细胞治疗细胞冻存技师考试试卷及答案

细胞治疗细胞冻存技师考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.细胞冻存液中常用的保护剂是______（二甲基亚砜）。2.细胞冻存的理想速率是______℃/min（1-2）。3.细胞复苏时需______℃水浴快速解冻（37）。4.冻存管标识必须包含______、代数、冻存日期（细胞名称）。5.液氮罐液氮液位应保持不低于______（1/3）。6.细胞冻存前活力需≥______%（90）。7.冻存液中血清的作用是______（保护细胞+提供营养）。8.细胞计数常用工具是______（血球计数板）。9.液氮罐属于______类低温容器（常压）。10.细胞冻存的核心目的是______（长期保存细胞活性）。二、单项选择题（每题2分，共20分）1.冻存液中DMSO的常规浓度是？A.5%B.10%C.15%D.20%答案：B2.细胞复苏解冻后离心转速通常为？A.500rpmB.1000rpmC.2000rpmD.3000rpm答案：B3.液氮罐使用错误操作是？A.戴防护手套B.用金属工具取冻存管C.保持通风D.定期查液位答案：B4.细胞冻存长期保存温度是？A.-80℃B.-196℃C.4℃D.37℃答案：B5.冻存前细胞需处于哪个生长阶段？A.停滞期B.对数生长期C.平台期D.衰退期答案：B6.复苏细胞后应立即？A.传代B.离心去冻存液C.加血清D.冻存备份答案：B7.冻存管密封不严会导致？A.细胞污染B.液氮渗入C.细胞活力下降D.以上都是答案：D8.细胞冻存时，冻存管内液体体积通常不超过？A.1mlB.2mlC.5mlD.10ml答案：A9.液氮挥发后产生的气体是？A.氧气B.氮气C.二氧化碳D.氢气答案：B10.冻存液中无血清冻存液的优势是？A.避免动物源污染B.成本更低C.保护效果更好D.无需解冻答案：A三、多项选择题（每题2分，共20分）1.冻存液主要成分包括？A.DMSOB.胎牛血清C.基础培养基D.抗生素答案：ABCD2.细胞冻存前需确认的指标有？A.细胞活力B.细胞密度C.支原体污染D.细胞纯度答案：ABCD3.液氮罐安全操作注意事项？A.防液氮溅伤B.禁止手伸罐内C.定期查液位D.保持通风答案：ABCD4.影响冻存效果的因素有？A.冻存速率B.冻存液成分C.细胞密度D.解冻方式答案：ABCD5.冻存管标识核心信息包括？A.细胞名称B.冻存日期C.代数D.冻存人答案：ABCD6.细胞复苏关键步骤？A.快速解冻B.离心去冻存液C.缓慢稀释D.立即传代答案：AB7.液氮罐类型包括？A.储存罐B.运输罐C.高压罐D.常压罐答案：AB8.冻存前细胞准备步骤？A.收集细胞B.离心洗涤C.重悬冻存液D.分装冻存管答案：ABCD9.复苏后细胞培养注意事项？A.换液去冻存液B.观察贴壁C.检测活力D.立即冻存答案：ABC10.细胞冻存常见用途？A.长期保存细胞系B.原代细胞备份C.临床细胞治疗D.传代备份答案：ABCD四、判断题（每题2分，共20分）1.冻存液中DMSO浓度越高越好？（×）2.细胞冻存速率越快越好？（×）3.复苏细胞需缓慢解冻？（×）4.液氮罐可直接用金属容器装液氮？（×）5.冻存管标识只需写细胞名称？（×）6.细胞冻存前活力需≥80%？（×）7.复苏细胞离心后应立即弃上清？（√）8.液氮罐使用需保持通风？（√）9.冻存细胞可长期存-80℃冰箱？（×）10.无血清冻存液可替代含血清冻存液？（√）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述细胞冻存“慢冻快融”原理？答案：慢冻使细胞内水分缓慢渗出，减少细胞内冰晶形成（冰晶会刺破细胞膜）；快融避免细胞内再次形成大冰晶。冻存液中DMSO降低冰点，血清提供营养/保护，共同减少细胞损伤。2.冻存管标识需包含哪些核心信息？答案：细胞名称/系号、冻存代数、冻存日期、冻存人、细胞密度、冻存液体积、支原体检测结果（可选），确保清晰可辨便于溯源。3.液氮罐安全操作关键注意事项？答案：①戴防护镜、防冻手套；②禁止金属工具直接接触液氮；③保持环境通风（防缺氧）；④液氮液位≥1/3；⑤冻存管密封完好；⑥禁止手伸入罐内。4.细胞复苏主要步骤？答案：①液氮罐取冻存管，37℃水浴快速解冻（1-2min）；②75%酒精擦管壁；③转移至含培养基的离心管；④1000rpm离心5min弃上清；⑤新鲜培养基重悬，计数活力；⑥接种培养瓶。六、讨论题（每题5分，共10分）1.如何优化细胞冻存效果提高复苏活力？答案：①细胞状态：对数生长期、活力≥90%、无支原体；②冻存液：10%DMSO+血清/无血清冻存液；③冻存速率：程序降温盒（1-2℃/min）；④冻存管：密封防液氮渗入；⑤解冻：37℃快速解冻；⑥复苏后：及时离心去冻存液，新鲜培养基重悬。2.液氮罐使用的安全