烟用添加剂中硫脲的测定 高效液相色谱法编制说明

《烟用添加剂中硫版的测定高效液相色谱法》

标准项目编制说明

1工作简况

1.1任务来源

根据国家烟草专卖局国烟科[2011]165号计划下达的工作计划，

制订《烟用添加剂中硫月尿的测定高效液相色谱法》行业检测标准。

1.2项目承担单位、协作单位及主要分工

根据国家烟草专卖局标准项目专项合同（合同号：2011B060）,

该项工作由云南烟草科学研究院牵头和湖南中烟工业有限责任公司

共同承担，主要负责本标准的研究、组织以及起草工作。云南省烟草

质量监督检测站、上海烟草集团有限责任公司、红塔烟草（集团）有

限责任公司、红云红河烟草（集团）有限责任公司等四家单位作为共

同实验方也参与了该标准的共同实验相关工作。

1.3主要工作过程

该项工作主要分四个阶段。

第一阶段前期调研阶段

项目组成立后，首先进行了国内外相关标准资料调研。调研结果

表明：国际标准化组织未制定烟用添加剂中硫赧的检测标准，有关硫

版的检测技术的报道也较少。目前能检索到的饮料中硫版测定的权威

相关文献主要有：

1999年，AOAC公布了一系列关于硫腺的官方检测方法，这些方

法包括：/以。%&/8（橙汁中的硫腺定性测试程序）、AOAC948.19

（橙汁中硫腺的迅速氧化方法）、力力C948.第（冰冻桃子中硫腺的

测定分光光度法）、42亿%1.10（桔子皮中硫腺的测定比色法）。

1981年，HKobayashi等采用反相高效液相色谱和紫外检测器

（RP-HPLC-UV）建立了血浆中硫脉的检测方法，该方法采用甲醇和水作

为流动相，检测波长设置为240nm，田鼠血浆样品经过乙醇提取、蒸

发富集、硅胶纯化等步骤，最后采用反相液相色谱检测样品中的硫腺。

1995年,BUA等采用HPLC建立了测定水中硫腺的高效液相色谱方法，

方法检出限为0.g/ml,方法回收率100T12%。

1997年，AndreaRaffaelli等采用大气压化学电离源选择反应

监测模式建立了水中硫腺的液相色谱质谱（LC-MS）快速检测方法。

2009年，黄晓兰等建立了测定面条和米粉中硫服的液相色谱-质谱/

质谱（LC-MS/MS）检测方法，方法的检出限0.5ug/g,平均回收率

83-90%o所报道的色谱方法主要是液相色谱法，涉及到的检测器有紫

外检测器、质谱检测器等。

从以上列举的方法可以看出，现有硫服的分析检测方法主要是针

对工业生产产品、环境样品和饮料等而建立的。其中A0AC方法针对

固定对象一橙汁、柑桔皮，采用比色法和分光光度法分别对样品中的

硫服进行了定性和定量测定，这些方法对于烟草类添加剂中硫腺的测

定具有借鉴意义。在梳理种类庞杂检测方法的基础上，项目组从本标

准制订的适用范围（香精及料液）、普适性（烟草行业内仪器配置情

况）出发，根据上述文献，对烟用添加剂中硫腺进行高效液相色谱法

的研究，以此法作为烟用添加剂中硫月尿的检测标准方法，力求使标准

既具有科学性、先进性，又具有适用性和可操作性。同时也充分考虑

到在实际工作中，如果需要对色谱峰进行定性确认时，可以将所建立

的高效液相色谱法移置到高效液相色谱-质谱/质谱（HPLC-MS/MS）检

测方法中，解决实际样品中硫脉定性判断问题。

第二阶段试验研究阶段

项目组根据选定的检测方法，按预定实验方案，对检测方法中涉

及的烟用添加剂样品称样量、萃取溶剂选择、溶剂用量、萃取条件和

体积的选择、高效液相色谱条件选择等方面进行了严谨细致的试验和

优化，确定了检测方法的相关实验条件，并对方法回收率、精密度、

检出限等指标进行了方法评价实验。

第三阶段补充实验阶段

2011年9月，项目组召开了《烟用添加剂中硫腺的测定高效液

相色谱法》标准研讨会，与会的有关专家对项目组初期建立《烟用添

加剂中硫腺的测定高效液相色谱法》标准草案进行了初步研讨，根

据研讨意见，项目组于2011年10月-2011年12月期间进行了补充

实验，基本完成检测方法标准相关研究。

第四阶段方法比对实验阶段

为了考察方法在不同实验室之间的再现性，取3个烟用添加剂样

品（表香、料液、浸膏），于2011年11月，分别在云南烟草科学研

究院、湖南中烟工业有限责任公司、云南省烟草质量监督检测站、红

塔烟草（集团）有限责任公司、红云红河烟草（集团）有限责任公司、

上海烟草集团有限责任公司等6家实验室，采用项目组确定方法对选

定样本进行了重复检测，验证结果表明：相同样品在不同实验室的测

试结果具有良好的再现性。

1.4标准主要起草人及其所做的工作

张承明、宸苏行：方法文献查阅、试验方案设计与研究、方法比

对实验；陈永宽、杨华武、缪明明：试验方案设计与技术指导；谭建

林、李劲竹、孙文梁、朱丽、王素娟、李雪梅、王璐、贺兵：方法研

究与比对实验。

2相关领域的国、内外标准研究和制修订情况

2.1相关领域的国、内外标准研究情况

国际标准化组织（ISO）未制定烟用添加剂中硫版的检测标准。

2.2标准编制原则及主要内容确定的依据

2.2.1标准适用范围

本标准规定了烟用添加剂中硫腺的高效液相色谱测定方法。本标

准适用于烟用香精及料液中硫脉的测定。

2.2.2标准编制原则

根据国家烟草专卖局国烟科[2011]165下达的工作计划，进行《烟

用添加剂中硫腺的测定高效液相色谱法》行业标准的制订。项目组

充分考虑行业内各卷烟企业的现有设备以及文献检测方法所涉及的

仪器设备两方面情况的前提下，采用高效液相色谱法作为烟用添加剂

中硫版的检测标准方法。并遵照科学性、先进性、适用性和可操作性

标准制订常规原则，进行了本检测标准的研究制订工作。

2.2.3标准主要内容确定的依据

项目组根据选定的检测方法，按预定实验方案，对检测方法中涉

及的相关条件实验及方法回收率、精密度、检出限等指标进行了严谨

细致的试验，主要内容如下：

称取1g（精确至0.1mg）试样于50矶具塞的锥形瓶中，加入

15niL水（4.2.1）,在150r/min条件下振荡萃取10min,将振荡萃

取液移入25mL具塞容量瓶中，用5mL水（4.2.1）清洗锥形瓶，将

清洗溶液注入容量瓶中，并用水（4.2.1）定容至刻度，摇匀。移取

10mL定容萃取液于10mL带塞的离心试管中，在5000r/min条件

下离心10min,准确移取3mL上清液至10mL容量瓶中，用甲醇

（4.2.2）定容，摇匀。取适量溶液过0.45uni滤膜（4.1.5）,滤液

用高效液相色谱仪分析。

对于水不能分散的试样，按照以下方法处理。

称取1g（精确至0.1mg）试样于50mL具塞的锥形瓶中，加入

5矶二氯甲烷（4.2.4）将试样分散均匀，再准确加入25mL水（4.2.1）,

在150r/min条件下振荡萃取10min,静置分层，准确移取3mL上

层水萃取溶液至10mL容量瓶中，用甲醇（4.2.2）定容，摇匀。取

适量溶液过0.45滤膜（4.1.5）,滤液用高效液相色谱仪分析。

本方法中硫版的检出限为0.43mg/kg,定量限为1.42mg/kg,

回收率在90.85%〜94.78%之间（具体内容见试验报告）。

3标准预期产生的社会、经济效益

硫版（thiourea）,别名：硫代尿素，主要用于有机合成，医药

上用作生产药物的中间体，橡胶工业上用作硫化促进剂，采矿上用作

浮选剂，还用作纺织品化学漂白剂、纸张处理剂，印染助剂，石油化

工助剂，在冶金、电镀、农药等行业也有应用。早期曾一度作为防腐

剂，广泛用于各类需要漂白、保鲜防腐的食品。向食品中加入硫服可

阻止褐变，表观光亮，略带半透明。据报导，国内东南沿海有用硫脉

增白、增筋面条，这种面条表观光亮、略带半透明，煮熟后爽滑有弹

性，口感不错。

但是，硫服一旦被人体摄入后，会导致多种危害，这些危害包括:

抑制甲状腺和造血器官的机能，引起中枢神经麻痹及呼吸和心脏功能

降低等，甚至导致死亡。IARC致癌性评价：动物阳性反应。基于上

述对人体的危害性，我国已不允许其作为食品添加剂使用。

2008年国家局为了加强产品质量安全监控体系建设，拟定了烟用

添加剂中16种禁用成分名单，硫腺是十六种成分之一。对于我国烟草

行业，建立准确可靠的烟用添加剂中硫腺的定量检测方法是非常有必

要的。

由于烟用添加剂种类繁多，成分复杂，因此建立一种能够准确测

定烟用添加剂中的硫月尿含量的方法，都是一项十分困难的工作。本标

准的目标是建立烟用添加剂中硫腺的检测标准，为卷烟产品安全监控

体系的构建提供技术支持，为低危害成分卷烟产品开发奠定技术基

础，具有一定的社会效益及潜在经济效益。

4采用国际标准和国外先进标准的情况

目前没有关于烟用添加剂中硫月尿测定的相关国际标准和国外先

进标准，因此没有进行采用。

5与有关的现行法律、法规和强制性标准的关系

本标准按照有关的现行法律、法规和强制性标准的相关规定，无

任何违背。

6作为强制性标准或推荐性标准的建议及主要依据

介于目前烟草行业内烟用添加剂中硫脉的定量检测手段、仪器设

备以及相关技术的现实情况，建议将《烟用添加剂中硫腺的测定高

效液相色谱法》可作为推荐性检测标准，提供给各卷烟企业、质检中

心以及相关研究中心等检测部门。

7标准宣贯的要求和措施建议

《烟用添加剂中硫服的测定高效液相色谱法》行业标准发布后,

由国家烟草专卖局标准化研究中心牵头组织标准宣贯，在烟草企业、

烟草质检系统进行标准宣贯培训，使卷烟生产企业以及各级烟草质量

监督检验机构，充分了解并