疾控检验考试题目及答案

疾控检验考试题目及答案一、单项选择题（每题1分，共30分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填入括号内）1.在ELISA间接法检测IgG抗体时，酶标记的二抗最常用的是（）A.抗人IgGFc段单抗-HRPB.抗人IgMμ链单抗-HRPC.抗人IgAα链单抗-APD.抗人IgGFab段单抗-β-半乳糖苷酶答案：A2.实时荧光PCR中，TaqMan探针5′端标记的荧光基团是（）A.FAMB.ROXC.TAMRAD.BHQ-1答案：A3.依据《人间传染的病原微生物名录》，SARS-CoV-2病毒培养应在（）实验室进行A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-4答案：C4.下列哪项不是细菌外膜蛋白的功能（）A.参与营养物质转运B.介导黏附宿主细胞C.提供鞭毛运动能量D.抵抗宿主补体杀伤答案：C5.在脉冲场凝胶电泳（PFGE）中，决定DNA片段分离范围的关键参数是（）A.电场强度B.脉冲角度C.脉冲切换时间D.琼脂糖浓度答案：C6.用于检测霍乱弧菌ctxAB基因的引物设计，最佳靶序列是（）A.16SrRNA基因B.毒力整合元件CTXφ的RS区C.tcpA基因D.toxR基因答案：B7.在血培养瓶中，溶解-离心血培养技术（Lysis-Centrifugation）主要优势是（）A.缩短报阳时间B.降低污染率C.提高苛养菌分离率D.减少抗生素干扰答案：C8.下列关于结核分枝杆菌rpoB基因说法正确的是（）A.编码RNA聚合酶β亚单位B.81bp核心区突变与异烟肼耐药相关C.用于菌种鉴定而非耐药检测D.仅存在于结核复合群答案：A9.在Westgard多规则质控中，提示随机误差的是（）A.1-2sB.1-3sC.2-2sD.10x答案：B10.检测水中大肠埃希氏菌的酶底物法（MMO-MUG）中，荧光产物是（）A.4-甲基伞形酮B.邻硝基苯酚C.对硝基苯胺D.氯酚红答案：A11.下列病毒中，基因组为分节段负链RNA的是（）A.麻疹病毒B.流感病毒C.腮腺炎病毒D.风疹病毒答案：B12.在布鲁氏菌病血清学诊断中，SAT试验凝集滴度≥（）视为阳性A.1:25B.1:50C.1:100D.1:160答案：D13.用于评价诊断试验真实性的指标是（）A.阳性预测值B.阴性预测值C.约登指数D.符合率答案：C14.在HIV-1基因型耐药检测中，pol区扩增片段应覆盖（）A.gagB.envC.protease全长+RT1-250codonD.integrase全长答案：C15.下列哪种培养基适合分离培养嗜肺军团菌（）A.BCYE-αB.TCBSC.CLEDD.CHROMagarO157答案：A16.实时荧光RT-PCR检测诺如病毒GI/GII，逆转录温度通常设为（）A.37℃B.42℃C.50℃D.60℃答案：C17.在质粒接合转移实验中，消除受体菌自身质粒常用的方法是（）A.高温诱导B.SDS裂解C.吖啶橙处理D.紫外线照射答案：C18.下列关于炭疽芽孢杆菌荚膜说法正确的是（）A.由多聚γ-D-谷氨酸组成B.由透明质酸组成C.抗吞噬作用弱D.可用青霉素诱导产生答案：A19.在病毒空斑试验中，中性红染色的作用是（）A.标记病毒抗原B.显示细胞病变C.染色活细胞D.固定病毒答案：C20.用于检测艰难梭菌毒素B的细胞毒性试验常用细胞系是（）A.VeroB.Hep-2C.CHOD.MRC-5答案：C21.下列哪项不是多重PCR体系优化重点（）A.引物二聚体评估B.退火温度梯度C.探针荧光淬灭基团选择D.靶基因片段长度差异答案：C22.在细菌耐药表型确证试验中，检测ESBLs最常用的底物抗生素组合是（）A.头孢他啶/头孢他啶+克拉维酸B.头孢噻肟/头孢噻肟+克拉维酸C.A+BD.亚胺培南/亚胺培南+EDTA答案：C23.下列关于寨卡病毒说法错误的是（）A.属黄病毒科B.基因组为单股正链RNAC.可经母婴垂直传播D.目前无疫苗上市答案：D（已有疫苗获批，故“无疫苗”表述错误）24.在ELISA竞争法中，显色深浅与待测物浓度关系是（）A.正相关B.负相关C.无相关D.先正后负答案：B25.用于检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素的免疫层析试纸条，标记抗体常用（）A.胶体金B.荧光微球C.量子点D.上转换纳米颗粒答案：A26.在基因芯片杂交中，用于封闭非特异性位点的试剂是（）A.SDSB.SSCC.BSAD.Denhardt’s答案：C27.下列关于钩端螺旋体培养说法正确的是（）A.需氧，最适pH7.4B.可用EMJH培养基C.35℃培养1天可见生长D.菌落呈β溶血答案：B28.在病毒核酸提取中，TRIzol法主要裂解成分是（）A.酚+异硫氰酸胍B.CTABC.SDS+蛋白酶KD.NaOH+SDS答案：A29.下列哪项不是质控菌株ATCC25922的用途（）A.药敏质控B.培养基性能验证C.消毒剂中和剂鉴定D.内毒素检测答案：D30.在HIV抗体确证试验中，Westernblot出现p24+gpl60条带，结果判读为（）A.阴性B.阳性C.不确定D.无效答案：B二、多项选择题（每题2分，共20分。每题有两个或两个以上正确答案，多选少选均不得分）31.下列属于细菌Ⅲ型分泌系统效应蛋白的有（）A.YersiniaYopHB.SalmonellaSopBC.EHECTirD.ShigellaIpaB答案：ABCD32.关于实时荧光PCRCt值，下列说法正确的有（）A.Ct值与初始模板量呈负相关B.相同阈值下，Ct值越大表示拷贝数越少C.Ct值不受扩增效率影响D.可用于相对定量分析答案：ABD33.下列属于病毒灭活剂的有（）A.β-丙内酯B.甲醛C.戊二醛D.氯仿答案：ABC34.在细菌耐药机制中，属于酶介导耐药的有（）A.AmpCβ-内酰胺酶B.氨基糖苷修饰酶AAC(6′)-IbC.氯霉素乙酰转移酶D.万古霉素耐药VanA答案：ABC35.下列关于高致病性禽流感病毒H5N1说法正确的有（）A.HA裂解位点含多个碱性氨基酸B.对奥司他韦敏感C.可在BSL-2实验室培养D.可引起人呼吸道症状答案：ABD36.下列属于核酸等温扩增技术的有（）A.LAMPB.RPAC.HDAD.NASBA答案：ABCD37.在ELISA间接法检测抗体时，可能导致假阳性的因素有（）A.类风湿因子干扰B.异嗜性抗体C.溶血标本D.高浓度钩状效应答案：ABC38.下列关于炭疽芽孢杆菌实验室鉴定说法正确的有（）A.串珠试验阳性B.噬菌体AP631裂解阳性C.触酶阳性D.溶血阴性答案：ABCD39.下列属于病毒载体疫苗的有（）A.腺病毒载体新冠疫苗B.黄热17D疫苗C.麻疹病毒载体ChAdOx1D.流感病毒载体RSV疫苗答案：ACD40.在细菌全基因组测序中，用于组装质量评估的指标有（）A.N50B.L50C.BUSCO完整性D.Q30比例答案：ABCD三、填空题（每空1分，共20分）41.实时荧光PCR扩增效率E的计算公式为E=10^(−1/slope)−1，理想斜率对应效率为________%。答案：10042.结核分枝杆菌GeneXpertMTB/RIF检测的靶基因是________。答案：rpoB43.在病毒分离中，用于维持液常用的抗生素浓度为青霉素________U/mL、链霉素________μg/mL。答案：100；10044.依据《生活饮用水卫生标准》GB5749-2022，总大肠菌群限值为________CFU/100mL。答案：045.细菌内毒素的活性单位用________表示，1ng≈________EU。答案：EU；1046.在PFGE中，SeakemGold琼脂糖终浓度通常为________%。答案：147.寨卡病毒NS1蛋白分子量约为________kDa。答案：4848.用于检测艰难梭菌谷氨酸脱氢酶（GDH）的免疫层析试纸条，其标记抗体为________标记。答案：胶体金49.在病毒滴度TCID50计算中，Reed-Muench法公式为logTCID50=L+d(S−0.5)，其中d表示________。答案：稀释倍数的对数差50.依据《人间传染的病原微生物名录》，布鲁氏菌属运输包装分类为________类。答案：A51.在ELISA封闭液中，常用封闭蛋白为________。答案：BSA52.病毒RNA提取后，测得A260/A280=1.55，提示________污染。答案：蛋白53.细菌鞭毛染色最常用的银染法是________法。答案：Leifson54.在基因芯片点样中，点样针直径通常为________μm。答案：15055.用于检测O157:H7的改良山梨醇麦康凯琼脂（CT-SMAC）添加的抗生素为________和________。答案：头孢克肟；亚碲酸钾56.在病毒中和试验中，固定病毒稀释血清法称为________法。答案：Reed-Muench57.依据CLSIM100，头孢他啶/阿维巴坦纸片含药量为________μg/20μg。答案：3058.在细菌16SrRNA基因测序中，通用引物27F对应的序列为________。答案：AGAGTTTGATCMTGGCTCAG59.用于灭活新冠病毒的β-丙内酯工作浓度为________%。答案：0.0560.在Westernblot转膜中，PVDF膜活化用甲醇浓度为________%。答案：100四、简答题（每题8分，共40分）61.简述实时荧光PCR中TaqMan探针设计原则。答案：（1）长度18–30bp，Tm值65–70℃，比引物高5–10℃；（2）GC含量30–80%，避免连续G；（3）5′端不含G，减少淬灭；（4）探针位置位于上下游引物之间，与引物距离1–10bp；（5）避免二级结构，ΔG>−2kcal/mol；（6）靶序列保守，无SNP；（7）荧光基团与淬灭基团匹配，如FAM-BHQ1；（8）终浓度0.1–0.25μmol/L，需预实验优化。62.简述多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药机制。答案：（1）产生OXA型碳青霉烯酶（OXA-23、OXA-24、OXA-58）；（2）AmpC酶过度表达；（3）外膜蛋白CarO缺失，降低碳青霉烯摄入；（4）外排泵AdeABC、AdeFGH、AdeIJK高表达；（5）氨基糖苷修饰酶AAC(6′)-Ib、ANT(2″)-Ia；（6）16SrRNA甲基化酶ArmA；（7）靶位改变：gyrA、parC突变导致喹诺酮耐药；（8）获得性耐药岛AbaR1携带多耐药基因。63.简述病毒空斑形成单位（PFU）测定步骤。答案：（1）准备6孔板，Vero细胞长至90%汇合；（2）10倍系列稀释病毒液，每稀释度做复孔；（3）吸去培养液，每孔加0.2mL病毒液，37℃吸附1h，每15min摇动；（4）吸去病毒液，加2mL1%低熔点琼脂糖-2%FBSMEM覆盖层，室温凝固；（5）37℃5%CO2培养48–72h；（6）加1mL0.1%中性红，37℃染色1h，弃染液；（7）计数空斑，取30–300PFU孔，按公式PFU/mL=平均空斑数×稀释倍数/0.2mL；（8）重复3次，取几何均值。64.简述ELISA间接法检测IgM抗体时避免RF干扰的措施。答案：（1）使用抗人IgMμ链捕获法，先包被抗μ链，再捕获IgM，去除IgG；（2）样本预稀释1:100以上，降低RF浓度；（3）加入IgG吸附剂，如GullSORB，去除人IgG-RF复合物；（4）使用F(ab′)2酶标二抗，避免Fc段结合RF；（5）加入0.5%热变性IgG封闭RF；（6）设置RF阳性对照，评估干扰；（7）结果可疑时采用IgM捕获法（μ-capture）复检。65.简述脉冲场凝胶电泳（PFGE）在暴发调查中的优势与局限。答案：优势：（1）分辨率高，可区分>20kb片段；（2）重复性好，标准化方案（PulseNet）便于比对；（3）数据库大，可跨地区追溯；（4）结果稳定，同一克隆型>95%相似。局限：（1）耗时3天，无法满足快速需求；（2）需专用设备，成本高；（3）对降解DNA敏感；（4）无法区分同源性极高的突变；（5）对不可培养菌无效。五、应用题（含计算/分析/综合，共40分）66.计算题（10分）某实验室对污水样进行诺如病毒GII定量RT-PCR，标准曲线方程为y=−3.42x+38.2，效率104%，R²=0.998。样本Ct=28.6，提取体积200μL，洗脱体积50μL，PCR加样5μL。求每100mL污水中病毒RNA拷贝数。答案：（1）由方程求log10拷贝数：28.6=−3.42x+38.2→x=(38.2−28.6)/3.42=2.81（2）PCR管中拷贝数=10^2.81=646copies/5μL（3）洗脱液浓度=646copies/5μL=129.2copies/μL（4）总洗脱液50μL，总拷贝=129.2×50=6460copies（5）提取自200μL污水，故100mL中拷贝=6460×(100/0.2)=3.23×10^6copies/100mL67.分析题（10分）某医院ICU一周内检出5例碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌（CRKP），药敏显示全部对替加环素敏感，对阿米卡星中介。PFGE显示3例A型，2例B型。A型与PulseNet数据库中去年本院流行株相似度100%，B型为新型。请分析可能的传播链并提出控制措施。答案：（1）A型为院内持续流行株，提示垂直传播或环境储源；（2）B型为新输入，可能通过患者转入或工作人员携带；（3）垂直传播途径：共用呼吸机、支气管镜、床单位；（4）水平传播：手卫生不到位、环境清洁不彻底；（5）控制：a.立即隔离所有CRKP患者，单间或同种同室；b.加强手卫生依从性监测，使用含醇手消；c.对A型患者周围环境采样，重点床栏、监护仪按钮；d.支气管镜高水平消毒后生物监测；e.阿米卡星雾化慎用，避免选择性压力；f.对B型患者进行流行病学调查，追溯入院前转出科室；g.每周进行ICU患者肛拭子主动筛查，持续4周；h.建立CRKP预警系统，PFGE>90%相似即启动同源性分析。68.综合题（20分）某市CDC接到报告，一所小学出现20例发热、皮疹、淋巴结肿大，初步疑为麻疹暴发。已采集8份咽拭子，需完成实验室确诊、基因分型及免疫效果评价。请设计完整实验方案，包括样本处理、检测方法、结果判读、报告流程。答案：（1）样本处理：a.咽拭子置于2mL病毒运输液（含青霉素1000U/mL、链霉素1000μg/mL、两性霉素B5μg/mL），4℃运输，24h内检测；b.200μL样本+200μLPBS，涡旋，4℃3000rpm10min，取上清。（2）RNA提取：使用QIAampViralRNAMiniKit，50μL洗脱，内参加入MS2噬菌体RNA10^5copies作为提取质控。（3）实时荧光RT-PCR：采用CDC推荐引物探针，靶基因N基因，引物：F:5′-CCATGATACCATCCTGGGCTTAG-3′R:5′-GACTGGTTGACGATGGCCTAGA-3′探针：FAM-CCCTGACGCACCTGAGCGTA-BHQ1体系