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文档简介

PCR技术与电泳相关问题练习

一、选择题

1.大引物PCR定点突变常用来研究蛋白质结构改变导致的功能变化。

单核甘酸的定点诱变仅需进行两轮PCR即可获得,第一轮加诱变引物

和侧翼引物,第一轮产物作为第二轮PCR扩增的大引物,过程如图所

示。下列叙述正确的是()

诱变•用•物

第T仑PCR]一

一PCR产.用[作大用物

A.第一轮PCR过程中复性所用的温度与第二轮PCR复性的温度是一样

B.PCR扩增的定点诱变产物通常需要连接到载体分子上才能表达出相

应的性状,该定点诱变产物需具备启动子、终止子等结构才能进行转

录和翻译

C.第二轮PCR所用的引物是第一轮PCR的产物DNA的两条链

D.将某功能蛋白的第17位Cys(UGU)改造成Ser(UCU),属于蛋白质工

2.恶性高热是一种潜在致命性单基因遗传病,患者一般无症状,但当

接触麻醉剂后,会诱发患者出现高热等症状,死亡率极高。某家庭的

母亲和女儿皆患有恶性高热,母亲因该病去世,女儿经及时抢救而康

复。科研人员对该家庭成员进行了基因检测。控制该性状的某一基因

可在限制酶的作用下切割成两条不同长度的DNA片段,用凝胶电泳法

分离后可显示出不同的带谱如图所示(控制该性状的基因为完全显

性,且不位于X、Y染色体的同源区段)。下列说法错误的是()

1母亲一1—2父亲

1-^—I;

3女儿I4I儿子I:

__i_____1

50()bp———

8(X)bp———

[:KN)bp——

A.该遗传病属于常染色体显性遗传病

B.结合3、4可推断2号不患病的概率是100%

C.该致病基因是由正常基因碱基的替换形成的

D.4号与无麻醉剂接触史的女子结婚,后代能出现的基因型最多有3

3.某研究小组利用转基因技术,将绿色荧光蛋白基因(G/力整合到野

生型小鼠%功3基因一端,如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋

白质的杂合子雌雄小鼠各1只,交配以期获得Ga功3—Gb基因纯合子

小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型,设计了引物1和

引物2用于PCR扩增,PCR产物电泳结果如图乙所示。

斤;动Gat“3#编

插l,字乂编码IX:X..,

入5----------------------------------------------------------•>

前3'--------------------------------------------------------5'

启动Gara3GFP非编

捕子区编码区幽]疝德区|码区

入,一•••>

后3'----------

“I物物2

1234

大片段一一一

小片段———

下列叙述正确的是()

A.Gata3基因的启动子无法控制G和基因的表达

B.翻译时先合成Gata3蛋白,再合成GFP蛋白

C.2号条带的小鼠是野生型,4号条带的小鼠是—G/产基因纯合

D.若用引物1和引物3进行PCR,能更好地区分杂合子和纯合子

4.如图所示,在一段未知序列的突变体DNA片段中,插入了已知序列

的T—DNA,要想对T—DNA两侧的未知序列进行测序,下列做法正确

的是()

5:未知、序列引匚物①T-।DNA引口物-②未知序列

'限制酣切点痛③痛④限制酹切於

突变体DNA

A.用引物①和引物④直接进行PCR扩增之后再测序

B.用引物②和引物③直接进行PCR扩增之后再测序

C.用DNA连接酶连接成环状后,再用引物①④PCR扩增后测序

D.用DNA连接酶连接成环状后,再用引物②③PCR扩增后测序

5.重叠延伸PCR技术是采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成重

叠链,从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸,获得想要的目的

基因。某科研团队运用重叠延伸PCR技术在水蛭素基因的特定位点引

入特定突变,以实现基因的定点突变,原理如图。下列说法错误的是

()

位点

拟突变

:^亍疏

r

=

5

:r

后的基

突变

点。

突变位

互补的

链不能

与模板

处代表

起凸起

注:引

核甘酸

脱氧

、4种

、引物

模板

DNA

冲液、

"的缓

含Mg

②需要

A.过程

合醯

DNA聚

温的

耐高

系统

的反应

4组成

引物

物3、

和引

系统

反应

成的

物2组

1、引

引物

B.若

NA分子

2种D

产生

共会

,一

复制后

子的

DNA分

一次

进行

中均

获得

程⑤

经过

可以

一种

只有

其中

种,

A有2

交DN

的杂

获得

程④

C.经过

目的基

引物

需要

伸,不

合酶延

DNA聚

温的

耐高

使用

程⑤

D.过

择题

非选

二、

急救药

血栓的

梗和脑

,是心

解血栓

高效降

蛋白能

t-PA

内的

6.人体

胱氨

的半

84位

白第

PA蛋

将t—

如果

血。

颅内出

会诱发

量使用

但大剂

行序

因进

为基

的力一

对天然

用。先

血副作

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