温度对中华鳖性腺发育与性比影响

温度对中华鳖性腺发育与性比影响目录1、课题意义2、国内外研究进展3、实验材料、仪器和试剂4、实验方法5、实验结果6、结论中华鳖（Trionyx

Sinensis），俗称甲鱼，营养丰富，肉味鲜美，又是珍贵的药材，其成分含动物胶、角蛋白、维生素D及碘等，具有滋阴清热、平肝益肾及消於的功能。对于雄性甲鱼其生长速度较快，裙边较雌性宽，营养价值则更为丰富。本课题从温度这一因素研究其对中华鳖性腺分化发育的影响，可为雄性化苗种的培育提供技术支持。1、课题的意义2、国内外研究进展关于中华鳖的性别决定，国内外曾有人做过相关研究，但结果却不尽相同。阮成旭(2004)和朱道玉(2000)的研究发现，孵化温度在32℃时中华鳖雄性比例较高，分别达到72.1%、88%，而27℃时雌性比例较高。巫旗生(2011)等用300枚受精卵分6个温度梯度进行研究，结果显示，雄性所占比例随温度升高而上升。聂刘旺(2001)的研究结果却与朱道玉等人的研究所得出的规律相反，发现中华鳖高孵化温度产雌性，低孵化温度产雄性。另外在甲壳类对虾方面，杨丛海(1993)等将中国对虾（Penaeuschinensis）受精卵用41.5~42℃的高温处理30s，雌雄之比为2.44∶1，差异极为显著。3、实验材料、仪器和试剂1.材料中华鳖受精卵500枚，卵重范围在3~5g，直径范围在1.5~2.0cm。（由河北康态中华鳖良种有限公司提供）2.仪器与试剂布温氏固定液，带式苏木精，0.5％伊红，二甲苯，梯度乙醇，中性树胶，蒸馏水。显微镜，数码相机，切片机，电热恒温干燥箱、塑料沙盘、解剖器材、载玻片、盖玻片、恒温培养箱。分两组进行孵化，每组250枚受精卵4、试验方法在32℃恒温箱内培养（空气湿度控制在85％左右，沙湿度10~15％）

待分化结束后，解剖观察并对性腺作石蜡切片（固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→染色→拍照观察）统计雌雄数、计算雌雄比，整理分析数据到第13天时，分别用18℃和40℃的极限温度刺激鳖卵6h，之后继续在32℃下孵化5.实验结果雌鳖胚胎雄鳖胚胎OvOKKKT卵巢：O；输卵管：Ov；精巢：T；肾脏：K雌鳖胚胎雄鳖胚胎OvOOKKKTT卵巢：O；输卵管：Ov；精巢：T；肾脏：K精巢发育对比15d，18℃处理精巢Sp24d，18℃处理精巢Sp15d，40℃处理精巢Sp24d，40℃处理精巢Sp精原细胞：Sp16d，40℃处理卵巢Oo16d，18℃处理卵巢Oo卵巢发育对比25d，18℃处理卵巢Oo25d，40℃处理卵巢Oo卵原细胞：Oo性别统计结果实验组雌性个数雌性比例雄性个数雄性比例孵化率18℃处理4869.6%2130.4%86.3%40℃处理4057.1%3042.9%87.5%32℃孵化（李慧君2011）1748.57%1851.43%83.0%两组各80枚鳖卵的解剖统计结果如下：与32℃孵化相比，经高温和低温处理后，雌性所占比例较高，且在低温处理后的雌性比例更高。6.结论1.温度的刺激并未对性腺的发育速度产生影响。2.在雌雄比例方面，雌性所占比例较高，且在低温处理后的雌性比例更高