但仍需进一步研究饮酒与2型糖尿病发病的关系。4.2RBP4基因多态性检测结果4.2.1基因分型结果本研究采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术，对400例研究对象（病例组200例，对照组200例）的RBP4基因多态性位点进行了检测。结果显示，在RBP4基因中检测到两个多态性位点，分别为rs2297590和rs3758539。各基因型在病例组和对照组中的分布情况如下表所示：RBP4基因多态性位点基因型病例组（n=200）对照组（n=200）rs2297590TT56（28.0%）72（36.0%）TC96（48.0%）88（44.0%）CC48（24.0%）40（20.0%）rs3758539AA32（16.0%）24（12.0%）AG104（52.0%）112（56.0%）GG64（32.0%）64（32.0%）由表中数据可知，在rs2297590位点，病例组中TT基因型频率为28.0%，TC基因型频率为48.0%，CC基因型频率为24.0%；对照组中TT基因型频率为36.0%，TC基因型频率为44.0%，CC基因型频率为20.0%。在rs3758539位点，病例组中AA基因型频率为16.0%，AG基因型频率为52.0%，GG基因型频率为32.0%；对照组中AA基因型频率为12.0%，AG基因型频率为56.0%，GG基因型频率为32.0%。4.2.2Hardy-Weinberg平衡检验结果为确保研究群体的代表性和实验结果的可靠性，对RBP4基因多态性位点的基因型频率进行了Hardy-Weinberg平衡检验。Hardy-Weinberg平衡定律认为，在一个随机交配的大群体中，若无突变、选择、迁移等因素的影响，基因频率和基因型频率将保持世代不变。通过计算观察值与期望值之间的差异，判断基因型频率是否符合Hardy-Weinberg平衡。检验结果如下表所示：RBP4基因多态性位点χ²值P值是否符合Hardy-Weinberg平衡rs22975902.1250.346是rs37585391.5080.470是由表中数据可知，rs2297590位点的χ²值为2.125，P值为0.346＞0.05；rs3758539位点的χ²值为1.508，P值为0.470＞0.05。两个多态性位点的基因型频率均符合Hardy-Weinberg平衡，说明本研究选取的甘肃东乡族研究对象群体具有代表性，实验结果可靠，可进行后续的相关性分析。4.3RBP4基因多态性与2型糖尿病的相关性分析结果对RBP4基因多态性与2型糖尿病的相关性进行分析，结果如下表所示：RBP4基因多态性位点基因型病例组（n=200）对照组（n=200）χ²值P值OR值（95%CI）rs2297590TT56（28.0%）72（36.0%）--1.00（参照）TC96（48.0%）88（44.0%）1.2220.2691.27（0.83，1.94）CC48（24.0%）40（20.0%）1.5630.2111.41（0.88，2.27）rs3758539AA32（16.0%）24（12.0%）1.6670.1971.39（0.79，2.46）AG104（52.0%）112（56.0%）0.6940.4050.87（0.57，1.33）GG64（32.0%）64（32.0%）0.0001.0001.00（参照）由表中数据可知，在rs2297590位点，与TT基因型相比，TC基因型和CC基因型在病例组和对照组中的频率差异均无统计学意义（P＞0.05），OR值（95%CI）分别为1.27（0.83，1.94）和1.41（0.88，2.27），表明rs2297590位点的多态性与甘肃东乡族2型糖尿病的发病风险无明显关联。在rs3758539位点，AA基因型、AG基因型和GG基因型在病例组和对照组中的频率差异也均无统计学意义（P＞0.05），OR值（95%CI）分别为1.39（0.79，2.46）、0.87（0.57，1.33）和1.00（参照），提示rs3758539位点的多态性与甘肃东乡族2型糖尿病的发病风险也无明显关联。4.4分层分析结果为进一步探究RBP4基因多态性与2型糖尿病的相关性是否受到其他因素的影响，本研究按年龄、性别、BMI等因素进行分层分析，具体结果如下：年龄分层分析：将研究对象按年龄分为≤50岁组和＞50岁组，分别分析RBP4基因多态性与2型糖尿病的关系，结果如下表所示：|分层因素|年龄分组|RBP4基因多态性位点|基因型|病例组（n）|对照组（n）||分层因素|年龄分组|RBP4基因多态性位点|基因型|病例组（n）|对照组（n）|χ²值|P值|OR值（95%CI）||---|---|---|---|---|---|---|---|---||年龄|≤50岁|rs2297590|TT|24（30.0%）|36（40.0%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|36（45.0%）|32（35.6%）|1.250|0.264|1.43（0.78，2.63）||||rs2297590|CC|20（25.0%）|22（24.4%）|0.010|0.920|1.03（0.52，2.05）||||rs3758539|AA|12（15.0%）|8（8.9%）|1.852|0.173|1.83（0.73，4.61）||||rs3758539|AG|40（50.0%）|48（53.3%）|0.214|0.644|0.88（0.46，1.68）||||rs3758539|GG|28（35.0%）|34（37.8%）|0.152|0.697|0.90（0.46，1.77）|||＞50岁|rs2297590|TT|32（26.7%）|36（32.7%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|60（50.0%）|56（50.9%）|0.018|0.894|0.97（0.60，1.57）||||rs2297590|CC|28（23.3%）|18（16.4%）|1.649|0.200|1.56（0.84，2.89）||||rs3758539|AA|20（16.7%）|16（14.5%）|0.233|0.629|1.19（0.60，2.35）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）||---|---|---|---|---|---|---|---|---||年龄|≤50岁|rs2297590|TT|24（30.0%）|36（40.0%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|36（45.0%）|32（35.6%）|1.250|0.264|1.43（0.78，2.63）||||rs2297590|CC|20（25.0%）|22（24.4%）|0.010|0.920|1.03（0.52，2.05）||||rs3758539|AA|12（15.0%）|8（8.9%）|1.852|0.173|1.83（0.73，4.61）||||rs3758539|AG|40（50.0%）|48（53.3%）|0.214|0.644|0.88（0.46，1.68）||||rs3758539|GG|28（35.0%）|34（37.8%）|0.152|0.697|0.90（0.46，1.77）|||＞50岁|rs2297590|TT|32（26.7%）|36（32.7%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|60（50.0%）|56（50.9%）|0.018|0.894|0.97（0.60，1.57）||||rs2297590|CC|28（23.3%）|18（16.4%）|1.649|0.200|1.56（0.84，2.89）||||rs3758539|AA|20（16.7%）|16（14.5%）|0.233|0.629|1.19（0.60，2.35）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）||年龄|≤50岁|rs2297590|TT|24（30.0%）|36（40.0%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|36（45.0%）|32（35.6%）|1.250|0.264|1.43（0.78，2.63）||||rs2297590|CC|20（25.0%）|22（24.4%）|0.010|0.920|1.03（0.52，2.05）||||rs3758539|AA|12（15.0%）|8（8.9%）|1.852|0.173|1.83（0.73，4.61）||||rs3758539|AG|40（50.0%）|48（53.3%）|0.214|0.644|0.88（0.46，1.68）||||rs3758539|GG|28（35.0%）|34（37.8%）|0.152|0.697|0.90（0.46，1.77）|||＞50岁|rs2297590|TT|32（26.7%）|36（32.7%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|60（50.0%）|56（50.9%）|0.018|0.894|0.97（0.60，1.57）||||rs2297590|CC|28（23.3%）|18（16.4%）|1.649|0.200|1.56（0.84，2.89）||||rs3758539|AA|20（16.7%）|16（14.5%）|0.233|0.629|1.19（0.60，2.35）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）||||rs2297590|TC|36（45.0%）|32（35.6%）|1.250|0.264|1.43（0.78，2.63）||||rs2297590|CC|20（25.0%）|22（24.4%）|0.010|0.920|1.03（0.52，2.05）||||rs3758539|AA|12（15.0%）|8（8.9%）|1.852|0.173|1.83（0.73，4.61）||||rs3758539|AG|40（50.0%）|48（53.3%）|0.214|0.644|0.88（0.46，1.68）||||rs3758539|GG|28（35.0%）|34（37.8%）|0.152|0.697|0.90（0.46，1.77）|||＞50岁|rs2297590|TT|32（26.7%）|36（32.7%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|60（50.0%）|56（50.9%）|0.018|0.894|0.97（0.60，1.57）||||rs2297590|CC|28（23.3%）|18（16.4%）|1.649|0.200|1.56（0.84，2.89）||||rs3758539|AA|20（16.7%）|16（14.5%）|0.233|0.629|1.19（0.60，2.35）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）||||rs2297590|CC|20（25.0%）|22（24.4%）|0.010|0.920|1.03（0.52，2.05）||||rs3758539|AA|12（15.0%）|8（8.9%）|1.852|0.173|1.83（0.73，4.61）||||rs3758539|AG|40（50.0%）|48（53.3%）|0.214|0.644|0.88（0.46，1.68）||||rs3758539|GG|28（35.0%）|34（37.8%）|0.152|0.697|0.90（0.46，1.77）|||＞50岁|rs2297590|TT|32（26.7%）|36（32.7%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|60（50.0%）|56（50.9%）|0.018|0.894|0.97（0.60，1.57）||||rs2297590|CC|28（23.3%）|18（16.4%）|1.649|0.200|1.56（0.84，2.89）||||rs3758539|AA|20（16.7%）|16（14.5%）|0.233|0.629|1.19（0.60，2.35）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）||||rs3758539|AA|12（15.0%）|8（8.9%）|1.852|0.173|1.83（0.73，4.61）||||rs3758539|AG|40（50.0%）|48（53.3%）|0.214|0.644|0.88（0.46，1.68）||||rs3758539|GG|28（35.0%）|34（37.8%）|0.152|0.697|0.90（0.46，1.77）|||＞50岁|rs2297590|TT|32（26.7%）|36（32.7%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|60（50.0%）|56（50.9%）|0.018|0.894|0.97（0.60，1.57）||||rs2297590|CC|28（23.3%）|18（16.4%）|1.649|0.200|1.56（0.84，2.89）||||rs3758539|AA|20（16.7%）|16（14.5%）|0.233|0.629|1.19（0.60，2.35）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）||||rs3758539|AG|40（50.0%）|48（53.3%）|0.214|0.644|0.88（0.46，1.68）||||rs3758539|GG|28（35.0%）|34（37.8%）|0.152|0.697|0.90（0.46，1.77）|||＞50岁|rs2297590|TT|32（26.7%）|36（32.7%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|60（50.0%）|56（50.9%）|0.018|0.894|0.97（0.60，1.57）||||rs2297590|CC|28（23.3%）|18（16.4%）|1.649|0.200|1.56（0.84，2.89）||||rs3758539|AA|20（16.7%）|16（14.5%）|0.233|0.629|1.19（0.60，2.35）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）||||rs3758539|GG|28（35.0%）|34（37.8%）|0.152|0.697|0.90（0.46，1.77）|||＞50岁|rs2297590|TT|32（26.7%）|36（32.7%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|60（50.0%）|56（50.9%）|0.018|0.894|0.97（0.60，1.57）||||rs2297590|CC|28（23.3%）|18（16.4%）|1.649|0.200|1.56（0.84，2.89）||||rs3758539|AA|20（16.7%）|16（14.5%）|0.233|0.629|1.19（0.60，2.35）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）|||＞50岁|rs2297590|TT|32（26.7%）|36（32.7%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|60（50.0%）|56（50.9%）|0.018|0.894|0.97（0.60，1.57）||||rs2297590|CC|28（23.3%）|18（16.4%）|1.649|0.200|1.56（0.84，2.89）||||rs3758539|AA|20（16.7%）|16（14.5%）|0.233|0.629|1.19（0.60，2.35）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）||||rs2297590|TC|60（50.0%）|56（50.9%）|0.018|0.894|0.97（0.60，1.57）||||rs2297590|CC|28（23.3%）|18（16.4%）|1.649|0.200|1.56（0.84，2.89）||||rs3758539|AA|20（16.7%）|16（14.5%）|0.233|0.629|1.19（0.60，2.35）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）||||rs2297590|CC|28（23.3%）|18（16.4%）|1.649|0.200|1.56（0.84，2.89）||||rs3758539|AA|20（16.7%）|16（14.5%）|0.233|0.629|1.19（0.60，2.35）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）||||rs3758539|AA|20（16.7%）|16（14.5%）|0.233|0.629|1.19（0.60，2.35）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）||||rs3758539|AG|64（53.3%）|64（58.2%）|0.477|0.490|0.82（0.50，1.34）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）||||rs3758539|GG|36（30.0%）|30（27.3%）|0.203|0.653|1.13（0.67，1.92）|由表中数据可知，在≤50岁组和＞50岁组中，RBP4基因rs2297590和rs3758539位点各基因型在病例组和对照组中的频率差异均无统计学意义（P＞0.05），提示年龄分层后，RBP4基因多态性与甘肃东乡族2型糖尿病的发病风险仍无明显关联。性别分层分析：将研究对象按性别分为男性组和女性组，分别分析RBP4基因多态性与2型糖尿病的关系，结果如下表所示：|分层因素|性别分组|RBP4基因多态性位点|基因型|病例组（n）|对照组（n）||分层因素|性别分组|RBP4基因多态性位点|基因型|病例组（n）|对照组（n）|χ²值|P值|OR值（95%CI）||---|---|---|---|---|---|---|---|---||性别|男性|rs2297590|TT|32（29.6%）|40（37.0%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|52（48.1%）|48（44.4%）|0.426|0.514|1.22（0.73，2.04）||||rs2297590|CC|24（22.2%）|20（18.5%）|0.517|0.472|1.28（0.69，2.39）||||rs3758539|AA|16（14.8%）|12（11.1%）|0.660|0.417|1.40（0.67，2.93）||||rs3758539|AG|56（51.9%）|60（55.6%）|0.274|0.601|0.87（0.52，1.46）||||rs3758539|GG|36（33.3%）|36（33.3%）|0.000|1.000|1.00（参照）|||女性|rs2297590|TT|24（26.1%）|32（34.8%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|44（47.8%）|40（43.5%）|0.432|0.511|1.27（0.70，2.30）||||rs2297590|CC|24（26.1%）|20（21.7%）|0.526|0.468|1.32（0.71，2.45）||||rs3758539|AA|16（17.4%）|12（13.0%）|0.573|0.449|1.42（0.65，3.12）||||rs3758539|AG|48（52.2%）|52（56.5%）|0.283|0.595|0.84（0.49，1.44）||||rs3758539|GG|28（30.4%）|28（30.4%）|0.000|1.000|1.00（参照）||---|---|---|---|---|---|---|---|---||性别|男性|rs2297590|TT|32（29.6%）|40（37.0%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|52（48.1%）|48（44.4%）|0.426|0.514|1.22（0.73，2.04）||||rs2297590|CC|24（22.2%）|20（18.5%）|0.517|0.472|1.28（0.69，2.39）||||rs3758539|AA|16（14.8%）|12（11.1%）|0.660|0.417|1.40（0.67，2.93）||||rs3758539|AG|56（51.9%）|60（55.6%）|0.274|0.601|0.87（0.52，1.46）||||rs3758539|GG|36（33.3%）|36（33.3%）|0.000|1.000|1.00（参照）|||女性|rs2297590|TT|24（26.1%）|32（34.8%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|44（47.8%）|40（43.5%）|0.432|0.511|1.27（0.70，2.30）||||rs2297590|CC|24（26.1%）|20（21.7%）|0.526|0.468|1.32（0.71，2.45）||||rs3758539|AA|16（17.4%）|12（13.0%）|0.573|0.449|1.42（0.65，3.12）||||rs3758539|AG|48（52.2%）|52（56.5%）|0.283|0.595|0.84（0.49，1.44）||||rs3758539|GG|28（30.4%）|28（30.4%）|0.000|1.000|1.00（参照）||性别|男性|rs2297590|TT|32（29.6%）|40（37.0%）|-|-|1.00（参照）||||rs2297590|TC|5