2026年病理学技术（中级）考试题库

2026年病理学技术（中级）考试题库一、单项选择题1.关于组织固定目的的描述，错误的是：A.防止组织自溶和腐败B.使细胞内蛋白质凝固，保持其原有结构C.沉淀或凝固细胞内物质，使其易于着色D.使组织硬化，便于切片E.增强组织折光率，利于观察2.最常用的免疫组织化学染色方法是：A.直接法B.间接法C.PAP法D.ABC法E.免疫荧光法3.诊断淀粉样变最特异的染色方法是：A.刚果红染色B.苏木素-伊红染色C.甲基紫染色D.PAS染色E.维多利亚蓝染色4.用于显示神经纤维的常用染色法是：A.镀银染色法（如Bielschowsky法）B.尼氏染色C.苏木素-伊红染色D.Masson三色染色E.油红O染色5.石蜡切片过程中，透明剂的作用是：A.脱去组织中的水分B.溶解石蜡，便于浸蜡C.作为脱水剂与浸蜡剂之间的媒介，增强石蜡渗透D.使组织变硬E.去除固定剂6.在常规HE染色中，细胞核被染成蓝色，是由于苏木素染料：A.与细胞核内的DNA碱基结合B.与细胞核内的RNA结合C.是一种酸性染料D.在碱性环境下带负电荷E.与核膜上的脂类结合7.用于显示糖原的染色方法是：A.PAS染色（过碘酸雪夫反应）B.阿尔辛蓝染色C.刚果红染色D.苏丹III染色E.镀银染色8.冰冻切片最常用于：A.长期保存组织B.制作教学切片C.术中快速病理诊断D.显示组织精细结构E.免疫电镜观察9.免疫组化染色中出现非特异性背景染色的原因不包括：A.内源性过氧化物酶未完全阻断B.一抗浓度过高C.组织固定不及时或过度D.使用合适的封闭血清E.洗涤不充分10.原位杂交技术主要用于检测：A.组织中的蛋白质B.组织中的脂类C.组织中的特定DNA或RNA序列D.组织中的酶活性E.组织中的多糖11.下列哪种固定液对组织抗原保存较好，常用于免疫组化？A.10%中性福尔马林B.Bouin固定液C.Zenker固定液D.Carnoy固定液E.丙酮12.测量溶液pH值最准确的方法是使用：A.pH试纸B.酸碱指示剂C.pH计D.石蕊试纸E.凭经验估算13.在制作电镜标本时，常用的固定剂是：A.戊二醛和锇酸双重固定B.10%福尔马林C.乙醇D.Bouin液E.丙酮14.用于显示弹力纤维的染色方法是：A.维多利亚蓝染色或Verhoeff铁苏木素染色B.Masson三色染色C.PAS染色D.苏丹III染色E.刚果红染色15.细胞凋亡的形态学特征在HE染色中不包括：A.细胞体积缩小，胞质浓缩B.染色质边集、核固缩C.凋亡小体形成D.细胞膜破裂，内容物外溢E.周围组织无显著炎症反应16.在配制0.1mol/L的盐酸溶液1000ml时，需要取用浓盐酸（浓度约为12mol/L）的体积约为（计算时忽略体积变化）：A.0.83mlB.8.3mlC.83mlD.1.2mlE.12ml17.原位末端标记法（TUNEL）主要用于检测：A.细胞增殖B.细胞凋亡C.病毒感染D.基因突变E.特定蛋白表达18.下列哪种染色方法可将胶原纤维、肌肉纤维和红细胞区分开？A.Masson三色染色B.HE染色C.刚果红染色D.镀银染色E.PAS染色19.实验室生物安全等级中，用于处理具有潜在危险微生物（如结核分枝杆菌）的实验室通常属于：A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-4E.无特殊要求20.流式细胞术不能直接检测的是：A.细胞大小和颗粒度B.细胞表面抗原C.细胞内DNA含量D.细胞超微结构E.细胞凋亡二、多项选择题1.组织脱水不彻底可能导致石蜡切片出现哪些问题？A.切片时组织易碎裂B.切片难以展开或出现皱褶C.染色时易脱片D.染色不清晰，出现云雾状E.组织块硬度适中2.影响免疫组化染色结果的关键因素包括：A.组织固定时间和固定液类型B.抗原修复方法的选择和强度C.一抗的特异性和工作浓度D.显色系统的敏感性E.操作环境的温度3.下列哪些是常用的特殊染色技术及其应用？A.网状纤维染色（如Gomori法）——用于显示网状纤维，判断肿瘤来源B.抗酸染色（如Ziehl-Neelsen法）——用于检测结核分枝杆菌C.革兰染色——用于细菌初步分类D.普鲁士蓝染色——用于显示含铁血黄素E.苏丹III染色——用于显示中性脂肪4.关于分子病理学技术，描述正确的有：A.PCR技术可以扩增特定的DNA片段B.荧光原位杂交（FISH）可在细胞原位检测基因扩增或易位C.基因测序是检测基因突变的金标准D.蛋白质印迹（WesternBlot）主要用于检测RNA表达水平E.流式细胞术可用于淋巴瘤的免疫分型5.病理切片档案管理的基本要求包括：A.建立唯一的病理编号系统B.切片和蜡块应分类、有序存放C.资料保存期限应符合国家相关规定（如门诊15年，住院30年）D.借阅切片需履行登记手续E.废弃的病理标本和切片应按医疗废物处理规定处置三、判断题1.福尔马林固定时间越长，对组织抗原的保存越有利，免疫组化染色效果越好。（）2.在HE染色中，伊红是一种酸性染料，主要使细胞质和间质中的碱性成分着红色。（）3.冰冻切片时，为了获得更薄的切片，应将组织冻得越硬越好。（）4.免疫组化染色中的“假阴性”结果可能由于抗原被过度固定掩盖所致。（）5.原位杂交技术检测mRNA时，需要使用RNA酶抑制剂以防止RNA降解。（）6.配制百分浓度溶液时，若未特别说明，“%”通常指质量-体积百分比（g/100ml）。（）7.电子显微镜的分辨率远高于光学显微镜，可用于观察病毒等亚细胞结构。（）8.巴氏染色主要用于宫颈脱落细胞学检查，能较好地区分细胞角化程度和核的细节。（）9.所有用于诊断的病理标本都必须经过10%中性福尔马林固定。（）10.实验室发生化学品溅入眼睛的紧急处理措施是立即用大量流动清水冲洗至少15分钟，并尽快就医。（）四、简答题1.简述石蜡包埋组织切片的基本步骤。2.简述免疫组织化学染色中抗原修复的原理和主要方法。3.简述苏木素-伊红（HE）染色的基本原理。4.列举三种显示病原微生物的特殊染色方法及其主要应用。5.简述病理实验室质量控制的主要内容。五、案例分析/论述题1.【案例】某实验室接收一份肝穿刺活检组织，临床怀疑为肝细胞癌。请设计一套完整的常规及特殊染色方案，以辅助病理医师进行诊断和鉴别诊断，并说明每种染色的目的。2.试述数字化病理切片（全切片数字化扫描）技术在病理诊断、教学、科研及远程会诊中的应用价值、优势及目前面临的挑战。3.论述分子病理学技术在肿瘤精准诊断和治疗（如靶向治疗、免疫治疗）中的应用，并举出2-3个具体实例（如EGFR基因突变检测与肺癌、HER2基因扩增检测与乳腺癌等）。答案与解析一、单项选择题1.答案：E解析：组织固定的主要目的是防止自溶腐败、凝固蛋白质保存结构、沉淀物质利于染色、硬化组织便于切片。固定通常会降低组织的折光率，而非增强。折光率的调整更多依赖于透明和封片介质。2.答案：D解析：ABC法（卵白素-生物素复合物法）因其高灵敏度、低背景和稳定性，成为目前最常用、最经典的免疫组化染色方法之一。PAP法也是经典方法，但灵敏度通常不及ABC法。3.答案：A解析：刚果红染色后，淀粉样物质呈砖红色，在偏振光显微镜下呈现独特的苹果绿双折光，这是诊断淀粉样变最特异的方法。甲基紫或结晶紫染色也可使淀粉样物质呈紫红色，但特异性不如刚果红染色。4.答案：A解析：镀银染色法（如Bielschowsky法、Gomori法）能使神经纤维、神经末梢等结构染成黑色，是显示神经纤维的经典方法。尼氏染色主要用于显示神经元内的尼氏体。5.答案：C解析：透明剂（如二甲苯、苯）既能与脱水剂（如乙醇）混溶，又能与包埋剂（如石蜡）混溶，起到桥梁作用，将组织中的脱水剂置换出来，便于石蜡充分浸入组织。6.答案：A解析：苏木素经氧化成熟为苏木红，与媒染剂（如铝离子）结合后形成带正电荷的复合物，作为碱性染料，与细胞核内带负电荷的DNA磷酸基结合，从而使细胞核染成蓝色。7.答案：A解析：PAS染色原理是利用过碘酸氧化糖原等物质中的乙二醇基产生醛基，醛基与雪夫试剂中的无色品红结合，形成紫红色产物，是显示糖原最常用的方法。8.答案：C解析：冰冻切片无需脱水、透明、浸蜡等耗时步骤，能在短时间内（通常数分钟）完成制片，主要用于手术中快速确定病变性质、切缘情况等，为临床手术方案提供即时依据。9.答案：D解析：使用合适的封闭血清是为了阻断组织中的非特异性结合位点，减少背景染色，是正确步骤。背景染色常源于内源性酶、抗体非特异性结合、固定不当或洗涤不充分。10.答案：C解析：原位杂交是利用标记的核酸探针，与组织切片或细胞涂片中的互补DNA或RNA序列特异性杂交，从而在细胞原位对特定基因序列进行定位、定性和相对定量分析。11.答案：A解析：10%中性福尔马林（pH7.2-7.4）是目前最常用的通用固定液，对大多数抗原保存尚可，且与多种检测技术兼容。Bouin液等含酸固定液对某些抗原破坏较大。丙酮固定常用于冰冻切片或细胞涂片的免疫组化/荧光。12.答案：C解析：pH计通过测量溶液中的氢离子活度产生的电位差来直接、精确地读取pH值，精度远高于pH试纸和指示剂。pH试纸和指示剂只能提供大致的pH范围。13.答案：A解析：电镜要求超微结构保存完好。戊二醛能较好地固定蛋白质，稳定细胞结构；锇酸除固定作用外，还能与脂类结合，增加图像反差。两者联合使用是电镜样本制备的标准固定方法。14.答案：A解析：维多利亚蓝和Verhoeff铁苏木素是显示弹力纤维最常用的特殊染色方法，能将弹力纤维染成蓝色或蓝黑色。Masson三色主要区分胶原、肌纤维等。15.答案：D解析：细胞膜破裂、内容物外溢是细胞坏死（细胞胀亡）的典型特征。凋亡的特征是细胞收缩、染色质边集、形成凋亡小体并被周围细胞吞噬，整个过程细胞膜保持完整，不引起周围炎症。16.答案：B解析：根据稀释公式=，12mol17.答案：B解析：TUNEL法通过标记凋亡细胞中断裂的DNA链的3'-OH末端，从而在形态学基础上特异性地显示发生凋亡的细胞，是检测细胞凋亡的常用分子技术。18.答案：A解析：Masson三色染色可将胶原纤维染成蓝色或绿色（取决于具体配方），肌纤维染成红色，红细胞染成橙红色，能清晰区分这三种成分，常用于观察纤维化病变和肿瘤间质。19.答案：C解析：BSL-3实验室适用于处理能通过气溶胶传播、可能引起严重或致死性疾病的内源性或外源性病原体，如结核杆菌、SARS冠状病毒、高致病性禽流感病毒等。20.答案：D解析：流式细胞术通过检测细胞的散射光信号和荧光信号来分析细胞物理特性（大小、颗粒度）和生化特性（表面/胞内抗原、DNA含量、钙离子浓度等）。细胞超微结构需通过电子显微镜观察。二、多项选择题1.答案：B,C,D解析：脱水不彻底会使组织中残留水分，导致透明和浸蜡不完全。切片时易出现组织松软、皱褶、难以展平；染色时水分会影响染料结合，造成染色不均、模糊，甚至导致组织从载玻片上脱落。2.答案：A,B,C,D解析：免疫组化是多重因素影响的实验。固定影响抗原保存；抗原修复是暴露被固定掩盖的抗原决定簇的关键步骤；一抗是特异性的核心；显色系统决定信号强度。环境温度一般有标准控制（室温或4℃），非首要变量。3.答案：A,B,C,D,E解析：所有选项均为常用特殊染色及其正确应用。网状纤维染色有助于区分癌与肉瘤、显示肝窦等；抗酸染色查结核杆菌和麻风杆菌；革兰染色区分G+和G-菌；普鲁士蓝染色显示三价铁；苏丹III染色显示中性脂肪。4.答案：A,B,C,E解析：A、B、C、E均正确。蛋白质印迹（WesternBlot）是用于检测特定蛋白质表达水平、分子量及翻译后修饰的技术，不是检测RNA。检测RNA常用NorthernBlot或RT-PCR。5.答案：A,B,C,D,E解析：病理档案是重要的医学和法律文件，管理需严格规范，包括编号唯一性、有序存放、法定保存期限、借阅制度以及医疗废物安全处置，所有选项均为管理要求内容。三、判断题1.答案：错误解析：福尔马林固定时间过长会导致蛋白质过度交联，掩盖抗原表位，造成抗原retrieval困难，反而可能导致免疫组化假阴性结果。一般推荐固定时间为6-48小时，视组织大小而定。2.答案：正确解析：伊红为酸性染料，在水中离解成带负电荷的色酸离子，与细胞质和细胞外基质中带正电荷的蛋白质氨基等碱性基团结合，使其着红色或粉红色。3.答案：错误解析：组织冻得过硬（温度过低）会变脆，切片时易碎裂成粉末，难以获得完整切片。理想的冰冻状态是组织既有一定硬度便于切片，又保持适度韧性。4.答案：正确解析：“假阴性”即实际存在抗原但未检出。固定过度是导致抗原决定簇被遮蔽的常见原因，需要通过适当的抗原修复技术来逆转。5.答案：正确解析：RNA极易被环境中广泛存在的RNA酶降解。在进行RNA原位杂交或涉及RNA的操作时，必须使用RNA酶抑制剂，并使用DEPC处理的水和器皿，以保护RNA的完整性。6.答案：正确解析：在医学和生物学实验室中，如无特殊说明，百分比浓度（%）通常指质量-体积百分比，即每100毫升溶液中所含溶质的克数（g/100ml）。7.答案：正确解析：光学显微镜分辨率约为0.2μm，而透射电镜分辨率可达0.1nm，相差三个数量级，足以观察细胞器内部结构、病毒颗粒、生物大分子等。8.答案：正确解析：巴氏染色采用多种染料（如苏木素、橘黄G、EA等）复合染色，能使不同分化程度的细胞呈现多种颜色，核结构清晰，是细胞病理学筛查和诊断的基石。9.答案：错误解析：虽然10%中性福尔马林是应用最广的通用固定液，但并非唯一选择。根据检测目的不同，可能会选用其他固定液，如电镜用戊二醛、某些特殊染色或分子检测用乙醇、丙酮或特定固定液。10.答案：正确解析：这是处理化学品入眼的标准急救程序。立即、持续、充分的冲洗能最大程度稀释和清除化学物质，减轻损伤，为后续医疗处理争取时间。四、简答题1.答案要点：①取材与固定：新鲜组织经适当大小取材后，立即投入足量固定液（如10%中性福尔马林）中充分固定。②脱水：将固定后组织经梯度乙醇（如70%、80%、90%、95%、100%I、100%II）逐步脱去水分。③透明：用透明剂（如二甲苯I、II）置换出组织中的乙醇。④浸蜡：将透明后的组织置于熔化的石蜡中（通常两缸），使石蜡充分渗透入组织间隙。⑤包埋：将浸透蜡的组织块放入包埋盒，注入熔蜡，冷却凝固成蜡块。⑥切片：将蜡块修整后，用切片机切成薄片（通常4-6μm）。⑦展片与捞片：切片在温水中展平，捞至载玻片上。⑧烤片：置入烤片箱烘干，使切片牢固附着于载玻片。2.答案要点：原理：甲醛固定使蛋白质分子间发生交联，形成网络结构，虽然保存了抗原，但也可能掩盖抗原决定簇。抗原修复旨在通过加热或酶解的方法，破坏这些交联，重新暴露被掩盖的抗原表位，从而提高免疫组化检测的灵敏度和特异性。主要方法：1.热修复法：最常用。包括高压热修复（高压锅内加热，修复强度高）、微波修复（微波炉加热，需防干片）和水浴热修复（恒温水浴锅加热，温和稳定）。修复液常用pH6.0的柠檬酸盐缓冲液或pH9.0的EDTA缓冲液。2.酶修复法：使用蛋白酶（如胰蛋白酶、胃蛋白酶）消化切片，切断蛋白间的连接。较温和，适用于某些对热敏感的抗原或固定过度的组织。3.答案要点：HE染色是最基本的病理染色。苏木素染色：苏木素经氧化为苏木红，与媒染剂（如硫酸铝钾）结合形成带正电的蓝色色淀。该色淀作为碱性染料，与细胞核内DNA双螺旋结构中带负电的磷酸基团通过离子键结合，同时也可与胞质内某些酸性成分结合，将细胞核染成蓝色。伊红染色：伊红是一种酸性染料，在水中离解成带负电荷的色酸离子。它与细胞质和细胞外基质中带正电荷的蛋白质氨基酸残基（如氨基）通过离子键结合，使这些结构着红色或粉红色。通过分化的步骤，可以洗脱细胞核上过染的苏木素和细胞质上过染的伊红，并通过返蓝步骤使核的蓝色更鲜明。通过分化的步骤，可以洗脱细胞核上过染的苏木素和细胞质上过染的伊红，并通过返蓝步骤使核的蓝色更鲜明。4.答案要点：抗酸染色（如Ziehl-Neelsen法）：主要用于检测结核分枝杆菌和麻风杆菌。菌体被染成红色，背景呈蓝色。革兰染色：用于细菌的初步分类。将细菌分为革兰阳性菌（染成紫色）和革兰阴性菌（染成红色）。六胺银染色（如Grocott法）：主要用于检测真菌（如隐球菌、曲霉菌、肺孢子菌）和某些寄生虫。真菌壁和孢子染成黑色或褐色，背景淡绿色。（注：答出任意三种即可，如Warthin-Starry染色查幽门螺杆菌等也可）（注：答出任意三种即可，如Warthin-Starry染色查幽门螺杆菌等也可）5.答案要点：室内质量控制：标本接收与核对：确保信息准确、标本合格。试剂与耗材管理：使用有资质的产品，定期校验（如pH计），记录效期。仪器设备维护：定期校准、维护切片机、脱水机、染色机、显微镜等，并记录。标准操作程序：所有技术步骤均有SOP文件，并严格执行。对照设置：免疫组化/特殊染色每批实验必须设立阳性和阴性对照。人员培训与考核：技术人员需持证上岗，定期培训与能力评估。切片质量评估：定期回顾切片质量（厚度、平整度、染色对比度等）。室间质量评价：参加国家或省级病理质控中心组织的免疫组化、特殊染色、细胞学等室间质评活动，比对结果，持续改进。五、案例分析/论述题1.答案要点：常规染色：HE染色：基础评估。观察肝小叶结构是否破坏，肝细胞形态（异型性、核浆比、核分裂像等），有无假小叶形成，间质反应等，是诊断和分级的基石。特殊染色/组织化学：网状纤维染色（如Gomori法）：显示肝血窦壁的网状纤维支架。肝癌时网状纤维减少或消失，而增生结节或腺瘤周围可有网状纤维包绕，有助于鉴别。Masson三色染色：显示胶原纤维（蓝色）。评估肝纤维化/肝硬化的程度，以及肿瘤间质中的纤维组织增生情况。PAS染色（消化前后对比）：显示糖原。肝细胞癌的癌细胞胞浆内糖原常减少或分布不均，而正常肝细胞或肝细胞腺瘤富含糖原。淀粉酶消化后染色消失可证实为糖原。黏液染色（如AB-PAS）：胆管细胞癌可产生黏液，而肝细胞癌通常不产生，有助于鉴别肝细胞癌与胆管细胞癌或混合型肝癌。免疫组织化学染色：HepatocyteParaffin1：肝细胞特异性标志物，阳性支持肝细胞来源。Glypican-3：在大多数肝细胞癌中高表达，而在良性肝病变和正常肝组织中不表达或低表达，是重要的辅助诊断标志物。CD34：显示血管内皮。肝细胞癌中可见“毛细血管化”的异常血窦内皮CD34弥漫阳性，而正常肝血窦内皮仅门脉区阳性。CK7/CK19：胆管上皮标志物。用于鉴别胆管细胞癌（阳性）和肝细胞癌（通常阴性），或识别混合型肝癌中的胆管分化成分。Arginase-1：肝细胞特异性标志物，敏感性和特异性均较高。Ki-67：增殖指数，评估肿瘤细胞的增殖活性，与分级和预后相关。2.答案要点：应用价值与优势：病理诊断：实现切片永久性数字化保存，避免物理切片褪色、损坏或遗失。便于进行图像定量分析（如免疫组化评分、细胞计数）。支持多专家远程同步会诊，提高诊断准确性和效率。人工智能辅助诊断系统可基于数字切片开发，用于筛查、初诊或质量控制。教学与培训：建立数字化切片库，方便学生随时随地调阅典型及疑难病例，进行自主学习、复习和考核。教师可方便地进行标注、讲解和在线答疑。科研：便于大样本的回顾性研究，无需反复调阅物理切片。支持高通量的图像组学分析，从海量图像数据中挖掘与诊断、预后、治疗反应相关的形态学特征。远程会诊与质控：基层医院可将数字切片上传至上级医院或专家平台，获得快速、高质量的远程诊断支持，促进医疗资源下沉和均质化。上级质控中心可在线抽查下级医院的切片质量。面临的挑战：初始成本高：高分辨率扫描仪价格昂贵，存储海量数据需要大容量服务器和稳定的网络，投入较大。数据存储与管理：数字切片文件巨大（通常数GB每张），长期存储、备份、检索和安全管理带来巨大挑战，需专业IT支持。标准化问题：扫描参数（分辨率、焦距）、图像色彩还原、不同品牌扫描仪间的兼容性等缺乏统一标准，可能影响诊断一致性和AI算法泛化能力。法规与伦理：涉及患者隐私和数据安全，需要完善的法律法规和伦理规范来管理数字切片的获取、