环境内分泌干扰物子宫内膜异位症课题申报书

环境内分泌干扰物子宫内膜异位症课题申报书一、封面内容

项目名称：环境内分泌干扰物与子宫内膜异位症关联机制及防治策略研究

申请人姓名及联系方式：张明，zhangming@

所属单位：国家卫生健康委员会内分泌与代谢疾病重点实验室

申报日期：2023年11月15日

项目类别：应用基础研究

二．项目摘要

子宫内膜异位症（Endometriosis,EM）是一种常见的妇科慢性疾病，其病理特征为子宫内膜异位生长并侵及子宫外器官，导致盆腔疼痛、不孕及严重生活质量下降。近年来，环境内分泌干扰物（Endocrine-DisruptingChemicals,EDCs）作为一类能够干扰机体内分泌系统的外源性化学物质，其在子宫内膜异位症发病机制中的潜在作用日益受到关注。现有研究表明，多种EDCs（如双酚A、邻苯二甲酸酯类、多氯联苯等）可通过模拟或拮抗雌激素、影响炎症反应及免疫调节等途径，与子宫内膜异位症的病理进程密切相关。然而，EDCs对子宫内膜异位症的具体作用机制、剂量-效应关系及跨物种传播规律仍需深入研究。

本项目旨在系统探究EDCs与子宫内膜异位症的关联机制及防治策略，采用多维度研究方法，结合体外细胞模型、动物实验及临床样本分析，重点从以下方面展开：

1.**EDCs对子宫内膜异位细胞生物学行为的干预机制**：通过建立体外子宫内膜异位细胞模型，筛选并验证关键EDCs的致异位效应，深入解析其通过影响细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移等生物学行为的作用路径，并揭示相关信号通路（如MAPK/ERK、PI3K/AKT等）的介导作用。

2.**EDCs在子宫内膜异位症动物模型中的致病效应**：构建EDCs暴露的子宫内膜异位症动物模型，评估不同暴露剂量及时间对异位病灶形成、炎症反应及免疫微环境的影响，并结合基因组学、蛋白质组学及代谢组学技术，解析EDCs的分子毒理机制。

3.**临床样本验证与流行病学分析**：收集子宫内膜异位症患者血清、异位病灶及正常内膜样本，检测EDCs及其代谢产物水平，结合病例对照研究，分析EDCs暴露与疾病风险、严重程度及治疗效果的关联性，并建立风险预测模型。

4.**防治策略探索**：基于上述研究结果，筛选具有潜在解毒或抗异位作用的天然产物或小分子化合物，开展初步的干预实验，为子宫内膜异位症的精准防治提供新靶点及临床参考。

预期成果包括明确EDCs在子宫内膜异位症中的关键作用机制，建立EDCs暴露风险评估体系，并提出基于环境干预的防治策略建议，为临床实践提供科学依据，同时推动内分泌干扰物相关法规的完善。本项目的实施将深化对子宫内膜异位症环境病因学的认识，并为该疾病的防治提供创新思路。

三.项目背景与研究意义

子宫内膜异位症（Endometriosis,EM）是一种常见的妇科慢性疾病，其特征为子宫内膜异位生长并侵及子宫外器官，如卵巢、子宫直肠陷凹、膀胱等，导致盆腔疼痛、性交疼痛、慢性盆腔炎、月经不调、不孕及严重生活质量下降。世界卫生（WHO）估计，子宫内膜异位症的全球患病率约为10%，在育龄女性中尤其常见，且近年来其发病率呈现上升趋势。尽管子宫内膜异位症的病理生理机制已得到一定程度的阐明，涉及雌激素依赖性、炎症反应、免疫异常、细胞凋亡障碍及基质重塑等多个方面，但其确切的发病机制仍不明确，且缺乏有效的预防和治疗手段，特别是针对早期病变的干预措施。

目前，子宫内膜异位症的治疗主要包括药物治疗（如口服避孕药、孕激素类药物、假性绝经疗法等）和手术治疗（如腹腔镜子宫内膜异位病灶切除术、卵巢功能囊肿剔除术等）。然而，这些治疗方法存在一定的局限性。药物治疗往往需要长期服用，可能产生不良反应，且部分患者存在药物耐药性；手术治疗虽然能有效缓解症状，但存在复发风险，且对于微小或深部病灶的清除效果有限。此外，现有治疗手段对于疾病的病因干预不足，缺乏针对环境因素导致的子宫内膜异位症的预防策略。

近年来，越来越多的研究表明，环境内分泌干扰物（Endocrine-DisruptingChemicals,EDCs）在子宫内膜异位症的发病机制中扮演着重要角色。EDCs是一类能够干扰机体正常内分泌功能的化学物质，广泛存在于环境中，包括食品容器、塑料制品、化妆品、工业废水、农药等。它们能够模拟或拮抗雌激素，影响激素的合成、代谢和信号传导，进而干扰机体的生理功能。大量流行病学研究显示，EDCs暴露与子宫内膜异位症的发生风险增加存在关联。例如，双酚A（BisphenolA,BPA）是一种常见的EDCs，已被证实能够干扰雌激素信号通路，促进子宫内膜细胞的增殖和侵袭，并加剧炎症反应。邻苯二甲酸酯类（Phthalates）作为另一种常见的EDCs，也被发现能够影响生殖系统的发育和功能，并与子宫内膜异位症的发生风险增加相关。此外，多氯联苯（PolychlorinatedBiphenyls,PCBs）、农药（如滴滴涕DDT）、重金属（如铅、镉）等EDCs也被报道与子宫内膜异位症存在潜在关联。

然而，尽管已有部分研究关注EDCs与子宫内膜异位症的关联，但该领域仍存在诸多问题和研究空白。首先，现有研究的样本量较小，且多为横断面研究，难以确定EDCs暴露与子宫内膜异位症之间的因果关系。其次，不同EDCs的毒性效应和作用机制复杂多样，且存在剂量-效应关系和非阈值效应，这使得风险评估和机制解析更加困难。此外，EDCs在体内的代谢和排泄过程复杂，且存在个体差异，这使得体内EDCs水平的准确检测和长期追踪面临挑战。最后，现有研究主要集中在EDCs对子宫内膜异位症的影响，缺乏对EDCs与其他环境因素、遗传因素及生活方式因素交互作用的综合研究。

因此，深入研究EDCs与子宫内膜异位症的关联机制及防治策略具有重要的研究必要性和现实意义。本项目旨在系统探究EDCs在子宫内膜异位症发病机制中的作用，并探索基于环境干预的防治策略，以期为子宫内膜异位症的预防和治疗提供新的思路和方法。

从社会价值来看，本项目的研究成果将有助于提高公众对环境内分泌干扰物的认识，促进环境保护和食品安全意识的提升，从而降低育龄女性子宫内膜异位症的发生风险。同时，本项目的研究成果也将为政府制定相关政策提供科学依据，例如加强环境内分泌干扰物的监管，限制其在食品、化妆品等领域的使用，以及开展环境内分泌干扰物的污染监测和风险评估等。此外，本项目的研究成果还将为临床医生提供新的诊断和治疗方法，改善子宫内膜异位症患者的预后，提高其生活质量。

从经济价值来看，子宫内膜异位症是一种常见的妇科疾病，其治疗费用高昂，给患者和家庭带来沉重的经济负担。据统计，全球子宫内膜异位症的治疗费用每年高达数百亿美元。本项目的研究成果将有助于开发新的、更有效的治疗药物和方法，降低治疗费用，减轻患者的经济负担。同时，本项目的研究成果也将促进相关产业的发展，例如环境监测、药物研发、医疗器械等产业，为经济发展注入新的活力。

从学术价值来看，本项目的研究将推动子宫内膜异位症和环境内分泌干扰物两个领域的研究进展。本项目的研究成果将丰富子宫内膜异位症的病因学和病理生理学知识，为该领域的研究提供新的理论和方法。同时，本项目的研究成果也将为环境内分泌干扰物的研究提供新的视角和思路，推动该领域的研究向纵深发展。此外，本项目的研究成果还将促进多学科交叉融合，推动生命科学、环境科学、医学等多个领域的研究进展。

四.国内外研究现状

子宫内膜异位症（Endometriosis,EM）的病因学复杂，涉及遗传、免疫、激素、炎症及环境等多种因素。近年来，环境内分泌干扰物（Endocrine-DisruptingChemicals,EDCs）作为一类能够干扰机体正常内分泌功能的化学物质，其在子宫内膜异位症发病机制中的作用日益受到关注。国内外学者在该领域开展了大量研究，取得了一定的进展，但仍存在诸多未解决的问题和研究空白。

**国内研究现状**

国内学者在子宫内膜异位症和EDCs研究领域起步相对较晚，但近年来发展迅速，取得了一系列重要成果。在流行病学研究方面，国内学者开展了多项关于EDCs暴露与子宫内膜异位症发生风险关联的研究。例如，一些研究报道了BPA暴露与子宫内膜异位症发病风险增加存在关联，并提出BPA可能通过影响雌激素信号通路、促进子宫内膜细胞增殖和侵袭等途径参与子宫内膜异位症的发病。此外，国内学者还研究了邻苯二甲酸酯类、多氯联苯等EDCs与子宫内膜异位症的关联，发现这些EDCs也可能与子宫内膜异位症的发生风险增加相关。

在机制研究方面，国内学者主要关注EDCs对子宫内膜异位细胞生物学行为的影响。一些研究表明，BPA能够促进子宫内膜异位细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移，并上调相关基因和蛋白的表达，如血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMPs）等。此外，国内学者还研究了EDCs对子宫内膜异位症患者免疫微环境的影响，发现EDCs暴露可能加剧子宫内膜异位症的炎症反应，并影响免疫细胞的功能。

在临床研究方面，国内学者探索了EDCs暴露与子宫内膜异位症患者临床特征、治疗效果及预后的关系。一些研究表明，EDCs暴露可能与子宫内膜异位症的严重程度增加、不孕风险升高及治疗效果下降相关。此外，国内学者还尝试将EDCs检测应用于子宫内膜异位症的早期诊断和预后评估，但相关研究尚处于初步阶段。

然而，国内在子宫内膜异位症和EDCs研究领域仍存在一些问题和不足。首先，国内研究的样本量相对较小，且多为横断面研究，难以确定EDCs暴露与子宫内膜异位症之间的因果关系。其次，国内研究的实验设计和方法学有待改进，例如缺乏严格的对照组、样本量不足、检测方法不够灵敏等。此外，国内研究的经费投入相对较少，制约了研究的深入发展。

**国外研究现状**

国外学者在子宫内膜异位症和EDCs研究领域起步较早，积累了丰富的经验，取得了一系列重要成果。在流行病学研究方面，国外学者开展了大量关于EDCs暴露与子宫内膜异位症发生风险关联的研究。例如，一些经典的研究报道了BPA暴露与子宫内膜异位症发病风险增加存在关联，并提出BPA可能通过影响雌激素信号通路、促进子宫内膜细胞增殖和侵袭等途径参与子宫内膜异位症的发病。此外，国外学者还研究了邻苯二甲酸酯类、多氯联苯、农药、重金属等EDCs与子宫内膜异位症的关联，发现这些EDCs也可能与子宫内膜异位症的发生风险增加相关。

在机制研究方面，国外学者主要关注EDCs对子宫内膜异位细胞生物学行为的影响。一些研究表明，BPA能够促进子宫内膜异位细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移，并上调相关基因和蛋白的表达，如血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMPs）等。此外，国外学者还研究了EDCs对子宫内膜异位症患者免疫微环境的影响，发现EDCs暴露可能加剧子宫内膜异位症的炎症反应，并影响免疫细胞的功能。一些研究还发现EDCs可以影响子宫内膜细胞的干细胞特性，从而影响子宫内膜异位症的发病。

在临床研究方面，国外学者探索了EDCs暴露与子宫内膜异位症患者临床特征、治疗效果及预后的关系。一些研究表明，EDCs暴露可能与子宫内膜异位症的严重程度增加、不孕风险升高及治疗效果下降相关。此外，国外学者还尝试将EDCs检测应用于子宫内膜异位症的早期诊断和预后评估，并取得了一些初步成果。

然而，国外在子宫内膜异位症和EDCs研究领域也面临一些挑战和问题。首先，虽然国外研究的样本量较大，且多为队列研究或病例对照研究，但仍难以确定EDCs暴露与子宫内膜异位症之间的因果关系。其次，EDCs的毒性效应和作用机制复杂多样，且存在剂量-效应关系和非阈值效应，这使得风险评估和机制解析更加困难。此外，EDCs在体内的代谢和排泄过程复杂，且存在个体差异，这使得体内EDCs水平的准确检测和长期追踪面临挑战。最后，国外研究也缺乏对EDCs与其他环境因素、遗传因素及生活方式因素交互作用的综合研究。

**研究空白**

尽管国内外学者在子宫内膜异位症和EDCs研究领域取得了一定的进展，但仍存在诸多未解决的问题和研究空白。首先，EDCs暴露与子宫内膜异位症之间的因果关系尚未明确，需要开展更多高质量的研究，如前瞻性队列研究、病例对照研究及干预实验等，以确定EDCs暴露与子宫内膜异位症之间的因果关系。其次，EDCs的毒性效应和作用机制复杂多样，需要开展更深入的机制研究，以揭示EDCs如何影响子宫内膜异位症的发病过程。此外，EDCs在体内的代谢和排泄过程复杂，需要开展更精确的检测方法，以准确评估体内EDCs水平。最后，需要开展更多关于EDCs与其他环境因素、遗传因素及生活方式因素交互作用的研究，以全面评估EDCs对子宫内膜异位症的影响。

综上所述，深入研究EDCs与子宫内膜异位症的关联机制及防治策略具有重要的研究必要性和现实意义。本项目将系统探究EDCs在子宫内膜异位症发病机制中的作用，并探索基于环境干预的防治策略，以期为子宫内膜异位症的预防和治疗提供新的思路和方法。

五.研究目标与内容

本项目旨在系统探究环境内分泌干扰物（EDCs）与子宫内膜异位症（EM）的关联机制，并探索有效的防治策略，以期为EM的预防和治疗提供新的科学依据。围绕这一总体目标，本项目设定了以下具体研究目标：

1.**明确关键EDCs对子宫内膜异位细胞的致病效应及其剂量-效应关系**：筛选并鉴定与EM发病显著相关的关键EDCs，并通过体外细胞实验明确这些EDCs对子宫内膜异位细胞（如EM相关间质细胞、内膜上皮细胞）的生物学行为（增殖、凋亡、侵袭、迁移、血管生成等）的影响，建立其剂量-效应关系模型。

2.**揭示关键EDCs诱导子宫内膜异位症的分子机制**：深入解析关键EDCs影响EM细胞生物学行为的分子通路和信号分子，重点研究其与雌激素信号通路（如ERα/ERβ）、炎症反应通路（如NF-κB、NLRP3炎症小体）、细胞基质重塑通路（如MMPs/TIMPs）及免疫微环境调节的相互作用机制。

3.**建立并验证EDCs暴露与EM发生发展的动物模型**：构建模拟人类EDCs暴露的EM动物模型，评估不同EDCs种类、剂量及暴露时间对动物模型异位病灶形成、盆腔炎症反应、免疫功能及生育能力的影响，并在模型中验证关键分子机制。

4.**评估EDCs暴露水平与EM患者临床特征的关联性**：收集EM患者及健康对照组的临床样本（血清、异位病灶、正常子宫内膜），检测关键EDCs及其代谢产物水平，分析EDCs暴露水平与患者年龄、病程、病灶分期、严重程度、不孕情况、治疗反应等临床特征的关联性。

5.**探索基于EDCs干预的EM防治策略**：基于上述机制研究发现的潜在靶点，筛选并评估具有拮抗EDCs致病效应或改善EM病理状态的天然产物、药物或环境调控措施，为EM的精准预防和治疗提供新的策略选项。

基于上述研究目标，本项目将开展以下详细研究内容：

1.**关键EDCs筛选与EM细胞模型建立及功能研究**：

***研究问题**：哪些常见EDCs（如BPA、邻苯二甲酸酯类DEHP/DINP、多氯联苯PCBs、农药如滴滴涕DDT、重金属如镉Cd等）对子宫内膜异位细胞具有显著致病效应？其作用是否具有剂量依赖性？

***研究内容**：收集并鉴定临床EM异位病灶和正常内膜，利用高通量筛选技术（如高通量LC-MS/MS）检测其中的EDCs残留水平，结合文献回顾和流行病学研究数据，筛选出与EM关联性较高的关键EDCs。在体外，分别建立EM相关间质细胞（如iSCs）和内膜上皮细胞（如EICs）的细胞模型，暴露于不同浓度和种类的筛选出的EDCs中，通过CCK-8法、流式细胞术（检测凋亡率）、Transwell实验（检测侵袭能力）、划痕实验（检测迁移能力）等方法，评估EDCs对细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。建立剂量-效应关系模型，明确各EDCs的半数效应浓度（EC50）。

***研究假设**：多种常见EDCs能够剂量依赖性地促进EM相关细胞的增殖、侵袭和迁移，抑制其凋亡，并存在特定的剂量-效应关系。

2.**EDCs诱导EM的分子机制研究**：

***研究问题**：关键EDCs通过哪些分子通路和信号分子影响EM细胞的生物学行为及其与雌激素信号通路、炎症通路、基质重塑通路及免疫微环境的相互作用机制是什么？

***研究内容**：针对在第一步中筛选出的关键EDCs，利用WesternBlot、免疫荧光、qRT-PCR、RNA测序（RNA-seq）等技术，检测EDCs处理后EM细胞中关键信号通路分子（如ERα/ERβ、MAPK、PI3K/AKT、NF-κB、NLRP3、MMPs、TIMPs等）的表达和磷酸化水平变化。通过小干扰RNA（siRNA）或过表达质粒技术，进行信号通路关键节点的功能验证。构建EM细胞与免疫细胞（如巨噬细胞、T细胞）共培养模型，研究EDCs如何影响免疫细胞极化、细胞因子分泌及免疫微环境的形成。利用分子对接等技术，探索EDCs与关键受体或酶的相互作用。

***研究假设**：关键EDCs主要通过非基因组途径快速激活下游信号通路（如MAPK/ERK、PI3K/AKT），并干扰雌激素信号通路，同时诱导慢性炎症反应和细胞外基质重塑，进而促进EM发生发展，且其作用与免疫微环境的异常密切相关。

3.**EDCs暴露EM动物模型的建立与验证**：

***研究问题**：在动物模型中，关键EDCs暴露能否诱导类似人类的EM病理改变？能否重现EM的关键特征（异位病灶形成、炎症、免疫异常）？

***研究内容**：选择合适的动物模型（如SD大鼠或小鼠），通过灌胃、皮下注射或环境暴露等方式，构建不同种类、剂量和时间的EDCs暴露模型。联合使用雌激素或手术方法（如卵巢切除）诱导EM病灶形成。通过HE染色、免疫组化、免疫荧光等方法，观察和评估异位病灶的大小、数量、学特征。检测盆腔的炎症因子（如TNF-α、IL-6、IL-1β）水平、免疫细胞浸润情况（如巨噬细胞、淋巴细胞标记物）。评估EDCs暴露对动物体重、繁殖能力、激素水平（如E2、P4）的影响。

***研究假设**：特定种类和剂量的EDCs暴露能够成功诱导动物模型产生EM样病灶，并伴随盆腔炎症反应和免疫微环境改变，其严重程度与暴露剂量相关。

4.**EDCs暴露水平与EM患者临床特征关联性分析**：

***研究问题**：EM患者体内关键EDCs的暴露水平如何？其水平与患者的临床病理特征（如分期、严重程度、不孕、治疗效果等）是否存在关联？

***研究内容**：收集一批已确诊的EM患者血清、异位病灶和正常子宫内膜样本，以及匹配的健康对照组样本。利用高灵敏度、高选择性的分析方法（如GC-MS/MS、LC-MS/MS），检测样本中多种EDCs及其主要代谢产物的浓度。统计分析不同临床分组（如不同分期、不孕/妊娠、用药史等）患者样本中EDCs水平的差异。建立多变量回归模型，分析EDCs暴露水平与EM临床特征之间的关联强度和方向，并尝试构建EM风险预测模型。

***研究假设**：EM患者体内特定EDCs（尤其是BPA、邻苯二甲酸酯类等）的浓度显著高于健康对照组，且其暴露水平与EM的严重程度、不孕风险及治疗效果存在显著正相关。

5.**基于EDCs干预的EM防治策略探索**：

***研究问题**：是否存在能够有效拮抗关键EDCs致病效应或改善EM病理状态的干预措施？

***研究内容**：基于前述机制研究发现的EDCs作用靶点和通路，筛选具有潜在解毒、抗炎、抗凋亡、抗侵袭等活性的天然产物（如植物提取物）或小分子化合物。在体外EM细胞模型中，评估这些候选干预措施对EDCs诱导的生物学效应的逆转能力。筛选出活性较强的候选物后，在EM动物模型中进行初步的干预实验，评估其对异位病灶形成、炎症反应及生育能力的影响。同时，结合临床样本，探索这些干预措施在体内的可行性和安全性。

***研究假设**：部分天然产物或小分子化合物能够有效逆转关键EDCs的致病效应，改善EM细胞行为和动物模型病理改变，为EM的防治提供新的策略选择。

六.研究方法与技术路线

本项目将采用多学科交叉的研究方法，结合分子生物学、细胞生物学、免疫学、病理学、动物模型学和流行病学等多种技术手段，系统研究环境内分泌干扰物与子宫内膜异位症的关联机制及防治策略。研究方法和技术路线具体如下：

**1.研究方法**

1.1**流行病学研究方法**：

***病例对照研究设计**：选择200例子宫内膜异位症患者（根据国际妇产科联盟[AFC]分期分级）作为病例组，同期选择200例因其他妇科疾病（如子宫肌瘤、卵巢囊肿等）行手术且病理证实无子宫内膜异位症的健康女性作为对照组。收集所有研究对象的临床资料（年龄、月经史、生育史、不孕情况、手术史、用药史等）和生活方式信息（饮食习惯、职业暴露等）。采集血液、异位病灶及正常子宫内膜样本。利用高灵敏度、高选择性的分析方法（如GC-MS/MS、LC-MS/MS），检测样本中多种EDCs（包括BPA、邻苯二甲酸酯类DEHP、DINP、多氯联苯PCBs、滴滴涕DDT、七氯Heptachlor、α-六六六Alpha-HCH、γ-六六六Gamma-HCH、镉Cd、铅Pb等）及其主要代谢产物的浓度。采用多元线性回归、Logistic回归模型，分析EDCs暴露水平与EM发生风险及临床特征（分期、严重程度、不孕等）的关联性，并调整潜在混杂因素（如年龄、体重指数、吸烟、饮酒等）。计算比值比（OR）及其95%置信区间（CI）。

***数据收集**：通过标准化的问卷和病历回顾收集临床和生活方式数据。样本采集和储存严格遵循规范操作流程，避免污染。

***统计分析**：使用SPSS或R等统计软件进行数据分析。首先进行描述性统计分析，然后进行单因素和多因素回归分析。对于非正态分布数据采用秩转换。利用Spearman秩相关分析EDCs浓度之间的关联性。

1.2**体外细胞实验方法**：

***细胞模型建立与处理**：分离培养人子宫内膜间质细胞（EMSCs）和内膜上皮细胞（EICs），或使用商业化的EM相关细胞系。将细胞分为对照组和不同浓度梯度（如0,0.1,1,10,100µM）的EDCs处理组。处理时间根据文献报道和预实验结果确定（如24h,48h,72h）。同时设置雌激素（如E2）处理组作为阳性对照。

***生物学行为检测**：

***增殖**：采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖活性。取平均值和标准差，进行统计学分析。

***凋亡**：通过AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率。使用FlowJo软件进行数据分析。

***侵袭**：采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。计数穿过膜的细胞数，进行统计学分析。

***迁移**：采用划痕实验检测细胞迁移能力。观察并记录划痕愈合情况，计算愈合率，进行统计学分析。

***分子水平检测**：

***信号通路**：采用WesternBlot检测关键信号通路分子（如ERα/β、p-ERK/ERK、p-AKT/AKT、p-NF-κB/p65、p-JNK/JNK、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2等）的表达和磷酸化水平变化。使用β-actin作为内参。采用ImageJ软件进行灰度值分析。

***基因表达**：采用qRT-PCR检测相关基因（如雌激素受体、炎症因子、细胞因子、细胞凋亡相关基因、基质金属蛋白酶等）的mRNA表达水平变化。使用内参基因（如GAPDH）进行标准化。

***RNA测序（RNA-seq）**：对高浓度EDCs处理组和对照组的EM细胞进行RNA-seq，全面筛选差异表达基因（DEGs），并进行基因本体（GO）和KEGG通路富集分析，以揭示EDCs影响EM细胞的核心分子网络和信号通路。

1.3**动物模型研究方法**：

***动物模型建立**：选择成年雌性SD大鼠或ICR小鼠，建立EM动物模型。通常采用两种策略：一是结合化学暴露和激素诱导。例如，腹腔注射或皮下植入慢释雌激素（E2）装置，同时通过灌胃等方式给予特定EDCs（如BPA或DEHP）或溶剂作为对照组。二是利用已建立的EM细胞移植模型，将处理后的EM细胞移植到小鼠的盆腔皮下或卵巢部位。

***模型评估**：

***大体观察**：定期观察并记录动物体重变化、行为学变化（如活动度、疼痛反应）、盆腔器官外观及异位灶大小、数量和位置。

***学分析**：处死动物后，完整剥离盆腔器官，固定、脱水、石蜡包埋、切片。采用HE染色观察异位灶的学特征，参照AFC标准进行分期。采用免疫组化（IHC）或免疫荧光（IF）检测关键分子（如ERα、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、CD11b、F4/80（巨噬细胞）、CD3（T细胞）、IL-6、TNF-α等）在异位灶的表达和定位。

***炎症因子检测**：采用ELISA试剂盒检测盆腔中炎症因子（如TNF-α、IL-1β、IL-6等）的含量。

***激素水平检测**：检测血清中的雌激素（E2）、孕酮（P4）等激素水平。

1.4**干预实验方法**：

***候选化合物筛选**：基于前期机制研究（如RNA-seq、通路分析）或文献筛选，选择具有潜在抗EM活性的天然产物（如从中药或植物中提取的化合物）或已知药物。在体外EM细胞模型中，评估其对关键EDCs（如BPA）诱导的增殖、凋亡、侵袭等生物学效应的逆转能力。

***体内干预实验**：在已建立的EM动物模型中，给予候选化合物干预（如灌胃），同时设置EDCs暴露组、溶剂对照组和阳性药物对照组。评估干预后动物模型的异位灶大小、数量、学特征、炎症反应、免疫微环境以及生育能力的变化。

1.5**质量控制方法**：

***样本质量**：确保所有临床和样本新鲜、保存规范，避免降解。细胞培养定期检测无菌和活力。

***实验重复性**：关键实验（如细胞实验、动物实验）设置适当的重复次数（如n≥3-6）。分子生物学实验严格遵守操作规程，使用标准品和内参控制实验质量。

***方法验证**：对于新的检测方法（如EDCs检测方法），进行方法学验证，包括线性范围、灵敏度、准确度、精密度等。

***盲法操作**：在可能的情况下，采用盲法设计减少主观偏倚。

**2.技术路线**

本项目的研究技术路线遵循“临床观察-细胞机制-动物验证-干预探索”的逻辑顺序，具体流程如下：

**第一阶段：临床流行病学研究与样本收集（时间：6个月）**

1.确定研究人群，完成病例对照招募与临床信息收集。

2.采集血液、EM病灶和正常内膜样本，-80℃冻存备用。

3.利用GC-MS/MS、LC-MS/MS等方法检测样本中EDCs浓度。

4.运用统计学方法分析EDCs暴露水平与EM临床特征及发生风险的关联。

**第二阶段：体外细胞模型建立与机制研究（时间：12个月）**

1.分离培养和鉴定EMSCs和EICs。

2.暴露细胞于不同浓度梯度EDCs，检测其生物学行为（增殖、凋亡、侵袭、迁移）。

3.检测EDCs处理后细胞信号通路、炎症相关分子、雌激素受体表达等变化。

4.通过RNA-seq筛选核心差异表达基因和通路，深入解析机制。

5.进行siRNA或过表达实验验证关键通路节点。

**第三阶段：EDCs暴露EM动物模型建立与验证（时间：12个月）**

1.按照预定方案建立EM动物模型（化学+激素诱导或细胞移植）。

2.定期观察动物大体表现，收集血液和样本。

3.进行学（HE染色、AFC分期）、免疫组化/荧光染色、炎症因子ELISA、激素水平检测等。

4.验证体外发现的机制在动物模型中的体现，评估模型的成功率。

**第四阶段：干预策略探索（时间：12个月）**

1.基于机制研究结果，筛选候选干预化合物（天然产物或小分子）。

2.在体外EM细胞模型中，评估候选化合物对EDCs致病效应的逆转能力。

3.在EM动物模型中，进行体内干预实验，评估候选化合物的抗EM效果及安全性。

4.初步分析干预效果的作用机制。

**第五阶段：总结与成果整理（时间：6个月）**

1.整合所有研究结果，进行系统性总结和深入讨论。

2.撰写研究论文、专利申请（如适用）和项目总结报告。

3.准备研究成果的学术交流与成果推广。

通过上述研究方法和技术路线，本项目旨在多层面、系统地揭示EDCs与EM的关联机制，为EM的早期预警、精准防治提供坚实的科学基础和实践指导。

七．创新点

本项目拟围绕环境内分泌干扰物与子宫内膜异位症的关联机制及防治策略展开深入研究，在理论、方法和应用层面均体现出显著的创新性：

**1.理论创新：拓展EM病因学认知，强调环境因素的核心作用**

现有关于子宫内膜异位症的病因学研究多聚焦于遗传易感性、激素失衡、免疫异常和基质重塑等传统因素，对环境因素的系统性研究尚显不足，且对其在EM发生发展中的具体作用机制和相对重要性缺乏清晰认识。本项目的主要理论创新在于，将环境内分泌干扰物作为EM发病的关键驱动因素进行系统性整合研究，挑战传统上对EM病因的单一或简单归因模式。项目不仅旨在证实特定EDCs与EM发生风险的关联性，更致力于深入揭示EDCs如何通过**非基因组途径**和**基因组途径**协同作用，干扰子宫内膜细胞的正常生理功能，促进其异位种植、侵袭、存活和免疫逃逸。例如，项目将关注EDCs对**瞬时受体电位（TRP）通道**、**孤儿G蛋白偶联受体（OGPCRs）**等非经典雌激素受体的激活，以及由此引发的下游信号通路（如钙信号通路、MAPK/ERK、PI3K/AKT）的复杂调控，为理解EM的“类雌激素效应”提供新的分子解释。此外，项目将探索EDCs与其他环境污染物（如重金属、农药）、生活方式因素（如饮食、肥胖）以及遗传因素的**交互作用**，构建更为全面和动态的EM环境病因学理论框架，强调环境暴露在EM发病中的**早期启动**和**长期维持**作用，从而为EM的预防和早期干预提供全新的理论视角。

**2.方法创新：采用多组学整合与前沿技术，实现机制解析的深度与广度**

本项目在研究方法上体现出的创新性主要体现在多组学技术的综合应用、动物模型的优化以及研究设计的严谨性上。首先，项目将**整合应用转录组学（RNA-seq）、蛋白质组学（LC-MS/MS）、代谢组学（LC-MS/MS）**等多种组学技术，对EDCs处理的EM细胞和动物模型进行系统性分析。通过比较对照组与处理组的“组学谱”，能够全面、深入地揭示EDCs暴露后引起的分子水平变化网络，不仅能够发现单一分子层面的变化，更能揭示**基因-蛋白-代谢物**之间的相互作用和调控关系，从而更准确地把握EDCs影响EM的关键通路和核心靶点。其次，在动物模型构建方面，项目将尝试优化现有的EM动物模型，例如，结合**慢释雌激素装置+EDCs灌胃**的方式，更精确地模拟人类体内长期、低剂量暴露的实际情况；或利用**CRISPR/Cas9基因编辑技术**构建特定基因缺陷型小鼠，以研究遗传背景对EDCs易感性的影响。此外，项目将引入**单细胞测序技术（scRNA-seq,scATAC-seq）**，解析EM病灶中不同细胞类型（如EM细胞、免疫细胞、间质细胞）在EDCs暴露下的异质性及其功能变化，为理解EM的复杂微环境提供单细胞水平的精细解析。最后，在临床研究部分，项目将采用**高灵敏度、高选择性的多残留分析方法（GC-MS/MS,LC-MS/MS）**对复杂基质（血液、）中的多种EDCs进行准确定量，并结合**分子印迹技术**等富集方法提高检测灵敏度，确保流行病学研究结果的准确性和可靠性。

**3.应用创新：聚焦精准防治，探索环境干预与个体化治疗的新策略**

本项目的研究成果不仅具有重要的理论价值，更具有显著的应用创新潜力，旨在为EM的临床防治提供新的策略和工具。其应用创新性主要体现在以下几个方面：第一，**建立基于EDCs暴露水平的EM风险预测模型**。通过整合流行病学研究数据，分析EDCs暴露水平与EM临床特征、发生风险的相关性，结合其他危险因素（如遗传、激素水平），构建预测模型，有望实现EM的早期识别和风险评估，为高危人群提供针对性预防建议。第二，**发现并验证EDCs拮抗剂或新型治疗药物**。基于体外和体内干预实验，筛选出能够有效逆转EDCs致病效应、改善EM病理特征的天然产物或小分子化合物。这些候选物不仅可能作为EM的**环境干预剂**（如开发环境净化技术或个人防护措施），也可能作为**新型治疗药物**（如开发针对EDCs作用靶点的靶向治疗药物），为EM的治疗提供新的选择，特别是对于那些对传统激素治疗无效或不耐受的患者。第三，**提出基于环境管理的EM预防策略**。项目的研究结果将为政府制定相关政策提供科学依据，例如，明确需要优先控制的环境EDCs种类，提出限制其在食品包装、塑料制品、化妆品等领域的使用的建议，改善环境质量，从源头上降低人群EDCs暴露水平，从而降低EM的发生风险。第四，**促进个体化医疗的发展**。通过对EDCs暴露水平、遗传背景、病理特征和治疗反应的综合分析，有助于实现EM的个体化诊疗，为患者制定更加精准、有效的治疗方案提供支持。

综上所述，本项目在理论认知、研究方法和实际应用层面均具有显著的创新性。通过系统研究EDCs与EM的关联机制，不仅能够深化对EM复杂病因和发病过程的理解，更有望为EM的早期预防、精准诊断和个体化治疗提供新的科学依据和技术支撑，具有重要的学术价值和广阔的应用前景。

八．预期成果

本项目旨在系统探究环境内分泌干扰物（EDCs）与子宫内膜异位症（EM）的关联机制及防治策略，基于其深入研究，预期将取得以下理论成果和实践应用价值：

**1.理论成果**

1.1**阐明EDCs致EM的关键分子机制**：通过体外细胞实验、动物模型和分子水平分析，本项目预期明确多种关键EDCs（如BPA、邻苯二甲酸酯类、多氯联苯等）影响EM发生发展的核心作用通路和信号分子。预期揭示EDCs不仅通过模拟雌激素信号通路发挥致病作用，还可能通过激活非经典受体、调节炎症微环境、影响细胞间质重塑和免疫逃逸等途径参与EM的病理过程。预期阐明EDCs与雌激素的协同或拮抗作用机制，以及EDCs诱导EM的剂量-效应关系和非阈值效应特征。

1.2**构建EM环境病因学理论框架**：基于临床流行病学研究结果和基础机制发现，本项目预期整合环境因素、遗传因素、激素因素和生活方式因素的交互作用，提出一个更为全面和动态的EM环境病因学理论模型。预期揭示EDCs在EM发病谱中的位置和作用层次，强调其在疾病早期启动和慢性维持中的重要性，为深入理解EM的复杂病因学提供新的理论视角。

1.3**发现EM相关的新型生物标志物**：通过分析EM患者体内EDCs水平、相关信号通路分子表达以及代谢物谱的变化，本项目预期发现与EDCs暴露水平和EM发生发展密切相关的新型生物标志物。这些标志物可能包括特定的EDCs代谢产物、炎症因子、细胞因子、生长因子或特定基因/蛋白的表达水平等，为EM的早期诊断、风险预测和疾病监测提供潜在的理论基础。

**2.实践应用价值**

2.1**建立EM风险预测模型，指导早期预防**：基于临床样本中EDCs暴露水平的测定结果和其他危险因素的统计分析，本项目预期建立一个具有应用价值的EM风险预测模型。该模型有望实现对高危人群的早期识别，为临床医生提供筛查建议，并为公众健康教育和环境干预措施的制定提供科学依据，从而推动EM的早期预防和一级预防工作。

2.2**开发EM防治的新策略和干预措施**：基于对EDCs作用机制的研究和体外、体内干预实验的结果，本项目预期发现并筛选出具有抗EM活性的候选化合物或天然产物，为EM的治疗提供新的药物靶点和候选药物。同时，基于对EDCs环境暴露途径的分析，本项目预期提出针对性的环境干预措施建议，如改进食品包装材料、减少塑料制品使用、加强环境监测与污染治理等，旨在降低人群EDCs暴露水平，从环境角度降低EM的流行风险。

2.3**推动EM个体化诊疗模式的探索**：通过综合分析患者的EDCs暴露水平、遗传背景、疾病特征、治疗反应等信息，本项目预期为EM的个体化诊疗提供初步的理论基础和实践思路。例如，根据患者的EDCs暴露特征选择合适的治疗方案，或针对EDCs作用靶点开发精准治疗药物，以提高治疗效果，改善患者预后。

2.4**为相关政策制定提供科学依据**：本项目的研究成果将为政府监管部门提供关于EDCs危害性的科学证据，支持制定或完善环境内分泌干扰物的管理法规和标准，如限制高风险EDCs在特定领域的应用、加强产品环境风险评估、开展环境EDCs污染监测等。同时，研究成果也将为公共卫生政策的制定提供参考，如开展针对性的人群健康干预项目、加强环境健康教育和风险沟通等。

**3.学术成果**

3.1**发表高水平研究论文**：本项目预期在国内外高水平学术期刊上发表系列研究论文，系统地报道EDCs与EM的关联性、作用机制、风险预测模型和干预策略研究，提升我国在EM和环境内分泌干扰物交叉领域的研究影响力。

3.2**申请相关专利**：对于研究过程中发现的具有潜在临床应用价值的候选干预化合物或诊断标志物，将进行专利检索和评估，必要时申请相关发明专利或实用新型专利，保护知识产权，为后续成果转化奠定基础。

3.3**促进学术交流与合作**：通过参加国内外学术会议、邀请国内外专家学者进行学术交流与合作研究，推动EM和环境内分泌干扰物领域的学术发展，促进多学科交叉融合，提升研究团队的整体科研能力。

综上所述，本项目预期在理论层面深化对EM病因学和环境内分泌干扰物致病机制的认识，在实践层面为EM的早期预防、精准诊断和个体化治疗提供新的科学依据和技术支撑，并为相关政策制定提供参考，具有重要的学术价值和广阔的应用前景。

九．项目实施计划

本项目实施周期为五年，将按照“临床研究-基础研究-动物模型-干预探索-成果总结”的逻辑顺序，并结合研究内容的内在联系，分阶段、分步骤地推进。项目组成员将根据各自专业背景和研究经验，明确分工，协同合作，确保项目按计划顺利实施。

**1.项目时间规划与任务分配**

**第一阶段：临床研究与环境样本收集与分析（第1-12个月）**

***任务分配**：由临床研究团队负责病例对照研究的实施，包括研究设计、伦理审查、患者招募、临床信息收集、生物样本采集与管理。由环境毒理团队负责EDCs检测方法的建立与验证，以及临床样本中EDCs浓度的测定。项目负责人统筹协调，定期召开项目启动会和例会，监督进度，解决问题。

***进度安排**：第1-3个月：完成研究方案细化、伦理申请、实验室资质认证、EDCs检测方法学验证和质控方案制定。第4-9个月：完成病例对照研究对象的招募（预期完成200例病例和200例对照），完成临床信息收集和生物样本采集。第10-12个月：完成所有临床样本的EDCs检测，初步进行数据整理和统计分析。

**第二阶段：体外细胞机制研究与模型优化（第13-30个月）**

***任务分配**：由细胞与分子生物学团队负责EM细胞模型的建立与培养，开展EDCs对细胞生物学行为和分子机制的研究。包括细胞实验设计与实施、信号通路分析、RNA测序等。由生物信息学团队负责数据分析与解读。项目负责人负责整体研究方向的把握和跨团队协作。

***进度安排**：第13-18个月：完成EM细胞模型的优化和鉴定，建立稳定高效的体外实验体系。开展EDCs对细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的实验，明确关键EDCs的生物学效应。第19-24个月：通过WesternBlot、qRT-PCR、RNA测序等技术，分析关键EDCs影响EM细胞的分子机制，筛选核心信号通路和差异表达基因。第25-30个月：进行机制验证实验（如siRNA干扰、过表达实验），深入解析EDCs作用的下游靶点和调控网络，完成体外部分的研究报告撰写。

**第三阶段：动物模型建立与机制验证（第31-48个月）**

***任务分配**：由动物实验团队负责EM动物模型的建立与评估，包括模型构建、行为学观察、学分析、免疫组化、炎症因子检测等。由机制研究团队负责结合体外研究结果，在动物模型中验证关键分子机制。由临床与基础研究团队联合分析动物模型与临床数据的关联性。

***进度安排**：第31-36个月：完成EM动物模型的建立，评估模型的成功率和稳定性，进行基础病理学检测。第37-42个月：在动物模型中开展机制验证实验，如特定信号通路干预实验，观察其对异位病灶形成、炎症反应的影响。第43-48个月：完成动物实验数据的整理与分析，结合临床样本数据进行关联性分析，撰写动物实验研究报告，初步探索干预策略。

**第四阶段：干预策略探索与成果总结（第49-60个月）**

***任务分配**：由药物筛选与评价团队负责候选干预化合物（天然产物或小分子）的筛选与体外干预实验。由临床转化团队负责评估干预策略的潜在应用价值。由项目负责人负责汇总所有研究数据，专家进行评审，完成项目结题报告、论文撰写、专利申请等。

***进度安排**：第49-54个月：完成候选干预化合物库的筛选，在体外EM细胞模型中评估其对关键EDCs致病效应的逆转能力。第55-60个月：在动物模型中开展干预实验，评估干预效果及安全性。完成所有实验数据的最终整理与分析，撰写项目结题报告、系列研究论文，进行成果总结与学术交流，提出基于环境管理的EM预防策略建议，为后续的转化应用和进一步研究奠定基础。

**2.风险管理策略**

本项目可能面临以下风险：**研究设计风险**，如病例对照研究样本招募不足或偏倚；**技术风险**，如EDCs检测方法灵敏度不足或假阳性/假阴性率偏高，动物模型构建失败或效果不理想；**进度风险**，如关键实验进展缓慢或失败，导致项目延期；**经费风险**，如研究经费使用效率低下或意外支出增加。针对上述风险，制定以下管理策略：

**研究设计风险**：严格遵循伦理规范，通过多渠道发布招募信息，与多家医院合作开展病例对照研究，采用匿名化设计和盲法评估，确保数据质量。建立质量控制体系，定期对研究方案执行情况进行评估和调整。

**技术风险**：前期充分进行方法学预实验，优化EDCs检测条件，验证方法的线性范围、灵敏度、准确性和精密度。选择经验丰富的技术团队，定期进行技术培训，确保实验操作的规范性和一致性。对于动物模型，选择合适的品系和性别，优化模型构建方案，密切监测模型状态，及时调整实验参数。建立应急预案，如实验失败时迅速分析原因，调整实验方案或补充实验设计。

**进度风险**：制定详细的项目实施计划，明确各阶段任务、时间节点和责任人。定期召开项目例会，跟踪研究进度，及时解决实验中遇到的问题。建立有效的沟通机制，确保信息传递的及时性和准确性。对于可能影响进度的关键节点，提前制定备用方案，如寻找替代实验材料、调整实验设计或增加人力投入。

**经费风险**：严格按照项目预算执行经费使用，建立严格的审批和报销制度。定期进行经费使用情况核算，确保经费使用的合理性和有效性。积极拓展经费来源，如申请横向课题、开展技术服务等。加强成本控制，优化实验方案，避免不必要的浪费。

通过上述风险管理策略，本项目将有效识别和控制潜在风险，确保项目研究的顺利进行，提高研究效率，保证研究成果的质量和实用性。

十.项目团队

本项目由一支多学科交叉的研究团队组成，成员包括临床医学专家、基础研究学者、环境毒理学家、生物信息学家和药物研发人员，均具有丰富的科研经验和扎实的专业背景。团队成员长期从事子宫内膜异位症、环境内分泌干扰物、细胞生物学、分子生物学、免疫学和动物模型等领域的研究，积累了丰富的经验，并取得了一系列研究成果。

**1.团队成员介绍**

***项目负责人**：张教授，主任医师，博士生导师。长期从事妇科内分泌及子宫内膜异位症的临床诊治和研究工作，在子宫内膜异位症病因学、病理生理学及治疗学研究方面积累了丰富的经验。曾主持多项国家级及省部级科研项目，在国内外核心期刊发表多篇高影响力论文，擅长利用激素治疗、手术治疗及介入治疗等方法治疗子宫内膜异位症，并致力于探索其发病机制及防治新策略。

***临床研究团队**：由5名具有丰富临床经验的妇科医生组成，包括3名主任医师和2名副主任医师。团队成员熟悉子宫内膜异位症的临床诊断和治疗，具备扎实的临床功底和科研能力。近年来，团队重点开展子宫内膜异位症的临床队列研究和病例对照研究，积累了大量的临床数据和生物样本资源。团队成员在临床研究中擅长病例选择、临床信息收集和生物样本的标准化管理和质量控制。

***基础研究团队**：由4名具有深厚分子生物学、细胞生物学及免疫学背景的教授和研究员组成。团队成员长期从事子宫内膜异位症的基础研究，在细胞信号通路、炎症反应、免疫微环境及基质重塑等方面具有深入的研究基础。团队成员熟练掌握多种分子生物学技术、细胞培养技术、动物模型构建技术及免疫组化技术等，并具有丰富的实验经验和创新研究思维。近年来，团队在子宫内膜异位症的基础研究方面取得了一系列重要成果，发表了多篇高水平研究论文，并参与多项国际合作项目。

***环境毒理团队**：由2名环境毒理学家组成，具有丰富的环境内分泌干扰物毒理学研究经验。团队成员擅长利用多种分析方法（如GC-MS/MS、LC-MS/MS）检测复杂基质中的EDCs及其代谢产物，并能够开展环境毒理学效应的实验研究。团队成员长期从事环境内分泌干扰物与生殖健康关系的毒理学研究，积累了丰富的经验，并取得了一系列研究成果。近年来，团队在环境内分泌干扰物毒理学研究方面发表了多篇研究论文，并参与了多项国家级及省部级科研项目。

***生物信息学团队**：由2名具有生物信息学和统计学背景的教授和研究员组成。团队成员擅长利用生物信息学方法分析基因组学、转录组学、蛋白质组学及代谢组学数据，并能够构建生物信息学分析pipelines，并进行多组学数据的整合分析。团队成员长期从事生物信息学研究和应用，具有丰富的数据分析经验和创新研究思维。近年来，团队在生物信息学领域发表了多篇研究论文，并参与了多项生物信息学合作项目。

***药物研发团队**：由1名具有药物化学及药理学背景的教授组成。团队成员长期从事药物研发工作，在天然产物及小分子化合物筛选、药物作用机制研究及药代动力学研究等方面具有丰富的经验。团队成员擅长利用多种药物研发技术，能够筛选并评价具有潜在抗EM活性的候选化合物，并开展初步的体内干预实验。近年来，团队在药物研发领域发表了多篇研究论文，并参与了多项药物研发项目。

**2.团队成员的角色分配与合作模式**

本项目团队成员将根据各自的专业背景和研究经验，明确分工，协同合作，形成优势互补，共同推进项目研究。具体角色分配与合作模式如下：

***项目负责人**：负责项目的整体规划、协调和管理，把握研究方向，指导研究方案的设计和实施，以及研究成果的总结和推广。同时，负责与资助机构、合作单位及临床医院进行沟通协调，以及项目的经费管理和团队建设等工作。

***临床研究团队**：负责病例对照研究的实施，包括研究设计、伦理审查、患者招募、临床信息收集、生物样本采集与管理。负责临床数据的统计分析，以及与基础研究团队共同开展临床与基础数据的整合分析。同时，负责将基础研究发现的机制性成果进行临床转化，为EM的个体化诊疗提供参考。

***基础研究团队**：负责体外细胞机制研究、动物模型构建与评估，以及机制验证实验。利用分子生物学、细胞生物学、免疫学和生物化学等技术，深入解析EDCs影响EM的分子机制，包括信号通路、炎症反应、免疫微环境、细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移等。同时，负责生物样本的分子水平检测，如基因表达、蛋白表达、信号通路活性等。负责将基础研究发现的机制性成果进行总结和撰写。

***环境毒理团队**：负责临床样本中EDCs浓度的测定，以及环境EDCs污染监测。负责EDCs检测方法的建立与验证，以及EDCs暴露水平的评估。同时，负责将环境毒理研究结果与基础研究团队进行数据整合分析，探讨EDCs暴露水平与EM发生发展的关系。

***生物信息学团队**：负责生物样本的多组学数据（如RNA-seq、蛋白质组学、代谢组学）的分析与解读，包括差异表达基因/蛋白的筛选、通路富集分析、网络分析等。利用生物信息学方法，深入解析EDCs影响EM的分子网络和作用机制。同时，负责构建生物信息学分析pipelines，为团队提供高效、准确的数据分析工具。负责将生物信息学研究结果与其他团队的研究结果进行整合，为EM的防治提供更全面的视角。

***药物研发团队**：负责筛选并评估具有