病理科病理检测技术应用考核模拟试题及答案解析

病理科病理检测技术应用考核模拟试题及答案解析一、单项选择题（每题2分，共30分）1.常规石蜡切片HE染色中，苏木精染色后分化步骤常用的试剂是（）A.75%乙醇B.1%盐酸乙醇C.蒸馏水D.伊红染液答案：B解析：苏木精染色后需用1%盐酸乙醇进行分化，通过酸的作用去除组织中多余的苏木精，使细胞核着色更清晰。75%乙醇主要用于脱水，蒸馏水用于水洗，伊红为胞质染色剂，均非分化步骤的正确试剂。2.免疫组化检测中，内源性生物素干扰最易出现在以下哪种组织中（）A.肝脏B.皮肤C.淋巴结D.骨组织答案：A解析：肝脏、肾脏、脾脏等富含内源性生物素的组织（如肝细胞、肾小管上皮细胞）在使用生物素-亲和素系统（如SP法）时，易因内源性生物素与检测系统结合导致假阳性。皮肤、淋巴结、骨组织内源性生物素含量较低，干扰风险较小。3.进行荧光原位杂交（FISH）检测时，标本预处理中“变性”步骤的主要目的是（）A.破坏细胞膜通透性B.使DNA双链解旋为单链C.去除蛋白质干扰D.增强探针结合特异性答案：B解析：FISH检测中，变性步骤通过高温（通常70-80℃）使组织或细胞中的DNA双链解旋为单链，同时探针DNA也需变性为单链，以便两者互补序列结合。破坏细胞膜通透性由消化步骤完成，去除蛋白质干扰需蛋白酶消化，增强特异性依赖探针设计和杂交条件。4.冰冻切片制作时，切片厚度过薄（＜2μm）最可能导致的问题是（）A.组织皱缩B.细胞结构模糊C.脱片D.染色过深答案：C解析：冰冻切片厚度过薄（＜2μm）时，组织与载玻片的黏附力下降，易在染色过程中脱落（脱片）。组织皱缩多因切片时温度过低或刀速不均；细胞结构模糊可能因切片过厚或冰晶形成；染色过深与染色时间或试剂浓度相关。5.特殊染色中，显示淀粉样物质常用的方法是（）A.刚果红染色B.PAS染色C.网状纤维染色D.甲苯胺蓝染色答案：A解析：刚果红染色可与淀粉样物质的β-折叠结构结合，在偏光显微镜下呈苹果绿色双折射，是淀粉样物质的经典检测方法。PAS染色显示多糖和糖蛋白，网状纤维染色（如Gomori银染）显示网状纤维，甲苯胺蓝用于肥大细胞或异染性物质（如黏液）。6.细胞病理学中，液基薄层制片（TCT）与传统涂片相比，主要优势是（）A.操作更简便B.细胞保存更完整C.成本更低D.无需固定答案：B解析：TCT通过液基处理去除血液、黏液等干扰成分，将细胞均匀分布在载玻片上，减少重叠，细胞保存更完整，提高诊断准确性。传统涂片操作更简便、成本更低，且两者均需固定（如95%乙醇）。7.分子病理检测中，提取福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织DNA时，最关键的预处理步骤是（）A.脱蜡B.蛋白酶K消化C.高温裂解D.乙醇沉淀答案：A解析：FFPE组织DNA提取时，石蜡包埋会包裹组织，必须先用二甲苯或替代试剂完全脱蜡，否则后续消化和裂解步骤无法有效接触组织，导致DNA提取失败。蛋白酶K消化用于分解蛋白质，高温裂解促进DNA释放，乙醇沉淀用于纯化，均需在脱蜡后进行。8.免疫组化结果判读时，“背景着色过深”最常见的原因是（）A.一抗浓度过低B.封闭时间过长C.洗涤不充分D.显色时间过短答案：C解析：洗涤不充分会导致未结合的抗体或检测试剂残留，与组织非特异性结合，引起背景着色过深。一抗浓度过低会导致阳性信号弱，封闭时间过长可能减少非特异性结合（但过度封闭可能影响阳性信号），显色时间过短会导致阳性信号弱。9.常规石蜡切片制作中，脱水步骤使用的乙醇浓度梯度通常为（）A.50%→70%→80%→95%→无水乙醇（2次）B.70%→80%→95%→无水乙醇（2次）C.80%→90%→95%→无水乙醇（2次）D.50%→60%→70%→80%→95%→无水乙醇（2次）答案：B解析：常规脱水梯度为70%（过渡）→80%→95%（进一步脱水）→无水乙醇（2次，彻底脱水）。50%乙醇因浓度过低，易导致组织过度膨胀，一般不用于常规石蜡切片脱水；梯度中无需50%或60%步骤。10.进行HER2免疫组化检测时，阳性对照应选择（）A.已知HER2阴性的乳腺癌组织B.已知HER2阳性的乳腺癌组织C.正常乳腺组织D.胃癌组织（HER2阳性）答案：B解析：HER2检测的阳性对照需选择同类型、已知阳性的组织（如乳腺癌HER2阳性组织），以验证检测系统的有效性。阴性对照使用已知阴性的同类型组织，正常乳腺组织HER2通常阴性，胃癌与乳腺癌为不同组织类型，对照意义弱。11.冰冻切片质量评价中，“冰晶形成”主要与以下哪项操作相关（）A.组织未及时固定B.切片时温度过高C.组织厚度过厚（＞5mm）D.染色时间过长答案：C解析：冰晶形成是由于组织内水分在冷冻时结晶，破坏细胞结构。组织过厚（＞5mm）时，中心部位冷冻速度慢，易形成大冰晶；切片温度过高（如-15℃以上）会导致组织软而难以切片，但不会直接导致冰晶；未及时固定主要影响抗原保存，染色时间与冰晶无关。12.特殊染色中，显示黑色素常用的方法是（）A.嗜银染色（Fontana-Masson）B.阿尔辛蓝（AB）染色C.维多利亚蓝染色D.甲苯胺蓝染色答案：A解析：Fontana-Masson染色利用银离子与黑色素结合，经还原后显棕黑色，是黑色素的特异性染色方法。AB染色显示酸性黏液，维多利亚蓝显示弹性纤维，甲苯胺蓝用于异染性物质。13.分子病理检测中，实时荧光定量PCR（qPCR）的“Ct值”指的是（）A.荧光信号达到阈值时的循环数B.反应终止时的荧光强度C.引物退火的温度D.模板DNA的初始浓度答案：A解析：Ct值（CycleThreshold）是qPCR中荧光信号达到设定阈值时所经历的循环数，与模板初始浓度呈负相关（浓度越高，Ct值越小）。其他选项均非Ct值的定义。14.细胞病理学中，“核异质细胞”最常见于（）A.炎症反应B.良性肿瘤C.癌前病变或早期癌D.正常组织答案：C解析：核异质细胞指细胞核出现一定异型性但不足以诊断为癌的细胞，常见于鳞状上皮内病变（如宫颈CIN）、不典型增生等癌前病变或早期癌，炎症反应多为反应性细胞改变，良性肿瘤细胞异型性轻，正常组织无核异质。15.免疫组化染色中，“脱片”最可能的原因是（）A.载玻片未涂黏附剂B.一抗孵育时间过长C.显色剂过期D.组织固定过度答案：A解析：载玻片未涂黏附剂（如多聚赖氨酸、APES）会导致组织与玻片黏附不牢，染色过程中易脱片。一抗孵育时间过长可能增加背景，显色剂过期影响阳性信号，组织固定过度可能导致抗原丢失，但不直接引起脱片。二、多项选择题（每题3分，共30分，少选、错选均不得分）1.影响常规石蜡切片质量的因素包括（）A.组织固定时间（过长或过短）B.脱水是否彻底C.包埋时组织方向D.切片刀的锋利度答案：ABCD解析：固定时间过长（组织硬脆）或过短（脱水时收缩）、脱水不彻底（石蜡无法渗透）、包埋方向错误（影响切片完整性）、切片刀不锋利（产生刀痕或组织断裂）均会影响切片质量。2.免疫组化检测中，设置阴性对照的目的是（）A.验证一抗的特异性B.排除内源性过氧化物酶干扰C.检测是否存在非特异性染色D.确认检测系统有效性答案：AC解析：阴性对照（如用PBS替代一抗）用于验证一抗是否与组织非特异性结合（排除假阳性），从而确认阳性信号的特异性。内源性过氧化物酶干扰通过阻断步骤（如3%H₂O₂）排除，检测系统有效性由阳性对照验证。3.分子病理检测中，FFPE样本DNA质量差的常见原因有（）A.固定时间不足（＜6小时）B.固定液为乙醇而非福尔马林C.组织自溶（未及时固定）D.石蜡包埋后存放时间过长（＞10年）答案：ACD解析：固定时间不足导致DNA降解，组织自溶（如送检延迟）因酶解作用破坏DNA，长期存放（＞10年）因福尔马林交联加剧导致DNA片段化。乙醇固定的FFPE样本DNA质量通常优于福尔马林固定（福尔马林会导致DNA交联），故B错误。4.冰冻切片适用的场景包括（）A.术中快速诊断（确定病变性质）B.脂肪组织的特殊染色（如油红O）C.需保留酶活性的检测（如酶组织化学）D.大规模批量标本检测答案：ABC解析：冰冻切片因无需脱水包埋，可快速制片（15-30分钟），用于术中诊断；脂肪在石蜡制片中被二甲苯溶解，冰冻切片可保留脂肪（用于油红O染色）；冰冻可保留酶活性（石蜡制片需高温，酶失活）。但冰冻切片质量较差、易脱片，不适合批量标本检测（D错误）。5.特殊染色中，PAS染色阳性的物质包括（）A.糖原B.基底膜C.黏液（中性）D.淀粉样物质答案：ABC解析：PAS染色通过过碘酸氧化糖类的邻二醇基为醛基，与Schiff试剂结合显红色，可显示糖原、基底膜（含糖蛋白）、中性黏液。淀粉样物质需刚果红染色，故D错误。6.细胞病理学标本采集时，需注意的事项包括（）A.避免血液或黏液污染B.及时固定（＜30分钟）C.标本量足够（＞1ml液体标本）D.标注患者姓名、标本类型答案：ABCD解析：血液/黏液会干扰细胞观察，及时固定防止细胞自溶，足够标本量保证细胞数量，标注信息避免混淆，均为关键注意事项。7.免疫组化结果判读时，需记录的内容包括（）A.阳性细胞比例（%）B.染色强度（弱/中/强）C.阳性细胞定位（胞核/胞质/胞膜）D.背景染色程度答案：ABCD解析：完整的免疫组化报告需记录阳性细胞比例（如HER2的IHC2+需结合FISH）、强度（区分弱阳性和强阳性）、定位（如ER为胞核阳性）及背景（评估非特异性染色影响）。8.分子病理检测中，NGS（二代测序）的优势包括（）A.一次检测多个基因B.检测灵敏度高（可检测低频突变）C.无需已知突变位点D.成本低于qPCR答案：ABC解析：NGS可同时检测数百个基因（panel）或全外显子，灵敏度可达1%以下（qPCR通常5%），且无需预设突变位点（可发现新突变）。但NGS成本高于qPCR，故D错误。9.常规HE染色中，切片染色过浅的可能原因有（）A.苏木精染色时间过短B.分化时间过长C.伊红染色时间过短D.封片时树胶过厚答案：ABC解析：苏木精/伊红染色时间短会导致着色浅；分化时间过长（盐酸乙醇作用过强）会脱去过多苏木精，导致核染色浅；封片树胶过厚影响观察但不改变染色深浅。10.病理科质量控制中，“室内质控”的内容包括（）A.每日检测阳性/阴性对照B.定期校准设备（如切片机、烤片机）C.记录试剂批号及有效期D.参加室间质评（如CAP、病理质控中心）答案：ABC解析：室内质控指实验室内部的质量控制措施，包括对照设置、设备校准、试剂管理等。室间质评（D）是外部机构对实验室能力的评估，不属于室内质控。三、案例分析题（共40分）（一）案例1（15分）某医院病理科接收1例“右乳肿块”术中冰冻标本，标本为直径2.5cm的灰白色组织，表面有少量血迹。技术员制片时发现：切片皱缩明显，部分区域细胞结构模糊，经HE染色后，细胞核着色浅，胞质红染不均。问题：1.冰冻切片皱缩、细胞结构模糊的可能原因及解决措施？（5分）2.细胞核着色浅、胞质红染不均的可能原因及改进方法？（5分）3.若冰冻结果与术后石蜡结果不符，可能的原因有哪些？（5分）答案：1.皱缩和结构模糊的可能原因：①组织未充分覆盖包埋剂（OCT），冷冻时表面水分蒸发导致皱缩；②冷冻温度过高（如-15℃以上），组织未完全冻硬，切片时受挤压变形；③组织过厚（＞5mm），中心冷冻不充分，冰晶形成破坏结构。解决措施：①包埋时用OCT完全覆盖组织，避免暴露；②调整冰冻温度至-20~-25℃，确保组织冻硬；③将组织修薄至3-5mm再冷冻。2.核着色浅、胞质红染不均的可能原因：①苏木精染色时间过短（＜2分钟），或分化时间过长（盐酸乙醇作用过度）；②伊红染色时切片未完全展平，局部重叠导致染色不均；③水洗不充分，残留乙醇影响苏木精吸附。改进方法：①延长苏木精染色时间（3-5分钟），缩短分化时间（5-10秒）；②切片时用温水（40-45℃）充分展平，避免折叠；③苏木精染色后用流水冲洗5-10分钟，确保脱酸完全。3.冰冻与石蜡结果不符的可能原因：①冰冻切片质量差（如皱缩、冰晶）导致观察困难；②病变为交界性或疑难病例（如导管上皮不典型增生与原位癌），冰冻难以准确判断；③标本取材未包含病变核心区域（如肿块边缘为纤维组织，中心为癌）；④术中标本因挤压、电刀损伤导致细胞形态改变。（二）案例2（15分）某患者因“结肠占位”行手术切除，术后石蜡标本HE染色显示：肿瘤细胞呈腺管样排列，核深染、异型性明显，可见病理性核分裂象。免疫组化结果：CK20（+），CDX-2（+），Villin（+），Ki-67（约60%+），HER2（0），但CEA（-）。临床怀疑“结肠腺癌”，但CEA阴性与预期不符。问题：1.免疫组化结果中，支持结肠腺癌诊断的指标有哪些？依据是什么？（5分）2.CEA阴性可能的原因有哪些？（5分）3.若需进一步明确诊断，可补充哪些检测？（5分）答案：1.支持结肠腺癌的指标：CK20（肠上皮标记）、CDX-2（肠特异性转录因子，结肠腺癌阳性率＞90%）、Villin（肠微绒毛标记，腺癌阳性）。这些指标联合阳性高度提示肠道来源腺癌。2.CEA阴性的可能原因：①肿瘤分化差（低分化腺癌CEA表达率降低）；②抗原修复不充分（CEA为膜/胞质抗原，需热修复，若修复时间不足则信号弱）；③抗体失效或操作误差（如一抗浓度过低、孵育时间不足）；④肿瘤异质性（部分区域CEA阴性，取材未覆盖阳性区域）。3.补充检测：①EBER（原位杂交）排除淋巴瘤；②MSI（微卫星不稳定