生物制品稳定性研究技术指导原则(试行)

生物制品稳定性研究技术指导原则(试行)一、目的与适用范围本指导原则旨在规范生物制品稳定性研究的试验设计、数据评价与有效期确定，为生物制品研发、注册和生产过程中的稳定性研究提供技术指导，保证产品在全生命周期内的质量安全、有效。本指导原则适用于治疗用、预防用生物制品，包括重组蛋白质药物、单克隆抗体药物、抗体药物偶联物（ADC）、疫苗（含减毒活疫苗、灭活疫苗、基因工程疫苗、结合疫苗等）、血液制品、细胞治疗产品、基因治疗产品、溶瘤病毒产品、微生态制剂等各类生物制品；不适用于按药品管理的体外诊断试剂。生物制品稳定性研究除符合本指导原则要求外，还应符合现行版《中华人民共和国药典》及药品监管相关法规要求。二、基本要求（一）基于风险的设计原则稳定性研究应结合生物制品的结构特性、作用机制、处方工艺、包装形式、临床使用方式，基于质量风险管理原则确定研究内容与考察指标，对稳定性风险较高的项目（如活性成分降解、聚集体生成、活毒/活细胞滴度下降、偶联键断裂等）应重点考察。产品处方中含有稳定剂、防腐剂、抗冻剂等功能性辅料的，应重点考察辅料含量随放置时间的变化，及其对活性成分稳定性的影响。（二）试验批次要求稳定性研究所用批次应满足以下要求：1.至少采用3批产品开展正式稳定性研究；2.产品生产工艺、质量控制标准与商业化生产一致，注册申报阶段应至少为中试以上规模，申报上市阶段应为商业化生产规模批次；3.每批产品的取样量应满足整个研究周期的检测需求，且预留足够量用于异常结果的复检。对于细胞治疗、基因治疗等小批量个性化产品，无法提供3批规模化批次的，可基于风险适当调整，提供至少2批符合生产工艺的代表性批次数据，同时充分说明调整合理性。（三）环境控制要求所有稳定性试验的温湿度应进行持续实时监控，常规试验温度波动范围不得超过±2℃，相对湿度波动不得超过±5%RH；超低温储存试验温度波动不得超过±5℃。试验用储存设备应经过验证，能够持续稳定符合设定的环境条件。三、稳定性研究内容与试验设计生物制品稳定性研究分为影响因素试验（含强制降解试验）、加速稳定性试验、长期稳定性试验、特殊稳定性试验四大类，各类试验的设计要求如下：（一）影响因素试验影响因素试验旨在考察影响产品稳定性的关键因素，明确产品的降解途径、敏感条件，为处方工艺优化、包装选择、储存条件确定提供依据，所有新产品开发阶段均应开展影响因素试验。试验一般除去外包装，采用直接接触产品的内包装放置于规定条件下考察。1.高温试验：取供试品置于60℃±2℃环境中放置10天，分别于第0天、第5天、第10天取样检测。若放置10天后供试品活性下降超过5%，或性状、有关物质发生显著超出标准的变化，应降低试验温度至40℃±2℃重新试验；若40℃条件下仍有显著变化，应进一步降至25℃±2℃试验，明确产品对高温的敏感性。2.高湿度试验：取供试品置于25℃±2℃、相对湿度90%RH±5%环境中放置10天，分别于第0天、第5天、第10天取样检测。若供试品吸湿增重超过5%，应调整试验条件为25℃±2℃、75%RH±5%重新试验；对于密封完好且完全不吸水的制剂，可不开展高湿度试验。3.光照试验：取供试品置于光照箱中，控制光照强度为4500lx±500lx，放置10天，保证总照度不低于1.2×10^6lx·h，近紫外区辐射能量不低于200W·h/m²，分别于第0天、第5天、第10天取样检测，试验过程中控制温度在25℃±2℃，避免温度干扰试验结果。4.强制降解试验：强制降解试验用于明确产品的降解途径，验证分析方法的专属性，是生物制品质量控制方法建立的必要支撑。强制降解试验一般包括：（1）酸降解：采用0.1mol/L~1mol/L盐酸，室温或适当加热条件下降解；（2）碱降解：采用0.1mol/L~1mol/L氢氧化钠，同上述条件降解；（3）氧化降解：采用0.1%~3%过氧化氢溶液降解；（4）热降解：在较高温度下长时间放置降解；（5）光照降解：同上述光照试验条件。试验需控制降解程度为10%~30%，避免过度降解产生无意义的次级降解产物，对不同降解条件下的主要降解产物进行分离鉴定，明确产品特征性降解途径。（二）加速稳定性试验加速稳定性试验是在高于长期储存条件的环境下放置，考察产品质量随时间的变化趋势，评估产品在非预期温度波动下的稳定性，支持暂定有效期的确定。加速试验采用与上市产品完全一致的包装，试验条件根据产品长期储存条件确定：1.长期储存温度≤-20℃的产品，加速试验条件一般为5℃±3℃放置6个月，或25℃±2℃、60%RH±5%放置6个月，可根据产品热稳定性特性调整试验时间与条件；2.长期储存温度为2℃~8℃的产品，加速试验条件为25℃±2℃、60%RH±5%放置6个月；3.长期储存温度为15℃~25℃（室温储存）的产品，加速试验条件为30℃±2℃、65%RH±5%放置6个月。加速试验取样时间点为第0个月、第1个月、第2个月、第3个月、第6个月，若试验至6个月发现质量指标有明显劣变趋势，尚未超出质量标准限度，应延长试验时间至12个月，进一步考察变化趋势。加速试验结果无显著劣变的，可结合长期试验初期数据暂定有效期；若加速试验结果出现超出质量标准的变化，应分析原因，评估处方工艺、包装的合理性，调整后重新开展试验。（三）长期稳定性试验长期稳定性试验是在产品拟定的上市储存条件下开展，是确定产品有效期和储存条件的最终依据。长期试验采用与上市产品一致的包装，试验条件与产品拟定储存条件一致：如拟定储存条件为2℃~8℃，则试验控制温度为2℃~8℃±2℃，相对湿度60%RH±5%；拟定储存条件为-20℃，则控制温度为-20℃±5℃。取样时间点设置为：试验第一年每3个月取样1次，第二年每6个月取样1次，试验第三年及以后每年取样1次，持续试验直到所有批次产品质量指标不符合质量标准为止。注册申报上市时，长期稳定性试验数据应至少覆盖拟申请有效期的三分之二以上，待整个试验周期完成后，最终确认产品有效期。（四）特殊稳定性试验针对生物制品的不同特性与使用场景，需开展针对性的特殊稳定性研究，主要包括：1.使用中稳定性（开瓶/复溶/稀释后稳定性）：所有供临床多次使用或临用配制的产品均需开展使用中稳定性研究，需严格模拟临床实际使用场景设计试验：如多剂量西林瓶产品，模拟临床多次穿刺取样，分别考察开封后在2℃~8℃、室温条件下放置不同时间的质量变化；冻干粉针剂考察复溶后的稳定性；输液用产品考察稀释后在输液袋/输液瓶中放置不同时间的稳定性。考察时间应覆盖临床从开封/配制到使用完毕的最长可能时间，一般至少考察24小时，若临床使用过程中可能放置更长时间，应相应延长考察时间，考察指标需覆盖性状、pH、不溶性微粒、活性、有关物质、无菌、内毒素等，保证使用过程中的质量安全。2.冻融稳定性：储存温度为冷冻条件的生物制品，生产、运输、储存过程中可能发生反复冻融，需开展冻融稳定性研究：取供试品反复冻融3次、5次，考察冻融后产品质量变化，重点考察聚集体生成、活性下降等指标，明确产品可承受的最大冻融次数，为生产储运过程的质量控制提供依据。3.温度偏离稳定性（冷链中断稳定性）：需冷链运输储存的生物制品，需考察短暂温度偏离对产品质量的影响，模拟供应链过程中可能发生的温度波动场景，如室温放置12小时、24小时，或37℃放置数小时，考察质量变化，为运输储存过程中的温度偏离处理提供数据支持。4.细分品类特殊要求：（1）活疫苗、微生态制剂：重点考察活菌数/病毒感染性滴度的变化，针对稳定性差的产品缩短取样间隔，增加考察频率；（2）细胞治疗产品：新鲜制剂保质期短，需考察从生产放行到临床使用整个周期的稳定性，涵盖细胞活率、表型、生物学功能等指标，充分考察运输过程中的温度波动影响；（3）抗体药物偶联物（ADC）：重点考察药物抗体比（DAR）、游离药物含量、聚集体含量的变化，明确偶联键的稳定性；（4）基因治疗病毒载体产品：重点考察感染滴度、基因组完整性、杂质含量的变化。四、考察项目设置考察项目应全面反映产品质量变化，结合产品结构、剂型、临床使用特点设置，优先选择能够反映产品质量变化的敏感指标，主要考察项目类别如下：1.物理属性：包括外观、颜色、澄清度、可见异物、不溶性微粒、pH、渗透压、摩尔渗透压浓度、复溶时间、混悬剂粒度分布、佐剂粒径分布、抗原吸附率等。2.化学属性：包括活性成分含量/浓度、纯度、有关物质（含聚集体、片段、降解产物、修饰变异体、游离药物、宿主细胞残余DNA/蛋白等）、电荷异质性、分子量分布、防腐剂含量、稳定剂含量等。3.生物学属性：包括比活性、效价、感染性滴度、活菌数、细胞活率、细胞活力、转染效率、生物学功能等，生物学活性是生物制品稳定性考察的核心指标，需全程考察。4.安全性属性：包括无菌检查、细菌内毒素检查、外源因子检查、支原体检查、异常毒性检查等，需根据产品给药途径与特性合理设置。五、包装与相容性要求稳定性研究所用包装材料、规格、封装方式应与上市产品完全一致，不得采用小规格试验包装替代上市包装，因包装材质、厚度、密封方式的差异会直接影响产品的稳定性。对直接接触产品的内包装，需在稳定性研究中考察包装材料与产品的相容性：包括是否有包装组分迁移至产品中，产品活性成分是否吸附于包装表面，包装材料是否会诱导蛋白聚集或降解，预充式注射器中的润滑层、胶塞是否对产品活性产生影响等，相容性研究结果应符合相关技术要求。六、结果分析与有效期确定1.结果分析：所有稳定性试验数据应进行系统分析，每个时间点的每个考察指标都应与初始值对比，分析变化趋势，不得仅以单次合格结果判断稳定性。对长期稳定性试验的关键质量指标（如活性、纯度）应进行线性回归分析，计算95%单侧置信区间，确定指标降低至质量标准下限的时间，为有效期确定提供统计依据。若加速试验与长期试验的降解趋势一致，可采用加速试验数据外推有效期，外推时间不得超过长期试验已完成时间的1倍，且最长外推时间不得超过2年。2.有效期确定原则：（1）新注册产品，根据长期稳定性试验数据确定有效期，申报阶段可根据已完成的长期试验数据结合加速试验数据暂定有效期，待长期试验完成后最终确认；（2）若3批产品的质量变化趋势一致，取3批数据统计得到的最短有效期作为产品的有效期；（3）发生处方、工艺、包装、生产场地变更的产品，应结合桥接稳定性研究数据，确定变更后产品的有效期，变更后产品有效期不得长于原产品有效期；（4）对于稳定性较差的小批量产品，