体外诊断试剂原料制备技师考试试卷及答案

体外诊断试剂原料制备技师考试试卷及答案填空题（每题1分，共10分）1.免疫诊断试剂最常用的生物识别分子是______，分单克隆和多克隆两类。2.基因工程抗体制备的关键步骤包括基因克隆、载体构建和______。3.半抗原需与______偶联才能诱导动物产生抗体。4.酶类原料常用的纯化方法有离子交换层析、凝胶过滤和______。5.蛋白纯度检测常用______电泳（SDS）。6.单克隆抗体由______细胞分泌。7.核酸探针常用标记物有荧光素、地高辛和______。8.细胞培养抗体的培养基分天然培养基和______培养基。9.原料与目标物结合的能力称为______，常用ELISA检测。10.原料制备需符合《医疗器械监督管理条例》及______要求。单项选择题（每题2分，共20分）1.以下属于基因工程抗体的是？A.多克隆抗体B.单克隆抗体C.嵌合抗体D.天然抗体2.亲和层析依赖配体与目标蛋白的？A.分子量差异B.电荷差异C.特异性结合D.疏水性差异3.以下哪种不是抗原类型？A.完全抗原B.半抗原C.载体蛋白D.佐剂4.ELISA常用酶标记物不包括？A.HRPB.APC.葡萄糖氧化酶D.淀粉酶5.细胞融合常用诱导剂是？A.PEGB.乙醇C.甲醛D.丙酮6.核酸探针长度一般为多少bp？A.10-20B.20-50C.50-1000D.1000-50007.可检测蛋白纯度的方法是？A.紫外分光光度法B.HPLCC.考马斯亮蓝法D.以上都是8.抗体类原料建议储存温度是？A.4℃B.-20℃C.-80℃D.室温9.佐剂的主要作用是？A.提高抗原免疫原性B.直接产抗体C.纯化抗原D.标记抗原10.基因工程蛋白表达宿主不包括？A.大肠杆菌B.酵母C.哺乳动物细胞D.植物细胞多项选择题（每题2分，共20分）1.免疫诊断试剂常用原料包括？A.抗体B.抗原C.酶D.核酸探针2.蛋白纯化常用技术有？A.离子交换层析B.凝胶过滤C.亲和层析D.超速离心3.单克隆抗体制备步骤包括？A.免疫动物B.细胞融合C.杂交瘤筛选D.腹水制备4.核酸类原料包括？A.DNA探针B.RNA探针C.引物D.抗原5.原料质量控制指标包括？A.纯度B.活性C.稳定性D.内毒素含量6.基因工程抗体优势有？A.特异性高B.大量制备C.降低异源性D.成本低7.天然培养基包括？A.胎牛血清B.小牛血清C.RPMI1640D.DMEM8.酶标记物特点有？A.催化显色B.特异性结合C.灵敏度高D.稳定性好9.原料制备法规要求包括？A.医疗器械分类B.注册申报C.GMPD.临床评价10.半抗原偶联载体蛋白有？A.BSAB.OVAC.KLHD.血红蛋白判断题（每题2分，共20分）1.多克隆抗体由单一B细胞克隆产生？（）2.亲和层析配体只能是抗原/抗体？（）3.核酸探针标记物只能是放射性物质？（）4.胎牛血清提供营养和生长因子？（）5.单克隆抗体特异性比多克隆高？（）6.酶活性常用分光光度法检测？（）7.原料内毒素无需控制？（）8.大肠杆菌适合表达复杂糖蛋白？（）9.佐剂增强免疫应答？（）10.抗原免疫原性仅与自身结构有关？（）简答题（每题5分，共20分）1.简述单克隆抗体制备基本流程。2.什么是亲和层析？原理是什么？3.原料质量控制主要指标有哪些？4.基因工程抗体比传统单抗有哪些优势？讨论题（每题5分，共10分）1.如何选择合适的基因工程抗体表达系统？2.原料制备中内毒素污染的来源及控制措施？答案填空题1.抗体2.蛋白表达与纯化3.载体蛋白4.亲和层析5.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶6.杂交瘤7.生物素8.合成9.活性10.医疗器械注册单项选择题1.C2.C3.D4.D5.A6.C7.D8.B9.A10.D多项选择题1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABC5.ABCD6.ABC7.AB8.ACD9.ABCD10.ABC判断题1.×2.×3.×4.√5.√6.√7.×8.×9.√10.×简答题1.流程：①免疫小鼠获得特异性脾细胞；②PEG诱导脾细胞与骨髓瘤细胞融合；③HAT培养基筛选杂交瘤细胞；④有限稀释法克隆化；⑤ELISA筛选特异性抗体克隆；⑥体内（腹水）或体外（培养）大量制备。2.亲和层析是利用生物分子特异性结合的纯化技术。原理：将目标分子配体偶联到介质上，样品中目标分子与配体结合，杂质流出；用洗脱液（改变pH/离子强度）将目标分子洗脱，获得高纯度产物。3.指标：①纯度（SDS/HPLC）；②活性（ELISA/酶动力学）；③稳定性（温度/时间下活性保留）；④内毒素（鲎试剂）；⑤浓度（紫外/考马斯亮蓝）；⑥异源性（特异性检测）。4.优势：①降低异源性（如嵌合抗体减少排异）；②大量制备（宿主细胞表达，成本低）；③特异性更强（基因修饰优化结合位点）；④功能多样（双特异性抗体/片段抗体）；⑤稳定性好（片段抗体分子量小）。讨论题1.选择依据：①抗体类型：片段抗体选大肠杆菌（快、成本低），完整抗体选哺乳动物细胞（CHO，糖基化活性好）；②产量需求：酵母（毕赤酵母）产量高于原核；③成本周期：原核最快最便宜；④活性要求：糖基化关键则选哺乳动物细胞；⑤纯化难度：分泌型表达（酵母/哺乳动物）易纯化。综合需求选择，如临床用完整抗体选CHO。2.来源：①原料（血清、试剂）；②生产过程（设备、人员操作