2026年临床病理科常规切片考核真题及解析

2026年临床病理科常规切片考核真题及解析一、单项选择题（共20题，每题1.5分，共30分）1.在常规病理切片制作过程中，组织固定的最主要目的是：A.使组织硬化便于切片B.保存组织的自然形态和结构C.使组织易于着色D.杀死组织内的细菌E.除去组织内的水分2.目前临床病理科最常用的固定液是：A.95%乙醇溶液B.10%中性缓冲福尔马林（NBF）C.Zenker固定液D.Bouin固定液E.4%多聚甲醛3.关于苏木精-伊红（H&E）染色中苏木精染液的理化性质，下列说法正确的是：A.苏木精是碱性染料，使细胞核着色B.苏木精是酸性染料，使细胞质着色C.苏木精是酸性染料，使细胞核着色D.苏木精是碱性染料，使细胞质着色E.苏木精对pH值变化不敏感4.在脱水过程中，组织块从低浓度酒精向高浓度酒精移动时，若浓度梯度过大，最易导致：A.组织收缩过度B.组织硬化不均C.组织内部产生气泡D.脱水不彻底E.染色不清晰5.组织切片在展片仪（水浴锅）中捞片时，最适宜的水温范围通常是：A.20B.30C.42D.55E.656.下列关于石蜡包埋的叙述，错误的是：A.包埋用石蜡的熔点通常在56−B.组织块应放入包埋盒底部并居中C.包埋时石蜡温度应比石蜡熔点高2D.包埋镊子预热后可避免组织块移位E.包埋后应立即放入冰箱冷冻以加速凝固7.常规石蜡切片的最佳厚度为：A.1B.3C.8D.12E.208.在H&E染色过程中，分化液通常使用：A.1%盐酸乙醇B.0.5%氨水C.95%乙醇D.1%醋酸E.伊红染液9.造成切片中“空洞”或“裂纹”伪影的最常见原因是：A.固定时间过长B.脱水时间不足C.组织取材时挤压D.透明时间过长E.封固剂太稀10.在免疫组化染色中，抗原修复的主要机制是：A.暴露被甲醛固定所遮蔽的抗原决定簇B.增加细胞膜的通透性C.增强抗体的特异性结合D.减少非特异性背景染色E.保护抗原不被酶消化11.下列哪种试剂常用于组织的透明处理？A.乙醇B.丙酮C.二甲苯D.甲醛E.冰醋酸12.在切片染色后，脱水透明过程中，若二甲苯中混入水分，会导致：A.切片呈现蓝色B.切片呈现云雾状C.切片褪色D.细胞核呈红色E.组织结构模糊不清13.常规HE染色中，细胞质被染成红色的原因是：A.细胞质为酸性物质，与碱性染料结合B.细胞质为碱性物质，与酸性染料结合C.细胞质含有大量DNAD.伊红染液pH值偏高E.苏木精分化过度14.关于切片刀的维护，下列哪项操作是错误的？A.切片刀用完后应立即擦拭干净并涂油保护B.刀刃有缺口时应及时磨刀或更换刀片C.为防止生锈，切片刀可长期浸泡在酒精中D.装刀时刀刃应略高于蜡块表面E.摇动手轮切片时应匀速用力15.在病理技术质量控制中，用于评估染色强度的对照组织通常是：A.脂肪组织B.扁桃体或阑尾组织C.纯粹的肿瘤组织D.坏死组织E.钙化组织16.组织块进入固定液后，固定液的体积应是组织块体积的：A.1-2倍B.3-5倍C.5-10倍D.20倍以上E.体积相等即可17.下列哪种情况最容易出现“切片皱褶”？A.蜡块过冷B.切片刀过钝C.展片水温过低D.组织脱水过度E.染色时间过长18.碱性品红常用于哪种特殊染色？A.网状纤维染色B.抗酸染色C.脂肪染色D.糖原染色（PAS）E.弹性纤维染色19.在冷冻切片制作中，常用的包埋剂是：A.石蜡B.OCT胶C.丙酮D.甲醛E.乙醇20.观察苏木精-伊红染色切片时，若发现细胞核着色过浅，呈淡蓝色，最可能的原因是：A.分化时间过长B.返蓝时间不足C.苏木精染色时间过长D.伊红染色时间过短E.脱水不彻底二、多项选择题（共10题，每题3分，共30分。每题全部选对得满分，错选、漏选均不得分）1.常规病理技术中，良好的组织固定应具备以下哪些特点？A.能迅速穿透组织B.能使细胞内蛋白质沉淀C.不产生过大的组织收缩或膨胀D.能增强组织的折光率E.便于后续的染色和免疫组化反应2.下列哪些因素会影响苏木精染液的染色效果？A.染液的pH值B.染液的成熟度（氧化程度）C.染色时的环境温度D.媒染剂的存在与否E.组织固定的时间长短3.组织脱水不彻底可能导致的后果包括：A.切片时组织难以切成连续带B.切片厚薄不均C.染色时组织易脱落D.显微镜下组织结构模糊，有水珠E.细胞核与细胞质对比度下降4.下列关于石蜡切片中“跳片”或“厚薄不均”的描述，正确的有：A.蜡块四周留蜡过少可能导致B.切片机刀刃角度不合适可能导致C.蜡块硬度不均可能导致D.夹紧螺丝松动可能导致E.摇轮转动速度过快可能导致5.在HE染色中，导致细胞核呈红色或棕色（核不着色）的原因可能是：A.分化液（酸乙醇）处理时间过长B.苏木精染液氧化过度失效C.脱水透明过程中二甲苯脱水不净D.返蓝液（氨水）浓度过高E.组织固定时间过短6.常用的特殊染色方法包括：A.Masson三色染色（显示胶原纤维）B.PAS染色（显示糖原和粘液）C.刚果红染色（显示淀粉样物质）D.普鲁士蓝染色（显示含铁血黄素）E.抗酸染色（显示结核杆菌）7.病理切片出现“刀痕”或“划痕”的常见原因有：A.切片刀刀刃有缺口或污垢B.蜡块内有硬性异物（如骨渣、钙化点）C.擦镜纸未擦拭干净，碎屑粘在刀上D.切片速度过慢E.组织包埋方向不正确8.免疫组化染色中出现非特异性背景染色的常见原因有：A.一抗浓度过高B.孵育时间过长C.内源性过氧化物酶未阻断D.血清封闭不充分E.显色剂（DAB）显色时间过长9.关于病理切片的封固，下列说法正确的有：A.封固前切片必须完全透明B.中性树胶是最常用的封固剂C.封固剂太稀会导致细胞结构弥散D.封固时避免产生气泡E.封固后可直接放入烤箱高温烤干10.在病理诊断中，细胞核异型性的主要表现包括：A.核体积增大，大小不一B.核染色质增粗，分布不均C.核膜增厚，轮廓不清D.核仁明显，增大E.核浆比例增大三、填空题（共15空，每空1分，共15分）1.10%中性缓冲福尔马林的配方中，甲醛（40%浓度）占____份，磷酸二氢钠和磷酸氢二钠用于调节____值。2.苏木精是一种____性染料，主要与细胞核内的酸性物质（如DNA和RNA）结合，这种结合方式称为____染色。3.在组织处理流程中，从水相进入有机溶剂（如石蜡）的中间步骤称为____，最常用的试剂是____。4.常规石蜡切片机分为两大类，即____式切片机和____式切片机。5.在HE染色中，为了使细胞核呈现鲜艳的蓝色，在酸乙醇分化后，需要置于____性溶液中进行返蓝，常用的试剂是____水溶液。6.观察切片时，显微镜的数值孔径（NA）越大，其分辨率越____，景深越____。7.常用的网状纤维染色方法是____染色，染出的网状纤维呈____色。8.在免疫组化SP法中，SP代表____法，其中P代表____。9.为了防止组织在脱水过程中产生强烈收缩，通常从低浓度到高浓度梯度进行，一般浓度梯度为____%、____%、85%、95%、100%。四、名词解释（共5题，每题3分，共15分）1.媒染剂2.分化3.人工假象4.核浆比5.透明五、简答题（共4题，每题5分，共20分）1.简述苏木精-伊红（H&E）染色中“分化”与“返蓝”的原理及作用。2.列出至少五种常见的病理切片人工假象，并简述其可能的原因。3.简述组织脱水过程中应注意的事项，若脱水不彻底会产生什么后果？4.在冷冻切片技术中，与石蜡切片相比，其主要优缺点是什么？六、综合分析与应用题（共3题，每题20分，共60分）1.染色故障分析：某技术员在制作一批胃肠镜活检组织的病理切片时，发现显微镜下观察结果如下：细胞核呈淡红色或棕色，细胞质染色鲜艳红色，核浆对比极差，难以判断细胞形态。请根据病理技术原理，分析造成这一现象的可能原因（至少列出4点），并针对每一点提出具体的解决方案或改进措施。2.切片质量综合控制：某医院病理科近期收到多起关于“切片上有大量皱褶且厚薄不均”的投诉。作为科室技术主管，你需要制定一份整改方案。请从蜡块制备、切片机操作、切片环境及展片捞片四个环节，详细分析可能导致该问题的技术因素，并给出相应的标准化操作建议（SOP要点）。3.病例分析：患者女性，45岁，因右乳腺发现无痛性肿块入院。粗针穿刺活检组织送病理检查。大体检查：灰白色条索状组织，长1.5cm，直径0.1cm。镜下观察（HE染色）：乳腺组织中可见异型细胞呈巢状排列，浸润周围纤维脂肪组织。细胞核增大，多形性明显，核染色质粗颗粒状，核仁清晰，可见核分裂象。细胞质略嗜酸性。间质伴有纤维增生及少量淋巴细胞浸润。(1)请根据上述描述，初步诊断该病例最可能的病理诊断是什么？(2)为了进一步确诊及指导治疗，需要进行哪些免疫组化标记？请列举至少4种指标，并说明其在该肿瘤诊断中的预期阳性结果及意义。(3)若在常规切片制作中，该组织固定延迟了24小时，这对HE染色形态及免疫组化结果有何潜在影响？参考答案与解析一、单项选择题1.B解析：固定的主要目的是通过凝固或沉淀蛋白质，终止细胞的生命活动，尽可能保存组织和细胞的自然形态和结构，防止自溶和腐败。虽然A、C、D也是固定带来的附加效果，但B是根本目的。2.B解析：10%中性缓冲福尔马林（10%NeutralBufferedFormalin）是国际通用的标准固定液，穿透力较好，形态保存优良，且能保护核酸，利于后续免疫组化和分子病理检测。3.A解析：苏木精是从苏木木中提取的天然染料，本身无染色能力，经氧化后成为苏木红，在媒染剂（如铝盐）作用下形成带正电荷的蓝色色原，属于碱性染料（阳离子染料），易与带负电荷的酸性物质（细胞核中的核酸）结合，此为正染。4.A解析：若浓度梯度过大，组织块表面的水分迅速脱出，而内部水分尚未扩散出来，导致表面高浓度酒精使组织剧烈收缩，形成硬壳，阻碍内部水分脱出，甚至导致组织内部结构破坏。5.C解析：展片水温通常控制在42−C。水温过低切片无法展开，水温过高（超过6.E解析：包埋后应待其自然冷却或在冷台上冷却，不可立即放入冰箱冷冻，因为急剧冷却会导致蜡块收缩产生裂纹，且容易使组织与蜡块分离。7.B解析：常规石蜡切片厚度为3−8.A解析：分化是利用酸乙醇（1%盐酸酒精）或酸性溶液分化过染的胞质和背景，使胞核着色清晰。9.B解析：组织内部产生空洞或裂纹，最常见的原因是脱水不彻底。残留的水分在进入透明剂（二甲苯）或石蜡时，因水与有机溶剂不互溶，形成微小水滴，占据空间并在后续过程中挥发形成空洞。10.A解析：甲醛固定会导致蛋白质发生醛基交联，从而遮蔽抗原决定簇。抗原修复（热修复或酶修复）通过断裂交联或水解蛋白质，重新暴露抗原。11.C解析：二甲苯是最常用的透明剂，它既能溶解石蜡，又能与乙醇互溶，且折光率与组织相近，使组织呈现透明状。12.B解析：二甲苯是非极性溶剂，遇水不溶。若二甲苯中混入水分，封片时水分会析出，在显微镜下呈现云雾状浑浊，严重影响观察。13.B解析：伊红是酸性染料（阴离子），细胞质中的碱性蛋白质（如赖氨酸、精氨酸等）带正电荷，两者结合形成盐，使细胞质染成红色，此为正染。14.C解析：切片刀（特别是钢刀）不能长期浸泡在酒精中，酒精会使刀片氧化生锈。正确的做法是擦拭干净涂油保存于干燥处。15.B解析：扁桃体和阑尾组织含有淋巴组织、上皮、肌层等多种成分，且结构典型，常用于作为HE染色和免疫组化的阳性对照组织，用于评估染色强度和背景。16.D解析：标准操作规范要求固定液体积应为组织体积的10-20倍以上，以保证固定液充足，避免组织释放的蛋白消耗固定液导致固定失效。17.C解析：展片水温过低，石蜡切片无法完全舒展，捞片后即形成皱褶。此外，蜡块过硬、刀刃变钝也可能导致皱褶，但水温过低是最直接原因。18.B解析：碱性品红是抗酸染色（Ziehl-Neelsen法）的主要染料，用于染结核杆菌等抗酸菌。19.B解析：OCT（OptimalCuttingTemperature）化合物是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，冷冻后形成支撑块，是冷冻切片的标准包埋剂。20.A解析：细胞核着色过浅（淡蓝），说明苏木精结合不足。常见原因包括：苏木精染色时间过短、苏木精氧化失效、或者分化时间过长（将不该分化的核内染料也洗脱了）。B项会导致核呈红色或棕色，C项会导致核深蓝，D项影响胞质，E项导致模糊。二、多项选择题1.ABCE解析：良好的固定应迅速穿透（A）、沉淀蛋白（B）、保持形态（C）、利于后续处理（E）。D项虽然固定后折光率会改变，但这不是固定目的的主要描述，且并非所有固定剂都显著增强折光率。2.ABCDE解析：苏木精染色受多种因素影响：pH值（碱性环境好）、成熟度（氧化为苏木红才能染色）、温度（温度高染色快）、媒染剂（必须）、组织固定（固定好坏影响染色亲和力）。3.ABCD解析：脱水不彻底会导致：切片困难（蜡块不硬，易碎或不成带，A、B）、染色脱落（C）、镜下有水珠模糊（D）。E项核浆比下降主要与病变有关，脱水不彻底主要影响清晰度。4.ABCDE解析：所有选项均可能导致切片跳片或厚薄不均。蜡块留蜡少则支撑不稳（A）；刀角度不对则受力不均（B）；蜡块硬度不均则切片阻力不一（C）；螺丝松动则蜡块震动（D）；摇轮过快易导致切片机惯性产生厚薄不均（E）。5.AB解析：细胞核不着色或呈异色（红/棕），说明苏木精未结合或被洗脱。原因包括：分化过度（A）、染液失效（B）。C导致云雾状，D导致返蓝过度核深蓝，E可能导致核着色深但背景脏。6.ABCDE解析：全部属于常用的特殊染色方法。7.ABC解析：刀痕原因主要是刀刃问题（缺口A、污垢B）或异物（C）。D速度过慢通常不会导致刀痕，E导致切片形态问题而非划痕。8.ABCDE解析：非特异性背景染色的原因众多：抗体浓度过高（A）、时间过长（B）、内源性酶未阻断（C）、封闭不足（D）、显色过久（E）均会导致背景加深。9.ABCD解析：封固前必须透明（A），常用中性树胶（B），太稀结构弥散（C），避免气泡（D）。E项错误，封固后只需室温干燥或温箱低温烘干，高温会导致树胶变黄或产生气泡。10.ABCDE解析：核异型性包括形态、结构、大小、染色质、核仁等各方面的异常，五项均为典型表现。三、填空题1.1；pH2.碱（阳离子）；正3.透明；二甲苯4.摇动式（轮转式）；滑动式5.弱碱；稀氨水（或自来水/碳酸锂）6.高；小7.镀银（Gomori或Gordon-Sweets）；黑8.链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶；过氧化物酶9.75；80四、名词解释1.媒染剂：在染色过程中，有些染料对组织没有直接亲和力，需要通过某种物质作为桥梁才能与组织结合，这种物质称为媒染剂。例如在苏木精染色中，铝盐（钾明矾或铵明矾）即为媒染剂，它一方面与苏木精结合形成色淀，另一方面与组织中的酸性基团结合。2.分化：指在染色过度的情况下，利用特定的溶液（分化剂）有选择地吸出或去除组织中多余的染料，使需要观察的结构着色清晰、背景干净的过程。如HE染色中用酸乙醇分化胞质中吸附的苏木精。3.人工假象：指在标本取材、固定、脱水、包埋、切片、染色等病理技术操作过程中，人为引入的、非组织本身固有的形态学改变。如切片刀痕、折叠、染色沉淀、固定伪影等，可能干扰诊断。4.核浆比：指细胞核直径与细胞质直径的比值，或者指细胞核面积与细胞面积的比值。正常细胞核浆比相对恒定，恶性肿瘤细胞常表现为核增大、浆减少，导致核浆比增大。5.透明：指在组织脱水后，用某种既能与酒精又能与石蜡互溶的试剂（如二甲苯）置换出组织中的酒精，并使组织折光率接近于玻璃，从而使组织变得透明透亮的过程，便于石蜡浸入和显微镜观察。五、简答题1.简述苏木精-伊红（H&E）染色中“分化”与“返蓝”的原理及作用。分化：苏木精染色后，不仅细胞核着色，细胞质和组织背景也会吸附部分染料，导致切片深蓝一片。分化利用酸乙醇（酸性）破坏染料与组织间的结合键，或者溶解非特异性结合的染料。由于细胞核与染料结合紧密（媒染剂作用），适当的分化主要去除胞质和背景的染料，使对比度增加。返蓝：分化后的切片呈酸性状态（红色或棕色），且苏木精在酸性环境下呈红色。返蓝是将切片置于弱碱性溶液（如稀氨水或自来水）中，使媒染剂（铝盐）与苏木精形成的蓝色色淀恢复稳定，从而呈现鲜艳的蓝色。作用：分化和返蓝是HE染色质量的关键步骤，旨在获得清晰的核红/蓝与质红的对比效果。2.列出至少五种常见的病理切片人工假象，并简述其可能的原因。刀痕/划痕：切片刀刃有缺口、刀上有污垢或蜡块内有硬物。折叠/皱褶：切片过厚、展片水温过低、捞片手法不当。气泡：封固时混入空气或封固剂挥发过快。空洞/裂纹：组织固定不及时、脱水不彻底、取材时挤压组织。染色沉淀：染液过滤不净、切片上有未冲洗干净的化学试剂结晶。脱片：载玻片未涂粘附剂、烤片时间/温度不足、组织脱水过度。3.简述组织脱水过程中应注意的事项，若脱水不彻底会产生什么后果？注意事项：1.梯度原则：必须从低浓度到高浓度梯度进行，避免组织剧烈收缩。2.时间控制：根据组织大小调整时间，小组织短，大组织长；时间不足致脱水不净，时间过长致组织硬脆。3.试剂更换：高浓度酒精易吸水，需定期更换以保持浓度。4.容量要求：脱水液体积应远大于组织体积。后果：1.组织内残留水分进入二甲苯时呈乳白色浑浊，透明不良。2.石蜡无法充分浸入组织，包埋后组织与蜡块分离或蜡块软硬不均。3.切片困难，呈碎屑状或无法成带。4.染色时组织易从玻片脱落。5.镜下结构模糊，可见细胞内空泡或水雾状。4.在冷冻切片技术中，与石蜡切片相比，其主要优缺点是什么？优点：1.速度快：无需脱水、透明、包埋等长流程，制片时间短（10-30分钟），主要用于术中快速病理诊断（FS）。2.保存抗原：不经有机溶剂处理，能更好地保存脂类和某些抗原活性，利于免疫组化和脂质染色。缺点：1.切片质量较差：厚度通常较厚（5−2.限制：不能长期保存，组织块大小受限。3.诊断难度：细胞形态改变大，对病理医师诊断经验要求极高，确诊率略低于常规石蜡切片。六、综合分析与应用题1.染色故障分析：现象：细胞核呈淡红/棕色，胞质红，核浆对比差。分析及对策：1.原因：分化过度。酸乙醇处理时间过长，将细胞核内的苏木精洗脱过多。对策：缩短分化时间，或在镜下控制分化程度，一旦核清晰即刻水洗终止分化。2.原因：苏木精染液失效或过度氧化。染液使用时间过长，氧化成苏木红后进一步氧化为无色或无效物质，导致着色力下降。对策：定期过滤并补充新鲜染液，或重新配制成熟的苏木精染液。3.原因：返蓝不足。分化后未在弱碱性水中充分返蓝，苏木精仍处于红色酸性状态。对策：延长在流动自来水或稀氨水中的返蓝时间。4.原因：固定不当。组织固定时间过短或固定液浓度过低，蛋白沉淀不足，核内酸性基团（核酸）未能很好保留，导致结合染料能力差。对策：确保组织及时固定，使用足量的10%NBF，必要时对送检组织进行补充固定（补救固定）。5.原因：染色时间过短。未能达到着色平衡。对策：适当延长苏木精染色时间。2.切片质量综合控制：问题：切片皱褶多、厚薄不均。整改方案：一、蜡块制备环节：分析：组织包埋面不平整、组织内含有硬物、蜡块四周留蜡太少。分析：组织包埋面不平整、组织内含有硬物、蜡块四周留蜡太少。SOP：修整蜡块时确保组织面平整且完全暴露；包埋前剔除可见钙化（需脱钙）或异物；包埋时确保组织四周留有至少2-3mm的蜡边，提供足够的支撑。SOP：修整蜡块时确保组织面平整且完全暴露；包埋前剔除可见钙化（需脱钙）或异物；包埋时确保组织四周留有至少2-3mm的蜡边，提供足够的支撑。二、切片机操作环节：分析：刀片变钝、刀刃角度不对、